Чем отличается диаскинтест от пробы манту: Диагностика туберкулеза (реакция Манту, Диаскинтест, Т-спот)

Диаскинтест в Звенигороде

Что такое диаскинтест?

Диаскинтест — это диагностическая процедура для детей, которая проводится для определения наличия туберкулёза. В некоторых случаях комбинируется вместе с пробой манту.

 

Записаться на приём Задать вопрос в WHATSAPP

Чем отличается диаскинтест от пробы манту?

Главные отличия между двумя методами заключаются в составе вакцины: используемые препараты включают в себе разные белки-антигены. В Манту присутствуют компоненты, которые есть в вакцине БЦЖ, тогда как в Диаксинтесте содержится рекомбинантный белок – он продуцируется генетически модифицированной культурой микобактерий, вызывающих развитие туберкулёза у человека.

Отказаться от Манту ради полного перехода на другую пробу не рекомендуется, поскольку Диаскинтекст не может диагностировать инфицирование туберкулёзом на ранних стадиях. Иначе говоря, Диаскинтест – это дополнительная проба, которая проводится при возможной фазе заболевания с активным размножением микобактерий. Однако именно она играет ключевую роль для выполнения более точного диагностирования туберкулезной палочки в организме ребёнка.

 


Кому и когда делают диаскинтест?

Детям в возрасте 8 – 18 лет диаскинтест делают один раз в год в качестве планового профилактического обследования, в независимости от наличия признаков туберкулёза в организме. Если ребёнок не получил прививку БЦЖ, то диаскинтест выполняется дважды в год.

Показания к внеплановому проведению диаскинтеста

  • длительный упорный кашель;
  • симптомы пневмонии при отсутствии эффекта от антибиотиков широкого спектра действия;
  • контакт с больным туберкулёзом;
  • длительный субфебрилитет.

 


Как подготовиться к диаскинтесту?

Для того чтобы провести диаскинтест, подготовительные мероприятия не требуются, однако за несколько дней перед процедурой необходимо пройти тщательный осмотр у терапевта на предмет вирусных и инфекционных заболеваний в стадии рецидива.

Для выявления возможных противопоказаний необходимо обратиться за помощью к специалисту.
 

 

Проба Манту или диаскинтест. Учёные проверили, что лучше

Как рассказывал Лайф, школьникам больше не будут делать пробу Манту для проверки на туберкулёз. Принят приказ, по которому вместо неё детям с семи лет будут делать диаскинтест.

Один из инициаторов перехода на диаскинтест — главный детский фтизиатр страны Валентина Аксёнова. При этом она сама принимала участие в разработке препарата по заказу компании «Генериум», которая сейчас является его производителем. Очевидно, здесь есть конфликт интересов. При этом, по словам экспертов, объёмных исследований, которые бы однозначно доказали, что диаскинтест лучше, нет. 

Лайф изучил те сравнительно небольшие научные работы, которые есть по этому вопросу. Из них следует, что свои плюсы и минусы есть как у пробы Манту, так и у диаскинтеста. Какие из них важнее — решайте сами. 

Диаскинтест не «увидел» 23% заболевших

В 2011 году сотрудники Астраханской государственной медицинской академии обследовали «100 больных с различными клиническими формами туберкулёза лёгких». Диагноз был точно известен заранее (всем пациентам делали рентген и брали у них анализы). В рамках исследования каждому пациенту делали по два теста: на одной руке — пробу Манту, на другой — диаскинтест.

Диаскинтест показал отрицательный результат у 23 человек из 100 (то есть почти в четверти случаев). Люди были больны туберкулёзом, а тест этого не видел. Проба Манту дала восемь отрицательных результатов из 100. То есть переход на диаскинтест в масштабе страны — это риск эпидемии, ведь тест часто принимает больных за здоровых. По данным Росстата, в 2016 году от туберкулёза умерло 11 тысяч россиян. 

Похожее исследование в 2014 году проводили сотрудники Самарского государственного медицинского университета. Они обследовали 100 детей с локальными формами туберкулёза (туберкулёз лимфатических узлов, костей и т.д.). Диагноз был известен заранее. Детям на одной руке делали пробу Манту, на другой — диаскинтест. Диаскинтест не увидел 16 случаев туберкулёза из 100, проба Манту — один случай. 

Проба Манту принимает здоровых за больных 

Учёные из Красноярского государственного медицинского университета им. В.Ф. Войно-Ясенецкого в 2012 году обследовали 109 студентов. Им также одновременно делали пробу Манту и диаскинтест (на разных руках). При этом им заранее сделали флюорографию — и она показала, что лёгкие у всех в порядке.  

Несмотря на это, проба Манту у 83% студентов показала положительный результат (очевидно, ложный в большинстве случаев). Диаскинтест в 15% случаев показал положительный результат. Студентов, у которых были наиболее сильные реакции, причём по обоим тестам, учёные проверили дополнительно — и выявили только один случай активного туберкулёза. 

Большинство жалоб на пробу Манту связано с тем, что она показывает туберкулёз, когда у ребёнка всего лишь аллергия. Родителям приходится везти его в туберкулёзный диспансер (где тот может уже действительно подхватить заразу), чтобы он прошёл дополнительное обследование. А Валентина Аксёнова ранее говорила, что проба Манту настолько бесполезна, что это просто «трата денег» для государства. 

Проба Манту ошибается после прививок

Также проба Манту ошибается, если у ребёнка есть осложнение после прививки на туберкулёз (она называется БЦЖ, её проводят в первые дни после рождения и в семь лет). Это показало самое первое, клиническое исследование диаскинтеста. В нём принимали участие 150 человек, и среди них было 20 детей с осложнениями после прививки (при этом туберкулёза у них точно не было). Во всех 20 случаях диаскинтест дал правильный отрицательный результат, а проба Манту во всех 20 случаях дала ошибочный положительный результат. 

Диаскинтест чаще вызывает воспаление

Диаскинтест чаще вызывает гиперергические (то есть чрезмерные) реакции. Может быть воспаление лимфатических сосудов, образование на коже пузырьков, гнойничков и т.д. Об этом говорится во многих исследованиях, в том числе в работе учёных из Мордовского государственного университета им. Н.П. Огарёва. Они проанализировали «68 историй болезни пациентов с инфильтративной формой туберкулёза». 

При диаскинтесте гиперергические реакции были у 33% пациентов, при пробе Манту — у 1,5%.

Часто задаваемые вопросы | Противотуберкулезный диспансер

Что нужно знать про тесты на туберкулез?

Всероссийское общество фтизиатров утвердило несколько возможных вариантов тестирования, включая не только пробу манту с 2ТЕ, но и тестирование с использованием Диаскинтеста и T-spot. Результаты каждого из этих тестов будут признаваться достаточными для приема ребенка в детский сад.

Что это за тесты и чем они отличаются?

1.    Реакция манту с 2ТЕ/(туберкулиновая проба).
Реакция манту является на сегодняшний день в России основным методом профилактического обследования детей (с 1 года до 8 лет) на инфицирование (заражение) туберкулезом. Реакция манту с 2ТЕ – это ответ организма на введение туберкулина (не смотря на название, саму туберкулезную палочку препарат не содержит). Оценивается напряженность иммунитета ребенка к туберкулезной палочке. До настоящего времени туберкулиновая проба не теряет своей актуальности, просто надо правильно и грамотно интерпретировать ее результаты.


2.    Диаскинтест (ДСТ) – способ, который позволяет определить наличие или отсутствие микобактерий туберкулеза в организме ребенка. ДСТ является более чувствительным тестом, поскольку в его состав входят белки, вызывающие иммунную реакцию в организме только на микобактерии, вызывающие туберкулез. ДСТ по сравнению с реакцией манту 2ТЕ позволяет определить не только наличие возбудителя, но и активность микобактерии, вызывающих само заболевание.


3.     Т-spot – тест на туберкулез, который проводится путем забора крови ребенка и ее последующее исследование (коммерческий метод).
Дети должны обязательно проходить один из утвержденных скринингов на туберкулез, потому что в настоящее время отмечается рост заболевания туберкулезом в нашем городе и эти тесты предназначены для раннего выявления туберкулеза у детей.

Наиболее оптимальный вариант – ДСТ.с«о»е-

USE OF DIASKINTEST AND MANTOUX TEST IN DIAGNOSTICS OF INFILTRATIVE TUBERCULOSIS.

Lyamina E.L., Rogozhina N.A., Musaleva N.M.

Mordovia State University, Department of Infectious Disease, Saransk

Аbstract: the analysis of the results Diaskintest and Mantoux test in infiltrative pulmonary tuberculosis. In patients with infiltrative pulmonary tuberculosis, the positive reaction to Diaskintest observed in 63,2% of cases, on the Mantoux test — in 76,4%. Hyperergic reaction to the Mantoux test were only observed in one patient at Diaskintest — in 32,6% of patients. In 72,7% of patients with reactions to hyperergic Diaskintest were small processes in the lungs without the disintegration and the excretion of bacteria. Thus, Diaskintest may provide some help in diagnostics of infiltrative tuberculosis, especially in patients with limited processes without the disintegration and excretion of bacteria.

Key words: infiltrative tuberculosis, diagnostics of tuberculosis, Mantoux test, Diaskintest.

ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ДИАСКИНТЕ-СТА И ПРОБЫ МАНТУ В ДИАГНОСТИКЕ ИНФИЛЬ-ТРАТИВНОГО ТУБЕРКУЛЁЗА.

Лямина Е.Л., Рогожина Н.А., Мусалёва Н.М., тел. 8(927)974-77-05, e-mail: [email protected] ru

Мордовский государственный университет им Н.П. Огарева, кафедра инфекционных болезней, Республиканский противотуберкулёзный диспансер, г. Саранск

Аннотация. Проведен анализ результатов Диаскинтеста и пробы Манту при инфильтратив-ном туберкулёзе лёгких. У больных с инфильтративным туберкулёзом лёгких положительные реакции на Диаскинтест отмечены в 63,2% случаев, на пробу Манту — в 76,4%. Гиперер-гические реакции на пробу Манту наблюдались лишь у одного человека, на Диаскинтест — у 32,6% больных.с«о»е-

Ключевые слова: инфильтративный туберкулёз, диагностика туберкулёза, проба Манту, Диаскинтест.

В практику фтизиатрической службы с 2010 г. внедрён инновационный биотехнологический препарат «Диаскинтест», показавший высокую специфичность и чувствительность в диагностике туберкулёза у детей и подростков [1]. Результативность данного теста у взрослых изучена мало.

Цель исследования: изучение результатов, полученных при использовании пробы с препаратом Диаскинтест в сравнении с пробой Манту у больных с инфиль-тративным тубёркулёзом лёгких.

Материал и методы исследования. Проанализировано 68 историй болезни пациентов с инфильтративной формой туберкулёза в возрасте от 20 до 72 лет. Больные были разделены на 2 группы: 1 группа — с выделением МБТ — 11 человек (16,2%) и 2 группа — без выделения МБТ — 57 (83,8%). Основное количество исследуемых составили пациенты с ограниченными процессами — 57(83,8%). Учёт результатов Диаскин-теста и пробы Манту осуществлялся согласно утверждённой инструкции по их применению.

Результаты. Положительный Диаскинтест отмечен у 43 (63,2%), сомнительный — у 2 (2,9%), отрицательный — у 23 (33,8%) человек. Гиперергические реакции наблюдались у 22 (32,6%) пациентов, у 16 (72,7%) из них отмечены ограниченные

процессы без распада и бактериовыделе-ния.

У больных с бактериовыделением положительный Диаскинтест наблюдался в 9 (81,8%) случаях, без бактериовыделения — в 34 (59,6%). Сомнительная реакция при выявлении МБТ в мокроте не зафиксирована, при отсутствии бактериовыделения установлена у 2 (3,5%) больных. Отрицательный результат на Диаскинтест наблюдался в 2 (18,2%) случаях при наличие бакте-риовыделения и в 21 (36,8%) — при отсутствии (р>0,05). Гиперергическая реакция при наличие МБТ отмечена у 4 (36,4%), при отсутствии — у 18 (31,6%) больных.

Проба Манту была положительной у 52 (76,4%) человек, сомнительной — у 1 (1,5%), отрицательной — у 15 (22,1%). Ги-перергические реакции наблюдались лишь у 1 (1,5%) пациента. У больных с бакте-риовыделением и без бактериовыделения -положительная проба Манту встречалась в 7 (63,6%) и 45 (78,9%) случаях соответственно. Сомнительная проба Манту при выявлении МБТ в мокроте установлена в 1 (9,1%) случае, при неустановленном бакте-риовыделении — не фиксировалась. Отрицательный результат пробы Манту у больных с бактериовыделением отмечен в 3 (27,3%) случаях, без бактериовыделения — в 12 (21,1%).

————- ————

2

Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).с«о»е-

При сравнении результатов Диаскин-теста и пробы Манту у всех больных (таб.1) положительные реакции на Диаскинтест встречаются несколько реже (63,2%), чем Таб.1. Результаты Диаскинтеста и пробы Манту у больных инфильтративным туберкулёзом

на пробу Манту (76,4%). Однако гиперер-гические реакции на Диаскинтест фиксируются значительно чаще (рП0,001).

Результаты положительный сомнит. отрицат.

но рм. гипер. всего

(п=68) абс % абс % абс % абс % абс %

Диаскин тест 21 30,9* 22 * cn» 3 43 63,2 2 2,9 23 33,8

Проба Манту 51 75,0 1 1,5 52 76,4 1 1,5 15 22,1

— реакция на Диаскинтест достоверно отличается от пробы Манту

Примечание: *

(р<0,001)

При сравнении результатов Диаскинте-ста и пробы Манту у больных с установленным бактериовыделением положительные реакции на Диаскинтест отмечены у 81,8% пациентов, на пробу Манту — у 63,6%. Гипе-рергических реакций на пробу Манту не установлено, тогда как на Диаскинтест они встречались в 36,4% случаев (р<0,05). Сомнительные реакции на Диаскинтест отсутствовали, на пробу Манту отмечены у 9,1% больных. Отрицательный Диаскинтест зафиксирован у 18,2%, отрицательная проба Манту — у 27,3% пациентов.

У больных с неустановленным бакте-риовыделением положительные реакции на Диаскинтест отмечены у 59,6% пациентов, на пробу Манту — у 78,9%. Гиперергические реакции на Диаскинтест наблюдались у 18 пациентов (31,6%), на пробу Манту — лишь у одного (1,6%) больного (рП0,001). Сомнительные реакции выявлены только на Диа-

скинтест у 3,5% больных. Отрицательный Диаскинтест зафиксирован у 36,8%, отрицательная проба Манту — у 21,1% пациентов.

Выводы. При инфильтративном туберкулёзе положительный Диаскинтест отмечен более чем у половины пациентов. У больных с бактериовыделением несколько чаще, чем при его отсутствии, фиксируются положительные и гиперергические реакции на Диа-скинтест. В целом, положительные реакции на Диаскинтест отмечены реже, чем на пробу Манту. Гиперергические реакции на Диа-скинтест встречаются значительно чаще, чем на пробу Манту, как при наличии так и при отсутствии бактериовыделения. Таким образом, Диаскинтест может оказать определённую помощь в диагностике инфильтративно-го туберкулёза, особенно у больных с ограниченными процессами без распада и бакте-риовыделения.

————- ————

3

Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор). Свидетельство о регистрации СМИ ПИ ЭЛ № ФС77-50518 Журнал представлен в НАУЧНОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ БИБЛИОТЕКЕ (НЭБ) — головном исполнителе проекта по созданию Российского индекса научного цитирования (РИНЦ).с«о»е-

ЛИТЕРАТУРА

Кожная проба с препаратом «Диаскинтест» — новые возможности в идентификации туберкулёзной инфекции / Под ред. Акаде-

мика РАН и РАМН М.А. Перельмана. Второе издание, переработанное и дополненное. — М.: Издательство «Шико», 2011. — 256с.

————- ————

~ 4 ~

Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор). Свидетельство о регистрации СМИ ПИ ЭЛ N° ФС77-50518 Журнал представлен в НАУЧНОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ БИБЛИОТЕКЕ (НЭБ) — головном исполнителе проекта по созданию Российского индекса научного цитирования (РИНЦ).

Манту или диаскинтест? Два эффективных способа иммунодиагностики

Главная » Новости » Манту или диаскинтест? Два эффективных способа иммунодиагностики

26 Марта 2021

Реакция Манту – это основной метод профилактического обследования детей на туберкулез. Иммунологический тест показывает, есть ли в организме туберкулезная инфекция. В месте введения препарата в кожу возникает специфическое воспаление, вызванное лимфоцитами крови, ответственными за клеточный иммунитет. По результатам реакции Манту ребенка могут направить на консультацию к фтизиатру.

Не так давно учеными был разработан новый метод диагностирования туберкулеза – Диаскинтест. Диаскинтест – это препарат, который дает возможность подтвердить наличие или отсутствие микробактерий туберкулеза в организме человека.

Тест позволяет четко дифференцировать поствакцинальную реакцию, то есть наличие иммунитета, от инфекционного процесса, обеспечивая отсутствие ложноположительных реакций, благодаря практически стопроцентной специфичности. Поэтому кожная проба с Диаскинтестом, в отличие от пробы Манту, является маркером активности туберкулезной инфекции, и положительная реакция свидетельствует о наличии либо туберкулеза, либо латентной туберкулезной инфекции с высоким риском развития заболевания, что является показанием для проведения превентивного лечения. Внедрение Диаскинтеста как скринингового метода при ранней диагностике туберкулеза у детей 8 лет и старше, благодаря высокой специфичности данного метода, позволяет значительно улучшить качество диагностики.

Проба Диаскинтест ничем не отличается по методике от реакции Манту. В результате введения препарата можно обнаружить возбудителей заболевания, которые находятся в фазе активного размножения. В этом случае тест будет положительным (отмечается папула или покраснение любого размера). Если же в организме микобактерии находятся в скрытой фазе – результат будет отрицательным.

Хотелось бы сказать родителям, чтобы они не отказывались от посещения специалиста, в случае положительной реакции на тест. Врач-фтизиатр обследует ребенка, и возможно, назначит профилактическое лечение. Профилактическое лечение противотуберкулезными препаратами назначается не с целью «травить ребенка», а для того, чтобы предупредить переход скрытой инфекции в реальное заболевание.

Важным для профилактики туберкулеза также является сбалансированное полноценное питание с достаточным содержанием в пище белка и витаминов, нормализация режима учебы, труда и отдыха, отказ от вредных привычек, как у подростков, так и у родителей.

Марина Артанова, врач-фтизиатр БУ «Няганская городская детская поликлиника»

Подробнее:

https://cmphmao.ru/node/259137


Диаскинтест  — новый вид диагностики туберкулеза

Лабораторная служба на ул. Коминтерна, 123

Лабораторная служба на ул. Генерала Зимина, 4

Лабораторная служба на пр. Кирова, 1А

Лабораторная служба на ул. Бульвар 60-летия Октября, 21/1

Лабораторная служба на ул. Русская, 9

Лабораторная служба на ул. Звездинка, 7

Лабораторная служба на ул. Есенина, 35

Лабораторная служба на пр. Ленина, 2

Лабораторная служба на ул. Романтиков, 2

Лабораторная служба на ул. Красная поляна 1

Лабораторная служба на ул. Карла Маркса, 49

Лабораторная служба на ул. Бурнаковская, 113

Лабораторная служба на ул. Б.Панина, 4

Лабораторная служба на Южном шоссе, 14

Лабораторная служба на пр. Ленина, 67/1

Лабораторная служба на ул. Родионова, 199

Лабораторная служба на ул. Сормовское шоссе, 20

Лабораторная служба на ул. Бекетова, 13

Почему необходима иммунодиагностика туберкулёза у детей?

 

 

ПОЧЕМУ НЕОБХОДИМА ИММУНОДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА У ДЕТЕЙ?

 

 Эпидемиологическая ситуация по туберкулезу в нашей стране за последние 10 лет существенно улучшилась, но продолжает оставаться напряженной. Жители Российской Федерации, в том числе дети, заболевают туберкулезом в несколько раз чаще, чем в других развитых странах. Показателем эпидемиоло­гической ситуации по туберкулезу является риск ежегодного инфицирования детей. В России он составляет около 0,8-1 % ежегодно (т. с. инфицируется примерно 1 ребенок из 100), тогда как при благополучной ситуации не должен превышать 0,05 %.

 Среди населения существует «бациллярное ядро» заразных больных, которое пополняется за счет мигрантов, лиц БОМЖ, освобо­дившихся из тюрем, больных туберку­лезом в сочетании с ВИЧ, больных хрони­ческими формами туберкулеза, а также людей, которые не проходят положенное регулярное флюорографическое обследование.

 Все эти группы населения присутствуют в нашем городе Санкт- Петербурге, они и являются источником заражения в большинстве случаев. Причем, микобактерии туберкулеза (МБТ) очень хорошо сохраняются во внешней среде, поэтому непосредственный контакт с больным совсем не обязателен.

 Примерно 90-95 % инфицированных детей и подростков туберкулезной палочкой остаются здоровыми, а у остальных есть риск заболеть, он максимален в первый год инфицирования.

 Поэтому так важно проводить ежегодное профилактическое обследование всех детей на туберкулез — скрининг на туберкулезную инфекцию.

 Термин «массовая иммунодиагностика» появился относительно недавно. Дело в том, что в настоящее время для выявления туберкулезного заражения (инфицирования) у детей в нашей стране используются две внутрикожные пробы: традиционная проба Манту с двумя туберкулиновыми единицами (2 ТЕ) и проба с аллергеном туберкулезным рекомбинантным — Диаскинтестом.

 Обе внутрикожные пробы основаны на реакции клеточного иммунитета — гиперчувствительности замедленного типа, отсюда и термин «иммунодиагностика». Проба Манту и проба с Диаскинтестом практически одинаковы по технике постановки. Оценка результатов пробы Манту и пробы с Диаскинтестом также происходит одинаково: через 72 часа измеряют появившуюся на коже припухлость (папулу) или покраснение (гиперемию), либо фиксируют отсутствие изменений — отрицательный результат. Отличаются же эти два теста разным составом препарата, который вводится детям н, соответственно, трактовкой пробы, то есть тем, что означает полученный результат. В чем же состоят различия? Постараемся объяснить.

 В пробе Манту используется препарат туберкулин (аллерген туберкулезный очищенный в стандартном разведении), поэтому проведение этой пробы и называется туберкулинодиагностикой.

 Препарат Диаскинтест (аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении) разработан российскими учеными на основании достижения мировой науки — расшифровки генома микобактерии туберкулеза.

 Согласно Приказа М3 РФ №124-н от 2017г, детям в возрасте от 1 до 7 лет (включительно) — проводится иммунодиагностика с применением туберкулина (проба Манту). Детям в возрасте 8 лет и старше проводится иммунодиагностика с применением аллергена туберкулезного рекомбинантного (Диаскинтеста). Иммунодиагностика должна проводиться не реже I раз в гол всем детям.

 Детям и подросткам с сомнительной или положительной реакцией на Диаскинтест показано полное обследование на туберкулез с последующим наблюдением и профилактическим лечением (по показаниям) в противотуберкулезном диспансере. Если по каким-либо причинам родители отказываются от иммунодиагностики или ее провести невозможно, необходимо проконсультироваться с фтизиатром о возможности применения других методов после обязательного осмотра ребенка.

 Ежегодная массовая иммунодиагностика туберкулеза у детей позволяет сформировать группы риска, которым требуются профилактические мероприятия, чтобы инфицирование микобактериями туберкулеза не перешло в заболевание, а в случаях возникновения заболевания туберкулезом выявить его на ранних стадиях.

 

д.м.н. . М. Э. Лозовская, гл. внештатный специалист детский фтизиатр КЗ, зав. кафедрой фтизиатрии ФГБОУ ВО СПб ГПМУ

Тест Манту — Откройте для себя науку и эксперты

Сравнительная чувствительность теста
Тест с туберкулезным рекомбинантным аллергеном, содержащим белок esat6 cfp10 и Тест Манту Тест с 2 tu ppd l у детей и подростков с впервые выявленным туберкулезом в Москве

PLOS ONE, 2018

Соавторы: Людмила Слогоцкая, Елена Богородская, Д Иванова, Татьяна Севостьянова

Абстрактный:

Справочная информация Группа российских ученых разработала Диаскин Тест , содержащий рекомбинантные белки, специфичные для Mycobacterium tuberculosis CFP10-ESAT6, для кожи Тест ing (0.2 мкг / 0,1 мл). Цель исследования Оценить сравнительную чувствительность TST с 2 TU PPD-L и кожным Test с туберкулезным рекомбинантным аллергеном (Diaskin Test ), содержащим белок ESAT6-CFP10, у детей и подростков с впервые выявленным активным туберкулезом во время массового скрининга в первичном медицинское обслуживание в москве. материалы и методы Исследование представляло собой комплексное ретроспективное групповое исследование детей и подростков, у которых в Москве был диагностирован активный туберкулез в 2013–2016 годах, в возрасте от 0 до 17 лет включительно.Полученные результаты Из 441 пациента, отобранного для анализа, у 408 пациентов были выполнены оба теста Test (TST с 2 TU PPD-L и Diaskin Test ), у 193 пациентов оба теста Test были проведены одновременно, из них 162 пациента были вакцинированы БЦЖ . Сравнительные результаты обоих Test s у 408 пациентов с туберкулезом: при граничном значении ≥ 5 мм оба теста Test s имеют одинаковую чувствительность: Diaskin Test 98,3% (95% ДИ 97,0–99,6%), TST 98,0% (95% ДИ 96,7–99,4%), при отсечении ≥10 мм чувствительность снижается как для Test s: Diaskin Test 90.0% (95% ДИ 87,0–93,0%), TST 88,7% (95% ДИ 85,6–91,9%), но при пороговом значении ≥ 15 мм снижение чувствительности статистически значимо: для теста Диаскин 61,5% ( 95% ДИ 56,7–66,3%), а для TST 46,3% (95% ДИ 41,4–51,3%) p Тесты на разных руках у 193 человек (в том числе 162 вакцинированных БЦЖ) не отличаются от результатов для 408 человек. Корреляция между результатами теста Diaskin Test и TST была достоверной во всех группах. Заключение У детей и подростков с активным туберкулезом Диаскин Тест из 0.2 мкг / мл и Mantoux Test с 2 TU PPD-L имеют высокую чувствительность (98%) при пороге отсечки 5 мм; однако при отсечении ≥ 15 мм чувствительность значительно снижается, и уменьшение более выражено в тесте Mantoux Test . Преимущество теста Диаскин в том, что в отличие от теста Манту он обладает высокой специфичностью в условиях массовой вакцинации БЦЖ. Test прост в выполнении и может использоваться при массовом досмотре.

% PDF-1.7 % 260 0 объект > эндобдж xref 260 85 0000000016 00000 н. 0000002707 00000 н. 0000002897 00000 н. 0000002933 00000 н. 0000003549 00000 н. 0000003586 00000 н. 0000003835 00000 н. 0000004018 00000 н. 0000004479 00000 н. 0000004928 00000 н. 0000005330 00000 н. 0000005891 00000 н. 0000006003 00000 п. 0000006117 00000 н. 0000006657 00000 н. 0000007783 00000 н. 0000007915 00000 н. 0000008343 00000 п. 0000008749 00000 н. 0000008776 00000 н. 0000009352 00000 п. 0000009609 00000 н. 0000010609 00000 п. 0000011486 00000 п. 0000012332 00000 п. 0000012464 00000 п. 0000012860 00000 п. 0000013293 00000 п. 0000013320 00000 п. 0000013574 00000 п. 0000014056 00000 п. 0000014314 00000 п. 0000014718 00000 п. 0000015397 00000 п. 0000016335 00000 п. 0000017133 00000 п. 0000018031 00000 п. 0000018600 00000 п. 0000021250 00000 п. 0000021320 00000 н. 0000021443 00000 п. 0000058373 00000 п. 0000058641 00000 п. 0000058906 00000 п. 0000059414 00000 п. 0000059484 00000 п. 0000059621 00000 п. 0000095521 00000 п. 0000096074 00000 п. 0000132655 00000 н. 0000152076 00000 н. 0000181080 00000 н. 0000211800 00000 н. 0000211915 00000 н. 0000212028 00000 н. 0000212489 00000 н. 0000212767 00000 н. 0000213064 00000 н. 0000220499 00000 н. 0000220762 00000 н. 0000221260 00000 н. 0000245228 00000 н. 0000245483 00000 н. 0000245882 00000 н. 0000263147 00000 н. 0000263414 00000 н. 0000263954 00000 н. 0000263985 00000 н. 0000264060 00000 н. 0000268290 00000 н. 0000268622 00000 н. 0000268688 00000 н. 0000268804 00000 н. 0000278788 00000 н. 0000279038 00000 н. 0000279411 00000 н. 0000279783 00000 н. 0000279858 00000 н. 0000279975 00000 н. 0000280276 00000 н. 0000280809 00000 н. 0000284720 00000 н. 0000291888 00000 н. 0000292283 00000 н. 0000001996 00000 н. трейлер ] / Предыдущее 2008794 >> startxref 0 %% EOF 344 0 объект > поток hb«`b`b`g`Peca @

Единственный рекомбинантный M.туберкулезный белок DPPD обеспечивает повышенную эффективность кожных тестов у ВИЧ-инфицированных больных туберкулезом | AMB Express

  • Arenas Miras Mdel M, Hidalgo Tenorio C, Jimenez Alonso J (2013) Туберкулез у пациентов с системной красной волчанкой: ситуация в Испании. Reumatol Clin 9 (6): 369–372. https://doi.org/10.1016/j.reuma.2012.06.011

    Артикул PubMed Google ученый

  • Arias Guillen M (2011) Достижения в диагностике туберкулезной инфекции.Arch Bronconeumol 47 (10): 521–530. https://doi.org/10.1016/j.arbres.2011.06.018

    Артикул PubMed Google ученый

  • Bass JB Jr (2003) Насколько хороша туберкулиновая кожная проба? Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 24 (11): 797–798. https://doi.org/10.1086/502138

    Артикул PubMed Google ученый

  • Boehme CC, Nicol MP, Nabeta P, Michael JS, Gotuzzo E, Tahirli R, Gler MT, Blakemore R, Worodria W, Gray C, Huang L, Caceres T, Mehdiyev R, Raymond L, Whitelaw A, Sagadevan K, Alexander H, Albert H, Cobelens F, Cox H, Alland D, Perkins MD (2011) Возможность, диагностическая точность и эффективность децентрализованного использования теста Xpert MTB / RIF для диагностики туберкулеза и множественной лекарственной устойчивости: многоцентровая реализация учиться.Ланцет 377 (9776): 1495–1505. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(11)60438-8

    Артикул PubMed PubMed Central Google ученый

  • Borsuk S, Newcombe J, Mendum TA, Dellagostin OA, McFadden J (2009) Идентификация белков из очищенного производного белка туберкулина (PPD) с помощью LC-MS / MS. Туберкулез (Edinb) 89 (6): 423–430. https://doi.org/10.1016/j.tube.2009.07.003

    CAS Статья Google ученый

  • Cameron MM, Acosta-Serrano A, Bern C, Boelaert M, den Boer M, Burza S, Chapman LA, Chaskopoulou A, Coleman M, Courtenay O, Croft S, Das P, Dilger E, Foster G, Garlapati R, Haines L, Harris A, Hemingway J, Hollingsworth TD, Jervis S, Medley G, Miles M, Paine M, Picado A, Poche R, Ready P, Rogers M, Rowland M, Sundar S, de Vlas SJ, Weetman D (2016) Понимание динамики передачи Leishmania donovani для получения надежных доказательств для вмешательств по ликвидации висцерального лейшманиоза в Бихаре, Индия.Векторы паразитов 9:25. https://doi.org/10.1186/s13071-016-1309-8

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Campos-Neto A, Rodrigues-Junior V, Pedral-Sampaio DB, Netto EM, Ovendale PJ, Coler RN, Skeiky YA, Badaro R, Reed SG (2001) Оценка DPPD, отдельной рекомбинантной Mycobacterium tuberculosis белок в качестве альтернативного антигена для пробы Манту. Туберкулез (Edinb) 81 (5–6): 353–358

    CAS Статья Google ученый

  • CDC (2013a) Масштабы и последствия повторяющейся нехватки растворов антигенов для кожных тестов, производных очищенного белка, туберкулина — США, 2013 г.MMWR Morb Mortal Wkly Rep 62 (49): 1014–1015

    Google ученый

  • CDC (2013b) Национальная нехватка продуктов туберкулина, производных очищенного белка. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 62 (16): 312

    Google ученый

  • CDC (2019) Общенациональная нехватка антигенов туберкулиновых кожных тестов: рекомендации CDC по уходу за пациентами и практике общественного здравоохранения. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 68 (24): 552–553.https://doi.org/10.15585/mmwr.mm6824a4

    Артикул Google ученый

  • Чо Ю.С., Добос К.М., Пренни Дж., Ян Х, Хесс А., Розенкрандс И., Андерсен П., Риу С.В., Бай Г.Х., Бреннан М.Дж., Иззо А., Билефельдт-Оманн Х., Белисл Дж. Т. (2012) Расшифровка протеома диагностического реагента in vivo «очищенное производное белка» из Mycobacterium tuberculosis . Протеомика 12 (7): 979–991. https://doi.org/10.1002/pmic.201100544

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Coler RN, Skeiky YA, Ovendale PJ, Vedvick TS, Gervassi L, Guderian J, Jen S, Reed SG, Campos-Neto A (2000) Клонирование гена Mycobacterium tuberculosis , кодирующего очищенный производный белок белка, который вызывает сильную гиперчувствительность замедленного типа, специфичную для туберкулеза.Журнал Infect Dis 182 (1): 224–233. https://doi.org/10.1086/315677

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Comstock GW, Edwards LB, Philip RN, Winn WA (1964) Сравнение в Соединенных Штатах Америки двух туберкулинов, Ppd-S и Rt 23. Bull World Health Organ 31: 161–170

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • Dacso CC (1990) Кожные пробы на туберкулез, том 47.Клинические методы: история, физические и лабораторные исследования, Boston

  • Dye C, Glaziou P, Floyd K, Raviglione M (2013) Перспективы ликвидации туберкулеза. Annu Rev Public Health 34: 271–286. https://doi.org/10.1146/annurev-publhealth-031912-114431

    Артикул PubMed Google ученый

  • Фархат М., Гринуэй С., Пай М., Мензис Д. (2006) Ложноположительные туберкулиновые кожные пробы: каков абсолютный эффект БЦЖ и нетуберкулезных микобактерий? Int J Tuberc Lung Dis 10 (11): 1192–1204

    CAS PubMed Google ученый

  • Getahun H, Matteelli A, Chaisson RE, Raviglione M (2015) Скрытая инфекция Mycobacterium tuberculosis .N Engl J Med 372 (22): 2127–2135. https://doi.org/10.1056/NEJMra1405427

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Gillenwater KA, Sapp SC, Pearce K, Siberry GK (2006) Увеличение числа преобразователей туберкулиновых кожных проб среди медицинских работников после перехода с туберсола на аплизол. Am J Infect Control 34 (10): 651–654. https://doi.org/10.1016/j.ajic.2006.05.288

    Артикул PubMed Google ученый

  • Goldstein S, Perlman DC, Salomon N (1994) Двухэтапное кожное туберкулиновое тестирование у ВИЧ-инфицированного населения: предварительный отчет.Mt Sinai J Med 61 (4): 337–340

    CAS PubMed Google ученый

  • Graham NM, Nelson KE, Solomon L, Bonds M, Rizzo RT, Scavotto J, Astemborski J, Vlahov D (1992) Распространенность туберкулиновой положительной реакции и анергии кожных пробы у ВИЧ-1-серопозитивных и -серонегативных потребителей инъекционных наркотиков . JAMA 267 (3): 369–373

    CAS Статья Google ученый

  • Houben RM, Dodd PJ (2016) Глобальное бремя латентной туберкулезной инфекции: переоценка с использованием математического моделирования.PLoS Med 13 (10): e1002152. https://doi.org/10.1371/journal.pmed.1002152

    Артикул PubMed PubMed Central Google ученый

  • Huebner RE, Schein MF, Bass JB Jr (1993) Туберкулиновая кожная проба. Clin Infect Dis 17 (6): 968–975

    CAS Статья Google ученый

  • Jensen PA, Lambert LA, Iademarco MF, Ridzon R (2005) Рекомендации по предотвращению передачи Mycobacterium tuberculosis в медицинских учреждениях, 2005.MMWR Recomm Rep 54: 1–141

    PubMed Google ученый

  • Johnson MP, Coberly JS, Clermont HC, Chaisson RE, Davis HL, Losikoff P, Ruff AJ, Boulos R, Halsey NA (1992) Реакция туберкулиновой кожной пробы у взрослых, инфицированных вирусом иммунодефицита человека. J Infect Dis 166 (1): 194–198

    CAS Статья Google ученый

  • Keeler E, Perkins MD, Small P, Hanson C, Reed S, Cunningham J, Aledort JE, Hillborne L, Rafael ME, Girosi F, Dye C (2006) Снижение глобального бремени туберкулеза: вклад улучшения диагностика.Nature 444 (Приложение 1): 49–57

    Артикул Google ученый

  • Kimura M, Comstock GW, Mori T (2005) Сравнение эритемы и уплотнения по результатам туберкулиновых проб. Int J Tuberc Lung Dis 9 (8): 853–857

    CAS PubMed Google ученый

  • Lifson AR, Watters JK, Thompson S, Crane CM, Wise F (1993) Расхождения в результатах кожных тестов на туберкулин с двумя коммерческими продуктами в популяции потребителей инъекционных наркотиков.J Infect Dis 168 (4): 1048–1051

    CAS Статья Google ученый

  • Liu C, Flamoe E, Chen HJ, Carter D, Reed SG, Campos-Neto A (2004) Экспрессия и очистка иммунологически реактивного DPPD, рекомбинантного антигена кожного теста Mycobacterium tuberculosis с использованием Mycobacterium smegmatis и Escherichia coli клетки-хозяева. Can J Microbiol 50 (2): 97–105

    CAS Статья Google ученый

  • Lonnroth K, Raviglione M (2016) Новая стратегия ВОЗ «Положить конец туберкулезу в эпоху Целей устойчивого развития после 2015 года».Trans R Soc Trop Med Hyg 110 (3): 148–150. https://doi.org/10.1093/trstmh/trv108

    Артикул PubMed PubMed Central Google ученый

  • Мамани М., Майзуби М.М., Торабиан С., Михан Р., Ализаде К. (2013) Латентный и активный туберкулез: оценка потребителей инъекционных наркотиков. Иранский Красный Полумесяц, Med J 15 (9): 775–779. https://doi.org/10.5812/ircmj.6283

    Артикул PubMed PubMed Central Google ученый

  • Mehta SR, MacGruder C, Looney D, Johns S, Smith DM (2009) Различия в реактивности туберкулина, определенные в программе проверки здоровья сотрудников администрации ветеранов.Clin Vaccine Immunol 16 (4): 541–543. https://doi.org/10.1128/CVI.00375-08

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Моррисон Дж., Пай М., Хоупвелл П.С. (2008) Туберкулез и латентная туберкулезная инфекция у лиц, близких к туберкулезу легких в странах с низким и средним уровнем дохода: систематический обзор и метаанализ. Ланцет Infect Dis 8 (6): 359–368. https://doi.org/10.1016/S1473-3099(08)70071-9

    Артикул PubMed Google ученый

  • Nicol MP, Workman L, Isaacs W., Munro J, Black F, Eley B, Boehme CC, Zemanay W, Zar HJ (2011) Точность теста Xpert MTB / RIF для диагностики туберкулеза легких у детей, поступивших в стационар в больницу в Кейптауне, Южная Африка: описательное исследование.Ланцет Infect Dis 11 (11): 819–824. https://doi.org/10.1016/S1473-3099(11)70167-0

    Артикул PubMed PubMed Central Google ученый

  • Овусу-Эдусей К. младший, Уинстон Калифорния, Маркс С.М., Лангер А.Дж., Мирамонтес Р. (2017) Использование тестов на туберкулез и медицинские расходы по данным амбулаторных страховых требований, 2013 г. Tuber Res Treat 2017: 3816432. https://doi.org/10.1155/2017/3816432

    Артикул Google ученый

  • Pai M, Denkinger CM, Kik SV, Rangaka MX, Zwerling A, Oxlade O, Metcalfe JZ, Cattamanchi A, Dowdy DW, Dheda K, Banaei N (2014) Анализ высвобождения гамма-интерферона для обнаружения Mycobacterium tuberculosis инфекционное заболевание.Clin Microbiol Rev 27 (1): 3–20. https://doi.org/10.1128/CMR.00034-13

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Pai M, Behr MA, Dowdy D, Dheda K, Divangahi M, Boehme CC, Ginsberg A, Swaminathan S, Spigelman M, Getahun H, Menzies D, Raviglione M (2016) Tuberculosis. Nat Rev Dis Primers 2: 16076. https://doi.org/10.1038/nrdp.2016.76

    Артикул PubMed Google ученый

  • Rangaka MX, Wilkinson KA, Glynn JR, Ling D, Menzies D, Mwansa-Kambafwile J, Fielding K, Wilkinson RJ, Pai M (2012) Прогностическое значение анализов высвобождения гамма-интерферона для случаев активного туберкулеза: систематический обзор и метаанализ.Lancet Infect Dis 12 (1): 45–55. https://doi.org/10.1016/S1473-3099(11)70210-9

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Рангель-Фраусто М.С., Понсе-Де-Леон-Росалес С., Мартинес-Абароа С., Хаслов К. (2001) Туберкулез и качество туберкулина: лучшие намерения, вводящие в заблуждение результаты. Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 22 (8): 481–484. https://doi.org/10.1086/501937

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Rose DN, Schechter CB, Adler JJ (1995) Интерпретация туберкулиновой кожной пробы.J Gen Intern Med 10 (11): 635–642

    CAS Статья Google ученый

  • Snider DE Jr (1982) Туберкулиновая кожная проба. Am Rev Respir Dis 125 (3 Pt 2): 108–118. https://doi.org/10.1164/arrd.1982.125.3P2.108

    Артикул PubMed Google ученый

  • Старшинова А., Журавлев В., Довгалюк И., Пантелеев А., Манина В., Зинченко Ю., Истомина Е., Павлова М., Яблонский П. (2018) Сравнение внутрикожного теста с рекомбинантным туберкулезным аллергеном (диаскинтест) с другими иммунологическими тестами в диагноз туберкулезной инфекции.Int J Mycobacteriol 7: 32–39

    CAS Статья Google ученый

  • Uplekar M, Weil D, Lonnroth K, Jaramillo E, Lienhardt C, Dias HM, Falzon D, Floyd K, Gargioni G, Getahun H, Gilpin C, Glaziou P, Grzemska M, Mirzayev F, Nakatani H, Raviglion M, для WsGTBP (2015) новая стратегия ВОЗ по ликвидации туберкулеза. Ланцет 385 (9979): 1799–1801. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(15)60570-0

    Артикул Google ученый

  • Villarino ME, Burman W, Wang YC, Lundergan L, Catanzaro A, Bock N, Jones C, Nolan C (1999) Сравнимая специфичность 2 коммерческих туберкулиновых реагентов у лиц с низким риском туберкулезной инфекции.JAMA 281 (2): 169–171

    CAS Статья Google ученый

  • Villarino ME, Brennan MJ, Nolan CM, Catanzaro A, Lundergan LL, Bock NN, Jones CL, Wang YC, Burman WJ (2000) Сравнительное тестирование текущего (PPD-S1) и предлагаемого (PPD-S2) эталона стандарты туберкулина. Am J Respir Crit Care Med 161 (4, часть 1): 1167–1171. https://doi.org/10.1164/ajrccm.161.4.9

    0

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Whittle H, Egboga A, Todd J, Morgan G, Rolfe M, Sabally S, Wilkins A, Corrah T. (1993) Иммунологические ответы гамбийцев в отношении клинической стадии болезни ВИЧ-2.Clin Exp Immunol 93 (1): 45–50

    CAS Статья Google ученый

  • WHO (2018a) Global Tuberculosis Report 2018. Всемирная организация здравоохранения, Женева

    Google ученый

  • ВОЗ (2018b) Скрытая туберкулезная инфекция: обновленные и сводные руководящие принципы программного управления. Всемирная организация здравоохранения, Женева, Женева

    Google ученый

  • Ян Х., Крух-Гарсия Н.А., Добос К.М. (2012) Очищенные производные белка туберкулина — прошлое, настоящее и будущее.FEMS Immunol Med Microbiol 66 (3): 273–280. https://doi.org/10.1111/j.1574-695X.2012.01002.x

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • SciELO — Общественное здравоохранение — Простой протокол сертификации чтения туберкулиновых кожных проб Простой протокол сертификации чтения туберкулиновых кожных проб

    Туберкулез (ТБ) остается первой причиной смерти от инфекционных заболеваний во всем мире 1 1.Всемирная организация здравоохранения. Глобальный отчет о туберкулезе 2019. http://www.who.int/tb/publications/global_report/en/ (по состоянию на 15 января 2020 г.).
    http: //www.who.int/tb/publications/globa …. Профилактическая терапия туберкулеза (TPT) очень эффективна у лиц с латентной туберкулезной инфекцией (LTBI) 2 2. Всемирная организация здравоохранения. Сводное руководство ВОЗ по туберкулезу. Модуль 1: профилактика. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 2020., являясь краеугольным камнем искоренения туберкулеза к 2050 году 3 3.Dye C, Glaziou P, Floyd K, Raviglione M. Перспективы ликвидации туберкулеза. Annu Rev Public Health 2013; 34: 271-86. , 4 4. Организация Объединенных Наций. Политическая декларация заседания высокого уровня Генеральной Ассамблеи ООН. https://www.who.int/tb/unhlmonTBDeclaration.pdf (доступ 17 января 2020 г.).
    https: //www.who.int/tb/unhlmonTBDeclarat …. Однако многочисленные препятствия на разных этапах каскада помощи при ЛТИ приводят к тому, что менее 30% имеющих право на ТПТ получают рецепт и менее 19% завершают курс лечения 5 5.Alsdurf H, Hill PC, Matteelli A, Getahun H, Menzies D. Каскад помощи в диагностике и лечении латентной туберкулезной инфекции: систематический обзор и метаанализ. Lancet Infect Dis 2016; 16: 1269-78 .. Таким образом, влияние TPT на общественное здоровье остается минимальным 1 1. Всемирная организация здравоохранения. Глобальный отчет о туберкулезе 2019. http://www.who.int/tb/publications/global_report/en/ (по состоянию на 15 января 2020 г.).
    http: //www.who.int/tb/publications/globa …, несмотря на включение новых более коротких и безопасных схем TPT в рекомендации Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) 2 2.Всемирная организация здравоохранения. Сводное руководство ВОЗ по туберкулезу. Модуль 1: профилактика. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 2020 ..

    Риск перехода от ЛТИ в активную болезнь выше у лиц с положительным результатом теста на ЛТИ, будь то туберкулиновая кожная проба (TST) или анализ высвобождения гамма-интерферона (IGRA) 6 6. Campbell JR, Winters N, Menzies D. Абсолютный риск туберкулеза среди нелеченых групп населения с положительным результатом туберкулиновой кожной пробы или анализа высвобождения гамма-интерферона: систематический обзор и метаанализ.BMJ 2020; 368: m549 .. Неудивительно, что TPT оказалась более полезной для людей с положительным результатом теста на ЛТИ. 7 7. Akolo C, Adetifa I, Shepperd S, Volmink J. Лечение латентной туберкулезной инфекции у ВИЧ-инфицированных. Кокрановская база данных Syst Rev 2010; (1): CD000171. , 8 8. Smieja MJ, Marchetti CA, Cook DJ, Smaill FM. Изониазид для профилактики туберкулеза у людей, не инфицированных ВИЧ. Кокрановская база данных Syst Rev 2000; (2): CD001363. , 9 9.Самандари Т., Агизев Т.Б., Ньиренда С., Тедла З., Сибанда Т., Шан Н. и др. Профилактическое лечение изониазидом в течение 6 месяцев по сравнению с 36-месячным курсом лечения туберкулеза у взрослых с ВИЧ-инфекцией в Ботсване: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Ланцет 2011; 377: 1588-98 .. Таким образом, TST (или IGRA, если таковой имеется) является обязательным тестом в каскаде оказания помощи при ЛТИ, за исключением пациентов, живущих с ВИЧ (ЛЖВ), или пациентов моложе пяти лет, у которых риск прогрессирования заболевания в активную фазу 2 2.Всемирная организация здравоохранения. Сводное руководство ВОЗ по туберкулезу. Модуль 1: профилактика. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 2020 .. Однако из 30 миллионов ВИЧ-отрицательных лиц в возрасте пяти лет и старше, которые должны получить TPT к 2022 году 4 4. Организация Объединенных Наций. Политическая декларация заседания высокого уровня Генеральной Ассамблеи ООН. https://www.who.int/tb/unhlmonTBDeclaration.pdf (доступ 17 января 2020 г.).
    https: //www.who.int/tb/unhlmonTBDeclarat …, 20 миллионов нуждаются в положительном тесте на ЛТБИ.ТКП прост в выполнении, обходится без лабораторной инфраструктуры и имеет хорошую точность 10 10. Трайман А., Штеффен Р.Е., Мензис Д. Анализ высвобождения гамма-интерферона в сравнении с кожным туберкулиновым тестом для диагностики латентной туберкулезной инфекции: обзор доказательств . Pulm Med 2013; 2013: 601737 .. Более новые и более специфические TST с использованием рекомбинантного туберкулина на основе белков ESAT-6 и CP-10 уже приняты в некоторых странах БРИКС. 11 11. Абубакар И., Джексон С., Рангака М.Х.C-Tb: кожная проба на скрытый туберкулез в 21 веке? Ланцет Респир Мед 2017; 5: 236-7. , 12 12. Никитина И.Ю., Карпина Н.Л., Касимцева О.В., Гергерт В.Ю., Эргешов А., Лядова И.В. Сравнительная эффективность QuantiFERON-TB Gold по сравнению с кожной пробой с рекомбинантным аллергеном туберкулеза (Диаскинтест) у пациентов с подозрением на туберкулез легких в России. Int J Infect Dis 2019; 86: 18-24. , 13 13. Зеллвегер Дж. П., Сотгиу Г., Корради М., Дурандо П. Диагностика латентной туберкулезной инфекции (ЛТИ): доступные в настоящее время тесты, будущие разработки и перспективы ликвидации туберкулеза (ТБ).Med Lav 2020; 111: 170-83 ..

    Несмотря на то, что это простой тест, воспроизводимость показаний уплотнения была низкой 14 14. Ozuah PO, Burton W, Lerro KA, Rosenstock J, Mulvihill M. Оценка эффективности туберкулина показания кожных тестов обученными профессионалами и пациентами. Сундук 1999; 116: 104-6. , 15 15. Теруэль Дж. Р., Руффино Нетто А., Дуарте Г. Г.. Стандартизация считывателей туберкулиновых тестов. Tubercle 1969; 50: 350-5. , 16 16.Goel D, Mantan M, Sethi GR. Повторный визит к пробе Манту: вариабельность чтения туберкулиновой пробы в педиатрической популяции. J Infect Dev Ctries 2018; 12: 625-30. , 17 17. Bearman JE, Kleinman H, Glyer VV, Lacroix OM. Исследование вариабельности чтения туберкулиновых тестов. Am Rev Respir Dis 1964; 90: 913-9 .. Таким образом, в некоторых системах здравоохранения требуется сертификация медицинских работников для чтения TST, но особые требования для сертификации сильно различаются. 15 15. Теруэль Дж. Р., Руффино Нетто А., Дуарте Г. Г..Стандартизация считывателей туберкулиновых тестов. Tubercle 1969; 50: 350-5 .. В то время как для сертификации в Грузии, США, требуются десять приложений и показаний TST под наблюдением сертифицированного специалиста (https://dph.georgia.gov/sites/dph.georgia.gov/files/ TB-TSTCertclass.pdf, по состоянию на 11 сентября 2020 г.), Бразилия установила от 80 до 100 чтений при 80% согласовании с тренером в качестве требования 18 18. Departamento de Vigilância das Doenças Transmissíveis, Secretaria de Vigilância em Saúde, Ministério da Saúde.Técnicas de aplicação e leitura da prova tuberculínica. Бразилиа: министерство да Сауде; 2014. Хотя протоколы обучения медицинских работников применению и чтению TST также сильно различаются, качество контроля качества выполнения TST на основе удаленного метода мобильного здоровья (mTST) считается точным, особенно для показаний менее 5 мм и более 14 мм 19 19. Моайеди-Ниа С., Барсс Л., Окслейд О., Валикетт С., Ли М.Х., Кэмпбелл Дж. Р. и др. MTST — подход мобильного здравоохранения к обучению и обеспечению качества проведения туберкулиновых кожных проб и чтения.PLoS One 2019; 14: e0215240 .. На основе этого опыта 19 19. Моайеди-Ниа С., Барсс Л., Окслейд О., Валикетт С., Ли М.-Х, Кэмпбелл Дж. Р. и др. MTST — подход мобильного здравоохранения к обучению и обеспечению качества проведения туберкулиновых кожных проб и чтения. PLoS One 2019; 14: e0215240., Мы предположили, что протокола обучения, основанного на моделировании солевых пузырьков, будет достаточно для сертификации медицинских работников, и проверили эту гипотезу.

    С октября 2019 года по январь 2020 года мы провели оперативное исследование в отделении первичной медико-санитарной помощи в фавеле с высокой заболеваемостью туберкулезом в Рио-де-Жанейро, Бразилия. этап оценки.Любой медицинский работник или студент-медик имел право добровольно участвовать в обучении. Мы включили всех людей, которые были доступны и согласились участвовать, подписав форму информированного согласия, и исключили тех, кто ранее прошел обучение. Основано на расхождениях в показаниях, указанных в протоколах 1960-х годов. 15 15. Теруэль Дж. Р., Руффино Нетто А., Дуарте Г. Г.. Стандартизация считывателей туберкулиновых тестов. Tubercle 1969; 50: 350-5., Мы установили выборку из 40 слушателей.

    Стажеры посетили 2-часовой семинар о важности TPT и рекомендациях по выявлению контактов, применению, чтению и интерпретации TST (адаптировано из Дика Мензиса и Линетт МакЭлрой; дополнительные материалы, http://cadernos.ensp.fiocruz .br / static // arquivo / suppl1-e00027321_5854.pdf) и просмотрел 7-минутное демонстрационное видео от Министерства здравоохранения Бразилии (доступно на https://www.youtube.com/watch?v=fRbg7vsa44o&t=4s) . После этого теоретического введения ученики участвовали в тренинге по чтению, где временные пузырьки создавались путем инъекции 0.1 мл физиологического раствора в сосисках (моделирование внутрикожной техники; дополнительный рисунок S1, http://cadernos.ensp.fiocruz.br/static//arquivo/suppl2-e00027321_9122.pdf). Наконец, чтобы смоделировать технику Манту, мы внутрикожно вводили 0,1 мл физиологического раствора стажерам добровольным медицинским работникам, которые подписали отдельную форму информированного согласия. Все пузырьки должны иметь диаметр не менее 6 мм и длиться от 10 до 15 минут, как и пузырек туберкулина 20 20. Канадская ассоциация легких; Канадское торакальное общество; Агентство общественного здравоохранения Канады; Центр инфекционных болезней и инфекционного контроля.Канадские стандарты по туберкулезу. https://central.bac-lac.gc.ca/.item?id=HP40-18-2014-eng&op=pdf&app=Library (по состоянию на 06 апреля 2021 г.).
    https: //central.bac-lac.gc.ca/.item? Id = H …. Показания колбасы и ручных пузырьков были индивидуальными, каждый студент не знал других показаний. Все этапы обучения проводил опытный врач с ЛТИ, не имеющий сертификата TST или опыта чтения TST, который прошел обучение с сосисками и добровольными солевыми пузырьками в предыдущем году в рамках подготовки к двум исследовательским проектам 19 19.Moayedi-Nia S, Barss L, Oxlade O, Valiquette C, Ly M-X, Campbell JR и др. MTST — подход мобильного здравоохранения к обучению и обеспечению качества проведения туберкулиновых кожных проб и чтения. PLoS One 2019; 14: e0215240. , 21 21. Oxlade O, Trajman A, Benedetti A, Adjobimey M, Cook VJ, Fisher D, et al. Повышение воздействия диагностики и лечения латентной туберкулезной инфекции на общественное здоровье (ACT4): протокол кластерного рандомизированного исследования. BMJ Open 2019; 9: e025831 .. Практический курс длился менее двух часов, в зависимости от количества слушателей.Схема тренировочного процесса представлена ​​на дополнительном рисунке S2 (http://cadernos.ensp.fiocruz.br/static//arquivo/suppl2-e00027321_9122.pdf).

    Чтобы оценить эффективность этого обучения, стажеры прошли этап оценки, прочитав уплотнения TST во время службы, которые были сравнены с эталонным стандартом «истинных» показаний уплотнения инструктором, сертифицированным Министерством здравоохранения Бразилии (90% соответствие стандарту 80-100 чтений с сертифицированным тренером). И стажеры, и инструктор не видели показания друг друга, и все измерения (имитация физиологического раствора и уплотнение туберкулина) выполнялись с помощью линейки штангенциркуля (дополнительный рисунок S3, http: // cadernos.Ensp.fiocruz.br/static//arquivo/suppl2-e00027321_9122.pdf).

    Согласие между наблюдателями было установлено при разнице между показаниями до 2 мм и проанализировано с использованием теста Бланда-Альтмана 22 22. Бланд Дж. М., Альтман Д. Г.. Согласованность методов измерения с несколькими наблюдениями на человека. J Biopharm Stat 2007; 17: 571-82 .. Чувствительность и специфичность чтения обучаемого, а также их 95% доверительные интервалы были рассчитаны с использованием 5 мм и 10 мм в качестве пороговых значений (меры, используемые в Бразилии, в зависимости от риска перехода в активный туберкулез и времени после вакцинации БЦЖ. ) 23 23.Departamento de Vigilância das Doenças Transmissíveis, Secretaria de Vigilância em Saúde, Ministério da Saúde. Руководство по борьбе с туберкулезом в Бразилии. 2ª Ред. Бразилиа: министерство да Сауде; 2018 .. Чтобы проверить, оказало ли количество считываний или тип введенного продукта (физиологический раствор или туберкулин) какое-либо существенное влияние на согласие, мы разработали линейную смешанную модель с двумя иерархическими уровнями (для каждого пациента и для каждого читателя), включая все показания (пузырьки и уплотнения), имеющие в качестве зависимой переменной абсолютную разницу между результатами обучаемого и инструктора в мм и в качестве независимых переменных: показания инструктора, количество показаний и тип введенного продукта (физиологический раствор или туберкулин).Модель считалась устойчивой, если средние остатки были близки к нулю. Все анализы проводились в Stata (https://www.stata.com).

    Исследование было одобрено Комитетом по этическим исследованиям Школы медсестер Анны Нери / Сан-Франциско-де-Ассис Институт здравоохранения Федерального университета Рио-де-Жанейро (№ 3.256.347 от 10 апреля 2019 г.) и Рио-де-Жанейро. Секретариат здравоохранения (№ 3.470.316 от 25 июля 2019 г.). Все пациенты и медицинские работники подписали форму информированного согласия перед участием в исследовании.

    Из 64 медицинских работников, отвечающих критериям, 15 прошли обучение на трех различных курсах. Каждый стажер прочитал в среднем 6,8 (± 2,2) пузырьков в сосисках и 3,5 (± 1,3) пузырьков у добровольцев. Из 15 участников 11 были оценены в процессе эксплуатации и получили в среднем 14,7 (± 5,4) показаний TST каждый. В их число входили один фармацевт, два врача, две дипломированных медсестры, два помощника медсестры и четыре представителя здравоохранения по месту жительства, прошедшие подготовку помощников медсестер. В целом они выполнили 141 измерение — 53 пузыря и 88 уплотнений — до того, как проект был прерван из-за пандемии SARS-CoV-2.

    Тест Бланда-Альтмана обнаружил высокое согласие для 88 показаний уплотнения, выполненных в 20 руках, со средним смещением 0,07 мм и 94,3% графиков в пределах диапазона 2s (Рисунок 1). Чувствительность показаний обучаемых составляла 100% (94,6%; 100,0%) при отсечении 5 мм и 87,3% (75,5%; 94,7%) при отсечении 10 мм, в то время как специфичность составляла 95,5% (77,2%; 99,9%) и 90,9% (75,7%; 98,1%) соответственно. Дополнительная таблица S1 (http://cadernos.ensp.fiocruz.br/static//arquivo/suppl2-e00027321_9122.pdf) представляет соглашение между наблюдателями по диапазону чтения инструктора.

    Рис. 1
    Соглашение Бланда-Альтмана о чтении туберкулиновых кожных проб между обучаемыми и тренером (N = 88, с использованием туберкулина).

    Что касается коэффициентов модели смешанной регрессии (таблица 1), количество считываний не оказало значительного влияния на согласие. Его коэффициент составлял -0,0007, что означает, что потребуется 131 показание (по оценкам 1 / 0,0007), чтобы получить разницу в 1 мм между показаниями обучаемого и инструктора. Туберкулин дал 0,9 мм (оценка 1/1.065) большая разница, чем физиологический раствор. Наконец, чем больше показания инструктора, тем больше разница с показаниями обучаемого (результат соответствует более низкой чувствительности для отсечки 10 мм). Поскольку средние остатки модели были близки к нулю, она считалась надежной.

    Таблица 1
    Независимые переменные, связанные с соглашением о чтении туберкулиновой кожной пробы между стажерами и сертифицированным тренером.

    Простой протокол обучения чтению TST с симуляцией физиологического раствора в среднем 3.5 представленных здесь добровольцев было достаточно для получения высокого согласия по показаниям уплотнения TST и очень высокой чувствительности для классификации пациентов на положительные или отрицательные результаты в соответствии с двумя различными точками отсечения (5 мм и 10 мм). Количество чтений не повлияло на соглашение. В целом, эти результаты показывают, что обучение с использованием очень небольшого количества солевых пузырьков может быть эффективным для сертификации медицинских работников для чтения TST во время службы. Этот предлагаемый протокол упрощает логистику обучения, является более приемлемым с этической точки зрения и избавляет от необходимости в высококвалифицированных тренерах.

    Другим его преимуществом было обучение применению TST, поскольку неправильное применение метода было указано как потенциальная причина ложноотрицательных результатов TST 20 20. Canadian Lung Association; Канадское торакальное общество; Агентство общественного здравоохранения Канады; Центр инфекционных болезней и инфекционного контроля. Канадские стандарты по туберкулезу. https://central.bac-lac.gc.ca/.item?id=HP40-18-2014-eng&op=pdf&app=Library (по состоянию на 06 апреля 2021 г.).
    https: // центральный.bac-lac.gc.ca/.item?id=H …. Усовершенствованием этого протокола было бы добавление шага для оценки приложения и проверки того, может ли тренер определить размер пузыря в течение 10-15 минут, обычная продолжительность 20 20. Канадская ассоциация легких; Канадское торакальное общество; Агентство общественного здравоохранения Канады; Центр инфекционных болезней и инфекционного контроля. Канадские стандарты по туберкулезу. https://central.bac-lac.gc.ca/.item?id=HP40-18-2014-eng&op=pdf&app=Library (по состоянию на 06 апреля 2021 г.).
    https: //central.bac-lac.gc.ca/.item? Id = H ….

    В литературе также сообщается о высокой вариабельности показаний TST внутри и между наблюдателями. 24 24. Kendig EL, Kirkpatrick BV, Carter WH, Hill FA, Caldwell K, Entwistle M. Недооценка реакции туберкулиновой кожной пробы. Chest 1998; 113: 1175-7. , 25 25. Пушо Дж., Грасланд А., Колле С., Кост Дж., Эсдейл Дж. М., Винсено П. Надежность измерения туберкулиновой кожной пробы. Ann Intern Med 1997; 126: 210-4., 26 26. Лонгфилд Дж. Н., Марджилет А. М., Голден С.М., Лазориц С., Бохан Дж. С., Круз Д.Ф. Различия между наблюдателями и методами туберкулиновой кожной пробы. Pediatr Infect Dis 1984; 3: 323-6., С большей разницей в показаниях, особенно когда они приближаются к точкам отсечения положительности 16 16. Гоэль Д., Мантан М., Сетхи Г.Р. Повторный визит к пробе Манту: вариабельность чтения туберкулиновой пробы в педиатрической популяции. J Infect Dev Ctries 2018; 12: 625-30 .. Так как разница в 2 мм, например, составляет 50% для результата 4 мм и только 20% для результата 10 мм, при больших значениях ожидается больше ошибок.При использовании туберкулина можно также ожидать более высоких показаний, поскольку линейка штангенциркуля сжимает пузырек, чего не наблюдается при уплотнении. Однако хорошо проведенное исследование, сравнивающее показания одного и того же наблюдателя с использованием пары штангенциркуля и прозрачной линейки, показало, что изменение показаний уплотнения TST не зависит от смены считывающего прибора. 27 27. Geldenhuys H, Verver S, Surtie S, Hatherill M, van Leth F, Kafaar F и др. Туберкулиновая кожная проба: сравнение показаний линейки и штангенциркуля.Int J Tuberc Lung Dis 2010; 14: 1266-71 ..

    TST — это наиболее широко доступный тест на ЛТБИ, и, несмотря на его ограничения, тест имеет хорошую точность, не требует лабораторного оборудования, прост для выполнения и интерпретации 19 19. Moayedi-Nia S , Барсс Л., Окслейд О., Валикетт С., Ли МХ, Кэмпбелл Дж. Р. и др. MTST — подход мобильного здравоохранения к обучению и обеспечению качества проведения туберкулиновых кожных проб и чтения. PLoS One 2019; 14: e0215240 .; любой медицинский работник, имеющий опыт применения внутрикожных вакцин, таких как БЦЖ, может ввести туберкулин.Чтение TST, однако, было предметом сложных протоколов, для которых требовался сертифицированный инструктор и наличие нескольких добровольных инструментов, что ограничивало его широкую доступность в системах общественного здравоохранения. Наши выводы имеют соответствующие прагматические последствия. Наш протокол также более безопасен и более приемлем с этической точки зрения. Инъекция туберкулина, хотя обычно хорошо переносится, может вызывать местные побочные реакции, такие как зуд, боль, образование пузырей, некротическая реакция и недомогание блуждающего нерва 28 28.Кристофер Д. Д., Шанкар Д., Дейти А., Цверлинг А., Пай М. Безопасность двухэтапного кожного туберкулинового теста у индийских медицинских работников. Int J Mycobacteriol 2014; 3: 247-51 .. Инъекция физиологического раствора безопасна, несмотря на легкий временный местный дискомфорт, обычно жжение. Альтернативный метод избежать тренировок на руках человека — использовать модели искусственных рук, но оценка эффективности такого метода выходила за рамки настоящего исследования.

    У нашего исследования есть несколько ограничений. Во-первых, трудно сделать обобщение на небольшой выборке одного медицинского учреждения.Во-вторых, этот небольшой размер выборки не позволяет проводить стратифицированный анализ по профессиональному образованию, как это делалось в других исследованиях с участием парамедиков 29 29. Хейнс Б.Э., Грабб Р. Парамедики могут применять и читать тесты Манту на туберкулез. J Emerg Med 2001; 20: 381-4., Фармацевты и другие медицинские работники 30 30. Джейкман Б., Гросс Б., Fortune D, Бабб С., Тинкер Д., Бахирич А. Оценка инициативы по тестированию на туберкулез, проводимой фармацевтами в Нью-Мексико. J Am Pharm Assoc (2003) 2015; 55: 307-12., 31 31. Ховард Т.П., Соломон Д.А. Чтение туберкулиновой кожной пробы: кто, когда и как? Arch Intern Med 1988; 148: 2457-9. читать TST. Тем не менее, общая успеваемость наших участников была очень хорошей, что позволяет предположить, что умение читать TST не зависит от профессионального опыта. Наконец, мы не оценивали различные техники чтения. 32 32. Моран-Мендоса О., Телло-Завала М.С., Ривера-Камарильо М., Риос-Меза Ю. Сравнение различных методов и времени считывания туберкулиновой кожной пробы.Int J Tuberc Lung Dis 2013; 17: 1273-8 ..

    Наше исследование также имеет сильные стороны, такие как оценка без отрыва от производства, проводимая сертифицированным инструктором, и как стажеры, так и инструкторы не имеют доступа к показаниям. Кроме того, различные анализы подтверждают надежность результатов.

    Таким образом, простой и реалистичный протокол обучения, успешно оцененный в этом исследовании, может полностью изменить сценарий недоступности сертифицированного персонала в каскаде оказания помощи при ЛТИ, ситуацию, созданную сложными сертификатами 33 33.Salame FM, Ferreira MD, Belo MT, Teixeira EG, Cordeiro-Santos M, Ximenes RA и др. Знания о передаче и профилактике туберкулеза, а также восприятие использования услуг здравоохранения среди индексных больных и контактов в Бразилии: понимание потерь в каскаде оказания помощи при латентном туберкулезе. PLoS One 2017; 12: e0184061 .. По мере разработки новых и более конкретных TST 11 11. Абубакар И., Джексон С., Рангака М.Х. C-Tb: кожная проба на скрытый туберкулез в 21 веке? Ланцет Респир Мед 2017; 5: 236-7., 12 12. Никитина И.Ю., Карпина Н.Л., Касимцева О.В., Гергерт В.Ю., Эргешов А., Лядова И.В. Сравнительная эффективность QuantiFERON-TB Gold по сравнению с кожной пробой с рекомбинантным аллергеном туберкулеза (Диаскинтест) у пациентов с подозрением на туберкулез легких в России. Int J Infect Dis 2019; 86: 18-24. , 13 13. Зеллвегер Дж. П., Сотгиу Г., Корради М., Дурандо П. Диагностика латентной туберкулезной инфекции (ЛТИ): доступные в настоящее время тесты, будущие разработки и перспективы ликвидации туберкулеза (ТБ).Med Lav 2020; 111: 170-83., Чтение TST останется необходимостью.

    Эпидемиология и инфекционные болезни »Современные подходы к аллергической диагностике туберкулеза в России

    1. Корецкая М.Н. [Диаскинтест — новый метод выявления туберкулезной инфекции]. Сибирское Медицинское Обозрение 2013; 2: 94–97. (На рус. Яз.).

    2. Стрельцова Е.Н., Рыжкова О.А., Беспалова А.О. [Сравнительное клиническое исследование результатов диаскинтеста и пробы Манту у больных туберкулезом] Астраханский медицинский журнал 2011; 1 (6): 265–270.(На рус. Яз.).

    3. Лысов А.В., Казаков А.В., Рябцева И.А., Попов Р.А., Родионова А.А. [Диаскинтест в практике фтизиатра]. Сибирское Медицинское Обозрение 2011; 6 (72): 110–113. (На рус. Яз.).

    4. Аксенова В.А. [Новая кожная проба «Диаскинтест» как скрининговый метод выявления туберкулеза]. Доктор. RU. 2011; 6: 35–39. (На рус. Яз.).

    5. Киселев В.И., Барановский П.М., Рудых И.В. Шустер А.М., Мартьянов В.А., Медников Б.Л., Демин А.В., Александров А.Н., Леви Д.Т., Слогоцкая Л.В., Овсянкина Е.С., Медуницин Н.В., Литвинов В.И., Перельман М.И., Пальцев М.А. Клинические исследования нового кожного теста Диаскинтест для диагностики туберкулеза. Проблемы Туберкулеза 2009; 2: 1–8. (На рус. Яз.).

    6. Медников Б.Л. [Применение Диаскинтеста для выявления туберкулеза]. Пульмонология 2010; 4: 66–70. (На рус. Яз.).

    7. Леви Д.Т., Наконечная А.В., Обухов Ю.И., Рухамина М.Л., Александрова Н.В., Альварес Фигероа М.В. [Туберкулезные аллергены-приборы для специфической диагностики туберкулеза.] Биопрепараты. Профилактика. Диагностика. Лечение 2013; 4 (48): 10–17. (На рус. Яз.).

    8. Богородская Е.М. Аналитический обзор статистических данных по туберкулезу за 2012 год. В кн .: Литвинов В.И., ред. Противотуберкулезная работа в городе Москва. М .: Триада, 2013; 15–23,102–103. (На рус. Яз.).

    9. Аксенова В.А., Клевно Н.И., Барышникова Л.А., Кудлай Д.А., Николенко Н.Ю., Курила А.А. Выявление туберкулеза и тактика диспансерного наблюдения за лицами из группы риска с использованием рекомбинантного туберкулезного антигена — Диаскинтест.Метод. Выявление и тактика диспансерного наблюдения за лицами из группы риска с применением Диаскинтеста. Руководящие указания]. (На рус. Яз.). http://diaskintest.ru/pdfs/metodicheskie_rekomendacii.pdf

    10. Шилова М.В. Туберкулез в России в 2012–2013 году. [Туберкулез в России в 2012–2013 гг.]. М .: Промбюро, 2014; 77–112. (На рус. Яз.).

    11. Красильников И.В. [Современные методы массовой ранней диагностики туберкулезной инфекции]. Медицинский альфавит 2013; 6 (1): 33–35. (На рус.).

    12. Слогоцкая Л.В., Литвинов В.И., Филиппов А.В., Кочетков Я.А., Сельцовский П.П., Стахеева Л.Б., Шустер А.М., Мартьянов В.А., Демин А.В. Чувствительность новой кожной пробы (Диаскинтест) у детей-подростков с туберкулезной инфекцией. Туберкулез и Болезни Легких. 2010; 1 (87): 10–15. (На рус. Яз.).

    13. Слогоцкая Л.В., Сенчихина О.Ю., Никитина Г.В., Богородская Е.М. Эффективность кожной пробы с рекомбинантным аллергеном туберкулеза для выявления туберкулеза у детей и подростков в Москве.Педиатрическая Фармакология 2015; 12 (1): 99–103. (На рус. Яз.).

    14. Александров А.Н., Аксенова В.А., Барановский П.М., Пальцев М.А. Кожная проба с Диаскинтестом — новые возможности выявления туберкулезной инфекции. М .: Медицина, 2010. 175 с. (На рус. Яз.).

    15. Приказ Минздрава России от 21.03.2003 № 109 (ред. От 29.10.2009) «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации». [Приказ Минздрава России от 21.03.2003 № 109 (ред. От 29.10.2009) «О совершенствовании борьбы с туберкулезом в Российской Федерации»]. (На рус. Яз.). http://ptd-omsk.ru/articles/normativ/post109.doc

    16. Слогоцкая Л.В., Филиппов А.В., Кочетков Я.А., Сельцовский П.П., Литвинов В.И. [Чувствительность и специфичность Диаскинтеста у больных туберкулезом и нетуберкулезными заболеваниями легких.] Российский Медицинский Журнал 2011; 4: 15–19. (На рус. Яз.).

    17. Королук А.М., Кривожиж В.Н. [Диаскинтест и туберкулиновая проба: вместе или вместо?].Эпидемиология и Инфекционные болезни 2013; 2: 73–75. (На рус. Яз.).

    18. Smith R., Cattamanchi A., Steingart K.R., Denkinger C., Dheda K., Winthrop K.L., Pai M. Анализ высвобождения гамма-интерферона для диагностики латентной туберкулезной инфекции: данные об иммуноопосредованных воспалительных расстройствах. Текущее мнение в ревматологии 2011; 23: 377–384.

    19. Маес М., Верхаген Л.М., Ортега Д., Санчес Г.Л., Сеговия Ю., дель Ногал Б., Де Ваард Дж. Х. Влияние бациллы Кальметта-Герена на туберкулиновую кожную пробу у индейцев Венесуэлы в регионах с высоким бременем туберкулеза.J. Infect. Развивающиеся страны 2014; 8 (2): 176–183.

    20. Mardani M., Tabarsi P., Mohammadtaheri Z., Farokhzad B., Chitsaz E., Hadavand F., Gachkar L., Nemati K., Masjedi MR. Показатели QuantiFERON-TB Gold по сравнению с туберкулиновой кожной пробой. в выявлении скрытой туберкулезной инфекции у ВИЧ-инфицированных в Иране. Анна. Грудной. Med. 2010; 5 (1): 43–46.

    21. Яблонский П.К., Довгалук И.Ф., Зубарева С.В., Корнева Н.В., Старшинова А.А. [Диаскинтест в общей медицинской сетевой практике: миф или реальность.] Практическая медицина 2012; 56: 65–69. (На рус. Яз.).

    22. Гурьева О.И., Ощепкова Н.М. Применение кожной пробы с Диаскинтестом для диагностики туберкулеза периферических лимфатических узлов у детей и подростков. Туберкулез и Болезни Легких 2011; 4: 113–114. (На рус. Яз.).

    23. Сметанин А.Г. Прогностическое значение Диаскинтеста и пробы Манту у детей с туберкулезной инфекцией. Медицинский альфавит 2013; 13 (2): 38–41. (На рус. Яз.).

    24. [Описание препарата Диаскинтест].В кн .: Электронный справочник «Видаль» [Электронный справочник «Видаль»]. Http://vidal.ru/poisk_preparatov/ diaskintest.htm ..

    25. Аксенова В.А., Барышникова Л.А., Сокольская Е.А. Новые возможности диагностики туберкулезной инфекции у детей и подростков. Российский вестник перинатологии и педиатрии 2011; 4: 90–95. (На рус. Яз.).

    26. Методические рекомендации по совершенствованию диагностики и лечения туберкулеза органов дыхания (утверждены Приказом Министерства здравоохранения Российской Федерации от 29 декабря 2014 г.).№ 951). [Методические рекомендации по совершенствованию диагностики и лечения туберкулеза органов дыхания (утверждены Минздравом РФ от 29 декабря 2014 г. № 951). (На рус. Яз.). http://pharm-spb.ru/docs/lit/Rekomendazii%20po%20diagnostike%20i%20lecheniyu%20tuberkuleza%20%28MZ%20RF%29%202014.pdf

    27. Иконкина И.В., Корниенко С.В., Кондрашева Л.В., Однолько О.В., Сковзгирд И.Н. [Опыт применения кожной пробы у детей Воронежской области] Туберкулез и Болезни Легких 2014; 7: 54–60.(На рус. Яз.).

    28. Долженко Е.Н. [Значение рекомбинантного аллергена туберкулеза (Диаскинтест) в выявлении активного туберкулеза]. Туберкулез и Болезни Легких 2012; 9: 21–36. (На рус. Яз.).

    29. Алексеев А.А., Фатыхова Р.Х. Опыт применения Диаскинтеста в Татарстане. Туберкулез и Болезни Легких. 2014; 10: 61–64. (На рус. Яз.).

    30. Моисеева Н.Н., Аксенова В.А., Одинец В.С. [Эффективность кожной пробы Диаскинтест при массовых обследованиях на туберкулез. Фармакоэкономический анализ.Туберкулез и Болезни Легких 2013; 2: 45–52. (На рус. Яз.).

    31. Мотанова Л.Н., Ковалева Г.Е., Попова Ю.В. [Опыт применения Диаскинтеста в регионах с высоким бременем туберкулеза]. Туберкулез и Болезни Легких 2014; 4: 34–39. (На рус. Яз.).

    32. Стрельцова Е.Н., Степанов Н.А. Диаскинтест в дифференциальной диагностике первичной инфекции Mycobacterium tuberculosis и поствакцинальной аллергии у детей и подростков. Туберкулез и Болезни Легких 2013; 6: 87–88. (На рус. Яз.).

    33. Федоровых В.С., Маркелов Ю.М., Карбаускене С.И. Оценка применения Диаскинтеста для выявления туберкулеза у детей и подростков. В кн .: Полторак А.Н., Балашов А.Т., Волковой Т.О. (ред.) Современная медицина: традиции и инновации. Сборник научных статей Петрозаводского государственного университета. [Современная медицина: традиции и инновации. Сборник научных статей Петрозаводского государственного университета. Киров: МЦНИП, 2013; 262 р. (На рус. Яз.).

    34.Шилова М.В., Лебедева Л.В. [Проблемы туберкулеза у детей и подростков]. Поликлиника 2014; 4: 73–80. (На рус. Яз.).

    35. Ставицкая Н.В., Молчанова Н.В., Дудченко Д.В., Дорошенкова А.Е. Оптимизация скрининга на туберкулезную инфекцию у детей. Туберкулез и Болезни Легких 2013; 12 (90): 59–64. (На рус. Яз.).

    36. Титлова И.В., Бакиров А.А., Плешаков А.В., Гилязитдинов К.А., Шукаева О.М., Губайдуллина Л.З., Миндавлетова Н.Н., Измайлова Н.П. [Анализ чувствительности Диаскинтеста у детей и подростков группы риска].Туберкулез и Болезни Легких 2014; 8: 103–104. (На рус. Яз.).

    37. Шовкун Л.А., Кампос Е.Д., Романцева Н.Е., Сагакянц О.Г., Володько Н.А., Константинова А.В., Тахтамышев С.А. Сравнительный анализ эффективности теста Манту и Диаскинтеста у детей и подростков в Ростовской области. Туберкулез и Болезни Легких 2013; 6: 97.

    38. Кривошеева Ж.И., Гуревич Г.Л., Морозкина Н.С., Емельянова Н.А., Астровко А.П., Бобрукевич Е.Л. [Значение новой кожной пробы в ранней диагностике туберкулезной инфекции у детей].Туберкулез и Болезни Легких 2014; 8: 61–62. (На рус. Яз.).

    39. Поддубная Л.В., Шилова Е.П., Силайкина С.Т. Скрининг на туберкулез в современных условиях. Туберкулез и Болезни Легких 2013; 6: 71–72. (На рус. Яз.).

    40. Auld S.C., Click E.S. Heilig C.M., Miramontes R., Cain K.P., Bisson G.P., Mac Kenzie W.R. Связь между результатом кожной пробы на туберкулин и клинической картиной туберкулеза. BMC Infect Dis. 2013; 13: 460–462.

    41. Старшинова А.А., Довгалук И.Ф., Гаврилов П.В., Якунова О.А. [Новый подход в диагностике туберкулеза внутригрудных лимфатических узлов у детей иммунологическими и лучевыми методами]. Практическая медицина, 2012; 61: 32–36. (На рус. Яз.).

    42. Слогоцкая Л.В., Кочетков Я.А., Сенчихина О.Ю. [Применение Диаскинтеста в группах риска с контактным туберкулезом у подростков]. Туберкулез и Болезни Легких 2011; 5: 163..

    43. Слогоцкая Л.В. [Диаскинтест — новый метод выявления туберкулеза].Туберкулез и Болезни Легких 2011; 6: 17–22. (На рус. Яз.).

    44. Лозовская М.Е., Белушков В.В., Новик Г.А., Гурина О.П., Шибакова Н.Д. Совершенствование диагностики туберкулеза у детей по результатам новых иммунологических методов. Туберкулез и Болезни Легких 2012; 8: 34–39. (На рус. Яз.).

    45. Лозовская М.Е. [Результаты диаскинтеста у детей группы риска и детей с туберкулезом в сравнении с результатами пробы Манту]. Материалы IX съезда физиатров России.Туберкулез и Болезни Легких 2011; 5: 29–30. (На рус. Яз.).

    46. Богданова Ю.В., Киселевич О.К., Севостьянова Т.А., Юсубова А.Н., Батыров Ф.А. Применение Диаскинтеста для диагностики туберкулеза у детей раннего возраста. Туберкулез и Болезни Легких 2011; 4: 57.

    47. Касымцева О.В., Демихова О.В., Карпина Н.Л. Информационный контент «Диаскинтест для диагностики туберкулеза у детей». Туберкулез и Болезни Легких 2011; 4: 186..

    48. Ахмерова Т.Е. Иммунодиагностика различных проявлений туберкулезной инфекции у детей. Кандидат Med. Дисс. Москва, 2015.

    49. Бородулина Е.А., Лебедева Н.О., Поваляева Л.В., Цыганков И.Л., Бородулин Б.Е. [Туберкулиновые тесты для диагностики туберкулеза в сочетании с ВИЧ-инфекцией]. Казанский медицинский журнал 2012; 4 (93): 576–579. (На рус. Яз.).

    Заявка на патент США для кожных тестов на туберкулез у лиц с ослабленным иммунитетом Заявка на патент (заявка № 201

    479 от 23 мая 2019 г.) ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

    Настоящее изобретение относится к применению антигенов Mycobacterium tuberculosis для приготовления специальной тестовой композиции для кожи с улучшенными диагностическими характеристиками ТБ в M.tuberculosis и лица с коинфекцией ВИЧ. Настоящее изобретение обеспечивает композицию, содержащую антигенов Mycobacterium tuberculosis (Mtb), для диагностики инфекции Mtb in vivo у лиц с ослабленным иммунитетом или лиц, коинфицированных ВИЧ, где реагент включает смесь двух антигенов ESAT6 и CFP-10.

    ОБЩАЯ ИНФОРМАЦИЯ

    Обзор TB / PPD

    С момента открытия в 1908 году Робертом Кохом очищенное производное туберкулина белка (PPD) использовалось в качестве диагностического теста для латентной инфекции Mtb.

    Использование диагностического теста на латентную инфекцию Mtb в качестве руководства по профилактическому лечению оказывает драматическое влияние на более позднее развитие туберкулеза. Люди, инфицированные МТБ, не имеют симптомов и требуют более мягкого режима лечения, тогда как пациенты с активным туберкулезом имеют тяжелое заболевание, высокую смертность и требуют более длительного и сложного лечения. Считается, что ⅓ населения мира инфицировано Mtb, у 8 миллионов человек ежегодно развивается активный туберкулез, из которых 1,3 миллиона умирают.

    При применении в качестве диагностического теста малый объем 0.1 мл PPD вводят в верхний слой кожи, и через 2-3 дня можно определить положительную реакцию, измерив уплотнение кожи с помощью простой линейки. Иммунологический фон кожной реакции PPD представляет собой реакцию гиперчувствительности замедленного типа IV типа, реакцию, опосредованную в первую очередь PPD-специфическими Th2 Т-клетками.

    PPD при применении, как описано Менделем и Манту, одобрен Всемирной организацией здравоохранения с 1955 года, а туберкулиновый кожный тест (TST) на основе PPD остается одним из наиболее широко используемых диагностических тестов, каждый из которых выполняется более 50 миллионов тестов. год.PPD представляет собой комплексный фильтрат культуры из M. tuberculosis , содержащий более 1000 белковых антигенов в дополнение к липидам и углеводам. Это делает PPD широко узнаваемым среди людей, инфицированных Mtb, и он очень иммуногенен, вызывая сильный Th2-Т-клеточный ответ в коже. Однако сырой и сложный состав PPD также является причиной проблем с PPD TST. Важно отметить, что множественные антигены в PPD также распознаются регуляторными Т-клетками, ограниченными CD1 T-клетками и Th3-клетками, которые избирательно могут ингибировать возникновение реакции типа IV.Кроме того, множественные антигены в PPD также экспрессируются микобактериями окружающей среды и Bacillus Calmette-Guérin (BCG), используемым для вакцинации против туберкулеза, что делает тест PPD неспецифичным.

    ВИЧ и лица с ослабленным иммунитетом.

    Другой серьезной проблемой при использовании PPD TST является его ненадежность у лиц с ослабленным иммунитетом. В частности, у людей, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), PPD TST часто перестает отвечать и дает ложноотрицательный результат, или может оказаться ложноположительным из-за применения слишком низкого отсечения.

    Иммунологический фон влияния ВИЧ на способность PPD вызывать кожную реакцию типа IV сложен, однако установлено, что селективная потеря CD4 Т-клеток ВИЧ-инфекцией является основной причиной. Следовательно, иммунодефицит, вызванный потерей CD4 T-клеток, является как основным фактором, приводящим к заболеванию, вызванным условно-патогенными инфекционными вирусами и бактериями (отличительный признак ВИЧ / СПИДа), так и неспособностью реагировать на PPD TST.

    Последствия этой дилеммы могут быть смертельными.Часто ВИЧ-инфекция (или другой иммунодефицит) не диагностируется во время тестирования PPD TST. Поэтому ответственный врач часто ложно полагается на результат PPD TST. Это ложное чувство безопасности часто приводит к неправильному диагнозу и отсутствию адекватного лечения инфекции Mtb, что приводит к более позднему развитию активного туберкулеза. Фактически, пациенты, инфицированные Mtb с ВИЧ / СПИДом, имеют 10% -ный годовой риск развития туберкулеза, а туберкулез является заболеванием, от которого умирает большинство пациентов с ВИЧ / СПИДом.

    Решение проблемы перекрестной реактивности с БЦЖ

    Как упоминалось выше, перекрестная реактивность с БЦЖ и микобактериями окружающей среды является основным ограничением для ТКП PPD.Перекрестная реактивность ставит под угрозу специфичность и потенциально приводит к избыточному лечению из-за ложноположительных ответов. Проблема специфичности может быть решена в некоторой степени, но не полностью, путем увеличения порога отсечки для TST с 5 мм до 10 мм или даже 15 мм уплотнения, однако увеличение отсечки снижает чувствительность теста.

    Дальнейшая потеря чувствительности может оказаться фатальной, особенно для ВИЧ-инфицированных и других больших групп пациентов с самым высоким риском развития ТБ, если не будет предложено адекватное лечение инфекции Mtb.Таким образом, тестирование на ВИЧ перед тестированием PPD TST, например, в Для оптимального выполнения PPD TST потребуется вакцинация БЦЖ. Однако из-за ограниченных ресурсов и табу как среди медицинских работников, так и среди пациентов, тестирование на ВИЧ часто не предлагается или не принимается человеком, нуждающимся в тестировании PPD TST.

    Эпоха специфического тестирования

    Открытие специфических иммунодоминантных антигенов Mtb открыло новые важные возможности для диагностики инфекции Mtb. Ранняя работа показала возможность замены PPD TST тестом, в котором оценивалась продукция in vitro интерферона гамма (IFN-γ) Т-клетками в ответ на антигены Mtb.Примерно в то же время крупным достижением стало открытие высокоиммуногенных антигенов, рано секретируемой антигенной мишени 6 (ESAT-6) и протеина фильтрата культуры 10 (CFP-10), которые значительно улучшили специфичность. Эти антигены кодируются в области различия 1 (RD1) патогена и, следовательно, отсутствуют во всех вакцинных штаммах Bacille Calmette Guerin (BCG) и в большинстве нетуберкулезных микобактерий (исключения включают Mycobacterium kansasii , Mycobacterium marinum, Mycobacterium szulgai ). .

    Ответы IFN-γ на перекрывающиеся пептиды антигенов, кодируемых RD1 ESAT-6 и CFP-10 формируют основу для обнаружения инфекции Mtb в двух коммерчески доступных анализах высвобождения IFN-γ (IGRA): QuantiFERON-TB Gold (QIAGEN , Германия) и T-SPOT.TB (Oxford Immunotec, Оксфорд, Великобритания).

    QuantiFERON-TB Gold (QFT, QIAGEN, Германия), иммуноферментный иммуноферментный анализ цельной крови (ELISA), имеет европейский сертификат CE и одобрен Американским Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) для выявления как латентной инфекции, так и заболевания туберкулезом.

    T-SPOT.TB (Oxford Immunotec, Оксфорд, Великобритания), иммуноферментный анализ (ELISPOT), в котором используются мононуклеарные клетки периферической крови, одобрен европейским знаком CE и одобрен FDA.

    Ограничения IGRA

    Однако, несмотря на очевидные превосходные характеристики IGRA по сравнению с TST, IGRA имеет несколько ограничений:

    Для проведения тестов IGRA на основе образцов крови требуется взятие крови, сложное лабораторное оборудование и обученный персонал для их выполнения. Эти ограничения делают тест практически невозможным для реализации в настройках ограничения ресурсов, где такие тесты наиболее востребованы.Тесты IGRA также могут вызывать проблемы на преаналитическом этапе, например: ложноотрицательные ответы из-за отложенного начала этапа инкубации.

    По сравнению с PPD TST, диагностическая эффективность тестов IGRA также требует, чтобы человек, подвергаемый тестированию, имел надежный иммунный ответ. Так же, как и для PPD TST, чувствительность IGRA может быть снижена у лиц с ослабленным иммунитетом. В частности, пациенты с ВИЧ-инфекцией и низким числом Т-лимфоцитов CD4 или пациенты, получающие иммунодепрессанты, часто испытывают ложноотрицательные или неопределенные ответы.

    Вероятная основная причина плохой работы тестов IGRA при иммуносупрессии — их уверенность в обнаружении очень слабого сигнала IFN-γ, который считается положительным (17,5 пг / мл или 6 реактивных Т-клеток на 200 000 PBMC). Такие низкие ответы граничат с уровнями обнаружения наиболее чувствительных анализов, используемых в клинической медицине.

    Таким образом, кожная проба, при которой иммунная реакция может быть вызвана потенциально любыми конкретными Т-клетками, доступными в организме, кажется сама по себе гораздо более надежной по сравнению с диагностическим тестом in vitro, в котором доступное количество Т-клеток ограничено небольшое количество клеток, включенных в образец.

    В мета-анализе Cattamanchi et al. (JAIDS 2011, 56 (3) 230-238) было показано, что для ВИЧ-инфицированных лиц с активным туберкулезом (суррогатный эталонный стандарт для ЛТИ) объединенные оценки чувствительности были неоднородными, но выше для T- Анализ SPOT.TB (72%; 95% ДИ, 62–81%) по сравнению с анализом QFT (61%; 95% ДИ, 47–75%) в странах с низким и средним уровнем доходов. Однако ни один из тестов IGRA не был стабильно более чувствительным, чем PPD TST при прямых сравнениях. Авторы пришли к выводу, что на IGRA может в меньшей степени влиять степень иммуносупрессии, вызванной ВИЧ, по сравнению с PPD TST, но результаты различались в зависимости от географических регионов.

    Потенциально опасные для жизни последствия ложноотрицательных результатов PPD TST и IGRA были описаны Сестером и др. (Am J Respir Crit Care Med. 2014 Nov 15; 190 (10): 1168-76. Doi: 10.1164 / rccm.201405- 09670С.). В этом большом проспективном исследовании с участием 768 пациентов с ВИЧ-инфекцией у восьми пациентов с ВИЧ-инфекцией развился активный туберкулез во время последующего наблюдения. Пять из 8 пациентов с определенным результатом теста IGRA имели ложноотрицательный результат теста IGRA во время скрининга, и им не было предложено профилактическое лечение.Еще 3 ВИЧ-инфицированных, у которых развился туберкулез, имели неопределенный результат теста IGRA. PPD TST была проведена всем 11 больным туберкулезом. В этой группе только 4 из 11 протестированных были положительными с использованием оптимизированного для ВИЧ отрезка 5 мм.

    Диаскинтест представляет собой рекомбинантный гибридный белок CFP10 -ESAT6, продуцируемый в E. coli BL21 (DE3) / pCF-ESAT. Этот белок представлен в виде белка с 6-кратной гистидиновой меткой и производится Generium в Российской Федерации. Доза составляет 0,2 мкг / 0,1 мл. Индурация любого размера считается признаком инфекции Mtb.Гистидиновая метка создает риск неоэпитопов. Сообщается, что диаскинтест работает с приемлемой специфичностью, но с высокой частотой (4–14%) везикулярно-некротическими изменениями, лимфангитом и лимфаденитом (Киселев В.И.; Пробл. Туберкулез. Болезн. Легк. 2009; 2: 11-6). Повторные инъекции высоких доз антигена могут создавать риск сенсибилизации, что может привести к ложноположительным реакциям, что еще больше увеличивает риск побочных реакций. Диаскинтест — единственный препарат, находящийся в клиническом применении. В нескольких исследованиях изучалась эффективность диаскинтеста у ВИЧ-инфицированных и было обнаружено очень сильное негативное влияние ВИЧ-инфекции на эффективность диаскинтеста.Панкратова обнаружила чувствительность 42,9% у ВИЧ-положительных субъектов по сравнению с 79,7% у лиц без ВИЧ-инфекции (Панкратова Л. и др., European Respiratory Journal 2012, том 40, Дополнение 56 / P431), аналогичные важные результаты были получены Литвиновым; 43,5% среди ВИЧ-инфицированных по сравнению с 89,7% среди ВИЧ-отрицательных случаев (Литвинов и др., Am J Respir Crit Care Med 185; 2012: A4703).

    Таким образом, PPD TST является привлекательным и простым тестом на латентную инфекцию Mtb, однако компонент антигена PPD неспецифичен, и результаты теста PPD TST у ВИЧ-инфицированных часто являются ложноотрицательными.Тест IGRA основан на специфических антигенах Mtb ESAT-6 и CFP10 и решает проблемы специфичности теста PPD TST, однако эти тесты сложны в реализации и выполнении, а также часто дают ложноотрицательные результаты у ВИЧ-инфицированных. Диаскинтест обеспечивает кожную пробу со специфичностью, подобной IGRA, однако эффективность Диаскинтеста у ВИЧ-инфицированных сильно снижается, при этом чувствительность снижается вдвое у ВИЧ-инфицированных по сравнению с ВИЧ-неинфицированными. Следовательно, существует потребность в новом диагностическом кожном тесте на инфекцию Mtb с более высокой специфичностью, чем PPD TST, и повышенной чувствительностью у ВИЧ-инфицированных.

    КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

    В изобретении раскрывается способ диагностики in vivo (кожные тесты) и диагностические агенты для диагностики Mtb у лиц с ослабленным иммунитетом или лиц, коинфицированных ВИЧ, лиц, которые в противном случае не были бы признаны инфицированными M. tuberculosis из-за отсутствия чувствительности существующих тестов.

    Эффект достигается при использовании коктейля M. tuberculosis антигенов ESAT6 и CFP10 для приготовления агента для кожных тестов, состоящего из коктейля, содержащего эти антигены.В предпочтительном воплощении используется смесь антигенов rdESAT-6 и rCFP-10. Комбинация антигенов C-Tb очень эффективна при ВИЧ-инфицированных, демонстрируя общее снижение чувствительности только на 33% по сравнению с 45% для квантиферона. В отличие от других методов тестирования, C-Tb, по-видимому, влияет только на ВИЧ-инфекцию в наиболее тяжелых случаях с количеством CD4 + Т-клеток <100 CD4 + Т-клеток / мкл.

    ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

    Настоящее изобретение раскрывает композицию, содержащую антигенов Mycobacterium tuberculosis , для использования при определении in vivo наличия инфекции Mtb у лиц с ослабленным иммунитетом или лиц, коинфицированных ВИЧ, при этом агент представляет собой смесь двух антигенов ESAT6 и CFP-10.

    Настоящее изобретение раскрывает использование антигенов Mycobacterium tuberculosis для приготовления диагностического средства для кожных проб (средство для кожных проб) для надежной оценки наличия инфекции Mtb у индивидуума, у которого индивидуум является человеком с ослабленным иммунитетом или человеком. коинфекция ВИЧ.

    Настоящее изобретение также раскрывает способ диагностики инфекции Mtb у лиц с ослабленным иммунитетом или у лиц, коинфицированных ВИЧ. Метод диагностики основан на измерении степени реакции кожи, возникающей в ответ на стимуляцию определенных иммунных клеток путем инъекции небольшого объема специфических антигенов Mtb.

    Два антигена предпочтительно клонировать, продуцировать и очищать из подходящего организма, например из Lactococcus lactis , rESAT6 и rCFP10, и наиболее предпочтительно двойной ESAT-6 (rdESAT-6; две молекулы ESAT-6, слитые вместе). rdESAT-6 и rCFP10 предпочтительно смешиваются в соотношении 1: 1 (мас. / мас.). Композиция включает два антигена, смешанные в носителе, где наиболее предпочтительный носитель включает фосфатно-солевой буферный раствор (PBS) с 0,01% полисорбата 20 и 0,5% фенола.

    Определения

    Термин «туберкулез» относится к клиническому состоянию туберкулезное заболевание, вызываемое различными штаммами микобактерий, обычно Mycobacterium tuberculosis.

    Термин «латентная инфекция M. tuberculosis » относится к субклинической или латентной инфекции M. tuberculosis , которая определяется наличием иммунного ответа на M. tuberculosis без признаков или симптомов активного заболевания. .

    Термин «ESAT-6» в настоящем изобретении относится к ранней секреторной антигенной мишени 6 кДа, продуцируемой Mycobacterium tuberculosis (esxA), представляет собой секреторный белок и мощный Т-клеточный антиген, метка локуса Rv3875

    Термины « CFP10 »в настоящем изобретении относится к секретируемому антигену 10 кДа из Mycobacterium tuberculosis , также известному как ESAT-6-подобный белок esxB или секретируемый антигенный белок MTSA-10 или антиген фильтрата культуры 10 кДа, Rv3874.

    Термины «коктейль» и «коктейль антигенов» в настоящем изобретении относятся по меньшей мере к двум белкам вместе в носителе или растворе.

    Термин «иммунодефицит», или «иммуносупрессия», или «иммунодефицит» относится к состоянию, при котором способность иммунной системы бороться с инфекционным заболеванием или вызывать иммунный ответ нарушена или полностью отсутствует.

    Термин «C-Tb» относится к приготовлению композиции rdESAT-6 и rCFP-10.

    Термин «ВИЧ» относится к лентивирусу Вируса иммунодефицита человека, который вызывает ВИЧ-инфекцию и со временем может привести к синдрому приобретенного иммунодефицита (СПИД).

    Под термином «гибридный белок» понимается случайный порядок двух или более иммуногенных полипептиды из M.tuberculosis или его аналоги, слитые вместе с аминокислотным линкером / спейсером (ами) произвольной длины и последовательности или без них. Чтобы избежать агрегации белка при последующем производстве, все цистеины в слитом белке можно заменить любой аминокислотой, но серин является предпочтительной заменой из-за его высокого структурного сходства с цистеином.

    Неожиданно улучшенная диагностическая чувствительность у ВИЧ-инфицированных, вероятно, достигается за счет совокупности механизмов. Реагент для кожной пробы C-Tb состоит из смеси антигенов по сравнению с e.грамм. Диаскинтест, представляющий собой гибридную конструкцию, включающую два белка, соединенных линкером. Дизайн коктейля C-Tb предлагает несколько потенциальных преимуществ, включая лучшую экспозицию эпитопов без вмешательства со стороны линкерных белков. Кроме того, формат кожных тестов имеет преимущества перед форматом IGRA. Продолжительный инкубационный период позволяет набирать ту же популяцию эффекторных Т-клеток, как отслеживается в IGRA, но, кроме того, также рекрутировать популяцию менее дифференцированных клеток.Более широкое привлечение Т-клеток в сочетании с форматом коктейля для кожных тестов, вероятно, позволило достичь более высокой чувствительности.

    Диагностический агент для кожной пробы включает два антигена ESAT6 и CFP10. В предпочтительном варианте осуществления реагент для кожной пробы состоит из смеси рекомбинантных версий двух антигенов. В наиболее предпочтительном варианте осуществления два антигена представляют собой двойной ESAT-6 (rdESAT-6; две молекулы ESAT-6, слитые вместе) и rCFP-10. Два антигена клонируют, ферментируют и очищают в подходящем организме e.грамм. из Lactococcus lactis или E. coli . Антигены смешивают в носителе или фармацевтически приемлемом носителе. В наиболее предпочтительном варианте осуществления rdESAT-6 и CFP10 смешивают в соотношении 1: 1 (мас. / Мас.) В носителе фосфатно-солевого буфера (PBS) с 0,01% Polysorbate 20® (и 0,5% фенола). Количество дозы антигена находится в диапазоне 0,25–2,0 мкг / мл каждого антигена. Предпочтительное количество составляет 0,1 мкг / 0,1 мл, что соответствует общей концентрации 1 мкг антигенов / мл, соответствующей 0.По 5 мкг / мл каждого. Этот специфический препарат rdESAT-6 и rCFP-10 называется C-Tb. Реагент не ограничивается только этими антигенами, но может дополнительно включать другие антигены, такие как Rv3615.

    Проведение кожной пробы

    Кожная проба проводится путем внутрикожной инъекции небольшого объема C-Tb, например 0,1 мл во внутреннюю поверхность предплечья.

    Инъекцию следует производить туберкулиновым шприцем кончиком иглы вверх. Однако можно использовать и другие способы внутрикожной инъекции.При правильном размещении инъекция C-Tb должна вызвать бледное возвышение кожи (волдырь) от 6 до 10 мм в диаметре.

    Реакция кожной пробы должна быть прочитана между 48 и 72 часами после введения. Пациенту, который не вернется в течение 72 часов, необходимо будет перенести еще один кожный тест.

    Степень кожной реакции можно определить, измерив уплотнение в миллиметрах (диаметр пальпируемого, приподнятого, уплотненного участка или припухлости). Диаметр уплотненной области следует измерять поперек предплечья (перпендикулярно длинной оси предплечья).

    Уплотнение в 5 миллиметров или более, используемое в примере материала, является предпочтительным отрезком, несмотря на то, что можно использовать другие отрезки, включая 10, 4, 3, 2, 1 или даже любую реакцию, превышающую 0 миллиметров. .

    Концепция C-Tb заключается в объединении хорошо известной техники Манту с использованием специфических антигенов из IGRA в специфический кожный тест с использованием единого универсального порогового значения индурации 5 мм независимо от вакцинации БЦЖ и статуса ВИЧ, считываемого через 2- 3 дня для выявления людей, инфицированных Mtb, доставленных и переведенных медицинским персоналом или медперсоналом на месте.

    Диагноз

    Кожные пробы с определенным реагентом особенно полезны для людей с иммунодепрессией. ВИЧ представляет собой ключевую группу риска, в которой инфекция Mtb может быстро перейти в активную форму заболевания. У ВИЧ-инфицированных людей нарушена функция Т-лимфоцитов CD4, поэтому кожные тесты с реагентом нацелены на Т-лимфоциты Th2, а не на Т-лимфоциты или регуляторные Т-клетки.

    Целевая группа по C-Tb включает лиц, подвергшихся воздействию Mtb, или лиц, проявляющих признаки или симптомы ТБ, с особым вниманием к группам с повышенным риском развития ТБ после заражения.Эти группы включают, но не ограничиваются ими, недавно инфицированные, выявленные при отслеживании контактов, детей младше 5 лет и ВИЧ-инфицированных.

    Настоящее изобретение обеспечивает реагент для кожной пробы для надежной оценки наличия инфекции Mtb у лиц, коинфицированных ВИЧ. Как ясно продемонстрировано в приведенных примерах, пример специфической кожной пробы (C-Tb) имеет лучшие характеристики по сравнению с PPD TST и IGRA.

    rdESAT-6 и CFP10 смешиваются в транспортном средстве в соотношении (мас. / Мас.), Хотя в предпочтительном варианте осуществления соотношение составляет 1: 1, другие соотношения мас. / Мас., Включая 1: 5, 1: 4, 1: 3, 1: 2; Можно ожидать, что 2: 1, 3: 1, 4: 1, 5: 1 и другие соотношения, охватывающие 1:20 и 20: 1, будут полезными.

    Количество дозы антигена находится в диапазоне 0,25-20,0 мкг / мл каждого антигена. Предпочтительное количество составляет 0,1 мкг / 0,1 мл, что соответствует общей концентрации 1 мкг антигенов / мл, соответствующей 0,5 мкг / мл каждого. Ожидается, что большее количество антигена будет вызывать более сильные реакции уплотнения кожи, но увеличивает риск неблагоприятных или излишне сильных реакций. В зависимости от клинических условий, генетического или этнического состава, степени иммуносупрессии или других характеристик тестируемой популяции доза антигена может быть выбрана в диапазоне от 0.25-20,0 0,25-20,0 мкг / мл каждого антигена.

    Хотя настоящее изобретение описывает специфический препарат rdESAT-6 и rCFP-10, агент не ограничивается только этими антигенами, но может дополнительно включать другие антигены, такие как espC (Rv3615) или другие специфические антигены, экспрессируемые M. tuberculosis. . Несколько антигенов, о которых известно, что они специфически экспрессируются инфекционными организмами в комплексе M. tuberculosis , могут быть подходящими добавками или заменами ESAT-6 и CFP10 в C-Tb.Эти антигены включают ограниченные по RD1 антигены, ассоциированные с RD1 антигены и антигены с иммунодиагностическим потенциалом, такие как Rv2564, Rv3865, Rv3877, Rv2348, Rv3614, Rv3616 и другие, известные специалистам.

    Предпочтительный вариант теста C-Tb предполагает внутрикожную инъекцию. Следует понимать, что инъекции с помощью шприца и иглы — это лишь один из нескольких способов введения. Альтернативные методы включают в себя ружье Heaf (Sterneedle) и различные другие методы, такие как, помимо прочего, струйное впрыскивание, доставка снаряда с использованием порошка и частиц золота (т.д., генная пушка), твердые пластыри с микроиглами (металлические или растворяющиеся микроиглы), местное добавление C-Tb после предварительной обработки микроиглами, тату-пистолеты или технологии, разработанные для увеличения проницаемости кожи в сочетании с пластырем для доставки, например абразия кожи, ультразвук, электропорация, лазерная обработка, химические усилители и термическая абляция.

    РИСУНОК ЛЕГЕНДЫ

    РИС. 1. Уровень положительности C-Tb (черный; граница 5 мм) и QFT (белый; граница 0,35 МЕ / мл) среди 534 ВИЧ-отрицательных и 277 ВИЧ-положительных подозреваемых на ТБ.Полоса ошибок указывает 95% доверительный интервал.

    РИС. 2. Уровень положительности C-Tb (черный) и QFT (белый) стратифицирован в соответствии с количеством CD4 среди 292 подозреваемых на ТБ. Полоса ошибок указывает 95% доверительный интервал.

    ПРИМЕРЫ

    Диагностический агент C-Tb был получен путем клонирования, ферментации и очистки рекомбинантных версий двух антигенов rdESAT-6 и rCFP-10 из Lactococcus lactis . Антигены смешивали в эквимолярных количествах ESAT-6 и CFP-10, соответствующих весовому соотношению 1: 1 rdESAT-6 и rCFP-10 в носителе фосфатно-солевого буфера (PBS) с 0.01% Polysorbate 20® (и 0,5% фенола)

    Диагностическая эффективность C-Tb, PPD и IGRA под названием QuantiFERON®-TB Gold In Tube (QFT) сравнивалась в исследовании III фазы с участием младенцев и детей младше 5 лет. лет с подозрением на инфекцию Mtb, а также у детей старшего возраста и взрослых с подозрением на туберкулез. В исследование 1190 человек вошли 299 ВИЧ-положительных и 730 ВИЧ-отрицательных. Кровь для QFT-тестирования была собрана до кожной пробы. C-Tb и PPD вводили двойным слепым методом в отдельные руки в рандомизированном дизайне с разделенными корпусами.Были включены результаты добровольцев с доступными парными результатами.

    Как видно из фиг. 1, C-Tb и QFT показали одинаковый уровень положительности среди ВИЧ-отрицательных пациентов, 292/534 (54,7%) были положительными с C-Tb и 285/534 (53,4%) были положительными с QFT. В общей сложности 277 ВИЧ-инфицированных были протестированы с помощью обоих тестов. Неожиданно C-Tb выявил значительно больше инфицированных Mtb, чем тест QFT, 102/277 (36,8%) дали положительный результат на C-Tb и только 80/277 (28,9%) дали положительный результат на QFT (таблица 1, McNemar; P = 0 .009).

    ТАБЛИЦА 1 QFT HIV pos + −SC-Tb + 59 43102−21154175S80197277P = 0,009

    При расслоении результатов покоя по количеству Т-лимфоцитов CD4 (фиг.2) становится очевидным, что более высокая чувствительность от C-Tb происходит из-за значительного повышения устойчивости не только к слоям Т-лимфоцитов с низким содержанием CD4, но и по всему спектру количества Т-лимфоцитов CD4.

    Artigos | CSP — Cadernos de Saúde Pública

    Введение

    Туберкулез (ТБ) остается первой причиной смерти от инфекционных заболеваний во всем мире 1 .Профилактическая терапия туберкулеза (TPT) очень эффективна у лиц с латентной туберкулезной инфекцией (LTBI) 2 , являясь краеугольным камнем для ликвидации туберкулеза к 2050 году 3 , 4 . Однако из-за множества препятствий на разных этапах каскада оказания помощи при ЛТИ, менее 30% лиц, имеющих право на ТПТ, получают рецепт и менее 19% завершают курс лечения 5 . Таким образом, влияние TPT на общественное здоровье остается минимальным 1 , несмотря на включение новых, более коротких и безопасных схем TPT в руководство Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) 2 .

    Риск прогрессирования ЛТИ в активное заболевание выше у пациентов с положительным результатом теста на ЛТИ, будь то туберкулиновая кожная проба (TST) или анализ высвобождения гамма-интерферона (IGRA). 6 . Неудивительно, что TPT оказалась более полезной для людей с положительным результатом теста на ЛТБИ 7 , 8 , 9 . Таким образом, TST (или IGRA, если таковой имеется) является обязательным тестом в каскаде оказания помощи при ЛТИ, за исключением пациентов, живущих с ВИЧ (ЛЖВ), или пациентов моложе пяти лет, которые имеют более высокий риск перехода в активную форму болезни 2 .Однако из 30 миллионов ВИЧ-отрицательных лиц в возрасте пяти лет и старше, которые должны получить TPT к 2022 году 4 , 20 миллионам потребуется положительный тест на ЛТИ. TST прост в выполнении, обходится без лабораторной инфраструктуры и имеет хорошую точность 10 . Новые и более специфические TST с использованием рекомбинантного туберкулина на основе белков ESAT-6 и CP-10 уже приняты в некоторых странах БРИКС 11 , 12 , 13 .

    Несмотря на то, что тест является простым, воспроизводимость показаний уплотнения низкая 14 , 15 , 16 , 17 .Таким образом, в некоторых системах здравоохранения требуется сертификация медицинских работников для чтения TST, но особые требования к сертификации сильно различаются 15 . В то время как для сертификации в Джорджии, США требуются десять приложений и показаний TST под наблюдением сертифицированного специалиста (https://dph.georgia.gov/sites/dph.georgia.gov/files/TB-TSTCertclass.pdf, доступно 11 сентября 2020 г.) Бразилия установила от 80 до 100 показаний при 80% согласовании с тренером в качестве требования 18 .Хотя протоколы обучения медицинских работников применению и чтению TST также сильно различаются, качество контроля качества выполнения TST на основе удаленного метода мобильного здоровья (mTST) считается точным, особенно для показаний менее 5 мм и более 14 мм 19 . Основываясь на этом опыте 19 , мы предположили, что протокола обучения, основанного на моделировании солевых пузырьков, будет достаточно для сертификации медицинских работников, и проверили эту гипотезу.

    Методы

    С октября 2019 г. по январь 2020 г. мы провели оперативное исследование в отделении первичной медико-санитарной помощи в фавеле в Рио-де-Жанейро, Бразилия, с высокой заболеваемостью туберкулезом. шаг.Любой медицинский работник или студент-медик имел право добровольно участвовать в обучении. Мы включили всех людей, которые были доступны и согласились участвовать, подписав форму информированного согласия, и исключили тех, кто ранее прошел обучение. Основываясь на расхождениях в чтении, указанных в протоколах 15 1960-х годов, мы составили выборку из 40 стажеров.

    Стажеры посетили 2-часовой семинар о важности TPT и рекомендациях по выявлению контактов, применению, чтению и интерпретации TST (адаптировано из Дика Мензиса и Линетт МакЭлрой; дополнительные материалы, http: // cadernos.Ensp.fiocruz.br/static//arquivo/suppl1-e00027321_5854.pdf) и просмотрел 7-минутное демонстрационное видео от Министерства здравоохранения Бразилии (доступно на https://www.youtube.com/watch?v=fRbg7vsa44o&t = 4 с). После этого теоретического введения стажеры приняли участие в тренинге по чтению, где временные пузырьки были приготовлены путем инъекции 0,1 мл физиологического раствора в сосиски (имитация внутрикожной техники; дополнительный рисунок S1, http://cadernos.ensp.fiocruz.br/static/ / arquivo / suppl2-e00027321_9122.pdf). Наконец, чтобы смоделировать технику Манту, мы внутрикожно вводили 0,1 мл физиологического раствора стажерам добровольным медицинским работникам, которые подписали отдельную форму информированного согласия. Все пузырьки должны иметь диаметр не менее 6 мм и длиться от 10 до 15 минут, как и пузырек туберкулина 20 . Показания колбасы и ручных пузырьков были индивидуальными, каждый студент не знал других показаний. Все этапы обучения проводил опытный врач с ЛТБИ (AT) без сертификата TST или опыта чтения TST, который прошел обучение с сосисками и добровольными солевыми пузырьками в предыдущем году в качестве подготовки к двум исследовательским проектам 19 , 21 .Практический курс длился менее двух часов, в зависимости от количества слушателей. Схема тренировочного процесса представлена ​​на дополнительном рисунке S2 (http://cadernos.ensp.fiocruz.br/static//arquivo/suppl2-e00027321_9122.pdf).

    Чтобы оценить эффективность этого обучения, стажеры прошли этап оценки, прочитав уплотнения TST во время службы, которые были сравнены с эталонным стандартом «истинных» показаний уплотнения инструктором, сертифицированным Министерством здравоохранения Бразилии (соответствие 90% в 80 -100 чтений с сертифицированным тренером).И обучаемые, и инструктор не видели показания друг друга, и все измерения (моделирование физиологического раствора и уплотнение туберкулина) выполнялись с помощью линейки штангенциркуля (дополнительный рисунок S3, http://cadernos.ensp.fiocruz.br/static//arquivo/suppl2 -e00027321_9122.pdf).

    Соглашение между наблюдателями было установлено на разницу между показаниями до 2 мм и проанализировано с использованием теста Бланда-Альтмана 22 . Чувствительность и специфичность чтения обучаемого, а также их 95% доверительные интервалы были рассчитаны с использованием 5 мм и 10 мм в качестве пороговых значений (показатели, используемые в Бразилии, в зависимости от риска перехода в активный туберкулез и времени после вакцинации БЦЖ) 23 .Чтобы убедиться, что количество измерений или тип введенного продукта (физиологический раствор или туберкулин) оказали какое-либо существенное влияние на согласие, мы разработали линейную смешанную модель с двумя иерархическими уровнями (на пациента и на одного читателя), включая все показания (пузырьки). и уплотнения), имея в качестве зависимой переменной абсолютную разницу между результатами обучаемого и инструктора в миллиметрах и в качестве независимых переменных: показания инструктора, количество измерений и тип вводимого продукта (физиологический раствор или туберкулин).Модель считалась устойчивой, если средние остатки были близки к нулю. Все анализы проводились в Stata (https://www.stata.com).

    Исследование было одобрено Комитетом по этическим исследованиям Школы медсестер Анны Нери / Сан-Франциско-де-Ассис Институт здравоохранения Федерального университета Рио-де-Жанейро (№ 3.256.347 от 10 апреля 2019 г.) и Министерством здравоохранения Рио-де-Жанейро. Секретариат (№ 3.470.316 от 25 июля 2019 г.). Все пациенты и медицинские работники подписали форму информированного согласия перед участием в исследовании.

    Результаты

    Из 64 медицинских работников, отвечающих критериям, 15 прошли обучение на трех различных курсах. Каждый стажер прочитал в среднем 6,8 (± 2,2) пузырьков в сосисках и 3,5 (± 1,3) пузырьков у добровольцев. Из 15 участников 11 были оценены в процессе эксплуатации и получили в среднем 14,7 (± 5,4) показаний TST каждый. В их число входили один фармацевт, два врача, две дипломированных медсестры, два помощника медсестры и четыре представителя здравоохранения по месту жительства, прошедшие подготовку помощников медсестер.В целом, они выполнили 141 измерение — 53 пузыря и 88 уплотнений — до того, как проект был прерван из-за пандемии SARS-CoV-2.

    Тест Бланда-Альтмана обнаружил высокое согласие для 88 показаний уплотнения, выполненных в 20 группах, со средним смещением 0,07 мм и 94,3% графиков в диапазоне 2s. Рис. 1. Чувствительность показаний обучаемых составила 100% ( 94,6%; 100,0%) при отсечении 5 мм и 87,3% (75,5%; 94,7%) при отсечении 10 мм, в то время как специфичность составляла 95,5% (77,2%; 99,9%) и 90.9% (75,7%; 98,1%) соответственно. Дополнительная таблица S1 (http://cadernos.ensp.fiocruz.br/static//arquivo/suppl2-e00027321_9122.pdf) представляет соглашение между наблюдателями по диапазону чтения инструктора.

    Рисунок 1 Соглашение Бланда-Альтмана о чтении туберкулиновых кожных проб между стажерами и тренером (N = 88, с использованием туберкулина).

    Что касается коэффициентов модели смешанной регрессии в таблице 1, количество считываний не оказало значительного влияния на согласие.Его коэффициент составлял -0,0007, что означает, что потребуется 131 показание (по оценкам 1 / 0,0007), чтобы получить разницу в 1 мм между показаниями обучаемых и инструкторов. Туберкулин привел к увеличению разницы на 0,9 мм (по оценкам на 1 / 1,065), чем физиологический раствор. Наконец, чем больше показания инструктора, тем больше разница с показаниями обучаемого (результат соответствует более низкой чувствительности для 10-миллиметровой отсечки). Поскольку средние остатки модели были близки к нулю, она считалась надежной.

    Таблица 1 Независимые переменные, связанные с соглашением о чтении туберкулиновой кожной пробы между стажерами и сертифицированным тренером.

    Обсуждение

    Простой протокол обучения чтению TST с симуляцией физиологического раствора в среднем для 3,5 добровольцев, представленный здесь, был достаточен для получения высокого согласия по показаниям уплотнения TST и очень высокой чувствительности для классификации пациентов на положительные или отрицательные результаты в соответствии с двумя различными разрезами. точки выключения (5 мм и 10 мм).Количество чтений не повлияло на соглашение. В целом, эти результаты показывают, что обучение с использованием очень небольшого количества солевых пузырьков может быть эффективным для сертификации медицинских работников для чтения TST во время службы. Этот предлагаемый протокол упрощает логистику обучения, является более приемлемым с этической точки зрения и избавляет от необходимости в высококвалифицированных тренерах.

    Еще одним из его преимуществ было обучение применению TST, поскольку неправильное применение метода было указано как потенциальная причина ложноотрицательных результатов TST 20 .Усовершенствованием этого протокола было бы добавление шага для оценки приложения и проверки того, может ли тренер считывать размер пузыря в течение 10-15 минут, обычная продолжительность 20 .

    В литературе также сообщается о высокой вариабельности показаний TST внутри и между наблюдателями 24 , 25 , 26 , с большими различиями в показаниях, особенно когда они приближаются к точкам отсечения положительности 16 . Так как разница в 2 мм, например, составляет 50% для результата 4 мм и только 20% для результата 10 мм, при больших показаниях ожидается больше ошибок.При использовании туберкулина можно также ожидать более высоких показаний, поскольку линейка штангенциркуля сжимает пузырек, чего не наблюдается при уплотнении. Однако хорошо проведенное исследование, сравнивающее показания внутри и между наблюдателями с использованием пары штангенциркулей и прозрачной линейки, показало, что на вариабельность между показаниями уплотнения TST не влияет изменение прибора для считывания 27 .

    TST — это наиболее широко доступный тест на ЛТБИ, и, несмотря на его ограничения, тест имеет хорошую точность, не требует лабораторного оборудования, прост для выполнения и интерпретации 19 ; любой медицинский работник, имеющий опыт применения внутрикожных вакцин, таких как БЦЖ, может ввести туберкулин.Чтение TST, однако, было предметом сложных протоколов, для которых требовался сертифицированный инструктор и наличие нескольких добровольных инструментов, что ограничивало его широкую доступность в системах общественного здравоохранения. Наши выводы имеют соответствующие прагматические последствия. Наш протокол также более безопасен и более приемлем с этической точки зрения. Инъекция туберкулина, хотя обычно хорошо переносится, может вызывать местные побочные реакции, такие как зуд, боль, образование пузырей, некротическая реакция и недомогание блуждающего нерва 28 . Инъекция физиологического раствора безопасна, несмотря на легкий временный местный дискомфорт, обычно жжение.Альтернативный метод избежать тренировок на руках человека — использовать модели искусственных рук, но оценка эффективности такого метода выходила за рамки настоящего исследования.

    У нашего исследования есть несколько ограничений. Во-первых, трудно сделать обобщение на небольшой выборке одного медицинского учреждения. Во-вторых, такой небольшой размер выборки не позволяет проводить стратифицированный анализ по профессиональному образованию, как это делалось в других исследованиях, с возможностью фельдшеров 29 , фармацевтов и других медицинских работников 30 , 31 читать TST.Тем не менее, общая успеваемость наших участников была очень хорошей, что позволяет предположить, что умение читать TST не зависит от профессионального опыта. Наконец, мы не оценивали различные техники чтения 32 .

    Наше исследование также имеет сильные стороны, такие как оценка без отрыва от производства, проводимая сертифицированным инструктором, и как стажеры, так и инструкторы не имеют доступа к показаниям. Кроме того, различные анализы подтверждают надежность результатов.

    Таким образом, простой и реалистичный протокол обучения, успешно оцененный в этом исследовании, может полностью изменить сценарий недоступности сертифицированного персонала в каскаде оказания помощи при ЛТИ, ситуацию, созданную сложными сертификатами 33 .По мере разработки новых и более конкретных TST 11 , 12 , 13 , чтение TST останется необходимостью.

    Благодарности

    Мы хотели бы поблагодарить участников и медицинских менеджеров клиники, доктора Дика Мензиса (Университет Макгилла, Монреаль, Канада) и Линетт МакЭлрой (консультант по обучению и ресурсам по туберкулезу, Виктория, Канада) за обучение двух авторов и предоставление тренировочный материал. В. получил грант Бразильского национального исследовательского совета (CNPq), а М.ФУНТ. Канадскими институтами исследований в области здравоохранения (CIHR). Источники финансирования не несут ответственности за проведенное исследование или заявления, раскрытые в этой рукописи.

    Список литературы

    1. Всемирная организация здравоохранения. Глобальный отчет о туберкулезе 2019. http://www.who.int/tb/publications/global_report/en/ (по состоянию на 15 января 2020 г.).
    2. Всемирная организация здравоохранения.Сводное руководство ВОЗ по туберкулезу. Модуль 1: профилактика. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 2020.
    3. Dye C, Glaziou P, Floyd K, Raviglione M. Перспективы ликвидации туберкулеза. Annu Rev Public Health 2013; 34: 271-86.
    4. Организация Объединенных Наций. Политическая декларация заседания высокого уровня Генеральной Ассамблеи ООН. https://www.who.int/tb/unhlmonTBDeclaration.pdf (доступ 17 января 2020 г.).
    5. Alsdurf H, Hill PC, Matteelli A, Getahun H, Menzies D. Каскад помощи при диагностике и лечении латентной туберкулезной инфекции: систематический обзор и метаанализ. Lancet Infect Dis 2016; 16: 1269-78.
    6. Кэмпбелл Дж. Р., Винтерс Н., Мензис Д. Абсолютный риск туберкулеза среди нелеченых групп населения с положительным туберкулиновым кожным тестом или результатом анализа высвобождения гамма-интерферона: систематический обзор и метаанализ.BMJ 2020; 368: m549.
    7. Akolo C, Adetifa I, Shepperd S, Volmink J. Лечение латентной туберкулезной инфекции у ВИЧ-инфицированных. Кокрановская база данных Syst Rev 2010; (1): CD000171.
    8. Smieja MJ, Маркетти, Калифорния, Cook DJ, Smaill FM. Изониазид для профилактики туберкулеза у людей, не инфицированных ВИЧ. Кокрановская база данных Syst Rev 2000; (2): CD001363.
    9. Самандари Т., Агизев Т.Б., Ньиренда С., Тедла З., Сибанда Т., Шан Н. и др.Профилактическое лечение изониазидом в течение 6 месяцев по сравнению с 36-месячным курсом лечения туберкулеза у взрослых с ВИЧ-инфекцией в Ботсване: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Ланцет 2011; 377: 1588-98.
    10. Trajman A, Steffen RE, Menzies D. Анализы высвобождения гамма-интерферона в сравнении с кожным туберкулиновым тестом для диагностики латентной туберкулезной инфекции: обзор доказательств. Pulm Med 2013; 2013: 601737.
    11. Абубакар I, Джексон C, Рангака MX.C-Tb: кожная проба на скрытый туберкулез в 21 веке? Ланцет Респир Мед 2017; 5: 236-7.
    12. Никитина И.Ю., Карпина Н.Л., Касымцева О.В., Гергерт В.Ю., Эргешов А, Лядова И.В. Сравнительная эффективность QuantiFERON-TB Gold по сравнению с кожной пробой с рекомбинантным аллергеном туберкулеза (Диаскинтест) у пациентов с подозрением на туберкулез легких в России. Int J Infect Dis 2019; 86: 18-24.
    13. Zellweger JP, Sotgiu G, Corradi M, Durando P.Диагностика латентной туберкулезной инфекции (ЛТИ): доступные в настоящее время тесты, будущие разработки и перспективы ликвидации туберкулеза (ТБ). Med Lav 2020; 111: 170-83.
    14. Ozuah PO, Burton W, Lerro KA, Rosenstock J, Mulvihill M. Оценка достоверности показаний туберкулиновой кожной пробы подготовленными профессионалами и пациентами. Сундук 1999; 116: 104-6.
    15. Теруэль-младший, Руффино Нетто А, Дуарте Г.Г.Стандартизация считывателей туберкулиновых тестов. Tubercle 1969; 50: 350-5.
    16. Goel D, Mantan M, Sethi GR. Повторный визит к пробе Манту: вариабельность чтения туберкулиновой пробы в педиатрической популяции. J Infect Dev Ctries 2018; 12: 625-30.
    17. Bearman JE, Kleinman H, Glyer VV, Lacroix OM. Исследование вариабельности чтения туберкулиновых тестов. Am Rev Respir Dis 1964; 90: 913-9.
    18. Departamento de Vigilância das Doenças Transmissíveis, Secretaria de Vigilância em Saúde, Ministério da Saúde. Técnicas de aplicação e leitura da prova tuberculínica. Бразилиа: министерство да Сауде; 2014.
    19. Moayedi-Nia S, Barss L, Oxlade O, Valiquette C, Ly M-X, Campbell JR и др. MTST — подход мобильного здравоохранения к обучению и обеспечению качества проведения туберкулиновых кожных проб и чтения. PLoS One 2019; 14: e0215240.
    20. Канадская ассоциация легких; Канадское торакальное общество; Агентство общественного здравоохранения Канады; Центр инфекционных болезней и инфекционного контроля. Канадские стандарты по туберкулезу. https://central.bac-lac.gc.ca/.item?id=HP40-18-2014-eng&op=pdf&app=Library (по состоянию на 06 апреля 2021 г.).
    21. Oxlade O, Trajman A, Benedetti A, Adjobimey M, Cook VJ, Fisher D, et al. Повышение воздействия диагностики и лечения латентной туберкулезной инфекции на общественное здоровье (ACT4): протокол кластерного рандомизированного исследования.BMJ Open 2019; 9: e025831.
    22. Bland JM, Altman DG. Согласованность методов измерения с несколькими наблюдениями на человека. J Biopharm Stat 2007; 17: 571-82.
    23. Departamento de Vigilância das Doenças Transmissíveis, Secretaria de Vigilância em Saúde, Ministério da Saúde. Руководство по борьбе с туберкулезом в Бразилии. 2ª Ред. Бразилиа: министерство да Сауде; 2018.
    24. Кендиг Е.Л., Киркпатрик Б.В., Картер У.Х., Хилл Ф.А., Колдуэлл К., Энтвистл М. Недооценка реакции туберкулиновой кожной пробы. Chest 1998; 113: 1175-7.
    25. Pouchot J, Grasland A, Collet C, Coste J, Esdaile JM, Vinceneux P. Надежность измерения туберкулиновой кожной пробы. Ann Intern Med 1997; 126: 210-4.
    26. Longfield JN, Margileth AM, Golden SM, Lazoritz S, Bohan JS, Cruess DF.Различия между наблюдателями и методами туберкулиновой кожной пробы. Pediatr Infect Dis 1984; 3: 323-6.
    27. Geldenhuys H, Verver S, Surtie S, Hatherill M, van Leth F, Kafaar F и др. Туберкулиновая кожная проба: сравнение показаний линейки и штангенциркуля. Int J Tuberc Lung Dis 2010; 14: 1266-71.
    28. Кристофер Д. Д., Шанкар Д., Дейти А., Цверлинг А., Пай М. Безопасность двухэтапного туберкулинового кожного теста у индийских медицинских работников.Int J Mycobacteriol 2014; 3: 247-51.
    29. Haynes BE, Grubb R. Парамедики могут подавать и читать тесты Манту на туберкулез. J Emerg Med 2001; 20: 381-4.
    30. Jakeman B, Gross B, Fortune D, Babb S, Tinker D, Bachyrycz A. Оценка инициативы по тестированию на туберкулез, проводимой фармацевтами в Нью-Мексико. J Am Pharm Assoc (2003) 2015; 55: 307-12.
    31. Говард Т.П., Соломон Д.А.Чтение туберкулиновой кожной пробы: кто, когда и как? Arch Intern Med 1988; 148: 2457-9.
    32. Моран-Мендоса О., Телло-Завала М.С., Ривера-Камарильо М., Риос-Меза Ю. Сравнение различных методов и времени считывания туберкулиновой кожной пробы. Int J Tuberc Lung Dis 2013; 17: 1273-8.
    33. Salame FM, Ferreira MD, Belo MT, Teixeira EG, Cordeiro-Santos M, Ximenes RA, et al. Знания о передаче и профилактике туберкулеза, а также восприятие использования услуг здравоохранения среди индексных больных и контактов в Бразилии: понимание потерь в каскаде оказания помощи при латентном туберкулезе.
    Copyright © 2008 - 2021