Растет количество родителей, опасающихся вакцинации
Житель села Нура Талгарского района Алматинской области, по имени Даниял, — один из противников вакцинации маленьких детей.
— Четыре года назад сделали прививку моему старшему сыну. Однако после той вакцины он оказался в реанимации. Слава богу, всё обошлось. После этого я не позволил делать прививки двум другим детям, родившимся после него. Врачи в свою очередь стали меня пугать тем, что «моего ребенка в будущем не возьмут в школу, и если я не позволю им сделать прививку, то они подадут на меня в суд», — говорит Даниял.
«ВРЕД, ПРИЧИНЕННЫЙ ВАКЦИНОЙ»
Наргуль, жительница Талгарского района Алматинской области, также из числа граждан, которые уверены в том, «вакцина может нанести вред ребенку». Она говорит, что прививка отрицательно сказалась на здоровье ее сына Абильмансура.
— При рождении у него было слабое сердце. Однако через некоторое время после лечения он пришел в норму. Ребенка, который родился в Алматы, на вакцинацию мы повезли в сельскую амбулаторию.
Работник медицинского учреждения ставит укол вакцины ребенку. Иллюстративное фото.
После вакцинации, по словам Наргуль, ребенок стал очень беспокойным, однако сельские врачи ее успокоили, сказав, что это «обычное состояние после прививки».
— На следующий день машина скорой помощи привезла нас в районную больницу. Врачи нам сказали, чтобы мы радовались тому, что ребенок остался жив, ему вообще делать вакцинацию нельзя. Мы были рады, что ребенок остался жив. Однако позднее узнали, что случилось то, что должно было случиться, — говорит мама малыша.
Сейчас двухлетний Абильмансур прихрамывает на одну ногу.
— О том, что наш сын стал инвалидом, мы узнали, когда он начал ходить. После первой вакцинации он пережил мини-инсульт, — говорит женщина.
Наргуль — медсестра, она говорит, что ее муж Кайрат работает лишь в летнее время, нанимается на поденную работу.
«ЕСЛИ РЕБЕНОК ЗДОРОВ, ВРЕДА ОТ ВАКЦИНЫ НЕ БУДЕТ»
По словам Карлыгаш (по ее просьбе имя и фамилия публикуются не полностью), врача алматинской детской больницы № 1, последние несколько лет среди родителей распространяется мнение, что «вакцинация отрицательно сказывается на детях».
— Если ребенок стопроцентно здоров, прививка ничем не повредит. Без разрешения невропатолога ребенку не вводят вакцину, — говорит она.
Для профилактики некоторых заболеваний новорожденным вводят препараты, изготовленные на основе ослабленных вирусов или генетически модифицированных клеток. Такие прививки в будущем смогут защитить ребенка от инфекционных заболеваний.
Кроме родителей, которые опасаются, что прививки окажут отрицательное воздействие на здоровье слабых детей, в Казахстане есть и те, кто отказывается от вакцинации по религиозным причинам.
Жандарбек Бекшин, главный санитарный врач страны, на специальном брифинге в мае этого года в Астане призвал жителей не отказываться от прививок по религиозным причинам. Ранее Азаттык писал о жителях западного региона Казахстана, которые в связи с религиозными убеждениями не прививают своих детей.
В соответствии со статьей 156 закона «О здоровье народа и системе здравоохранения» все жители Казахстана обязаны получать прививки. В соответствии со статьей 93 пациент или его законный представитель имеют право отказаться от прививок, так как это не относится к заболеваниям, которые лечатся в принудительном порядке.
В Казахстане новорожденному ребенку в течение первых четырех дней жизни делают три прививки (против туберкулеза, вирусного гепатита В и полиомиелита ОПВ), в два месяца — три прививки (против вирусного гепатита В, ОПВ, АКДС — против коклюша, дифтерии, столбняка), в три месяца — две прививки (ОПВ и АКДС), в четыре месяца — три прививки (против вирусного гепатита В, ОПВ и АКДС), после одного года — две прививки (против кори и паротита), в полтора года — одну прививку (АКДС), в семь лет — три прививки (против туберкулеза, дифтерии и стобняка — АДС), в 12 лет — две прививки (против туберкулеза и дифтерии — АД-м), в 15 лет — одну прививку (против краснухи), в 16 лет — одну прививку (против дифтерии и стобняка — АДС-м). Взрослые должны получать АДС-м через каждые 10 лет.
С июня 2013 года вышла инструкция о замене прививки АКДС прививкой АбКДС (против коклюша, дифтерии, столбняка, вирусного гепатита, гемофильной инфекции и полиомиелита).
Американской школьнице делают прививку от штамма гриппа h2N1.В зарубежных странах также встречаются родители и пациенты, которые (по религиозным, личным и другим убеждениям) отказываются от иммунизации. В последние годы на Западе часто обсуждают, что безопаснее — вводить природные вакцины на основе бактерий или искусственные синтетические вакцины. Несмотря на то что некоторые синтетические вакцины удачно прошли испытания, на практике их использование пока не получило широкого распространения. В странах Запада различные неправительственные организации и активисты участвуют в работах по совершенствованию вакцин, их безопасности и разъяснению пациентам и родителям положительных сторон иммунизации. Например, в Великобритании организация The UK Paediatric Vaccine Group («Британская группа детской вакцины») оказывает содействие в обмене опытом и информацией между научно-исследовательскими группами по изготовлению вакцин, педиатрами и родителями, в совместном повышении квалификации.
Відповіді на поширені питання про вакцинацію проти кору
Яка вакцина захищає від кору і наскільки вона безпечна? Де і коли треба зробити щеплення? Які є протипоказання? Підготували відповіді на ці та інші питання про вакцинацію від кору.
Яка вакцина захищає від кору?
Від кору захищає комплексна трикомпонентна вакцина КПК, що забезпечує імунітет одразу від трьох захворювань: кору, паротиту (свинки) та краснухи. Згідно з календарем щеплень, для захисту від кору потрібно ввести дві дози вакцини: в 1 і 6 років.
За рекомендацією Всесвітньої організації охорони здоров’я, принаймні 95% населення мають бути щеплені двома дозами вакцини КПК для забезпечення надійного захисту від кору.
Яка вакцина наявна в Україні?
Наразі в Україну для щеплень КПК постачають такі вакцини:
- «Пріорикс»/Priorix (виробник GlaxoSmithKline Biologicals S.A., Бельгія), прекваліфіковану ВООЗ, найавторитетнішою організацією світу в сфері охорони здоров’я.
- «М-М-Р ІІ»/M-M-R II (виробник Merck & Co., Inc., США), схвалену державним Управлінням продовольства і медикаментів США (Food and Drug Administration (FDA), яка також є однією з найавторитетніших установ світу в цій сфері.
Обидві вакцини безпечні, ефективні й гарантовані державою безоплатно в рамках національного календаря профілактичних щеплень. Більша кількість постачальників дозволяє країні уникнути нестачі у разі дефіциту продукту від одного виробника. Це особливо важливо під час спалаху, адже лише з початку року на кір в Україні захворіли понад 26 500 людей, і 10 із них померли.
Наскільки безпечна вакцина від кору?
Вакцина КПК використовується вже понад 50 років, і понад 500 мільйонів доз вакцин з протикоровим компонентом було введено в більш ніж 100 країнах світу. Вакцина проти кору безпечна та ефективна.
Вакцини, як і будь-які ліки, можуть викликати реакції, але серйозні реакції на вакцину — вкрай рідкісні. У той час, як кір може мати тяжкий перебіг, нести ризик госпіталізації і смерті, щеплення вакциною КПК — безпечне. Імовірність серйозної алергічної реакції на вакцину КПК становить одна реакція на мільйон щеплень. Тоді, як із 1 000 людей, які заразилися кором, 1 помирає, 1 захворіває на енцефаліт, а 50 отримують тяжкі ускладнення.
Як і де зробити щеплення від кору?
Наразі вакцина КПК наявна в державних медичних закладах. Для дітей до 18 років вакцинація від кору в Україні є безкоштовною.
Також Міністерство охорони здоров’я затвердило наказ про проведення безкоштовної імунізації дорослих, які належать до груп ризику. Зокрема йдеться про медиків, освітян, студентів, поліцію, військових, учасників Операції об’єднаних сил.
Отримати щеплення можуть дорослі, які контактували з хворим на кір. Не відкладайте візит до лікаря, щоб зробити планове або надолужити пропущене щеплення.
Коли вакцинувати дитину?
В Україні роблять щеплення від кору двічі: у 12 місяців та в 6 років. Якщо дитині незабаром виповнюється 1 або 6 років, це означає, що наближається час вакцинації від кору. Дуже важливо не відкладати щеплення.
Якщо дитина пропустила першу чи другу дозу вакцини КПК за графіком, потрібно звернутися до лікаря і якнайшвидше надолужити пропущені щеплення КПК.
Що робити, якщо батьки вказують на те, що записи про щеплення їхньої дитини є неправдивими, та/або не пам’ятають, які із записаних у довідці дитини щеплень робили насправді?
У такому випадку батькам треба звернутися до медичного закладу і зробити дитині щеплення. Додаткове щеплення від кору НЕ шкодить дитині, а навпаки — посилює захист.
Як захиститися від кору дорослим, які не входять до груп ризику?
Усім дорослим, які не були щеплені від кору або не перехворіли на кір, потрібно вакцинуватися. Проконсультуйтеся зі своїм сімейним лікарем про можливості вакцинації проти кору.
Чи є вакцини від кору в приватних клініках?
Вакцина КПК зареєстрована в Україні й може закуповуватися приватними клініками. МОЗ не регулює, які вакцини і в якому обсязі завозити постачальникам на приватний ринок України.
Чи можна вакцинуватися під час спалаху?
Під час спалаху надзвичайно важливо захистити дитину від кору. Якщо дитині виповнюється 12 місяців або 6 років, якщо дитина пропустила планове щеплення від кору раніше — вакцинуватися вкрай потрібно! Щеплення — єдиний надійний спосіб здобути захист від інфекцій. Так само, якщо дорослий не має щеплення, його потрібно зробити.
Що трапиться, якщо вакцинуватися вже після контакту з хворим, тобто імовірно заразившись?
У таких випадках і здійснюється вакцинація контактних осіб (наказ МОЗ України №595 від 16 вересня 2011), що також відповідає рекомендаціям Всесвітньої організації охорони здоров’я. Таким чином імунна система починає «бігти наввипередки» з вірусом, виробляючи антитіла. Що швидше зроблено вакцинацію, то вищою є імовірність уникнути хвороби чи принаймні полегшити її перебіг.
Якщо людина контактувала з хворим на кір, вона має отримати вакцинацію протягом перших 72 годин. Пізнішу вакцинацію також рекомендовано, проте її ефективність вже буде не такою високою. У деяких випадках також показане введення імуноглобуліну.
Чи можна вакцинуватися від кору в сезон грипу?
Так. Якщо дитина або дорослий почуваються добре, немає жодних причин відкладати щеплення від кору через те, що в країні грип. Попри поширений міф вакцинація не послаблює і не перевантажує імунну систему.
За світовими стандартами застуди з температурою до 38,0°С–38,5°С не є протипоказанням до вакцинації від кору.
Навіть більше, вакцинуватися від кору та грипу можна в один день — у різні ділянки тіла.
За результатами наукових досліджень окремих випадків бактеріальних та вірусних інфекцій в популяції після щеплення (0–30 днів, 31–60 днів і 61–90 днів), було встановлено, що вакцина КПК не підвищує ризики цих інфекцій, не «перевантажує» імунну систему, не послаблює захист організму в цілому.
Так, твердження, що вакцинуватися проти кору під час зростання захворюваності на грип і ГРВІ небезпечно, є необґрунтованим та не відповідає дійсності.
Які є протипоказання до вакцинації від кору?
Перелік протипоказань до вакцинації КПК невеликий. Він не містить застуди з температурою до 38,5°С. Вакцинацію не роблять, якщо є високий ризик серйозної реакції та імунна відповідь на введену вакцину не сформується, тобто:
- Гостре захворювання, що супроводжується температурою, вищою за 38,5°С.
- Серйозна алергічна реакція (анафілактичний шок) на попередню дозу вакцини чи відома алергічна реакція на один із компонентів вакцини (наприклад, на желатин, неоміцин, курячий білок тощо).
- Захворювання і стани організму, коли після введення вакцини імунітет може не сформуватися (наприклад, хіміотерапія в онкологічних хворих; вживання великих доз стероїдних гормонів; вживання ліків, що пригнічують імунітет; СНІД).
- Вагітність: вакцину КПК не вводять вагітним, адже вона містить живі віруси. Щеплення проти кору необхідно зробити на етапі планування вагітності.
У разі виникнення тимчасових протипоказань до вакцинації дитина отримує так зване медвідведення від щеплень. Потім пропущені за календарем щеплення потрібно надолужити.
Більшість із протипоказань — лише тимчасові. Це означає, що захистити дитину можна буде вже зовсім скоро. Важливо, щоб батьки не відкладали щеплення КПК на довгий час, позбавляючи дитину захисту від кору, а також не відкладали щеплення після тимчасових протипоказань на невиправдано довгий час.
Після гострих захворювань щеплення можна робити відразу після одужання. Так само після операції: не потрібно чекати, наприклад, місяць — щеплення можна робити щойно дитина почувається добре після хірургічного втручання. До речі, не слід відмовлятися від вакцинації живою вакциною і перед ним: якщо дитина почувається добре, відкладати щеплення КПК немає сенсу.
Чи можна вакцинувати дитину з хронічними захворюваннями?
Існує міф, що наявність у дитини бронхіальної астми, цукрового діабету чи інших хронічних захворювань є протипоказанням до вакцинації. Проте насправді такі малюки потребують щеплення в першу чергу, адже ризик зараження кором і розвитку серйозних ускладнень після хвороби для них значно вищий.
Що робити, якщо людина контактувала з хворим на кір?
У разі контакту з хворим на кір негайно зверніться до лікаря: потрібно зробити щеплення протягом перших 72 годин. У деяких випадках також (наприклад, тим, у кого є протипоказання до вакцинації) вводять імуноглобулін.
Якими є ризики для невакцинованих?
Вірогідність заразитися кором для невакцинованої людини, яка контактувала з хворим на кір, становить 90%. У понад 5% людей, які перехворіли на кір, розвиваються порушення здоров’я на все життя.
Чому серед захворілих на кір були повністю вакциновані?
Імовірність захворіти після щеплення існує, адже жодна вакцина не може дати 100% захисту від захворювання. У 3–5% людей не формується імунітет після вакцинації. Окрім того, деякі відомості в довідках про щеплення можуть не відповідати дійсності. До того ж, захворіти можуть ті, кому ввели вакцину, яка зберігалася за неналежної температури і втратила свої властивості.
Проте навіть якщо щеплена людина захворіє, хвороба буде мати значно легший перебіг, без серйозних ускладнень. Ті ж, у кого організм не відповів на вакцину, повинні бути захищені колективним імунітетом, який можна досягнути високим рівнем охоплення щепленнями.
Яким є рівень вакцинації в Україні?
За українським календарем щеплень кожна дитина має отримати дві дози вакцини проти кору — в 12 місяців та в 6 років.
2018 року 91% дітей одного року отримали першу дозу вакцини від кору, та 89,5% дітей 6 років — другу дозу вакцини вчасно.
Це набагато краще, ніж, наприклад, 2016 року, коли лише 45,5% дітей одного року були щеплені від кору вчасно. Проте цього недостатньо, щоб надійно захистити людей від інфекцій. Як мінімум, 95% мають отримати обидві дози вакцини для того, щоб вірус не поширювався і можна було уникнути госпіталізації та смерті.
До того ж, залишається частка дітей, які пропустили свої щеплення за графіком в минулі роки, і їм також потрібно ввести вакцину. У 2018 році частка дітей, які отримали пропущену першу дозу КПК, становить 57%. А частка дітей, які надолужили дві дози, іще менша — 46%.
До 2009 року принаймні 94% українських дітей одного року мали планові щеплення та понад 95% шестирічних дітей отримували другу дозу, тому випадків кору не було.
В яких областях рівень вакцинації найнижчий?
2018 року найнижчі рівні планового щеплення дітей одного року були в таких областях: Івано-Франківська (78.9%), Харківська (80.8%), Закарпатська (84.8%), Одеська (84.8%), Рівненська (84.8%), Черкаська (87.5%), Київська (87.9%) та Львівська (89.9%).
А найнижчі рівні охоплення плановим щепленням шестирічних дітей були в Івано-Франківській (69.6%), Київській (81.1%), Харківській (82.2%), Львівській (83.2%), Запорізькій (83.3%), Одеській (85.6%), Закарпатській (86.9%), Чернівецькій (88.1%) та Чернігівській областях (88.9%).
Чи достатньо в Україні вакцин проти кору?
Станом на 7 лютого 2019 року в регіонах України наявні 1 067 014 доз вакцин проти кору, паротиту і краснухи. Цієї кількості достатньо для проведення щеплень.
Що робити, якщо в медичному закладі немає вакцин?
Якщо в кабінеті щеплень кажуть, що вакцини немає, зверніться до керівника медзакладу. Якщо він не може надати необхідну інформацію, зверніться до департаменту/управління охорони здоров’я у вашій області. За розподіл вакцин у межах області відповідає місцева влада.
Анализ на вирус кори ᐈ сдать кровь на наличие вируса кори в организме, антитела IgG
Описание анализа:
Высокая заразность вируса и недостаточный уровень вакцинации провоцируют постоянное появление вспышек кори, представляющих особую опасность для людей, не имеющих иммунитета к заболеванию. Анализ на антитела IgG к вирусу кори позволяет проверить приобретен ли такой иммунитет (вследствие перенесенного заболевания или прививки) или человек беззащитен перед болезнью. Если антител IgG не выявлено, значит иммунитета нет и необходимо привиться, чтобы устранить риск инфицирования коревой инфекцией.
Анализ на антитела к кори IgG – простой и быстрый способ понять, необходима ли вам вакцина против кори или нет.
Вирус кори, антитела IgG – анализ, применяемый для определения антител к вирусу кори, наличие которых значит, что пациент болен корью в данный момент или же переболел ею в прошлом. Передача вируса кори обычно происходит воздушно-капельным путем, заразиться могут люди всех возрастов, но чаще всего – дети. Корь может быть спровоцировать тяжелые осложнения, вплоть до летального исхода.
Инкубационный период кори длится от 7 до 21 дня, в среднем – около 11 дней, во время которых заразившегося не беспокоят никакие симптомы. На острой стадии болезни температура поднимается до 38-40 С, появляется головная боль, светобоязнь, сухой кашель, чихание, насморк и осиплость голоса. Горло покрасневшее, а на нёбе появляются красные пятна – коревая энантема.
Со второго дня болезни, на слизистой оболочке щек проступают пятна Бельского-Филатова-Коплика –мелкие белесые пятнышки. С четвертого-пятого дня развивается коревая экзантема – мелкая сыпь, покрывающая лицо, шею и кожу за ушами. Спустя сутки сыпь спускается на туловище, а еще через 24 часа достигает пальцев на руках и ногах. Сыпь выглядит как мелкие узелки (папулы), окруженные покраснением и склонные к слиянию.
С четвертого дня после начала высыпаний симптомы идут на убыль: температура приходит в норму, сыпь темнеет, буреет и шелушится. Исчезновение высыпаний идет в том же порядке, что и развитие: сначала пятна исчезают с лица и шеи, затем с туловища и с конечностей. Пигментация может сохраняться до полутора недель.
15-20% пациентов с корью страдает от осложнений: стоматита, пневмонии, трахеита, отита, менингита, энцефалита, энтерита, колита, пиелонефрита. Вирус кори опасен для беременных, так как может вызвать преждевременные роды или выкидыш.
Выработкой антител организм нейтрализует вирус и уничтожает его. В первую очередь вырабатываются антитела класса М, а антитела IgG вырабатываются спустя 2-4 недели, сохраняясь в крови десятками лет и обеспечивая стойкий иммунитет к вирусу кори.
Показания к назначению
Лабораторное исследование обычно назначает педиатр или терапевт, но может также ЛОР, инфекционист, дерматолог или пульмонолог, при таких показаниях:
- проявления кори;
- проверка людей, имевших контакты с больными корью;
- контроль эффективности вакцинации.
Интерпретация результатов
Результаты исследования показываются в виде индекса. Если полученное значение менее 0,8 – тест отрицательный, антител IgG не обнаружено. Если более 1,2 – положительный результат, антитела IgG к вирусу кори выявлены. Промежуточные значения (0,8-1,2) требуют дополнительных исследований.
Причиной положительного результата является текущая или бывшая в прошлом коревая инфекция или успешная вакцинация против неё. Отрицательный результат возможен, если пациент здоров, неэффективно вакцинирован, имеет слабый иммунитет или же от начала заболевания прошло недостаточно (менее 2 недель) времени для выработки IgG.
Подготовка к обследованию: не требуется.
Материал для исследования: венозная кровь.
Метод исследования: иммуноферментный анализ.
Срок проведения: 2 рабочих дней.
Запись на анализы
Прививка КПК против кори, паротита (свинки) и краснухи
Куда делают прививку КПК детям?
Детям в возрасте 1-1,5 лет первую дозу прививки от кори, эпидемического паротита и краснухи обычно делают в бедро. Детям в возрасте 6-7 лет, которые должны получить вторую дозу прививки, ее обычно вводят в плечо.
Когда (в какие сроки) нужно сделать прививку от кори эпидемического паротита и краснухи детям? Что делать если прививка не была сделана во время?
Согласно национальному календарю вакцинации принятому в России и во многих других странах мира, первая доза прививки КПК должна быть сделана ребенку в возрасте 1 -1,5 года, а вторая доза (ревакцинация) в возрасте 4-6 лет.
Если по какой-то причине вы не успеете или не сможете сделать ребенку КПК в сроки установленные календарем — не беспокойтесь. Это не опасно и не снижает эффективности прививки. Просто постарайтесь сделать прививку, как только появится возможность.
Длительное откладывание получения первой дозы прививки КПК нежелательно, так как по мере взросления ребенка и расширения круга его общения с другими людьми повышается и риск его заражения дикими формами краснухи, свинки и кори.
Получения второй дозы КПК может быть отложено и на длительное время, однако, желательно повторить прививку до поступления ребенка в школу.
КПК и путешествия за границу
Если вы собираетесь в путешествие заграницу с ребенком, которому еще не исполнился год – обязательно проконсультируйтесь с врачом по поводу того, чтобы сделать ребенку прививку от кори, эпидемического паротита и краснухи раньше срока предусмотренного календарем вакцинации. В таком случае у ребенка появится определенный иммунитет против этих болезней (это особенно важно для защиты ребенка от кори).
Из-за того что организм детей до года не способен в полной мере реагировать на компоненты КПК и вырабатывать сильный иммунитет, когда ребенку исполнится год, КПК нужно будет повторить, а потом нужно будет поставить еще одну дозу прививки когда ребенку исполнится 6 лет.
Моделирование молекулярной динамики рецептора ACE2 с использованием проверенных природных ингибиторов для выявления нового кандидата в лекарство от COVID-19
, 1 , 2 , 2 и 3Neha Srivastava
1 Центр биоинформатики, Биотехнологический парк, Лакхнау, Уттар-Прадеш, Индия
Прекши Гарг
2 Институт биотехнологии, Университет AMITY, Лакхнау, Уттар-Прадеш, Индия
Prachi Srivastava
2 Институт биотехнологии, Университет AMITY, Лакхнау, Уттар-Прадеш, Индия
Прахлад Кишор Сет
3 Старший научный сотрудник NASI, получивший статус платинового юбилея, биотехнологический парк, Лакхнау, Уттар-Прадеш, Индия
Академический редактор: Юрий Орлов
1 Центр биоинформатики, Биотех-парк, Лакхнау, Уттар-Прадеш, Индия
2 Институт биотехнологии, Университет AMITY, Лакхнау, Уттар-Прадеш, Индия
3 Старший научный сотрудник NASI, получивший статус платинового юбилея, Биотех-парк, Лакхнау, Уттар-Прадеш, Индия
Автор, отвечающий за переписку.Поступило 15.09.2020 г .; Принято 7 марта 2021 года.
Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение, воспроизведение и адаптацию на любом носителе и для любых целей при условии, что это должным образом указано. Для указания авторства необходимо указать автора (авторов), название, источник публикации (PeerJ) и либо DOI, либо URL-адрес статьи.Аннотация
Предпосылки и цели
Массовая вспышка нового тяжелого острого респираторного синдрома, коронавируса (SARS-CoV-2), оказалась серьезной проблемой глобального здравоохранения во всем мире.В настоящее время нет лекарств или вакцин для лечения COVID-19. В текущем вычислительном исследовании была предпринята попытка идентифицировать новый терапевтический ингибитор против нового SARS-CoV-2 с использованием разработки лекарств in silico.
Методы
В настоящем исследовании рецептор человеческого ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE2) стал мишенью для разработки лекарств против смертельного вируса. Трехмерная структура рецептора была смоделирована и проверена с использованием швейцарской модели, сервера Procheck & Errat.Исследование молекулярной стыковки было выполнено между группой природных и синтетических соединений, обладающих доказанной противовирусной активностью в отношении рецептора ACE2, с использованием инструмента Autodock 1.5.6. Моделирование молекулярной динамики было выполнено с использованием Desmond v 12 для оценки стабильности и взаимодействия рецептора ACE2 с лигандом.
Результаты
Основываясь на самой низкой энергии связи, подтверждении и взаимодействии Н-связи, коричная кислота (-5,20 ккал / моль), тимохинон (-4,71 ккал / моль) и андрографолид (Kalmegh) (-4.00 ккал / моль) были отсеяны, показав сильное сродство связывания с активным сайтом рецептора ACE2. Моделирование методом MD предполагает, что коричная кислота, тимохинон и андрографолид (Kalmegh) могут эффективно активировать биологический путь без изменения конформации в сайте связывания рецептора ACE2. Биоактивность и лекарственные свойства соединений показывают их лучшие фармакологические свойства и более безопасны в использовании.
Интерпретация и выводы
В исследовании сделан вывод о высоком потенциале коричной кислоты, тимохинона и андрографолида в отношении белка рецептора SARS-CoV-2 ACE2.Таким образом, исследование молекулярного стыковки и моделирования MD поможет понять молекулярное взаимодействие между лигандом и сайтом связывания рецептора, что приведет к новому терапевтическому вмешательству.
Ключевые слова: SARS-CoV-2, рецептор ACE2, природные соединения, синтетические соединения, виртуальный скрининг, молекулярный докинг, моделирование молекулярной динамики, открытие лекарств
Введение
Новый коронавирус тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV-2 ) представляет собой уникальный вирус с необычно большим геномом положительно-смысловой РНК длиной от 32 т.п.н. (Lu et al., 2020) и специальной стратегии репликации. Он является членом крупнейшей группы вирусов Nidovirales (Naqvi et al., 2020). Он покрыт оболочкой и отличается булавовидными шипами, которые выступают из поверхности. Рецептор-связывающий домен спайкового белка связывается с клеткой-хозяином и делает вирус способным вызывать у хозяина различные заболевания (Huang et al., 2020). Он вызывает энтерит у коров и свиней и заболевание верхних дыхательных путей у птиц. В настоящее время доказано, что он вызывает потенциально смертельные респираторные инфекции у людей.До вспышки коронавируса считалось, что эти вирусы вызывают только легкие респираторные инфекции у людей, но после вспышки смертельные побочные эффекты вируса стали главной глобальной проблемой. Известно, что эти вирусы вызывают более тяжелые заболевания у новорожденных, пожилых людей и людей с сопутствующими заболеваниями (Perlman, 2016).
В декабре 2019 года Ухань, Китай, стал центром вспышки нового вируса SARS-CoV-2, который вызвал серьезную и неотложную озабоченность на международном уровне.Аналогичная вспышка вируса SARS-CoV также произошла в 2003 году в Гуандуне, Китай. Число случаев в то время значительно увеличилось и распространилось по всему миру (Zhong et al., 2003). В 2003 году вирус заразил около 8000 человек и стал причиной 774 смертей во всем мире (Sarkar & Saha, 2020). Основной причиной распространения SARS-CoV в 2003 году была способность вируса быстро передаваться среди людей. Также недостаточная подготовленность и реализация мер борьбы привели к дальнейшему распространению вируса.Извлечение уроков из прошлого опыта, изоляция людей с подозрением на заболевание, тщательный мониторинг их контактов, сбор эпидемиологических и клинических данных от пациентов, а также разработка диагностических, а также лечебных процедур — вот некоторые из широко принятых мер, принятых для борьбы с распространением. нового коронавируса (Wang et al., 2020). Вспышка нового SARS-CoV-2 в 2019 году заразила более 66 818 411 человек и 1428 870 смертей во всем мире по состоянию на ноябрь 2020 года. Контроль над распространением вируса, а также адекватный план действий и лечения вируса — основная потребность час.Поэтому сейчас исследователи пытаются найти лекарство, которое могло бы значительно уменьшить воздействие вируса. В настоящем исследовании мы стремимся идентифицировать соединения, которые можно использовать в качестве профилактических средств против нового SARS-CoV-2. Коронавирус содержит геном размером примерно 30 т.п.н. и состоит из 5′-кэп-структуры и 3′-поли (A) -хвоста, что позволяет ему действовать как мРНК для трансляции полипротеинов репликазы. В начале каждого структурного или вспомогательного гена присутствуют регуляторные последовательности транскрипции (TRS), которые необходимы для экспрессии каждого из этих генов.SARS-CoV-2, как известно, связывается с ангиотензинпревращающим ферментом 2 (ACE2) в качестве рецептора для проникновения в клетки человека (Li et al., 2003). Различные неструктурные белки собираются в комплекс репликаза-транскриптаза вирусного генома, чтобы обеспечить среду, подходящую для синтеза РНК, а также содержат ферментные домены и функции, которые важны для репликации РНК. Различные неструктурные белки (nsp) играют важную роль в распространении и активации вируса внутри хозяина.Nsp1 способствует деградации клеточной мРНК и блокирует трансляцию клетки-хозяина, что в конечном итоге приводит к блокированию врожденного иммунного ответа (Huang et al., 2011; Tanaka et al., 2012). Nsp2 связывается с запрещающими белками и дополнительно усиливает распространение вируса в организме (Cornillez-Ty et al., 2009). Nsp3 — это большой многодоменный трансмембранный белок, состоящий из доменов Ubl1 и Ac, которые взаимодействуют с белком N, активности ADRP, которая способствует экспрессии цитокинов, и домена PLPro / деубиквитиназы, который расщепляет вирусный полипротеин и блокирует врожденный иммунный ответ хозяина (Chatterjee et al., 2009; Frieman et al., 2009; Серрано и др., 2009). Nsp4 и nsp6 являются потенциальными трансмембранными каркасными белками, важными для правильной структуры DMVs (Gadlage et al., 2010; Oostra et al., 2008). Nsp5 расщепляет вирусные белки, nsp7 и nsp8 действуют как зажим для РНК-полимеразы (Imbert et al., 2006). Nsp9 является РНК-связывающим белком, а nsp13 действует как РНК-геликаза для вирусного генома. Nsp10 действует как кофактор для nsp14 (важный белок для проверки вирусного генома (Eckerle et al., 2010)) и nsp16 (защищает вирусную РНК от распознавания MDA5 (Zust et al., 2011)) и стимулирует активность ExoN и 2-0-MT (Bouvet et al., 2010; Decroly et al., 2011).
Новый SARS-CoV-2 очень похож на SARS-CoV (Andersen et al., 2020; Lu et al., 2020; Zhu et al., 2020). Оба этих вируса принадлежат к роду бета-коронавирусов (линия B) (Chan et al., 2020; Letko, Marzi & Munster, 2020). Подробное сравнение SARS-CoV, MERS-CoV и SARS-CoV-2 представлено в (Abdelrahman, Li & Wang, 2020).
Таблица 1
Сравнение SARS-CoV, MERS-CoV и SARS-CoV-2.
| Характеристика | SARS-CoV | MERS-CoV | SARS-CoV-2 |
|---|---|---|---|
| Год, в котором был зарегистрирован первый случай | 2002 | 2012 | 2019 |
| Страна / регион, где был зарегистрирован первый случай | Китай | Ближний Восток | Китай |
| Основной способ передачи | Капли, аэрозоль и контакт | Капли, аэрозоль и контакт | Капли, аэрозоль , и контакт |
| Инкубационный период | 2–7 дней | 2–14 дней | 2–14 дней |
| Рецептор хозяина | ACE2 | DPP4 | ACE2 | Примерно 15% | 34.4% | 1–3% |
Попадание вируса в клетку является одним из наиболее важных и важных шагов для распространения заболевания, вызванного новым SARS-CoV-2. Этот вирус кодирует поверхностный гликопротеин, известный как шип (Li, 2016). Рецептор-связывающий домен (RBD) белка-шипа отвечает за связывание с рецептором клетки-хозяина и опосредует проникновение вируса в клетку. Вирус проникает в клетку-хозяин из-за высвобождения пептида слияния спайков, образованного в результате расщепления белка спайков протеазой хозяина (Simmons et al., 2013; Bertram et al., 2011). Сходство рецептор-связывающего домена обоих вирусов SARS-CoV-2 предполагает, что оба этих вируса имеют общий рецептор, ACE2. Ангиотензин-превращающий фермент 2 (ACE2) в основном обнаруживается в альвеолярных эпителиальных клетках (Zhao, 2020) и отвечает за снижение поверхностного натяжения этих клеток, тем самым предотвращая коллапс альвеол. Следовательно, ACE2 — очень важный белок, обеспечивающий надлежащий газообмен в легких. Любое повреждение таких клеток приведет к серьезному повреждению легких, которое обычно наблюдалось у пациентов с COVID-19.Связывание шипового белка SARS-CoV-2 с ACE2 клетки-хозяина приводит к эндоцитозу вируса и потере функции ACE2, поэтому из-за этого связывания клетка теряет свой основной компонент, который отвечал за защиту легких от любого повреждения. . Это делает хозяина уязвимым для вирусной инфекции. Рецептор-связывающий домен гликопротеина шипа связывается с кончиком субдомена 1 ACE2. Вирусная мембрана сливается с клеткой-хозяином и активирует клетку (Wrapp et al., 2020; Song et al., 2018; Ли и др., 2005). После слияния вирусная РНК попадает в цитоплазму, что вызывает инфекцию. Таким образом, нацеливание на рецептор ACE2 клеток-хозяев может блокировать проникновение вируса в клетку, тем самым защищая хозяина от вирусной инфекции и пандемического заболевания COVID-19.
С момента вспышки пандемии во всем мире продолжаются исследования для изучения различных аспектов SARS-CoV-2 и механизма заражения. Исследования SARS-CoV-2 прошли долгий путь от перепрофилирования лекарств до поиска новых лекарств и кандидатов в вакцины.Некоторые из недавних исследований исследуют новые иммуногенные аспекты пандемии. В одном из исследований исследователи использовали онтологический подход для определения целей как в вирусе, так и в хозяине, которые могут помочь в поиске эффективных вакцин и лекарств против COVID-19 (Jayachandran et al., 2020). В другом исследовании исследователи провели молекулярное моделирование, намереваясь выявить новые участки связывания в спайковом белке SARS-CoV-2. В своем исследовании они раскрыли 8 новых участков связывания шипованного белка, которые можно использовать с помощью лекарств (Ugur Marion & Marion, 2020).В одном из исследований ученые проверили способность флавонолов действовать как противовирусные препараты, воздействуя на спайковый белок, протеазы SARS-CoV-2, РНК-зависимую РНК-полимеразу и рецептор ACE2 (Mouffouk et al., 2020).
Следовательно, существует потребность в более эффективных и рациональных подходах, которые открывают дверь для разработки более эффективных новых терапевтических мишеней и лекарственных препаратов-кандидатов против Covid-19. В этом отношении вычислительные подходы играют важную роль в процессе быстрого открытия и разработки лекарств с меньшими затратами времени и рентабельностью.Помимо этого, лекарственные травы оказывают огромное влияние на здоровье человека (Pan et al., 2014). Около 70–80% населения мира полагается на лекарственные травы из-за их высокой совместимости с меньшими или нулевыми побочными эффектами для здоровья человека. Биоактивные компоненты, присутствующие в растениях, обладают лечебными свойствами и используются различными фармацевтическими отраслями и отраслями НИОКР для разработки лекарств из-за их более безопасного и лучшего использования (Ekor, 2014). В текущем исследовании insilco реализованы подходы к открытию лекарств для выявления новых терапевтических ингибиторов против нового SARS-CoV-2, нацеленного на рецептор человеческого ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE2).
Методология
Прогнозирование и проверка структуры белка
Последовательность белка рецептора ACE2 была получена в формате FASTA из общедоступной базы данных NCBI. Для идентификации подобных последовательностей была выполнена программа BLAST для поиска структурно похожих последовательностей с помощью базы данных банка данных белков (PDB) (Gupta et al., 2013). Трехмерная структура рецептора ACE2 была смоделирована с помощью сервера онлайн-моделирования SWISS-Model (Waterhouse et al., 2018) на основе параметра BLAST.Кроме того, минимизация энергии моделируемой структуры была выполнена с помощью инструмента Chimera 1.10.1 (Goddard, Huang & Ferrin, 2005). Трехмерная структура была подвергнута валидации с использованием Procheck и Errat Plot. График Рамачандрана (Spencer et al., 2007) оценивает любые стерические конфликты и надежность структуры, тогда как график ошибок измеряет общую частоту ошибок в смоделированной структуре.
Идентификация лиганда
Тридцать природных и синтетических соединений с доказанной противовирусной активностью in vitro и in vivo, использованные в исследовании, основанном на различных обзорах литературы, изображены в и (Manoj Kumar et al., 2014). Доступные 2D и 3D структуры соединений были получены из базы данных PubChem. Программное обеспечение химиоинформатики Molinspiration использовалось для прогнозирования молекулярного анализа и анализа биоактивности, а также свойств лекарственного сходства этих соединений.
Таблица 2
Список природных соединений.
| S. No. | Название соединения | Производное производное | Мол. вес (г / моль) | Донор Н-связи | Акцептор Н-связи | |||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1. | Холин | Withania Somnifera | 104,17 | 1 | 2 | |||||||||||||||
| 2. | Harmine | Passiflora Incarnata | Коричный альдегид | Корица кассия | 132,16 | 0 | 1 | |||||||||||||
| 4. | Коричная кислота | Бромелия | 148.16 | 1 | 2 | |||||||||||||||
| 5. | Кумарины | Dypsis Lutescens | 146,15 | 0 | 2 | |||||||||||||||
| 6. | Acidumolic | Acidumolic | 2 | 3 | ||||||||||||||||
| 7. | Хлорогеновая кислота | Даукус Карота | 354,31 | 6 | 9 | |||||||||||||||
| 8. | Ассафетиднол B | Ferula Assafoetida | 456,54 | 2 | 7 | |||||||||||||||
| 9. | Glucobrassicin | Линамарин | Phaseolus Lunatus | 247,25 | 4 | 7 | ||||||||||||||
| 11. | Лютеолин | Тимус обыкновенный | 286.24 | 4 | 6 | |||||||||||||||
| 12. | Андрографолид (Калмег) | Andrographis Paniculata | 350,4 | 3 | 5 | 13. | 458,4 | 15 | 12 | |||||||||||
| 14. | Цитраль | Melissa Officinalis | 152,24 | 0 | 1 | |||||||||||||||
| 15. | Гидроксихлорохин | Синтетический | 335,9 | 2 | 4 | |||||||||||||||
| 16. | Линалоол | Лаванда узколистная | Nicotiana Tabocum | 162,23 | 0 | 2 | ||||||||||||||
| 18. | Хлорохин | Helianthus Annus | 319.9 | 1 | 3 | |||||||||||||||
| 19. | Лук | Allium Sativum | 150,3 | 0 | 0 | |||||||||||||||
| 20. | 9063 Nigtiva 9063 Sativum | 0 | 2 |
Таблица 3
Список синтетических соединений.
| S. No. | Название соединения | Мол.вес (г / моль) | Донор Н-связи | Акцептор Н-связи | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1. | Ампренавир | 505,64 | 1 | 4 | ||||
| 2. | Acyc. | 4 | 8 | |||||
| 3. | Умифеновир | 477,42 | 1 | 5 | ||||
| 4. | Комбивир | 50107. | Тамифлю | 312,41 | 3 | 6 | ||
| 6. | Занамивир | 332,31 | 9 | 11 | ||||
| 7 | ||||||||
| 8. | Перамивир | 328,41 | 7 | 8 |
Исследование молекулярного докинга
Исследование молекулярного докинга было выполнено между рецептором ACE2 и 30 природными и синтетическими соединениями с использованием Autodock 1.5.6 для прогнозирования наилучшего показателя связывания, аффинности и подтверждения (Yue et al., 2016; Yue et al., 2017). AutoDock — это автоматизированный набор инструментов стыковки белков и лигандов, используемых для прогнозирования взаимодействий белков с небольшими молекулами, такими как молекулы лекарств и субстрат. Он анализирует взаимодействие молекул лиганда в указанном целевом сайте белка. AutoDock использует силовое поле AMBER и линейную регрессию для прогнозирования свободных энергий связи (Ravi & Kannabiran, 2016). Самая низкая энергия связывания была критерием выбора наилучшего комплекса белок-лиганд.Расчет энергии связи был выполнен с использованием полуэмпирического силового поля свободной энергии с десольватацией на основе заряда и стыковкой на основе сетки. Силовое поле было выбрано на основе комплексной термодинамической модели, которая позволяет включать межмолекулярные энергии в прогнозируемую энергию связи (Nakamura et al., 2010). Платформа Cygwin использовалась для запуска файлов стыковки. Discovery Studio 4.5 использовался для визуализации и анализа взаимодействия белок-лиганд и подтверждения.
Исследование молекулярно-динамического моделирования
Исследование молекулярно-динамического моделирования было выполнено для изучения конформационных изменений в белке, происходящих из-за сайта связывания лиганда, и для оценки влияния этих изменений на комплекс белок-лиганд (Yue et al. ., 2017; Okimoto et al., 2009). Для оценки стабильности и взаимодействия рецептора ACE2 с лигандом исследование было выполнено с использованием программного пакета Desmond v12 Schrödinger при периоде времени 50 нс (Wright et al., 2020). Комплекс был помещен в мастер подготовки белка для оптимизации, анализа и доработки стыковочного комплекса, меню построителя системы настроило модель мембраны POPC (пальмитоил олеоил фаза тидил хлор). Молекулы воды добавляли к стыковочному комплексу рецептора ACE2 с помощью модели воды с простой точечной зарядкой (SPC).Конструктор системы был построен с использованием противоионов, алгоритм встряхивания, используемый для ограничения геометрии молекул воды, и длины связи тяжелых атомов с водородом, электростатическое взаимодействие, применяемое с использованием метода сетки частиц Эвальда (PME), и орторомбические, использовались в качестве периодических граничных условий (PBC). Энергия была минимизирована с помощью максимальной итерации 5000 шагов с использованием алгоритма наискорейшего спуска (SD) и 1000 шагов с использованием алгоритма сопряженного градиента (CG) с порогом сходимости 50 e. Динамика выполнялась с 50 нс, во время моделирования длина связи с участием водорода была ограничена с помощью ансамбля NPT, без ограничений, для времени моделирования 1.2 пикосекунды (пс) (температура 300 К) выполнялись для релаксации системы.
Результат
Прогнозирование и проверка трехмерной структуры
Общая длина рецептора ACE2 у человека составляет 805 аминокислот. Трехмерная модель белка была смоделирована с помощью сервера онлайн-моделирования SWISS-Model. На основе самого низкого z-показателя и действительного q-среднего значения была предсказана лучшая модель. Смоделированная трехмерная структура была подвергнута валидации с использованием Procheck и Errat Plot. График Рамачандрана использовали для оценки положения аминокислотных остатков в разрешенной и запрещенной области и общих стереохимических свойств структуры белка.График ошибок использовался для расчета общей частоты ошибок. График Рамачандрана показывает 90,9% в благоприятном регионе; указывают на хорошую стабильность и надежность конструкции. График ошибок, показывающий добротность 96,08%, показывает несвязанное взаимодействие с различными атомами в моделируемой структуре, что указывает на хорошее качество модели ().
Структура, моделируемая белком.Прогнозирование структуры и проверка рецептора ACE2. (A) Смоделированная трехмерная структура рецептора ACE2. (B) График Рамачандрана рецептора ACE2, созданный сервером procheck.(C) График частоты ошибок, созданный сервером ERRAT.
Исследование молекулярного докинга
Известно, что исследование молекулярного докинга является наиболее надежным методом анализа и прогнозирования наилучшего подтверждения соответствия белок-лиганд (Liu et al., 2015; Yue et al., 2016). Исследование молекулярного стыковки было выполнено между рецептором ACE2 и тридцатью соединениями с использованием инструментов Autodock 1.5.6 для получения более стабильного комплекса белок-лиганд (). Основываясь на самой низкой энергии связи (∆G b , ккал / моль), подтверждении взаимодействия водородных связей, три соединения, а именно коричная кислота (-5.20 ккал / моль), тимохинон (-4,71 ккал / моль) и андрографолид (Kalmegh) (-4,00 ккал / моль) были отобраны, показывая сильное сродство связывания с активным сайтом рецептора ACE2 (&). Таким образом, эти соединения можно рассматривать как подходящий терапевтический ингибитор против SARS-CoV-2. Кроме того, все три док-комплекса были подвергнуты моделированию молекулярной динамики для проверки стабильности комплексов белок-лиганд.
Исследование молекулярного взаимодействия.Изучение молекулярного взаимодействия рецептора ACE2 с (A) коричной кислотой (B) тимохиноном (C) андрографолидом (D) холенгеновой кислотой (E) куминальдегидом.Здесь, на фигуре, зеленая точка указывает на взаимодействие Н-связи между белком-лигандом.
Таблица 4
Результаты молекулярного докинга.
| S. No. | Название соединения | Энергия связывания (Ккал / моль) | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1. | Холин | −3,99 Ккал / моль | |||||
| 2. | Гармин | −3,71 Ккал / моль | |||||
| 3. | Куминальдегид | −4.00 Ккал / моль | |||||
| 4. | Коричная кислота | −5,20 Ккал / моль | |||||
| 5. | Куркумрин | −2,42 Ккал / моль | |||||
| 6. | Кислота | 3,43 Ккал / моль | |||||
| 7. | Хлорогеновая кислота | −4,20 Ккал / моль | |||||
| 8. | Ассафетиднол B | −3,82 Ккал / моль | G 9in. 3.65 Ккал / моль | ||||
| 10. | Линамарин | −2,32 Ккал / моль | |||||
| 11. | Лютеолин | −4,19 Ккал / моль | |||||
| 12. | −1 | −4 ккал / моль / Моль||||||
| 13. | Ацикловир | −3,24 Ккал / моль | |||||
| 14. | Умифеновир | −2,30 Ккал / моль | |||||
| 15. | Комбивир | ||||||
| 16. | Тамифлю | −3,14 Ккал / моль | |||||
| 17, | Занамивир | −2,00 Ккал / моль | |||||
| 18. Цидофовир | -1,78 Ккал / моль | ||||||
| 20. | Перамивир | -3,84 Ккал / моль | |||||
| 21. | Андрографолид (Калмег) | 900 -4,63 | 900 -4,63 | Ккал / моль | Greentea | −3,25 Ккал / моль | |
| 23. | Цитраль | −2,82 Ккал / моль | |||||
| 24. | Гидроксихлорохин | −2,7010 | +1,49 Ккал / моль | ||||
| 26. | Никотин | -1,27 Ккал / моль | |||||
| 27. | Хлорохин | -2,52 Ккал / моль | + 0.58 Ккал / моль |
Таблица 5
Пять лучших результатов стыковки.
| S. No. | Название соединения | Энергия связи (ккал / моль) | Взаимодействие водородных связей | |
|---|---|---|---|---|
| 1. | Коричная кислота | −5,20 ккал / моль | ALA-264, LYS-481, LEU-503 | |
| 2. | Тимохинон | −4,71 ккал / моль | LEU-103, TRP-165, ARG-169 | |
| 3. | Андрографолид (Kalmegh) | −4,63 Ккал / моль | ARG-273, TYR-127, ASN-277, ASN-277 | |
| 4. | Холенгеновая кислота | ARG | ккал / моль | ARG -4,20 9010 ккал / моль -273, ARG-273 |
| 5. | Куминальдегид | −4,00 Ккал / моль | TRP-165 |
Исследование молекулярно-динамического моделирования
Исследование методом МД было выполнено для проверки стабильности ACE2 рецептора с коричной кислотой, тимохиноном и зеленой хиретой с использованием Desmond v12 на основе результатов стыковки и исследования взаимодействия h-связи.Для изучения стабильности вычисляли среднеквадратичное отклонение (RMSD) относительно исходных структур вдоль 50 нс (нс) каждой траектории со средним RMSD (среднеквадратичное отклонение) 12,0 — 4,5 A для комплекса ACE2-коричная кислота ( ), 12,0–6,0 A для комплекса ACE2-тимохинон () и 12,0–6,0 A для ACE2-андрографолида (Kalmegh) (). Таким образом, устойчивость комплекса также подтвердила справедливость результатов стыковки. Нет влияния температуры и давления на конформацию конструкции.
Молекулярно-динамическое моделирование ACE2-коричной кислоты.График среднеквадратичного отклонения (RMSD) для комплекса ACE2-коричная кислота в течение 50 нс моделирования молекулярной динамики. ACE2 показан красным цветом, а коричная кислота — синим цветом.
Молекулярно-динамическое моделирование ACE2-тимохинона.График среднеквадратичного отклонения (RMSD) для комплекса ACE2-тимохинон в течение 50 нс моделирования молекулярной динамики. ACE2 показан красным цветом, а тимохинон — синим.
Молекулярно-динамическое моделирование ACE2-Андрографолида.График среднеквадратичного отклонения (RMSD) для комплекса ACE2-андрографолид (Kalmegh) в течение 50 нс моделирования молекулярной динамики. ACE2 показан красным цветом, а андрографолид (Kalmegh) — синим цветом.
Обсуждение и заключение
Возбудитель респираторного заболевания COVID-19, пандемии нового коронавируса SARS-CoV-2, представляет собой опасное для жизни заболевание, поражающее более 66 818 411 человек во всем мире.По оценкам, на данный момент общее количество смертей составило около 1 428 870 человек. В настоящее время не существует доступных противовирусных препаратов или вакцин с доказанной эффективностью для профилактики и лечения заболеваний. Следовательно, необходим более эффективный и рациональный подход, который в конечном итоге приведет к новым терапевтическим подходам. В этом отношении вычислительный подход открывает многообещающие тенденции в процессе открытия и разработки лекарств с сокращением затрат и времени. В текущем исследовании insilico рецептор ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE2) был взят в качестве белка-мишени, поскольку различные литературные исследования показали, что ACE2 является функциональным рецептором SARS-CoV-2, необходимым для входа в клетку-хозяина и последующей репликации вируса (Kuba et al. al., 2005). Трехмерная структура рецептора ACE2 была смоделирована и подтверждена. Было проведено стыковочное исследование отфильтрованных природных и синтетических соединений с рецептором ACE2. На основании самой низкой энергии связи, подтверждения стыковки и взаимодействия Н-связи и пи-пи Коричная кислота (-5,20 ккал / моль), тимохинон (-4,71 ккал / моль) и андрографолид (калмег) (-4,00 ккал / моль) демонстрируя сильное связывание с активным сайтом рецептора ACE2. Кроме того, результат моделирования MD показывает, что коричная кислота, тимохинон и андрографолид могут эффективно активировать биологический путь без изменения конформации в сайте связывания рецептора ACE2.Биоактивность и лекарственные свойства соединений показывают их лучшие фармакологические свойства и безопасность в использовании.
Коричная кислота, полученная из растения Bromeliad , обладает вирулицидной активностью, участвует в ингибировании цикла репликации вируса, включая образование вирусной оболочки и клеточной мембраны, тем самым влияя на всю эпидемиологию вирусного белка. Известно, что это отличный фитохимический препарат, обладающий цитопатической активностью против всех вирусных инфекций.В исследовании сообщалось (Orhan & Sezer Senol Deniz, 2020) о потенциале растительных экстрактов и природных соединений против SARs CoV-2 и других смертоносных вирусов показано подавляющее действие транс -коричной кислоты (IC50 = 3,0 ± 0,18 мкг / мл, SI = 7,4) на инфекцию Covid-19. Исследование молекулярной стыковки, проведенное на клетке Vero против вирусной инфекции SARS CoV-2, нацеленной на белок Mpro, показало самую высокую активность с коричной кислотой (Santos et al., 2020). Тимохинон, полученный из растения Nigella sativa , значительно усиливает иммунную реакцию и подавляет патогенность многих вирусов.Исследование показало, что он блокирует репликацию белка SARS-CoV spike (S), который играет важную роль в прикреплении вируса клетки-хозяина к рецептору ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE2). В исследовании сообщается об антиноцицептивном эффекте тимохинона за счет непрямой активации супраспинальных μ1- и κ-опиоидных рецепторов (Abdel-Fattah, Matsumoto & Watanabe, 2000). Что касается этих геморфинов, опоидный активный пептид также блокирует действие АПФ (Lantz et al., 1991). Таким образом, эти данные предполагают сходную ингибирующую молекулу как для опоидного рецептора, так и для ACE2.Таким образом, тимохинон может быть доказан как новая молекула, ингибирующая ACE2 при SARS-CoV-2. В исследовании in-Silico (Mohideen, 2021), нацеленный на белок E SARs, CoV-2 показывает хорошее сродство связывания и подтверждение (BE = -9,01 ккал / моль) с тимохиноном с использованием Argus Lab 4.0. Кроме того, их сравнительное исследование с патч-доком также показало лучшее сродство (BE = -32,03 ккал / моль). Таким образом, эти данные свидетельствуют об эффективности тимохинона против мишеней SARsCoV-2. В исследовании природного соединения, участвующего в стрессе ER против HSPA5-связывающего домена β (SBDβ), которое, как известно, находится на сайте узнавания спайка SARsCOv-2, показывает среднюю энергию связывания -6.25 ± 1,10 и -5,520 ± 0,12 ккал / моль с тимохиноном (Elfiky, 2020). Поэтому он, вероятно, используется в качестве препарата против covid-19 для пациентов, у которых уже есть заболевание или стресс. Зеленая чиретта или калмег ( Andrographis paniculata ) — отличное лекарственное растение, обладающее анти-ВИЧ, антипатогенным, противовирусным и иммунорегуляторным действием. Сообщалось, что его биоактивный компонент андрографолид обладает иммунорегуляторной активностью, играет важную роль в качестве модулятора измененных иммунных ответов.Он может регулировать как классическую, так и альтернативную активацию макрофагов и продукцию специфических антител, а также спленоцитов, продуцирующих антиген. Исследование insilico (Enmozhi et al., 2020), проведенное для оценки потенциала андрографолида против инфекции covid-19, показало высокую энергию связывания, лучшее подтверждение, биоактивность и фармакодинамические свойства в отношении основного протеина протеазы (Mpro) SARS-CoV-2. Чтобы изучить потенциал андрографолида (AGP1), 14-дезокси-11,12-дидегидроандрографолида (AGP2), неоандрографолида (AGP3) и 14-дезоксиандрографолида (AGP4), были проведены молекулярно-динамические и имитационные исследования против центральных мишеней вируса. а именно неструктурные белки (3 л основная протеаза (3CLpro), папаин-подобная протеиназа (PLpro) и РНК-направленная РНК-полимераза (RdRp)) и структурный белок-шип (S).Открытие предполагает эффективность и потенциал аналога AGP3 против инфекции covid-19 (Murugan, Pandian & Jeyakanthan, 2020). Комплексное исследование метаболомики жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС / МС) и сетевой фармакологии на калмеге показало его активную роль в качестве иммунопротекторной и противовирусной активности, а также его участие в различных путях, таких как путь толл-подобных рецепторов, Путь PI3 / AKT и пути киназы MAP против SARs CoV-2 (Banerjee et al., 2020).Таким образом, это фитохимическое соединение может подавлять распространение вируса и действовать как отличный противовирусный препарат. Таким образом, полученные соединения, если они будут синтезированы и протестированы на модели животных, будут перспективными при лечении вируса SARS CoV-2.
Заключение
В исследовании сделан вывод о высоком потенциале коричной кислоты, тимохинона и андрографолида в отношении белка рецептора SARS-CoV-2 ACE2. Исследование молекулярного стыковки и моделирования молекулярной динамики показывает лучшее сродство связывания, стабильность и структурную конформацию в сайте связывания этих соединений с рецептором ACE2.Таким образом, вышеуказанное открытие поможет разработать новый мощный терапевтический ингибитор против SARS-CoV-2.
Дополнительная информация
Дополнительная информация 1
Необработанные данные.Благодарности
Мы выражаем признательность г-ну Виноду Девараджу, специалисту по прикладным программам, Schrodinger, Бангалор, за его поддержку, оказанную в исследовании моделирования молекулярной динамики. Мы глубоко признательны генеральному директору компании Biotech Park, Лакхнау, за их поддержку и поддержку в исследовании.Мы также выражаем признательность за поддержку, оказываемую в работе инструментами, программным обеспечением и базами данных биоинформатики.
Заявление о финансировании
Прахлад Кишор Сет получил Платиновую стипендию для старшего научного сотрудника Наси от Национальной академии наук Индии. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.
Дополнительная информация и заявления
Конкурирующие интересы
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.
Вклад авторов
Неха Шривастава разработала и разработала эксперименты, выполнила эксперименты, проанализировала данные, подготовила рисунки и / или таблицы, написала или отрецензировала черновики статьи и одобрила окончательный вариант.
Прекши Гарг задумал и разработал эксперименты, провел эксперименты, подготовил рисунки и / или таблицы и утвердил окончательный проект.
Прачи Шривастава задумал и разработал эксперименты, разработал или рецензировал черновики статьи и одобрил окончательный вариант.
Прахлад Кишор Сет задумал и разработал эксперименты, проанализировал данные, написал или рецензировал черновики статьи и одобрил окончательный вариант.
Доступность данных
Следующая информация была предоставлена относительно доступности данных:
Необработанные данные доступны в дополнительных файлах.
файл человеческого рецептора ACE2 доступен в NCBI с идентификатором доступа {«type»: «entrez-protein», «attrs»: {«text»: «Q9BYF1», «term_id»: «71658783», «term_text»: » Q9BYF1 «}} Q9BYF1.2.
Ссылки
Абдель-Фаттах, Мацумото и Ватанабе (2000) Абдель-Фаттах А.М., Мацумото К., Ватанабе Х. Антиноцицептивные эффекты масла Nigella sativa и его основного компонента, тимохинона, у мышей. Европейский журнал фармакологии. 2000. 400 (1): 89–97. DOI: 10.1016 / S0014-2999 (00) 00340-X. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Абдельрахман, Ли и Ван (2020) Абдельрахман З., Ли М., Ван X. Сравнительный обзор респираторных вирусов SARS-CoV-2, SARS-CoV, MERS-CoV и гриппа А. Границы иммунологии.2020; 11: 552909. DOI: 10.3389 / fimmu.2020.552909. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Андерсен и др. (2020) Андерсен К.Г., Рамбаут А., Липкин В.И., Холмс Э.К., Гарри РФ. Проксимальное происхождение SARS-CoV-2. Природная медицина. 2020; 26: 450–452. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] Banerjee et al. (2020) Банерджи С., Кар А., Мукерджи П.К., Халдар П.К., Шарма Н., Катияр С.К. Иммунопротекторный потенциал аюрведической травы Kalmegh (Andrographis paniculata) против респираторных вирусных инфекций — LC-MS / MS и сетевой фармакологический анализ.Фитохимический анализ. 2020 doi: 10.1002 / pca.3011. Epub готовится к печати 9 ноября 2020 г. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Bertram et al. (2011) Bertram S, Glowacka I, Müller MA, Lavender H, Gnirss K, Nehlmeier I, Niemeyer D, He Y, Simmons G, Drosten C, Soilleux EJ, Jahn O, Steffen I, Pöhlmann S. Расщепление и активация Тяжелый острый респираторный синдром коронавирус вызывает выброс белка трипсиноподобной протеазой дыхательных путей человека. Журнал вирусологии. 2011. 85 (24): 13363–13372. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] Буве и др.(2010) Bouvet M, Debarnot C, Imbert I, Selisko B, Snijder EJ, Canard B, Decroly E. Восстановление метилирования cap метилирования мРНК SARS-коронавируса in vitro. PLOS Патогены. 2010; 6 (4): e1000863. DOI: 10.1371 / journal.ppat.1000863. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Chan et al. (2020) Чан JF-W, Кок K-H, Zhu Z, Chu H, To KK-W, Yuan S, Yuen K-Y. Геномная характеристика нового патогенного для человека коронавируса 2019 года, выделенного от пациента с атипичной пневмонией после посещения Ухани. Экстренные микробные инфекции.2020; 9 (1): 221–236. DOI: 10.1080 / 22221751.2020.1719902. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Chatterjee et al. (2009) Chatterjee A, Johnson MA, Serrano P, Pedrini B, Joseph JS, Neuman BW, Saikatendu K, Buchmeier MJ, Kuhn P, Wüthrich K. Структура ядерного магнитного резонанса показывает, что уникальный для коронавируса домен тяжелого острого респираторного синдрома содержит складка макродомена. Журнал вирусологии. 2009. 83 (4): 1823–1836. DOI: 10.1128 / JVI.01781-08. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Cornillez-Ty et al.(2009) Cornillez-Ty CT, Liao L, Yates JR, Kuhn P, Buchmeier MJ. Неструктурный белок 2 коронавируса тяжелого острого респираторного синдрома взаимодействует с комплексом белков-хозяев, участвующих в митохондриальном биогенезе и внутриклеточной передаче сигналов. Журнал вирусологии. 2009. 83 (19): 10314–10318. DOI: 10.1128 / JVI.00842-09. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Decroly et al. (2011) Decroly E, Debarnot C, Ferron F, Bouvet M, Coutard B, Imbert I, Gluais L, Papageorgiou N, Sharff A, Bricogne G, Ortiz-Lombardia M, Lescar J, Canard B.Кристаллическая структура и функциональный анализ комплекса SARS-РНК коронавируса кэп 2’-O-метилтрансферазы nsp10 / nsp16. PLoS Патогены. 2011; 7 (5): e1002059. DOI: 10.1371 / journal.ppat.1002059. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Eckerle et al. (2010) Eckerle LD, Becker MM, Halpin RA, Li K, Venter E, Lu X, Scherbakova S, Graham RL, Baric RS, Stockwell TB, Spiro DJ, Denison MR. Неверность репликации мутантного вируса SARS-CoV по Nsp14-экзонуклеазе выявляется путем полного секвенирования генома.PLoS Патогены. 2010; 6 (5): e1000896. DOI: 10.1371 / journal.ppat.1000896. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Экор (2014) Экор М. Растущее использование лекарственных трав: проблемы, связанные с побочными реакциями, и проблемы в мониторинге безопасности. Границы фармакологии. 2014; 4: 177. DOI: 10.3389 / fphar.2013.00177. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Elfiky (2020) Elfiky AA. Натуральные продукты могут мешать прикреплению SARS-CoV-2 к клетке-хозяину. Журнал биомолекулярной структуры и динамики.DOI 2020: 10.1080 / 073.2020.1761881. Epub выходит в печать 27 апреля 2020 г. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Enmozhi et al. (2020) Энможи С.К., Раджа К., Себастин I, Джозеф Дж. Андрографолид как потенциальный ингибитор основной протеазы SARS-CoV-2: подход in silico. Журнал биомолекулярной структуры и динамики. 2020; 7 (42717): 1–7. DOI: 10.1080 / 073
.2020.1760136. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Frieman et al. (2009) Frieman M, Ratia K, Johnston RE, Mesecar AD, Baric RS.Тяжелый острый респираторный синдром, коронавирус, папаин-подобная протеаза, убиквитин-подобный домен и каталитический домен регулируют антагонизм передачи сигналов IRF3 и NF-kappaB. Журнал вирусологии. 2009. 83 (13): 6689–6705. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] Gadlage et al. (2010) Gadlage MJ, Sparks JS, Beachboard DC, Cox RG, Doyle JD, Stobart CC, Denison MR. Неструктурный белок 4 вируса гепатита мышей регулирует индуцированные вирусом модификации мембран и функцию комплекса репликации. Журнал вирусологии.2010. 84 (1): 280–290. DOI: 10.1128 / JVI.01772-09. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Годдард, Хуанг и Феррин (2005) Годдард Т.Д., Хуанг С.К., Феррин Т.Э. Программные расширения химеры UCSF для интерактивной визуализации больших молекулярных сборок. Состав. 2005. 13 (3): 473–482. DOI: 10.1016 / j.str.2005.01.006. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Гупта и др. (2013) Гупта С.К., Анурадха С.С., Нишал К.К.П., Сет П.К. Молекулярный докинг и моделирование исследований для изучения противовирусных соединений против белка оболочки вируса японского энцефалита.Анализ сетевого моделирования в информатике здравоохранения и биоинформатике. 2013. 2 (4): 231–243. DOI: 10.1007 / s13721-013-0040-z. [CrossRef] [Google Scholar] Хуанг и др. (2011) Huang C, Lokugamage KG, Rozovics JM, Narayanan K, Semler BL, Makino S. Белок nsp1 вируса трансмиссивного гастроэнтерита альфа-коронавируса подавляет трансляцию белка в клетках млекопитающих и в бесклеточных экстрактах клеток HeLa, но не в лизате ретикулоцитов кролика. Журнал вирусологии. 2011. 85 (1): 638–643. DOI: 10.1128 / JVI.01806-10. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Хуанг и др.(2020) Хуан И, Ян Ц, Сюй С-Ф, Сюй В., Лю С. Структурные и функциональные свойства шипового белка SARS-CoV-2: разработка потенциального антивирусного препарата для COVID-19. Acta Pharmacologica Sinica. 2020; 41 (9): 1141–1149. DOI: 10.1038 / s41401-020-0485-4. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Имберт и др. (2006) Imbert I, Guillemot J-C, Bourhis J-M, Bussetta C, Coutard B, Egloff M-P, Ferron F, Gorbalenya AE, Canard B. Вторая, неканоническая РНК-зависимая РНК-полимераза в коронавирусе SARS.EMBO Journal. 2006. 25 (20): 4933–4942. DOI: 10.1038 / sj.emboj.7601368. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Jayachandran et al. (2020) Джаячандран С.К., Анусуядеви М., Эсса М.М., Коронфлех М.В. Расшифровка информации о COVID-19: онтологический подход к разработке возможных терапевтических средств. Информатика в медицине разблокирована. 2020; 22: 100486. DOI: 10.1016 / j.imu.2020.100486. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Куба и др. (2005) Куба К., Имаи И, Рао С., Гао Х, Гуо Ф, Гуань Б., Хуан И, Ян П, Чжан И, Дэн В., Бао Л., Чжан Б., Лю Г, Ван З, Чаппелл М., Лю Ю. , Чжэн Д., Лейббрандт А., Вада Т., Слуцкий А.С., Лю Д., Цинь С., Цзян С., Пеннингер Дж. М..Решающая роль ангиотензин-превращающего фермента 2 (ACE2) в повреждении легких, вызванном коронавирусом SARS. Природная медицина. 2005. 11 (8): 875–879. DOI: 10,1038 / нм1267. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Lantz et al. (1991) Lantz I, Glamsta EL, Talback L, Nyberg F. Геморфины, полученные из гемоглобина, обладают ингибирующим действием на активность ангиотензинпревращающего фермента. Письма FEBS. 1991. 287 (1–2): 39–41. DOI: 10.1016 / 0014-5793 (91) 80011-Q. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Летко, Марци и Мюнстер (2020) Летко М., Марци А., Мюнстер В.Функциональная оценка входа в клетки и использования рецепторов для коронавирусов SARS-CoV2 и других линий B beta. Природная микробиология. 2020; 5 (4): 562–569. DOI: 10.1038 / s41564-020-0688-у. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Ли (2016) Ли Ф. Структура, функция и эволюция шиповых белков коронавируса. Ежегодный обзор вирусологии. 2016; 3 (1): 237–261. DOI: 10.1146 / annurev-virology-110615-042301. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Ли и др. (2005) Ли Ф, Ли В., Фарзан М., Харрисон С.Структура домена связывания рецептора шипа коронавируса SARS в комплексе с рецептором. Наука. 2005; 309 (5742): 1864–1868. DOI: 10.1126 / science.1116480. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Ли и др. (2003) Li W, Moore MJ, Vasilieva N, Sui J, Wong SK, Berne MA, Somasundaran M, Sullivan JL, Luzuriaga K, Greenough TC, Choe H, Farzan M. Ангиотензин-превращающий фермент 2 является функциональным рецептором для Коронавирус SARS. Природа. 2003. 426 (6965): 450–454. DOI: 10,1038 / природа02145. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Лю и др.(2015) Лю Дж, Юэ И, Ван Дж, Ян Х, Лю Р., Сунь Й, Ли Х. Изучение взаимодействия между сывороточным альбумином человека и тремя производными фенантридина: флуоресцентная спектроскопия и вычислительный подход. Spectrochimica Acta Часть A: Молекулярная и биомолекулярная спектроскопия. 2015; 145: 473–481. [PubMed] [Google Scholar] Лу и др. (2020) Лу Р, Лу Р, Чжао Икс, Ли Дж, Ниу П, Ян Би, Ву Х, Ван В, Сон Х, Хуан Би, Чжу Н, Би Й, Ма Х, Чжан Ф, Ван Л, Ху Т , Zhou H, Hu Z, Zhou W, Zhao L, Chen J, Meng Y, Wang J, Lin Y, Yuan J, Xie Z, Ma J, Liu WJ, Wang D, Xu W, Holmes EC, Gao GF, Wu Дж., Чен В., Ши В., Тан В.Геномная характеристика и эпидемиология нового коронавируса 2019 года: значение для происхождения вируса и связывания с рецептором. Ланцет. 2020; 395 (10224): 565–574. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] Лу и др. (2020) Лу Р, Чжао X, Ли Дж, Ниу П, Ян Б., Ву Х, Ван В., Сун Х, Хуанг Б., Чжу Н. Геномная характеристика и эпидемиология нового коронавируса 2019 года: последствия для происхождения вируса и связывания рецепторов. Ланцет. 2020; 395 (10224): 565–574. DOI: 10.1016 / S0140-6736 (20) 30251-8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Манодж Кумар и др.(2014) Манодж Кумар, Дагар А., Гупта В.К., Шарма А. Исследования in silico стыковки биоактивных натуральных растительных продуктов в качестве предполагаемых антагонистов DHFR. Исследования в области медицинской химии. 2014; 23: 810–817. [Google Scholar] Mohideen (2021) Mohideen AKS. Молекулярный стыковочный анализ фитохимического тимохинона в качестве терапевтического агента на белке оболочки SARS-Cov-2. Биоинтерфейсные исследования в прикладной химии. 2021; 11 (1): 8389–8401. DOI: 10.33263 / BRIAC111.83898401. [CrossRef] [Google Scholar] Муффук и др. (2020) Муффук С., Муффук С., Муффук С., Хамбаба Л., Хаба Х.Флавонолы как потенциальные противовирусные препараты, нацеленные на протеазы SARS-CoV-2 (3CL pro и PL pro ), спайковый белок, РНК-зависимую РНК-полимеразу (RdRp) и рецептор ангиотензинпревращающего фермента II (ACE2) European Journal of Pharmacology . 2020; 891: 173759. DOI: 10.1016 / j.ejphar.2020.173759. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Муруган, Пандиан и Джеякантан (2020) Муруган Н.А., Пандиан С.Дж., Джеякантан Дж. Вычислительное исследование фитохимических веществ Andrographis paniculata для оценки их эффективности против SARS-CoV-2 по сравнению с известными противовирусными соединениями в испытаниях лекарственных средств.Журнал биомолекулярной структуры и динамики. 2020; 35: 1–12. DOI: 10.1080 / 073.2020.1777901. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Накамура и др. (2010) Накамура К., Секин Ю., Оучи Ю., Цудзи М., Йошикава Е., Футацубаши М., Цучия К.Дж., Сугихара Г., Ивата Ю., Сузуки К., Мацудзаки Н., Суда С., Сугияма Т., Такей Н., Мори Н. Серотонин мозга. и связывание переносчиков дофамина у взрослых с высокофункциональным аутизмом. Архив общей психиатрии. 2010. 67 (1): 59–68. DOI: 10.1001 / archgenpsychiatry.2009.137.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Накви и др. (2020) Накви ААТ, Фатима К., Мохаммад Т., Фатима У, Сингх И.К., Сингх А., Атиф С.М., Харипрасад Г., Хасан Г.М., Хасан М.И. Понимание генома SARS-CoV-2, структуры, эволюции, патогенеза и лечения: подход структурной геномики. Biochimica et Biophysica Acta. 2020; 1866 (10): 165878. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] Okimoto et al. (2009) Окимото Н., Футацуги Н., Фудзи Х., Суэнага А., Моримото Г., Янаи Р., Оно Y, Наруми Т., Тайджи М., Случай D. Открытие высокоэффективных лекарств: компьютерный скрининг путем объединения стыковки и моделирования молекулярной динамики.Вычислительная биология PLoS. 2009; 5 (10): e1000528. DOI: 10.1371 / journal.pcbi.1000528. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Oostra et al. (2008) Oostra M, Hagemeijer MC, van Gent M, Bekker CPJ, te Lintelo EG, Rottier PJM, de Haan CAM. Топология и закрепление на мембране комплекса репликации коронавируса: не все гидрофобные домены nsp3 и nsp6 проникают через мембрану. Журнал вирусологии. 2008. 82 (24): 12392–12405. DOI: 10.1128 / JVI.01219-08. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Орхан и Сезер Сенол Дениз (2020) Орхан И.Е., Сезер Сенол Дениз Ф.Натуральные продукты как потенциальные средства борьбы с коронавирусами: могут ли они стимулировать структурные модели против SARS-CoV-2? Натуральные продукты и биоразведка. 2020; 10 (4): 171–186. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] Пан и др. (2014) Пан С.-И, Личер Г., Гао С.-Х, Чжоу С.-Ф, Ю З-Л, Чен Х-К, Чжан С.-Ф, Тан М-К, Сун Дж-Н, Ко К-М. Историческая перспектива традиционной медицинской практики коренных народов: современное возрождение и сохранение растительных ресурсов. Доказательная дополнительная и альтернативная медицина.2014; 2014: 20. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] Перлман (2016) Перлман А.Р. Коронавирусы: обзор их репликации и патогенеза. Методы молекулярной биологии. 2016; 1282: 1–23. DOI: 10.1007 / 978-1-4939-2438-7_1. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Ravi & Kannabiran (2016) Ravi L, Kannabiran K. Справочник по инструменту стыковки белок-лиганд: autodock4. Innovare Journal of Medical Science. 2016; 4: 28–33. [Google Scholar] Santos et al. (2020) Сантос И.А., Гроше В.Р., Бергамини ФРГ, Сабино-Силва Р., Жардим АЧГ.Противовирусные препараты против коронавирусов: препараты-кандидаты для лечения SARS-CoV-2? Границы микробиологии. 2020; 11: 1818. DOI: 10.3389 / fmicb.2020.01818. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Sarkar & Saha (2020) Sarkar M, Saha S. Структурное понимание роли нового белка SARS-CoV-2 E: потенциальная цель для разработки вакцины и др. терапевтические стратегии. PLOS ONE. 2020; 15 (8): e0237300. DOI: 10.1371 / journal.pone.0237300. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Серрано и др.(2009) Серрано П., Джонсон М.А., Чаттерджи А., Нойман Б.В., Джозеф Дж. С., Бухмайер М.Дж., Кун П., Вютрих К. Структура ядерного магнитного резонанса домена, связывающего нуклеиновую кислоту неструктурного белка коронавируса тяжелого острого респираторного синдрома 3. Журнал Вирусология. 2009. 83 (24): 12998–13008. DOI: 10.1128 / JVI.01253-09. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Simmons et al. (2013) Simmons G, Zmora P, Gierer S, Heurich A, Pöhlmann S. Протеолитическая активация шипового белка SARS-коронавируса: режущие ферменты на переднем крае антивирусных исследований.Противовирусные исследования. 2013. 100 (3): 605–614. DOI: 10.1016 / j.antiviral.2013.09.028. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Сонг и др. (2018) Song W, Gui M, Wang X, Xiang Y. Крио-ЭМ структура гликопротеина шипа коронавируса SARS в комплексе с его рецептором клетки-хозяина ACE2. PLoS Патогены. 2018; 14 (8): e1007236. DOI: 10.1371 / journal.ppat.1007236. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Спенсер и др. (2007) Спенсер Т.Дж., Бидерман Дж., Мадрас Б.К., Догерти Д.Д., Бонаб А.А., Ливни Э., Мельцер П.С., Мартин Дж., Раух С., Фишман А.Дж.Еще одно свидетельство нарушения регуляции переносчика дофамина при СДВГ: контролируемое исследование ПЭТ с использованием альтропана. Биологическая психиатрия. 2007. 62 (9): 1059–1061. DOI: 10.1016 / j.biopsych.2006.12.008. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Танака и др. (2012) Tanaka T, Kamitani W, DeDiego ML, Enjuanes L, Matsuura Y. Коронавирус nsp1 тяжелого острого респираторного синдрома способствует эффективному размножению в клетках за счет специфического отключения трансляции мРНК хозяина. Журнал вирусологии. 2012. 86 (20): 11128–11137.DOI: 10.1128 / JVI.01700-12. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Угур Марион и Марион (2020) Угур Марион I, Марион А. Молекулярное моделирование выявило восемь новых участков связывания в спайковом белке SARS-CoV-2, которые могут принимать лекарственные препараты. ChemRxiv. 2020 doi: 10.26434 / chemrxiv.13292768.v1. [CrossRef] [Google Scholar] Ван и др. (2020) Ван Ц., Хорби П.В., Хайден Ф.Г., Гао Г.Ф. Новая вспышка коронавируса, вызывающая озабоченность в области здравоохранения во всем мире. Ланцет. 2020; 395 (10223): 470–473. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] Waterhouse et al.(2018) Waterhouse A, Bertoni M, Bienert S, Studer G, Tauriello G, Gumienny R, Heer FT, de Beer TAP, Rempfer C, Bordoli L, Lepore R, Schwede T. SWISS-MODEL: моделирование гомологии белковых структур и комплексы. Исследования нуклеиновых кислот. 2018; 46 (W1): W296 – W303. DOI: 10,1093 / нар / gky427. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Wrapp et al. (2020) Wrapp D, Wang N, Corbett KS, Goldsmith JA, Hsieh CL, Abiona O, Graham BS, McLellan JS. Крио-ЭМ структура спайка 2019-нКоВ в конформации до слияния.Наука. 2020; 367 (6483): 1260–1263. DOI: 10.1126 / science.abb2507. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Райт и др. (2020) Wright WC, Chenge J, Wang J, Girvan HM, Yang L, Chai SC, Huber AD, Wu J, Oladimeji PO, Munro AW, Chen T. Пропионат клобетазола — это опосредованный гемом селективный ингибитор цитохрома P450 3A5 человека. . Журнал медицинской химии. 2020; 63 (3): 1415–1433. DOI: 10.1021 / acs.jmedchem.9b02067. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Юэ и др. (2016) Юэ И, Дун Цюй, Чжан И, Ли Х, Янь Х, Сунь И, Лю Дж.Синтез производных имидазола и спектральная характеристика связывающих свойств с сывороточным альбумином человека. Spectrochimica Acta Часть A: Молекулярная и биомолекулярная спектроскопия. 2016; 153: 688–703. [PubMed] [Google Scholar] Юэ и др. (2016) Yue Y, Sun Y, Yan X, Liu J, Zhao S, Zhang J. Оценка связывания перфторированного соединения с пепсином: спектроскопический анализ и молекулярный докинг. Chemosphere. 2016; 161 (39): 475–481. DOI: 10.1016 / j.chemosphere.2016.07.047. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Юэ и др.(2017) Yue Y, Zhao S, Liu J, Yan X, Sun Y. Исследование связывающих свойств дициандиамида с пепсином методами спектроскопии и стыковки. Chemosphere. 2017; 185: 1056–1062. DOI: 10.1016 / j.chemosphere.2017.07.115. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Юэ и др. (2017) Юэ И, Чжао С., Ян Ю.С., Ян Х, Лю Дж, Чжан Дж. Влияние аурантио-обтусина растительного экстракта на структуру пепсина: спектроскопическая характеристика и моделирование стыковки. Журнал люминесценции. 2017; 187: 333–339. DOI: 10.1016 / j.jlumin.2017.03.041. [CrossRef] [Google Scholar] Zhao (2020) Zhao YZ. Профили экспрессии одноклеточной РНК ACE2, предполагаемого рецептора Wuhan2019-nCov. bioRxiv bioRxiv. 2020 doi: 10.1101 / 2020.01.26.919985. [CrossRef] [Google Scholar] Чжун и др. (2003) Zhong NS, Zheng BJ, Li YM, Poon Xie, Chan ZH, Li KH, Tan PH, Chang SY, Xie Q, Liu JP, Xu XQ, Li J, Yuen DX, Peiris KY, Guan Y. причина тяжелого острого респираторного синдрома (SARS) в Гуандуне, Китайская Народная Республика, в феврале 2003 года. Lancet.2003. 362 (9393): 1353–1358. DOI: 10.1016 / s0140-6736 (03) 14630-2.2003-02. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Zhu et al. (2020) Zhu N, Zhang D, Wang W, Li X, Yang B, Song J, Zhao X, Huang B, Shi W, Lu R, Niu P, Zhan F, Ma X, Wang D, Xu W, Wu G , Гао Г.Ф., Тан В., Китайская группа по расследованию и исследованию нового коронавируса Новый коронавирус от пациентов с пневмонией в Китае, 2019. Медицинский журнал Новой Англии. 2020; 382 (8): 727–733. DOI: 10.1056 / NEJMoa2001017. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Zust et al.(2011) Зуст Р., Сервантес-Барраган Л., Хабьян М., Майер Р., Нойман Б. В., Зибур Дж., Шреттер К. Дж., Бейкер С. К., Барчет В., Даймонд М. С., Сидделл С. Г., Людвиг Б., Тиль В. Рибоза 2′-О- метилирование обеспечивает молекулярную подпись для различения собственной и чужой мРНК, зависящей от сенсора РНК Mda5. Иммунология природы. 2011; 12: 137–143. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Устойчивое развитие | Бесплатный полнотекстовый | Сила защиты бренда, мой друг! Стимулирование защиты бренда с помощью маркетинга цифрового контента
ELM и его эмпирическая проверка для защиты бренда в секторе гостеприимства вносят важный вклад в существующую литературу.С теоретической точки зрения, ELM основан на идее, что люди могут следовать двум альтернативным маршрутам обработки информации (в данном случае — маркетингу цифрового контента): центральным или периферийным. Используя эту структуру исследования, это исследование помогает объяснить, почему пользователи социальных сетей обрабатывают FGC, используя центральный маршрут, и почему они используют периферийный маршрут для UGC [32]. Согласно результатам нашего экспериментального исследования, доверие к источнику влияет на потребителей в индустрии гостеприимства таким образом, что пользовательский контент является более сильным предиктором защиты бренда по сравнению с FGC.Следовательно, это исследование объединяет ELM, теорию достоверности источника и теорию привязанности, обеспечивая интегративную основу для объяснения влияния DCM на поведенческое взаимодействие и защиту бренда. Наши результаты показывают, что когда пользователи социальных сетей чувствуют эмоциональную связь с DCM, они демонстрируют большую защиту бренда, и это происходит в случае UGC, поскольку он более вдохновляет [19] и воспринимается как некоммерческая, беспристрастная информация [42,127]. Что касается взаимодействия с клиентами, теория привязанности [27] показывает, как потребители связаны с брендами [88].Согласно нашим результатам, типы DCM также различаются по своему влиянию на поведенческое взаимодействие, поскольку пользовательский контент может создавать более тесные связи и большую привязанность с клиентами, отдавая предпочтение более прочным связям с поведенческим взаимодействием. Это исследование дополняет недавнюю работу по вовлечению клиентов [128,129], фокусируясь на одном из его аспектов и его влиянии на защиту бренда. Эти эмпирические данные также дополняют существующую литературу по теории достоверности источников [26], поскольку типы DCM также различаются по степени достоверности.Поскольку пользовательский контент не зависит от мотивации компаний, потребители считают, что он более надежен [69], чем FGC, поэтому пользователи будут более склонны демонстрировать большую защиту бренда. Мы также вносим свой вклад в существующую литературу, подтверждая, что относительное влияние типов DCM на защиту бренда опосредовано поведенческим взаимодействием. Как утверждается в литературе, положительный e-WOM является одним из результатов взаимодействия с клиентами [96,97], поэтому клиенты, демонстрирующие большую привязанность к брендам, будут демонстрировать большее поведенческое взаимодействие, а это, в свою очередь, также будет способствовать усилению защиты бренда, что является высшей формой положительного электронного журавля [60,130].Таким образом, когда пользователи подвергаются воздействию пользовательского контента, они входят в круг благоразумия, когда демонстрируют большее поведенческое взаимодействие, которое превращается в защиту бренда, и такое отношение к защите бренда создает положительный электронный WOM, который способствует дальнейшему вовлечению и созданию контента. вклад, который не получил должного внимания в литературе: теория когорт поколений. Согласно этой теории, маркетологи не должны нацеливаться на пользователей в целом, поскольку возраст может влиять не только на интересы и вкусы, но также на отношения и покупательское поведение [131, 132, 133].Наше исследование показывает, что существуют значительные различия во влиянии типов DCM на защиту бренда с использованием эффекта модерации. В частности, в условиях UGC поколение Z демонстрирует более сильную приверженность защите бренда, тогда как в условиях FGC поколение X проявляет наименьшую готовность к поддержке. Эти результаты согласуются с предыдущей литературой [132, 134, 135], где Z-ers больше полагаются на UGC, поскольку они больше используются для онлайн-среды и создания контента, больше доверяя пользовательскому контенту.Интересно, что наше исследование также показывает, что в условиях FGC именно поколение Y, а не поколение X, с наибольшей вероятностью будет защищать бренд. Это может быть связано с тем, что поколение Y считается первыми цифровыми аборигенами [136], поэтому они могут обрабатывать информацию веб-сайтов в пять раз быстрее, чем предыдущие поколения [134]. Однако они родились в цифровой среде 1.0, где UCG было мало. Следовательно, они выросли, доверяя информации компании, поскольку она была единственной доступной, и они менее склонны создавать, делиться и взаимодействовать с пользовательским контентом (по сравнению с Z-ers), поэтому они более рефлексивны, когда дело доходит до достоверность различной информации, которую они находят в Интернете [135]. Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера для приема файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.
Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
- Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г.,
браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
- Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.
Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.
Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Что сохраняется в файле cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт
не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к
остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
* KKP * New * Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? P
Descargar Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Libro Gratis PDF / EPUB leer en línea ==== >>> Скачать Pdf Aquí <=====
==== >>> Lee El Pdf Aquí <=====
Почему Запрещенные генетические исследования навахо народа навахо — ИСТОРИЯ Ваш браузер указывает, посещали ли вы эту ссылкуhttps: //www.sistory.com / news / why-the-navajo-nation-banned-генетическое-исследование По словам историка Маррена Сандерса, френологи использовали черепа коренных американцев, чтобы «доказать» что «индейцы были« более невежественными и мстительными, кровожадными и жестокими на войне », а также ДНК коренных американцев — University of Minnesota Press. Ваш браузер указывает, посещали ли вы эту ссылку. -american-dna В ДНК коренных американцев Ким ТоллБир показывает, что тестирование ДНК является мощным — и проблематичным — научным процессом, который полезен для определения близких биологических родственников. Но принадлежность к племени — это юридическая категория, которая возникла в зависимости от определенных социальных представлений и исторических контекстов. , набор понятий, который e Генетические тесты ДНК ntangles стоят на шаткой почве для определения коренных американцев. Ваш браузер указывает, посещали ли вы эту ссылку Итак, тест, который утверждает, что человек имеет коренное американское происхождение, может быть неправильным. Халл вскоре поняла, что это не все. Наборы предков коренных жителей не могут определить идентичность коренных американцев Древняя ДНК рассказывает историю разорения коренных американцев Ваш браузер указывает, посещали ли вы эту ссылку Рассказывает историю разорения коренных американцев. Анализируя ДНК самых первых американцев, новое исследование подтверждает разрушительное влияние контактов с европейцами на коренные народы. вы посетили эту ссылку https://ation com / article / archive / dna-tests-elizabeth-warren-native-american-race-science / Индейские нации являются политическими и культурными образованиями, продуктами истории, а не генами, и утверждениями белых людей о происхождении коренных американцев и утверждении, что индустрия ДНК является генетической историей коренных народов Америки. Ваш браузер указывает, посещали ли вы эту ссылку. в физической антропологии) делится на два резко отличных друг от друга эпизода: первоначальное заселение Америки примерно от 20 до 14 тысяч лет назад (20-14 тыс. лет назад) и контакты с европейцами после примерно 500 лет назад. генетических линий, зиготность Древняя ДНК подтверждает глубокие корни коренных американцев на Севере. Ваш браузер указывает, посещали ли вы эту ссылку. cemag org / news / 2018/11 / древний-днк-подтверждает-коренные-американцы-глубокие-корни-север-и-южная-америка Древняя ДНК подтверждает глубокие корни коренных американцев в Северной и Южной Америке Лиззи Уэйд 8 ноября 2018 г., 14:00 На протяжении десятилетий ученые могли описать заселение Америки только с помощью древней ДНК, показывающей таинственный генетический захват в Иберии. Ваш браузер указывает, посещали ли вы эту ссылку https://nationalgeographic com / science / article / древние-иберийцы-днк-из-степи -men-spainУдивительная ДНК, обнаруженная у древних людей из южной Европы Изучение генетики за 8000 лет из Испании и Португалии дает удивительно сложную картину происхождения жителей. Остатки коренных народов не принадлежат к — Scientific American Ваш браузер показывает, посещали ли вы это linkhttps scientificamerican com / article / коренные-остатки-не-принадлежат-науке / В 2004 году закон определяет коренных американцев как «принадлежащих к племени, народу или культуре, являющимся коренными народами Соединенных Штатов, или относящимся к ним». ученые, которые подал в суд, чтобы предотвратить репатриацию древней ДНК, обнаруживает новые ветви денисовского генеалогического древа Ваш браузер показывает, посещали ли вы эту ссылку Денисовское генеалогическое древо от Cell Press Изображение двойной спиральной структуры ДНК Его четыре кодирующие единицы (A, T, C, G) имеют розовый и оранжевый цвета. Другие результаты
Научное использование ДНК американских индейцев: A Культурное преступление? Descargar Libro:
PDF Descargar Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Libro Gratis En Línea
PDF Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление?
Gratis ePub Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Descargar
Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Аудиокнига Скачать
Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Читать онлайн
Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Epub
Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Pdf Полная электронная книга
Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Amazon Gratis
Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Аудиокнига
Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Pdf Online
Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Скачать Libro Gratis PDF / EPUB leer en línea
Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Mobi
Научное использование ДНК американских индейцев: культурное преступление? Pdf Gratis
Я не буду прыгать, но буду гулять по Ирфану по жизни и кино
Комал Панчаматия
Мумбаи, 6 марта (PTI) Актер Ирфан вернулся на свое место — в кино.
Ирфан был вдали от кино с момента выхода фильма «Карваан» в 2018 году, в том же году, когда у него была диагностирована нейроэндокринная опухоль.
53-летний актер прошел курс лечения от «редкого заболевания» в Великобритании и в апреле прошлого года ненадолго посетил Индию, чтобы снять фильм «Angrezi Medium», продолжение его фильма 2017 года «Hindi Medium».
Но Ирфан не торопится.
«Я не буду прыгать, но буду гулять», — сказал он.
Через социальные сети актер даже заранее проинформировал своих поклонников о своем отсутствии во время промоушена своего будущего фильма в будущем, а также попросил их «подождать» его возвращения.
В переписке с PTI по электронной почте Ирфан сказал, что он тронут бесконечной любовью и поддержкой, которые он получил.
«Благословения и невзгоды идут рука об руку, я слышал, и я испытал это, когда это случилось со мной.
« Желания отовсюду похожи на ощущение, будто вы идете под дождем и не несете любая смена одежды, и кто-то, кого вы даже не знаете, просто так забирает вас в свой зонтик «, — сказал он.
За свою более чем трехдесятилетнюю карьеру актер зарекомендовал себя как надежный и мощный исполнитель в Индии. киноиндустрия и Голливуд с «Хаасил», «Макбул», «Паан Сингх Томар», «Тезка», «Жизнь Пи» и многие другие.
За последние два года он узнал больше о своей семье — жене продюсера Сутапе, сыновьях Бабиле и Аяане и, что наиболее важно, о себе.
«Я очень близко познакомился с Ирфаном, Сутапой, Бабилом и Аяном, и я бы предпочел заняться расшифровкой этих сюрпризов жизни», — сказал он.
«Hindi Medium» оказался огромным хитом, и вернуться в колею для его продолжения, «Angrezi Medium», поначалу было нелегко для удостоенного национальной премии актера, который возвращался на съемочную площадку после перерыва в большем. чем год.
«Это было непросто с точки зрения внешнего вида. Я давно не говорил на марвари, хотя я из Раджастана.
» День первый был … Как это было … Как вы объясните? Это было необъяснимое ощущение. Я забыл о ремесле и был всем сердцем, сработало оно или нет, вам нужно будет сказать, — сказал он.
В «Средстве Ангрези» режиссера Хоми Ададжания Ирфан играет владельца кондитерской в Удайпуре, который делает отчаянные попытки осуществить мечту дочери об обучении в лондонском колледже.»Мард Ко Дард Нахин Хота» Слава Радхика Мадан играет дочь.
За кадром, по словам актера, он тоже может пойти на все ради своих детей, но он не станет бороться за них.
«Эмоционально, я могу идти за своими детьми на все, что угодно, но не буду бежать за них, потому что это их гонка. В профессиональном плане у меня нет целей как таковых. Я много работал, буду продолжать делать, просто стиль работы может изменяться, развиваться «, — сказал он.
Представленный Jio Studios и Прем Виджаном, «Angrezi Medium» является продуктом Maddock Films.
Также с участием Дипака Добрияла, Карины Капур Хан, Панкаджа Трипати, Ранвира Шори, Димпл Кападиа и Закира Хуссейна, фильм должен выйти на 13 марта. PTI KKP RDS
BK
BK
округа Мансехра — Газета
МАНСЕХРА, 18 июля: На заседании совета здесь в четверг был представлен годовой бюджет районного совета Мансехра, прогнозируемый в размере 1 267 784 млн рупий на 2002-2003 годы.
Район Назим, Мохаммад Азам Хан Свати представил бюджет, а Наиб Назим Шахзада Мохаммад Густасап Хан председательствовал на заседании.
Район Назым сообщил, что на текущие расходы было выделено 210,50 млн. Рупий, включая 77,283 млн. Рупий из местных средств. Однако он сказал, что зарплата государственных служащих, работающих на районном уровне, будет выплачиваться правительством провинции.
Азам Свати сказал, что районное правительство открыло свой баланс с 21,817 миллиона рупий в качестве местного фонда в прошлом году, добавив, что в текущем году расчетный доход районного совета составил 3 рупия.230 миллионов.
Он сказал, что на расходы, не связанные с развитием, было выделено 2,452 миллиона рупий, а 22,418 миллиона рупий были выделены как расходы на развитие.
Он сказал, что 1,80 миллиона рупий будут выплачены в счет обязательств по проектам, инициированным предыдущим районным советом.
Назвав баланс доходов и расходов неудовлетворительным, Азам Свати сказал, что 97% доходов районного совета приходилось на заработную плату сотрудников. Он отметил, что в текущем году районное правительство предложило несколько небольших налогов, заявив, что полученный таким образом доход будет потрачен на социальные проекты.
Говоря о достижениях районного правительства, Назим указал, что в рамках программы Хушал Пакистан (KKP) районное правительство получило 104,818 миллиона рупий, из которых 24,328 миллиона рупий было потрачено на 348 различных проектов, включая строительство зданий, дороги, схемы водоснабжения и водоотведения и мощение улиц.
В рамках Программы социальных действий (SAP) правительство округа получило 15,626 млн. Рупий, из которых 4,144 млн. Рупий было потрачено на завершение шести различных проектов развития.
Он сказал, что на модернизацию программы начального и базового образования районное правительство выделило 27,067 миллиона рупий. По его словам, из этой суммы 16,493 миллиона рупий было потрачено на завершение трех основных программ, в соответствии с которыми мебель была предоставлена всем школам района, помимо строительства классных комнат и ремонта.
Вивек Оберой: Не без ума от голливудских фильмов: Вивек Оберой | Hindi Movie News
Актер Вивек Оберой, озвучивший хинди в версии голливудского фильма «Новый Человек-паук 2», говорит, что он не очень хочет сниматься в голливудских фильмах и будет писать только качественные роли.
«Я не без ума от голливудских фильмов. Мне не интересно играть пятиминутную роль в фильме, который меня не волнует. Для меня важно качество роли, и если роль меня волнует, я делаю это, «Сказал Вивек.
Ряд болливудских актеров, таких как Анил Капур, Амитабх Баччан, Ирфан Хан, Анупам Кхер и другие, снялись в голливудских фильмах.
ЧИТАТЬ: Чрезвычайно высокие бюджеты для фильмов о супергероях: Вивек Оберой
Вивек говорит, что он согласился дублировать персонажа Электро в «Новом Человеке-пауке 2», поскольку он был большим поклонником супергероя, транслирующего веб-кастинг.
«Я всегда был большим поклонником комиксов и фильмов о Человеке-пауке. Макс Диллон / Электро — чрезвычайно увлекательный и сложный персонаж, и будет интересно сразиться с Человеком-пауком», — сказал он.
Слушайте песни Вивека Обероя на Gaana.com
Вивек сказал, что дубляж для него не новость. «Я был художником по дублированию, прежде чем стать актером. Я прошел подготовку для этого. Дубляж для фильма, в котором вы не играли, — другое дело. Это сложно дублировать на другом языке и с другим персонажем.Но это был забавный опыт », — добавил он.
В оригинальной версии фильма Электро играет оскароносный актер Джейми Фокс.
Вивек сыграл злодейские роли в таких фильмах, как «Компания», «Перестрелка в Лохандвале», «Рахт Чаритра», «Крриш 3».
ЧАСЫ: Вивек Оберой продвигает удивительного Человека-паука 2
«Нет никакого восхищения ролями злодеев. Мне нравится играть разных персонажей. У всех нас есть элемент серого, я люблю показывать это на экране», — сказал Вивек, добавив «Габбар Сингх», увековеченный Амджадом.