ПЦР диагностика туберкулеза — суть метода, плюсы и минусы

Полимеразная цепная реакция (далее ПЦР) — это высокоточный метод молекулярно-генетического исследования материла, который позволяет выявить у человека различные инфекционные заболевания и установить генотип возбудителя.

ПЦР для выявления различных заболеваний стала применяться в самом конце прошлого века. Первооткрывателем этого метода исследования является американский биохимик Кэри Муллис. Свое открытие он сделал в 1983 году. Но еще несколько лет понадобилось, чтобы доработать метод.

Суть метода

С помощью ПЦР-диагностики можно обнаружить фрагменты чужеродного ДНК в любой жидкой среде организма. На анализ могут быть взяты такие жидкости:

• Кровь.
• Слюна.
• Мокрота.
• Выделения из половых органов.
• Смывная жидкость бронхов.
• Желудочный сок.

Лечащий врач сам определяет, какую биологическую жидкость лучше взять на анализ при конкретном заболевании.

ПЦР-диагностика позволяет не только обнаружить микрофрагменты чужеродной ДНК, но и определить к какому конкретному виду она относится. То есть с помощью ПЦР можно не только точно установить возбудителя заболевания, но и выяснить к какому виду он принадлежит.

Процесс анализа ПЦР — очень сложный. Он состоит из нескольких этапов:

1. Сначала нужно обнаружить фрагменты вредоносной ДНК в предоставленном образце.
2. Копирование фрагмента ДНК. Маленького участка ДНК для анализа недостаточно, поэтому его копируют. Нуклеиновая кислота может копироваться в пробирке с помощью фермента полимеразы (вне живого организма). В пробирке образуется множество клонов, то есть происходит цепная реакция. Весь процесс происходит в три этапа под воздействием различных температур.
3. Когда генетического материала становится достаточно для исследования, тогда возбудитель определяется обычными методами.

Метод ПЦР очень точен и может выявить наличие любого возбудителя по небольшому фрагменту ДНК или РНК.

ПЦР-исследование туберкулеза

ПЦР-анализ на туберкулез является самым информативным методом диагностирования этого заболевания. Относительно туберкулеза этот метод позволяет не только установить наличие микобактерий в организме, но и определить к какому виду они принадлежат.

Результат ПЦР диагностики может быть простой и расширенный. В простом результате указывается только наличие/отсутствие микобактерии. Расширенный результат дает представление о дополнительных параметрах протекания заболевания. Правильно понять, что написано в результате анализа ПЦР может только фтизиатр.

Показания для проведения ПЦР-исследования туберкулеза

ПЦР-диагностика туберкулеза не проводится всем без исключения. Это объясняется дороговизной реактивов и недоступностью проведения исследования в некоторых отдалённых районах (в таких местах пользуются другими методами диагностики).

Показаниями для проведения ПЦР-исследования являются:

• Длительный контакт с больным туберкулезом.
• Беременность. ПЦР крови на туберкулез является самым быстрым и безопасным методом для беременной женщины.
• Экстренная ситуация. Например, необходимость срочного оперативного вмешательства, при котором нужно точно установить наличие/отсутствие туберкулеза в организме.
• Аллергическая реакция на туберкулиновые пробы.
• ВИЧ-инфекция.
• Невозможность диагностирования заболевания другими способами, при наличии явных признаков туберкулеза.
• Неоднозначные симптомы, которые не позволяют создать четкую клиническую картину заболевания (болезни верхних дыхательных путей, сопровождающиеся большим количеством мокроты, кровохарканьем и пр.).

Метод ПЦР, при всей своей сложности и дороговизне, проводится и расшифровывается в течение нескольких часов. Что делает этот метод золотым стандартом при диагностике туберкулезной инфекции.

Забор материала

Забор материала — это первый этап при выполнении ПЦР-исследования. Для того, чтобы выполнить качественный анализ, нужно соблюдать определенные правила по сбору материла:

• Для ПЦР мокроты на туберкулез нужно тщательно провести туалет полости рта. Делать это нужно вечером и утром перед анализом. Все это время не есть. Вечером выпить муколитическое средство для лучшего отхождения мокроты.
• Перед сдачей крови на ПЦР нужно не употреблять пищу в течение 8 часов. Лучше всего производить забор крови утором натощак. Курить перед забором крови также нельзя. Кровь берется из вены на локтевом сгибе руки в стерильную пробирку. В эту же емкость добавляется антикоагулянт, чтобы кровь оставалась жидкой. Смешивать антикоагулянт с кровью нужно очень аккуратно, не делая резких движений. Если кровь была взята не в лабораторных условиях, то она должна быть предоставлена лаборанту до истечения пятичасового срока. Иначе результат может быть не точным.
• Моча собирается в стерильную емкость утром, до приема пищи. Перед сбором мочи необходим тщательный туалет промежности.
• Остальные виды жидкостей (смывы с бронхов, спинномозговая жидкость) может собрать только специалист в условиях стационара.
• Перед забором жидкостей на ПЦР-исследование запрещено принимать некоторые препараты (например, прием некоторых антибиотиков нужно прекратить за две недели до забора материала).
• Требования к лаборатории, в которой проводится забор анализов на ПЦР очень строгие. Лаборатория должна быть стерильна, чтобы не произошло перекрестное загрязнение материала. В этом случае результаты могут быть ложноположительными.

ПЦР-тест на туберкулез — высокоточный информативный анализ. И требования к его проведению крайне строгие. Чтобы анализ получился, нужно соблюдать регламент.

Требования к ПЦР-лаборатории

Для работы в ПЦР-лаборатории приглашаются специально обученные врачи: бактериологи, вирусологи, микробиологи. Все они прошли дополнительное обучение для работы на сложном оборудовании.

Лаборатория должна иметь лицензию на выполнение работ связанных с бактериологически-опасными вирусами и бактериями.

В самой лаборатории должны быть выделены такие рабочие зоны:

• Зона приемки и сортировки проб.
• Зона подготовки проб. В этом помещении выделяются нуклеиновые кислоты из образцов материала.
• Зона проведения реакционных проб.
• Зона для учета результатов и расшифровки анализов.

Все помещения располагают последовательно. Допуск в эти зоны разрешен только работающим там сотрудникам, которые при входе соблюдают правила личной защиты от бактерий и вирусов.

Лучше, если есть возможность расположить лабораторию в отдельно стоящем здании с собственной системой вентиляции.

В лаборатории соблюдаются стерильные условия работы, чтобы избежать перекрестного загрязнения проб. Даже если один фрагмент чужеродной ДНК попадет в исследуемый материал, ПЦР его размножит, и анализ получится ложноположительным.

В каждой зоне лаборатории имеется свой набор оборудования и посуды для проведения исследований. Также имеются свои холодильники, которые не могут быть использованы в других целях, кроме хранения материала конкретной зоны исследований.

Использованные расходные материалы и остатки биологического материала уничтожаются специальными способами, в соответствии с инструкциями.

Плюсы ПЦР-диагностики

ПЦР-тест на туберкулез имеет множество плюсов, которые делают этот метод диагностики все более востребованным:

• Срок проведения. Несмотря на сложность проведения анализа, он готовится намного быстрее других лабораторных методов диагностики туберкулеза (около пяти часов). Это свойство анализа ПЦР становится особенно важным, когда анализ необходимо провести экстренно.
• Анализ ПЦР абсолютно безопасен и может проводиться беременным женщинам и детям.
• ПЦР-исследование можно сделать, когда по каким-то причинам нельзя выполнить другие методы диагностики.
• С помощью ПЦР-диагностики можно провести исследование любой биологической жидкости на выбор. В некоторых случаях это имеет большое значение.
• Позволяет обнаружить возбудителя на любой фазе заболевания. Даже после проведенного лечения, сохранившиеся остатки ДНК мертвых микобактерий будут обнаружены.
• Высочайшая чувствительность этого метода позволяет обнаруживать в биологическом материале даже единичные фрагменты ДНК микроорганизмов.
• Метод ПЦР позволяет не только обнаружить присутствие заболевания, но и может определить генотип возбудителя, отличив его от похожих микроорганизмов.
• ПЦР-исследование очень эффективно при рецидивирующем течении заболевания.
• Благодаря высочайшей чувствительности, анализ ПЦР может распознать микобактерии в организме человека, когда он только недавно инфицировался туберкулезом, задолго до появления клинических симптомов.

Казалось бы, метод ПЦР-диагностики содержит в себе только плюсы, но это не так.

Минусы ПЦР-диагностики

Минусы этого метода исследования тоже существенны. При выборе метода исследования туберкулеза это также стоит учитывать:

• Это дорогостоящий метод исследования. Для проведения ПЦР-диагностики нужна специально-оборудованная лаборатория. Оборудование для таких исследований стоит очень дорого, и не во всякой лаборатории оно имеется. В крайнем случае, можно обратиться в платную лабораторию.
• Сразу же после проведенного лечения метод ПЦР применять не рекомендуется. В крови пациента некоторое время сохраняется небольшое количество живых и мертвых микобактерий. Если провести анализ в этот период, он покажет ложноположительный результат.
• При мутациях микобактерий, анализ будет недостоверным, так как нормальная ДНК не сможет синтезироваться.
• Для ПЦР-исследования имеет значение правильный выбор биологической жидкости на анализ.
• Сверхчувствительность. Это тот случай, когда достоинство метода становится его недостатком. Если при проведении анализа в биологический материал каким-то образом попадет даже единичный фрагмент чужеродного ДНК, то ПЦР его размножит, и будет получен ложный результат.

Где пройти ПЦР-исследование на туберкулез

ПЦР-лаборатория имеется только в крупных противотуберкулезных диспансерах и диагностических центрах.

Объясняется это высокой стоимостью оборудования и высокими требованиями к содержанию лаборатории (реактивы, обработка).

Медицинские чиновники не сильно переживают из-за отсутствия ПЦР-лаборатории в каком-то конкретном населенном пункте, поскольку анализы на туберкулёз можно провести другими методами (культивирование микобактерий, микроскопическое исследование).

Если в населённом пункте нет бесплатной ПЦР-лаборатории, пациент по желанию может обратиться в платное учреждение.

В последнее время ПЦР-диагностика занимает все более прочные позиции в диагностике туберкулеза и других заболеваний, отодвигая на задний план другие методы диагностики.

какие сдавать, методы диагностики, где можно сдать

Микроскопия мазка подразумевает поиск возбудителя туберкулеза в отделяемой при кашле жидкости — мокроте.

Подробнее…

Метод ИФА подходит в качестве уточняющего шага, а также для диагностики скрыто протекающего и внелегочного туберкулеза.

Узнать цены…

Метод ПЦР позволяет обнаружить туберкулез даже тогда, когда все другие методики показывают отрицательный результат.

ПЦР: что это такое?

Эксперты констатируют: туберкулез в России — больше, чем просто болезнь. Это — неприятное социальное клеймо, которое, помимо физических страданий, становится для заболевшего человека источником серьезного психологического дискомфорта, а иногда и вынуждает на долгие месяцы и годы отказаться от привычного образа жизни, карьеры и планов на будущее.

Лечение туберкулеза — процесс сложный и длительный, а успех во многом определяется тем, насколько своевременно было выявлено заболевание. С учетом того, что никто из нас не застрахован от заражения, крайне важно регулярно проходить профилактическое скрининговое обследование, а при малейших подозрениях на недуг — обращаться к уточняющим анализам. Лишь такое ответственное поведение убережет вас от беды.

Когда сдать анализы на туберкулез и почему не стоит с этим медлить

По мнению обывателей, туберкулезом страдают лишь неблагополучные люди, проживающие на грани нищеты, а также выходцы из мест лишения свободы. Однако такой взгляд, как отмечают врачи, не имеет ничего общего с реальностью. Пациентами фтизиатров нередко становятся и учителя, и бизнесмены, и чиновники, и даже сами доктора. Ведь ключевой фактор, приводящий к развитию заболевания, — это отнюдь не финансовое благополучие, а состояние иммунитета. Если по каким-то причинам (стресс, сопутствующее заболевание, беременность, перенесенная операция, погрешности в питании) организм ослаблен — туберкулезная палочка не упустит шанса для атаки.

Важно знать
По статистике в России ежегодно туберкулез выявляют более чем у 80-ти тысяч человек. Каждый третий заболевший погибает от этой болезни. При этом важно понимать, что 90% жителей уже инфицированы — то есть в их легких живет возбудитель заболевания. Но сильный иммунитет не дает болезни развиться, поэтому лишь 1% инфицированных столкнется с какими-либо симптомами туберкулеза.

Болезнь развивается постепенно, начинаясь в лимфатических узлах, а затем распространяясь по органам и тканям организма. Чаще туберкулез поражает легкие, однако в некоторых случаях, а также при отсутствии лечения бактерии размножаются в пищеварительном тракте, органах мочеполовой системы, костях, коже, оболочках головного и спинного мозга и даже в глазах.

Коварная особенность возбудителя заболевания — микобактерии туберкулеза — умение быстро приобретать устойчивость к антибактериальным препаратам, без которых невозможно успешное лечение. Ученые вынуждены разрабатывать все новые и новые лекарства, что в конечном итоге делает терапию дорогой, а также приводит к неизбежным побочным эффектам, таким как поражение печени. Поэтому важным этапом диагностики туберкулеза является определение чувствительности выявленного возбудителя к различным антибиотикам, это помогает врачам подобрать эффективное лечение.

В силу широкого распространения туберкулеза в нашей стране (70% от общего числа российских больных инфекционными и паразитарными заболеваниями умирают именно из-за такого диагноза) выявление зараженных микобактериями среди детей и взрослых организовано достаточно хорошо.

Так, детям и подросткам до 18-ти лет время от времени проводят туберкулиновые пробы, знакомые нам всем как реакция Манту. После достижения совершеннолетия основным методом диагностики становится флюорография, которую каждый гражданин РФ обязан проходить раз в два года, а определенные категории людей — каждый год. Без такого рентгеновского снимка вас, скорее всего, не допустят к работе: результаты флюорографии необходимо предъявлять при трудоустройстве, а в дальнейшем — повторять процедуру в ходе регулярных медосмотров. Таким образом медики стараются минимизировать количество больных туберкулезом, которые не получают лечение и заражают окружающих.

Помимо этих правил, провериться на туберкулез нужно в случаях, если у вас появились симптомы, указывающие на вероятность развития заболевания (слабость, ночное потоотделение, необъяснимая потеря веса, небольшое повышение температуры по вечерам, увеличение лимфоузлов, хронический кашель). Иногда догадка о возможной причине такого недомогания возникает у врача, но вы и сами можете пройти обследование и сдать анализы, чтобы исключить вероятность инфекции.

Какие анализы сдают на выявление микобактерии туберкулеза

Выявить туберкулез можно несколькими путями. Основной задачей диагностики в детском возрасте является определение самого факта инфицирования, ведь в этот период вероятность, что бактерия, попавшая в организм, сразу вызовет патологический процесс, значительно выше, чем у взрослых. По этой причине ведущей методикой первичного скрининга остается туберкулиновая проба.

Оценить признаки поражения легких — наиболее типичное клиническое свидетельство начала заболевания — позволяет флюорография. В случае сомнений для уточняющей диагностики врач назначит рентген — развернутую визуализацию легочной ткани.

Лабораторные анализы крови и мочи помогают «поймать» возбудителя туберкулеза или зафиксировать следы его присутствия в организме. Их назначают для окончательного установления диагноза, а также в целях уточнения степени тяжести заболевания и чувствительности микобактерии к антибиотикам.

Туберкулиновая проба-тест

Туберкулин — это смесь белков, выделенных из погибших возбудителей туберкулеза. Введение небольшого количества такого препарата под кожу вызывает реакцию иммунитета у всех людей, однако в зависимости от состояния их здоровья она проявится по-разному. Так, у пациентов, в организме которых отсутствует микобактерия туберкулеза, через двое суток после пробы останется лишь незначительный след от укола (или его не будет вовсе). Если же размер красной отметины в месте введения туберкулина больше сантиметра или в этой области на коже появился гнойник — высока вероятность, что человек заражен.

Напомним, реакция Манту — метод первичной диагностики, он не может со 100%-ной вероятностью ответить на вопрос, болен ли человек туберкулезом, но позволяет выделить группу риска, которой предстоит пройти дополнительные обследования.

Аппаратные методы диагностики

Поскольку степень инфицирования населения в России микобактериями туберкулеза очень высока, у лиц старше 18-ти лет врачи по умолчанию допускают контакт с инфекцией. Задачей становится поиск больных со скрыто протекающей инфекцией, которые не знают о своем состоянии.

• Флюорография
  Оптимальным методом массовой диагностики в этом случае была и остается флюорография. Это — фотоснимок экрана рентгеновского аппарата, который можно получить очень быстро, не подвергая при этом человека значительной лучевой нагрузке. Поэтому кабинеты флюорографии есть практически во всех населенных пунктах нашей страны, а пройти процедуру можно за считанные минуты.
• Рентген и КТ
  В случае если человек не предъявляет никаких жалоб на самочувствие, а флюорография не выявила признаков изменения легочной ткани, врачи делают заключение, что туберкулеза у пациента нет. Но для более тщательной проверки легких может быть назначено развернутое рентгенографическое исследование (когда снимки делаются не только в прямой, но и в боковой проекции, а специалист лучевой диагностики тщательно изучает каждый сантиметр изображения), а также компьютерная томография (КТ), позволяющая с наибольшей степенью достоверности выявить визуальные признаки туберкулеза и оценить степень распространения патологического процесса.

Типы лабораторных анализов на туберкулез

Некоторые из лабораторных анализов, назначаемых при подозрении на туберкулез, являются специфическими — они проводятся только при этом заболевании. Другие же вы можете пройти в рамках общего медицинского осмотра: это ценный источник информации о вашем состоянии здоровья, который способен указать на наличие инфекционного процесса.

• Общий анализ крови/мочи является диагностическим стандартом при самых разных патологиях. В случае с туберкулезом исследование крови покажет повышение уровня лейкоцитов (сдвиг лейкоцитарной формулы влево) и ускоренную скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Изменения в анализе мочи будут наблюдаться при поражении микобактериями почек и мочевыводящих путей — в этом случае в образце обнаружатся признаки амилоидоза.
• Микроскопия мазка подразумевает поиск возбудителя туберкулеза в отделяемой при кашле жидкости — мокроте. Пациенты с подозрением на заболевание особым образом собирают мокроту в стерильную банку, после чего доставляют анализ в лабораторию. Там частицы мокроты переносят на предметное стекло и окрашивают методом по Цилю-Нильсену (при этом микобактерии туберкулеза приобретают хорошо различимый под микроскопом красный цвет, а большинство остальных микроорганизмов — синий).
• Классический культуральный метод. Если в ходе микроскопии лаборант выявил в мокроте микобактерии в достаточном количестве (более 5-ти в поле зрения), то следующим этапом лабораторной диагностики туберкулеза становится бактериологический посев образца в питательную среду. Будучи помещенными в оптимальные температурные условия, микроорганизмы быстро растут, что позволяет уточнить их вид и провести оценку чувствительности к различным типам антибиотиков.
• ИФА (метод иммуноферментного анализа) обнаруживает в крови у пациента антитела к туберкулезу, что указывает на инфицированность (но не обязательно на заболевание). Данный метод подходит в качестве уточняющего шага, а также для диагностики скрыто протекающего и внелегочного туберкулеза.
• ПЦР (метод полимеразной цепной реакции) выявляет ДНК микобактерий в различных средах — в сыворотке крови, моче, мокроте, спинномозговой жидкости и так далее. Это крайне точный метод, который с достоверностью в 100% может дать ответ на вопрос о том, присутствует ли возбудитель в конкретном органе человека. Чувствительность ПЦР так высока, что в некоторых случаях этот анализ позволяет обнаружить туберкулез даже тогда, когда все другие методики показывают отрицательный результат.
• Гистологические анализы (биопсия) подразумевают изъятие маленького фрагмента ткани из тела пациента с целью его обстоятельного микроскопического изучения. Биопсия является важным методом диагностики, особенно в ситуациях, когда исследовать биологические жидкости при помощи других анализов не представляется возможным (например, в случае вялотекущего туберкулеза костей).

Диагностика туберкулеза — сложная и крайне ответственная задача, но благодаря развитию современных медицинских технологий получить точную информацию о состоянии здоровья и ответ на вопрос «болею ли я туберкулезом?» — стало доступно каждому. При наличии малейших подозрений на инфекцию — не откладывайте визит к врачу, ведь от вашей сознательности зависит не только прогноз заболевания — но и благополучие окружающих.

Анализ на пцр туберкулез — диагностика

Анализ крови по ПЦР-методике на туберкулез – современная диагностика выявления абсолютно всех штаммов инфекционного заболевания и их очагов в биоматериале организма человека.

Анализ крови и мочи методикой ПЦР на туберкулез – является фактически обязательным исследованием скрытого проистекания заболевания, передающегося не только воздушно-капельным путем, но и посредством контакта с насекомыми. Туберкулез представляет собой достаточно специфическое инфекционное заболевание, очаг которого в тканях любого человека может находиться на протяжении многих лет, а выход распространения найти в течение нескольких недель. Именно потому сдавать анализы крови либо мочи на выявление туберкулеза стоит наряду с основными исследованиями.

Содержание статьи

Современный метод постановки диагноза: ПЦР-диагностика

Подобрать оптимальные варианты лечения туберкулеза довольно сложно. Основная причина затруднительного излечивания состоит в поздних сроках обнаружения инфекционного заражения. Диагностика ПЦР методикой представляет собой современный способ выявления очагов микобактерий в мизерном составе, когда сама болезнь еще не подала признаки присутствия. То есть до первых симптомов проявления туберкулеза, а особо до достижения состояния переносчика, допустимо диагностировать и излечить инфекцию.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) методика исследования лабораторным способом определения ДНК микобактерий, основанная на генетик-биологическом материале. В основе действия стоит особый фермент – полимераза, отвечающая за синтез молекул ДНК.

Применение полимеразы в исследовательских целях на небольших фрагментах биологического материала, выявляет ДНК бактерий существующих в минимальных количествах. Размножение ДНК молекул дает необходимый объем материала для исследований и определения типа бактерий, и ее функциональную принадлежность к определенному штамму туберкулеза.

Диагностика туберкулеза посредством полимеразной цепной реакции выдает фактически 100% результаты, что относит методику к наиболее достоверным способам выявления заболеваний бактериального и инфекционного типа. Не исключено, что в будущем пробу Манту и другие методы диагностирования для определения микобактерии туберкулеза, полностью сменит ПЦР-методика.

Примечательно, что анализ ПЦР является достаточно специфичным. Поясняется фактор тем, что при исследовании биологического материала на признак туберкулеза, диагностика вполне может выявить и другие типы инфекций, либо опровергает наличие таковых в легких.

Необходимость в диагностике методом ПЦР

Симптоматика проистекания такого заболевания, как туберкулез, весьма спорна. Например, у детей болезнь протекает без особых явных симптомов, как и в случае заражением иного рода бактериальной инфекцией. По сути, треть всего населения проживающего на планете заражены туберкулезом и являются носителями инфекции.

Существует несколько форм заболеваний:

• первичная – является ранней стадией;
• латентная – скрытая форма болезни, не является заразной;
• активная – заразная открытая форма заболевания;
• вторичная – имеет свойство распространяться через кровь по всему организму.

Специалисты не дают направление на ПЦР на туберкулез абсолютно всем пациентам, что проходят обследования. Причина тому дороговизна оборудования для поликлиник государственного значения, и высокая стоимость анализа в частных лабораториях.

При условии, что выявлены симптомы:

• продуктивного кашля, особо сильно проявляющегося в утреннее время;
• выделения мокроты во время кашля зеленоватого либо желтоватого оттенка;
• в процессе прогрессирования туберкулеза, в мокроте начинают появляться прожилки и сгустки крови.

Вышеперечисленные симптомы определенно указывают на присутствие в организме инфекции в открытой форме проистекания, которая требует незамедлительного лечения. Закрытая форма туберкулеза не имеет определенных симптомов на ранней стадии развития, тем не менее, существует ряд отличительных особенностей в самочувствии:

• ночное отделение пота;
• плохой аппетит;
• общий упадок сил;
• ощутимая потеря веса;
• в целом ощущение слабости и недомогания.

До назначения ПЦР диагностики, специалист может дать направления на анализы привычных исследований заболевания, которые так же оправдывают себя при постановке диагноза:

• осмотр и прослушивание пациента;
• сбор анамнеза, опрос;
• флюорография либо рентгенография;
• лабораторные исследования – бактериологический посев мокроты, анализ мочи, микроскопия мазка, общий анализ венозной крови;
• компьютерная диагностика.

ПЦР методика исследует инфекционные поражения туберкулезной палочкой легких фактически во всех биологических материалах человека.

Диагностика проводится фактически с фрагментами любого типа:

• венозной кровью либо с пальца;
• со сбором мочи;
• с выделениями мочеполовой системы;
• калом;
• мокротами;
• соскобами с любых органов;
• спинномозговой жидкостью;
• околоплодными водами при беременности.

На диагностирование методикой полимеразной цепной реакцией может направить специализированный медик с таких сфер, как терапевт, фтизиатр, педиатр, пульмонолог, венеролог, гинеколог, и прочие.

Микобактерии туберкулеза, определение ДНК (Mycobacterium tuberculosis, DNA) в сыворотке крови

Метод определения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».

Исследуемый материал Сыворотка крови

Доступен выезд на дом

Определение ДНК возбудителей туберкулеза, комплекса микобактерий: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Туберкулёз (от лат. tuberculum — бугорок) – распространённое, социально зависимое заболевание человека. Болеют им и животные. Возбудитель туберкулёза открыт Р. Кохом в 1882 г. Это кислотоустойчивые аэробные бактерии (74 вида) рода Мycobacterium, широко распространённые в почве, воде и у животных. У человека чаще всего возбудителем является Mycobacterium tuberculosis. Второй по частоте является Mycobacterium bovis. Оба вида очень устойчивы ко многим факторам внешней среды, а в организме очень долго остаются жизнеспособными и могут вызвать заболевание через многие годы после заражения. Очень важно, что микобактерии туберкулёза могут образовывать так называемые L-формы. Сохраняясь в организме, они создают противотуберкулёзный иммунитет.

Длительное время туберкулёз может протекать скрыто и обнаруживаться случайно, хотя нередко уже проявляются такие симптомы, как слабость, быстрая утомляемость, субфебрильная температура, ночная потливость, а в крови – анемия и лейкопения. В настоящее время, несмотря на все достижения антимикробной терапии, туберкулёз угрожает будущему нации. Поэтому все методы диагностики, особенно его латентных форм являются крайне важными.

Существует много методов лабораторной диагностики туберкулёза: микроскопия мазка (чаще всего для этого используют мокроту), классический культуральный метод, ИФА. Всем им присущи достоинства, но и определённые недостатки, в частности, обнаружение микобактерий только в случае их достаточного количества.

В последние годы для диагностики используют полимеразную цепную реакцию (ПЦР). Её высокая чувствительность позволяет обнаружить в исследуемом материале единичные клетки и даже их фрагменты ДНК. Метод исключает перекрёстные реакции и специфичность достигает 100%. ПЦР позволяет дифференцировать ограниченные и диссеминированные формы туберкулёза, особенно у детей даже при отрицательных результатах микробиологических исследований.

Аналитические показатели:

• определяемый фрагмент — специфичные участки ДНК микобактерий;
• специфичность определения — 100%;
• чувствительность определения- 100 копий ДНК микобактерий в образце.

Литература

1. Макаревич А.Э. Заболевания органов дыхания – М. Высшая школа, 2000. – 368 с.
2. Jacobs D. et al. Laboratory test handbook/ Lexi-Comp./2002 — pр. 828 — 829.

Расшифровка результатов ПЦР на туберкулез

Оглавление: [скрыть]

• Что такое ПЦР диагностика
• Ответственность перед сдачей анализов
• Процесс сбора анализов
• Как расшифровываются результаты

В последнее время ПЦР на туберкулез считается наиболее точным анализом, хотя и существуют другие методы. Данное заболевание набирает обороты, поэтому специалисты стараются изобрести новые технологии по выявлению палочки Коха в организме. Всем известно, что туберкулез является инфекционной болезнью, которая может передаваться как воздушно-капельным путем, так и через насекомых и т.д. поэтому крайне важно проводить периодические обследования.

Что такое ПЦР диагностика

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет всего в течение нескольких часов обнаружить возбудителя инфекции, причем выявить можно даже 1-2 молекулы среди огромного количества. Данный тест имеет массу достоинств, которые проявляются в следующем:

• 100%-ное выявление, так как в биологической пробе определяется от 10 до 100 клеток;
• специфичность ДНК МБТ является очень высокой;
• скорость анализ имеет от 4 до 4,5 часа;
• диагностика туберкулеза легких, что практически нереально для других методов;
• выявляется особенный фрагмент, который имеется только в конкретном возбудителе.

С помощью этой диагностики можно своевременно не только обнаружить инфекцию, но и изолировать человека и назначить ему соответствующее лечение. Особенно это касается туберкулеза, потому что точное расположение палочки Коха выявить проблематично. Кроме того, данный анализ способен исследовать устойчивость микобактерий к определенному медицинскому препарату, тем самым определяется метод лечения. Чтобы провести полимеразную цепную реакцию на устойчивость, используют гены, запоминающие невосприимчивость к некоторым лекарствам, после чего через двое суток можно получить результат. Это благотворно сказывается на профилактике заболевания.

Вернуться к оглавлению

Ответственность перед сдачей анализов

Следует отметить, что ПЦР выявляет возбудителей не только туберкулезной палочки, но и многих других заболеваний и даже ВИЧ. Анализ проводится с любой биологической жидкостью. Это могут быть:

• кровь;
• моча;
• кал;
• выделения половых органов;
• мокрота;
• жидкость спинномозговая;
• соскоб со всех органов.

Собранный материал помещается в специальный амплификатор, то есть реактор, где находятся некоторые ферменты, благодаря которым идет цепная реакция по удвоению ДНК инфекции. После этого производится расшифровка. Результат, как правило, бывает либо положительный, либо отрицательный.

Назначается диагностика туберкулеза в тех случаях, когда, во-первых, существуют основные симптомы болезни, во-вторых, человек очень длительное время болеет острыми заболеваниями дыхательных путей и, в-третьих, люди контактируют с больными туберкулезом. Но врач может провести данный анализ и при наличии сомнительных снимков после рентгенологического обследования.

На полимеразную цепную реакцию могут направить такие специалисты, как пульмонолог, фтизиатр, терапевт, а детей — педиатр. Конечно, есть правила, которые необходимо соблюдать пациенту перед сдачей, например, крови на туберкулез. Прежде всего, нельзя употреблять пищу за 4-5 часов до сдачи, а за сутки до этого нужно исключить из своего рациона жирные и аллергенные продукты. Также желательно не использовать антибиотики и личные средства гигиены в виде гелей.

Вернуться к оглавлению

Процесс сбора анализов

Но не только больной обязан соблюдать необходимые условия. То же относится и к врачам. Чтобы забор анализов на туберкулез был проведен правильно, нужно делать это только в стерильных условиях, иначе в жидкую среду могут попасть другие микроорганизмы, следовательно, интерпретация будет неверной. Все инструменты, приборы и контейнеры тоже должны быть в стерильном виде.

Итак, материал собирается в специальные контейнеры, которые при необходимости специалист дает пациенту. Например, моча собирается только первая после пробуждения человека утром. Но при этом необходимо провести утренние водные процедуры в соответствующих местах. Мочи для сбора достаточно от 20 до 30 мл. А вот синовиальную жидкость из спинного мозга и прочие сложные анализы берет только высококвалифицированный специалист, находящийся в стационарных условиях.

У женской половины человечества мазок берет только гинеколог на специализированном кресле, а у мужчин соскоб или мазок забирается из мочеиспускательного канала (из наружной части). Из зева мазок берет врач специальной лопаткой или другими инструментами. Кровь берется непосредственно из вены стерильными шприцами.

На последнем этапе сбора доктор с учетом всех требований транспортировки и хранения направляет образец в специальную лабораторию для дальнейшего исследования. Для этого персонал лаборатории помещает кровь или прочие мазки в пробирку, в которую заблаговременно добавлено вещество, препятствующее преждевременному старению образца.

В случае с кровью, что особенно важно, данное вещество не позволяет ей свернуться, следовательно, наличие сгустков исключено. Пробирки при этом не встряхиваются, так как можно повредить состояние эритроцитов. Это все нужно для того, чтобы легче и быстрее было определить все компоненты крови.

Потом кровь на туберкулез центрифугируют, чем отделяют от плазмы клеточный осадок, который и изучается под микроскопом. Изучив первоначальные данные, добавляют фермент (транскриптазу) и при определенном температурном режиме проводят следующую цепную реакцию. Благодаря этому образуются фрагменты генетического материала, которые и подвергаются расшифровке.

Вернуться к оглавлению

Как расшифровываются результаты

Не всегда анализ бывает правдивым. Ложноположительный результат бывает только в том случае, если не соблюдены все требования по подготовке и сдаче мазков и т.д. Именно поэтому следует как пациенту, так и врачам строго придерживаться всех правил, о которых говорилось выше.

Расшифровка может быть как простой, так и сложной. К первой относится определение «отрицательно» или «положительно», что свидетельствует о том, что при отрицательной расшифровке пациенту не о чем беспокоиться, т.к. инфекций не обнаружено.

При положительных результатах простой формы количество содержащихся возбудителей является ничтожно малым. Дело в том, что в медицине существуют определенные нормы, благодаря которым можно определить степень устойчивости к заболеваниям.

Но в сложной расшифровке теста определяется конкретное содержание тех или иных микроорганизмов, что позволяет сделать самые точные выводы. Естественно, ни один пациент не сможет самостоятельно расшифровать все эти цифры, а врач способен подробно объяснить больному.

Именно эти цифры показывают, где расположены очаги, на какой стадии находятся и что является причиной возникновения заболевания туберкулезом.

На основании расшифровки специалисты назначают метод лечения и пр. Никогда не стоит забывать о том, что малейшее наличие возбудителей свидетельствует об их присутствии в организме. Поэтому рано или поздно инфекция может распространиться дальше и стадия туберкулеза увеличится. Не следует безответственно относиться к собственному здоровью, всегда следуйте рекомендациям специалистов.

вместо реакции Манту ребенку, общий, ИФА, клинический, биохимический, СОЭ, T-Spot тест, показатели крови у взрослых, детей, что показывает, цифры, как называется на микобактерии, антитела к туберкулезу, можно ли определить

Анализ крови на туберкулез помогает выявить болезнь и приступить к лечению. Туберкулез – сложное, опасное для здоровья и жизни заболевание. Специфика болезни заключается в длительном отсутствии симптоматической картины и возможности возбудителя распространяться с кровью и лимфой по всему организму. Поэтому важно проходить обследование, которое позволит избежать тяжелых осложнений.

Когда нужен анализ

Обследование на туберкулез у детей осуществляется с помощью Манту, которое проводится ежегодно. Но есть ситуации, когда требуется сдать анализ крови на туберкулез вместо Манту с целью получения развернутого ответа. К таким показаниям относятся тревожные признаки, появление которых может свидетельствовать о наличии заболевания:

• постоянное чувство слабости и сонливости;
• быстрая утомляемость даже после незначительной физической нагрузки;
• уменьшение массы тела без видимых причин;
• повышенная температура тела, удерживающаяся на отметке +37°C и часто повышающаяся к вечеру;
• хронический кашель неустановленной этиологии;
• иммунодефицитные состояния, при которых риск инфицирования увеличивается.

Анализ крови вместо Манту сдается и тогда, когда был контакт с инфицированным человеком. Кроме того, регулярно необходимо сдавать кровь на туберкулез людям, перенесшим раньше данное заболевание. Болезнь характеризуется высоким риском рецидивов, особенно если есть провоцирующие факторы.

Виды

Для определения патологии в организме используется множество лабораторных методик. Если подозревают развитие заболевания, обязательно проводится анализ биоматериала. Существует 3 основных способа исследования крови:

1. Общий – помогает определить, есть ли в организме воспалительный очаг и степень его выраженности.
2. Биохимический – по анализу выявляется более точное месторасположение воспалительного очага и стадия.
3. ИФА на туберкулез – определяет наличие антител к палочке Коха.

Эти лабораторные исследования являются первыми, проводимыми в рамках диагностики туберкулеза. Помимо них, проводится исследование мокроты на микобактерии. Если инфицирование палочкой Коха произошло, и заболевание начало развиваться, в биологическом материале будут выявлены микобактерии.

Исследование крови не является точным в диагностике туберкулеза, т. к. результаты показывают общие отклонения в ее биохимическом составе, а это является характерным признаком ряда воспалительных и инфекционных заболеваний, в т. ч. и инфицирования МБТ (палочкой Коха).

Если исследование крови показало ряд отклонений, это еще не означает, что произошло заражение туберкулезом. Для постановки точного диагноза проводится анализ мокроты и слюны, а также рентген и флюорография. Только по результатам всех анализов врач может поставить точный диагноз и назначить лечение.

Общий анализ крови

Этот метод выявляет различные патологические состояния, сопровождающиеся воспалительными процессами. Туберкулез общий анализ крови может и не выявить. Задача данного метода – определение в организме очага воспаления, на появление которого указывает такой признак, как повышенная температура тела.

Если есть воспалительные очаги, это отразится на показателе СОЭ – скорости оседания эритроцитов. Чем выше будет этот уровень, тем сильнее и обширнее патологический процесс. ОАК при туберкулезе не показывает точной локализации воспаления. Поэтому общий анализ крови при туберкулезе легких является лишь первым звеном в цепи комплексной диагностики, указывающим на наличие патологии.

Биохимический анализ

Исследование может быть полезно с точки зрения диагностики в том случае, если заболевание протекает в острой стадии. Тогда будет выявлен пониженный коэффициент альбумин-глобулина. Если заболевание протекает в хронической стадии либо находится в инкубационном периоде, никаких отклонений выявлено, скорее всего, не будет.

Биохимический анализ, заменяющий общее исследование, не является достаточно информативным для выявления такого заболевания, как туберкулез.

Биохимический анализ крови не покажет наличие в организме палочки Коха, как и общий анализ крови при туберкулезе у детей и взрослых. Но это исследование может указать на ряд биологических и химических изменений в крови, происходящих при развитии туберкулеза.

ИФА

ИФА, в отличие от общего и биохимического обследования, дает более развернутый ответ. ИФА-тест на туберкулез имеет такое преимущество, как проверка большего количества показателей крови.

Задача иммуноферментного анализа – определить наличие антител, которые вырабатываются при попадании в организм патогенного возбудителя. Чем выше уровень антител, тем больше вероятность того, что произошло инфицирование палочкой Коха.

Анализ ИФА на туберкулез имеет недостаток – отличается низкой чувствительностью. В связи с этим использовать его как один из способов диагностики туберкулеза рекомендуется только в районах, где уровень заболевания низкий.

ПЦР

Если обследование крови на антитела к возбудителю туберкулеза указывает на превышение этого показателя, для получения развернутой информации дополнительно проводится ПЦР-исследование. Этот клинический анализ в определении туберкулеза имеет наибольшую точность и информативность. Называется данный метод – полимеразная цепная реакция. Задача – определение ДНК-цепочки микробактерий. ПЦР может показать:

ПЦР-диагностика проводится периодически в процессе лечения, чтобы проверить эффективность назначенной терапии и наличие положительной динамики. Несмотря на то что данный анализ является наиболее точным в лабораторной диагностике туберкулеза, он имеет один недостаток: для проведения требуется сложное оборудование, которое есть не в каждой лаборатории. Влияет это и на стоимость анализа.

T-Spot TB диагностика

Название анализа расшифровывает так: Т – лимфоциты, спот – пятно, TB – туберкулез. Исследование проводится по крови пациента, у которого есть подозрение на инфицирование патогеном. Методика является одной из наиболее точных и информативных. Показания к проведению:

1. Ложноположительные реакции Манту.
2. При высоких рисках инфицирования, например, у медицинского персонала, который контактирует с пациентами, зараженными туберкулезом.
3. Подозрение на внелегочную форму болезни.

Анализ на туберкулез T-Spot выявляет возбудителя у людей, которые являются носителями, но у них заболевание по ряду причин не развивается. Подробнее читайте на https://protuberkulez.info/diagnostika/t-spot-test.html

Показатели крови при туберкулезе

Если в организме нет каких-либо патологических процессов, все показатели крови должны соответствовать норме. При туберкулезе показателями (основными) являются:

• СОЭ;
• антитела;
• лейкоциты;
• гемоглобин;
• эритроциты.

Узнать о наличии туберкулеза можно по тому, как изменяется число и концентрация данных показателей.

Нужно понимать, что только по тому, как изменились данные составляющие крови, установить точный диагноз невозможно. Чтобы определить болезнь, нужно проводить расшифровку анализа, основываясь на результатах инструментальной диагностики – рентгена и флюорографии.

СОЭ

Определение СОЭ при туберкулезе (скорости оседания эритроцитов) проводится в рамках ОАК. Данный показатель указывает на наличие воспалительного очага различной локализации. У взрослых людей и в детском возрасте нормы СОЭ отличаются:

• До 10 лет – максимум 10 мм/ч.
• У женщин до 50 лет – до 20 мм/ч.
• У мужчин до 50 лет – до 15 мм/ч.
• Женщины старше 50 – до 30 мм/ч.
• Мужчины старше 50 – до 20 мм/ч.

Повышенный СОЭ – это всегда повод для обращения к врачу. Поставить диагноз только по тому, насколько повышен показатель, невозможно. На наличие болезни с высокой долей вероятности указывают цифры до 80 мм/ч вне зависимости от возраста и половой принадлежности пациента.

Лейкоциты

К основным показателям крови, которые указывают на высокую вероятность инфицирования туберкулезом, относится лейкоцитарная формула. При попадании в организм палочки Коха в ней происходят определенные изменения:

1. Увеличение показателя нейтрофилов. Изменения происходят от 15% до 20% в абсолютном и относительном выражении.
2. Увеличение числа нейтрофилов палочкоядерного типа.
3. Снижение количества лимфоцитов – от 8% до 15%.
4. Проявление зернистости нейтрофилов, возникающее только при тяжелых или вялотекущих патологиях.
5. Увеличение от 10% до 18% моноцитов.

Сдвиги в формуле требуют проведения комплексной диагностики. При подозрении на заражение вывод о наличии или отсутствии заболевания делается по результатам инструментальных методов обследования.

Антитела

Организм человека всегда пытается самостоятельно бороться с любым патогеном, который попадает в него. Незамедлительно на проникновение болезнетворной микрофлоры реагирует иммунная система, начиная активно вырабатывать антитела.

При отсутствии заболевания или его возбудителей будут отсутствовать и антитела, т. к. иммунной системе не с чем бороться.

По такому принципу делается Манту ребенку, но наиболее точным является ИФА-анализ на туберкулез, на антитела. Исходя из определенной концентрации антител, можно сделать заключение о стадии болезни.

Эритроциты

Данный показатель может меняться только в случае, если туберкулез протекает в активной фазе. При незначительном размере воспалительных очагов и в случае их точечной локализации концентрация эритроцитов остается неизменной, либо уровень немного повышается.

Повышение эритроцитов в совокупности с другими лабораторными данными и результатами инструментальной диагностики с высокой долей вероятности указывает на развитие туберкулеза. При этом у пациента уже присутствуют достаточно выраженные признаки данного заболевания.

При остром течении болезни либо в запущенном случае происходит изменение не только количества клеток крови, но и их морфологии. Происходит развитие полихромазии и олигохромазии.

При патологии отмечается повышение уровня эритроцитов, которые еще не дозрели: около 1% от всего количества эритроцитарных клеток.

Гемоглобин

Данный параметр анализа, показывающий, что в организме происходят патологические процессы, изменяет свою концентрацию в сторону уменьшения только в запущенных случаях. Так же случается и при инфицировании туберкулезным возбудителем. Когда болезнь находится на начальной стадии или протекает без осложнений, гемоглобин остается на прежнем уровне либо имеет незначительные отклонения.

Развернутый анализ на туберкулез не покажет пониженного содержания гемоглобина, если болезнь носит локальный характер, а воспалительные очаги небольшие. Для сложного или острого течения характерным является развитие 3 видов анемии – апластической, мегалобластной и смешанной.

Возбудитель туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis-complex), качественное определение ДНК

array(19) { [«catalog_code»]=> string(6) «010601» [«name»]=> string(138) «Возбудитель туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis-complex), качественное определение ДНК» [«period»]=> string(1) «1» [«period_max»]=> string(1) «0» [«period_unit_name»]=> string(6) «к.д.» [«cito_period»]=> NULL [«cito_period_max»]=> NULL [«cito_period_unit_name»]=> NULL [«group_id»]=> string(4) «2542» [«id»]=> string(4) «1350» [«url»]=> string(29) «vozbuditel-tuberkuleza_010601» [«podgotovka»]=> string(882) «

Условия подготовки определяются лечащим врачом.

Моча: Провести туалет наружных половых органов. У женщин желательно закладывать тампон во влагалище перед сбором материала. У мужчин при мочеиспускании оттянув кожную складку освободить наружное отверстие мочеиспускательного канала. Моча собирается в стерильный контейнер (контейнер можно получить в регистратуре CMD).

Секрет предстательной железы: 2-3 дня половое воздержание, взятие осуществляется врачом-урологом.

» [«opisanie»]=> string(3445) «

Метод исследования: ПЦР

Туберкулез – хроническая инфекция, проявляющаяся поражением органов дыхания, суставов, костей, мочеполовых органов, кожи и т.д. Туберкулез у человека вызывают микобактерии туберкулеза (МБТ): M.tuberculosis, M.bovis, M.africanum, M.microti, M.canettii, M.caprae, M.pinnipedii, M. mungi, объединяемые в группу микобактерий, называемую Mycobacterium tuberculosis complex. Источником инфекции является больной человек, основной путь заражения – воздушно-капельный. В развитии инфекционного процесса большую роль играют неблагоприятные условия жизни, труда, а также факторы, влияющие на снижение иммунитета. При попадании микобактерий в организм, происходит их транспорт в региональные лимфатические узлы и формирование первичных туберкулезных комплексов с развитием гранулем, наиболее часто в легочной ткани. В ряде случаев возможно формирование очагов в почках, половых органах, костях. Клинически реактивный туберкулез характеризуется кашлем, часто с кровохарканием, субфебрильной температурой, снижением массы тела, слабостью.

Анализ на микобактерии туберкулеза методом ПЦР включает определение ДНК Mycobacterium tuberculosis-complex (M.tuberculosis, M.bovis, M.africanum, M.microti).

ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:

• Обследование лиц с подозрением на туберкулез

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения
ДНК Mycobacterium tuberculosis complex	Не обнаружено

Обнаружение ДНК свидетельствует о наличии инфекционного процесса.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«serv_cost»]=> string(3) «365» [«cito_price»]=> NULL [«parent»]=> string(2) «25» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(2) { [0]=> array(3) { [«cito»]=> string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(8) «Моча» } [1]=> array(3) { [«cito»]=> string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(54) «Секрет предстательной железы» } } }