Ослабленная акдс вакцина: Как применяют вакцины

Содержание

Вакцинация и иммунопрофилактика

Вакцинация — это самое эффективное и экономически выгодное средство защиты против инфекционных болезней, известное современной медицине.

Вакцинация — это введение в организм человека ослабленный или убитый болезнетворный агент для того, чтобы стимулировать выработку антител для борьбы с возбудителем заболевания.

Среди микроорганизмов, против которых успешно борются при помощи прививок, могут быть вирусы (например возбудители кори, краснухи, свинки, полиомиелита, гепатита А и В и др.) или бактерии (возбудители туберкулеза, дифтерии, коклюша, столбняка и др.).

Чем больше людей имеют иммунитет к той или иной болезни, тем меньше вероятность у остальных (неиммунных) заболеть, тем меньше вероятность возникновения эпидемии.

Выработка специфического иммунитета до защитного уровня может быть достигнута при однократной вакцинации (корь, паротит, туберкулез) или при многократной (полиомиелит, АКДС).

Ревакцинация (повторное введение вакцины) направлена на поддержание иммунитета, выработанного предыдущими вакцинациями.

АКДС, АДС и АДС-м вакцины

АКДС вакцина защищает против дифтерии, столбняка и коклюша.Содержит инактивированные токсины дифтерийных и столбнячных микробов, а также убитые коклюшные бактерии.

АДС-м — вакцина против дифтерии и столбняка, с уменьшенным содержанием дифтерийного анатоксина. Применяется для ревакцинации детей старше 6 лет и взрослых через каждые 10 лет.

Дифтерия. Инфекционное заболевание, при котором нередко возникает сильная интоксикация организма, воспаление горла и дыхательных путей. Кроме того, дифтерия чревата серьезными осложнениями — отеком горла и нарушением дыхания, поражением сердца и почек. Дифтерия нередко заканчивается смертью. Широкое использование АКДС вакцины в послевоенные годы во многих странах практически свело на нет случаи дифтерии и столбняка и заметно уменьшило число случаев коклюша. Однако, в первой половине 90-х годов в России возникла эпидемия дифтерии, причиной которой был недостаточный охват привиками детей и взрослых. Тысячи людей погибли от заболевания, которое можно было предотвратить при помощи вакцинации.

Столбняк. При этом заболевании возникает поражение нервной системы, вызванное токсинами бактерий, попадающих в рану с грязью. Столбняком можно заразиться в любом возрасте, поэтому очень важно поддерживать иммунитет регулярными (через каждые 10 лет) прививками от этого заболевания.

Коклюш. При коклюше поражается дыхательная система. Характерным признаком заболевания является спазматический «лающий» кашель. Осложнения чаще всего возникают у детей первого года жизни. Наиболее частой причиной смерти является присоединившаяся вторичная бактериальная пневмония (воспаление легких). Пневмония возникает у 15% детей, заразившихся в возрасте до 6 месяцев.

Вакцина АКДС вводится внутримышечно в ягодицу или переднюю поверхность бедра.

Вакцинация АКДС является обязательным условием при устройстве ребенка в детский сад.

После проведения вакцинации и ревакцинации согласно календарю прививок проводятся ревакцинации взрослым каждые 10 лет вакциной АДС-М.

Вакцина против полиомиелита

Полиомиелит – в прошлом широко распространенная кишечная вирусная инфекция, грозным осложнением которой были параличи, превращающие детей в инвалидов. Появление вакцин против полиомиелита позволило успешно бороться с этой инфекцией. У более чем 90% детей после вакцинации вырабатывается защитный иммунитет.

Вакцинация против полиомиелита является обязательным условием при устройстве ребенка в детский сад. Проводится согласно календарю прививок. Ревакцинация взрослого человека рекомендуется в случае, если он выезжают в опасные по полиомиелиту районы. Взрослых людей, не получивших вакцинацию в детстве и не защищенных против полиомиелита, рекомендуется прививать.

Вакцина против туберкулеза

Туберкулез — инфекция поражающая преимущественно легкие, но процесс может затрагивать любые органы и системы организма. Возбудитель туберкулеза — микобактерия Коха — очень устойчива к применяемому лечению.

Для профилактики туберкулеза применяют БЦЖ вакцину. Она представляет собой живые, ослабленные микобактерии туберкулеза. Вакцинация проводится обычно в родильном доме.

Вводится внутрикожно в верхнюю часть левого плеча. После введения вакцины образуется небольшое уплотнение, которое может нагноится и постепенно, после заживления, образуется рубчик (как правило весь процесс длится от 2-3 месяцев и дольше). Для оценки приобретенного иммунитета, в дальнейшем, ребенку ежегодно проводится туберкулиновая проба (реакция Манту).

Вакцина против кори

Корь — вирусное заболевание, чрезвычайно заразное. При контакте с больным корью заболевают 98% непривитых или не имеющих иммунитета людей.

Вакцина готовится из живых ослабленных вирусов кори. Вакцина вводится подкожно под лопатку или в области плеча. Вакцинация против кори является обязательным условием при устройстве ребенка в детский сад. Вакцинация и ревакцинация проводится согласно календарю прививок

Вакцина против паротита (свинки)

Паротит — вирусное заболевание, поражающее преимущественно слюнные железы, поджелудочную железу, яички. Может быть причиной мужского бесплодия и осложнений (панкреатит, менингит). Иммунитет после однократной вакцинации, как правило, пожизненный. Вакцина готовится из живых ослабленных вирусов паротита. Вводится подкожно, под лопатку или в плечо.

Вакцина против гепатита B

Гепатит B — вирусное заболевание, поражающее печень. Опасным последствием этой болезни является ее затяжное течение с переходом в хронический гепатит, цирроз и рак печени. Заболевание передается половым путем и через контакт с кровью больного или носителя вируса гепатита В. Для заражения достаточно контакта с ничтожным количеством крови. Вакцина против гепатита В готовится генно-инженерными методами. Вводится внутримышечно в бедро или плечо.

Иммунизируются новорожденные, дети первого года жизни и взрослые из групп риска (медицинские работники, пациенты на гемодиализе или получающие в больших количествах препараты крови, лица поживающие в районах с высоким уровнем хронического носительства вируса гепатита В, наркоманы, гомосексуалисты, здоровые лица, имеющие в качестве полового партнера носителя HBs антигена, любые сексуально активные люди, имеющие большое число половых партнеров, индивидуумы с длительным сроком заключения в тюрьмах, пациенты учреждений для лиц с отставанием в развитии).

Отводы от прививок

Нередко принимаются решения о невозможности вакцинации детей с ослабленным здоровьем. Однако по рекомендации Всемирной Организации Здравоохранения именно ослабленные дети должны прививаться в первую очередь, так как они наиболее тяжело болеют инфекциями. В последнее время перечень заболеваний, считавшихся противопоказаниями для вакцинации, существенно сужен.

Абсолютными противопоказаниями для прививки являются: тяжелая реакция на предшествующее введение данного препарата, злокачественное заболевание, СПИД.

Временными противопоказаниями для прививок всеми вакцинами служат острые лихорадочные заболевания в периоде разгара или обострение хронических болезней. Плановая вакцинация откладывается до окончания острых проявлений заболевания и обострения хронических заболеваний. При нетяжелых ОРЗ, острых кишечных заболеваниях и др. прививки проводятся сразу же после нормализации температуры тела.

Вакцина «Инфанрикс гекса» (дифтерия, столбняк, коклюш, полиомиелит, гепатит В, гемофильная инфекция), Бельгия в медицинском центре «Академия здоровья»

Стоимость услуги

2700р 3400р

МЫ ОСУЩЕСТВЛЯЕМ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОЕ СОПРОВОЖДЕНИЕ: ЕСЛИ ВЫ СВЯЗЫВАЕТЕ НЕДОМОГАНИЕ С ПРОВЕДЕННОЙ У НАС ПРИВИВКОЙ, ВЫ ВСЕГДА МОЖЕТЕ НАМ ПОЗВОНИТЬ ИЛИ ОБРАТИТЬСЯ В МЕДИЦИНСКИЙ ЦЕНТР НА ПРИЕМ К ВРАЧУ — ПЕДИАТРУ БЕСПЛАТНО! Вакцина Инфанрикс Гекса — одна из самых современных комбинированных вакцин, которая позволяет единовременно защитить ребенка от шести опасных инфекций. Вакцина успешно используется в Европе около 10 лет и отвечает всем требованиям ВОЗ к производству биологических веществ. Инфанрикс Гекса представляет собой адсорбированную ацеллюлярную (бесклеточную) коклюшно-дифтерийно-столбнячную вакцину, инактивированную полиомиелитную вакцину, рекомбинантную вакцину против гепатита В и вакцину для профилактики Haemophilus influenzae тип b. В своем составе вакцина Инфанрикс Гекса содержит антигены дифтерийного и столбнячного анатоксина, компоненты клеточной стенки возбудителя коклюша, инактивированный вирус полиомиелита 1,2,3 типов, капсульные полисахариды гемофильной палочки тип b, и генно-инженерный HbsAg (антиген гепатита В). При помощи самых современных технологий при производстве Инфанрикс Гекса удалось снизить количество белковых молекул в 30 раз (по сравнению с цельноклеточными вакцинами — АКДС) без потери иммуногенности, что доказано в многочисленных клинических исследованиях для каждого компонента. При равнозначной эффективности эффективности с цельноклеточными вакцинами (АКДС), количество побочных реакций после вакцинации Инфанрикс Гекса значительно уменьшается. Наличие шести компонентов в одной вакцине позволяет максимально сократить количество уколов, тем самым значительно снижается количество осложнений и неприятных ощущений у ребенка. ЧЕМ ИНФАНРИКС ОТЛИЧАЕТСЯ ОТ АКДС? Во-первых, АКДС не защищает от гемофильной инфекции, полиомиелита и гепатита B, а значит, против них нужно вакцинироваться дополнительно. Это означает более частые походы в поликлинику. Инфанрикс позволяет вакцинироваться от всех этих заболеваний одновременно, при этом частота поствакцинальных реакций — не выше, а ниже. Во-вторых, АКДС и вакцина против полиомиелита – цельноклеточные. Это значит, что вместе с ней в детский организм попадают ослабленные, но все еще живые бактерии. В составе вакцины Инфанрикс живых бактерий нет, что снижает вероятность постиммунизационной лихорадки. В каком возрасте проводится вакцинация Инфанрикс Гекса? Схему вакцинации этим препаратом составляет врач. При выборе сроков вакцинации ориентируются на сроки введения вакцины против гепатита. Обычно ее вводят при рождении, затем в 1 и 6 месяцев. Если все три первые вакцинации проводятся именно этим препаратом, возможна схема введения в 2, 3 и 4 месяца или 2, 4 и 6 месяцев. Также возможно провести препаратом Инфанрикс Гекса одну из вакцинаций (например, третью), если предыдущие проводились другими препаратами. Посоветуйтесь с педиатром, и он составит подходящую схему вакцинации для вашего ребенка.

Вакцинация

                                                                                                            

Вакцинация – это не что иное, как специфический иммунитет, созданный «своими руками», к определенным болезням, которые встречаются наиболее часто и имеют тяжелые последствия. Для создания вакцин организм нужно «познакомить» с ослабленным возбудителем, или частью его структуры. Для этого могут использовать убитых или ослабленных возбудителей или их белки–антигены.

В зависимости от заболевания и целей вакцинации существуют определенные временные интервалы для ревакцинации, чтобы добиться напряженного иммунитета и обезопасить себя.

Наименование услуги Цена, руб
Вакцинация против инфекций, вызванных пневмококком (ПНЕВМОВАКС-23) 2 950
Вакцинация против инфекций, вызванных пневмококком (ПРЕВЕНАР) 3 200
Вакцинация против дифтерии, столбняка, коклюша, полиомиелита, инфекций, вызванных гемофильной палочкой (ПЕНТАКСИМ) 3 750
Вакцинация от клещевого энцефалита 705
Вакцинация от клещевого энцефалита с выездом по городу 850
Вакцинация от клещевого энцефалита с выездом за пределы города 920
Вакцинация против кори, паротита, краснухи (ММР, с 12 месяцев)+ осмотр врача 1 700
Вакцинация против дифтерии, столбняка, коклюша (АКДС) 450
Вакцинация против гриппа (ИНФЛЮВАК, С 6-ТИ МЕСЯЦЕВ) 635
Вакцинация против кори (вакцина коревая культуральная живая) 750
Вакцинация против гриппа 635
Вакцинация против гриппа с выездом в пределах города 820
Вакцинация против дифтерии, столбняка (АДС-М) 300
Вакцинация от гепатита В (РЕКОМБИНАНТНАЯ ДРОЖЖЕВАЯ ЖИДКАЯ ВАКЦИНА) 450
ВАКЦИНАЦИЯ ПРОТИВ ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА 6, 11, 16 И 18 ТИПОВ (ГАРДАСИЛ) 9 850
ВАКЦИНАЦИЯ ПРОТИВ КРАСНУХИ (ВАКЦИНА ЖИВАЯ АТТЕНУИРОВАННАЯ) 350
Вакцинация от менингококковых инфекций (МЕНАКТРА, ОТ 9 МЕС ДО 55 ЛЕТ), 1 ДОЗА 7 000

Детский медицинский центр «До 16-ти»

«У меня, наверно, грипп:
Насморк, кашель, я охрип.
Даже сам я вижу — вырос
За три дня противный вирус»

Покидая материнский организм, ребенок остается один на один с инфекциями. Именно поэтому так важна детская вакцинация. Введение вакцины помогает организму ребенка сформировать свои собственные механизмы защиты от инфекционных агентов, окружающих его повсеместно.
Вакцинацией называется введение в организм человека ослабленных микроорганизмов или продуктов их жизнедеятельности. Цель процедуры проста: иммунная система ребенка «знакомится» с угрозами, которые ей предстоит отражать в будущем. Детская вакцинация – это своеобразная школа защиты для организма. Он с легкостью справляется с вводимой ослабленной инфекцией. Иммунная система распознает попавших в организм «врагов», вырабатывает специфические клетки и вещества для борьбы с ними и успешно их уничтожает.
Но основная польза детской вакцинации заключена в том, что иммунная система обладает памятью. И после первой встречи с болезнетворным (патологическим) микроорганизмом, она запоминает микроб и методы защиты от него. В дальнейшем, если в организм ребенка попадет такой же инфекционный агент из внешней среды, уже не ослабленный, как в вакцине, а полностью жизнеспособный, скорость иммунного ответа вырастает в разы. Это позволяет организму быстро и эффективно уничтожать инфекцию, не допуская развития заболеваний либо позволяя переносить болезнь в легкой форме.
Для каждого заболевания существует определенный возраст, в котором детская вакцинация будет наиболее эффективна. Кроме того, память иммунной системы не абсолютна, как, например, при вакцинации против гепатита. А это значит, что некоторые вакцины вводятся в несколько этапов, причем оптимальные сроки первичной и повторной вакцинации детей объединены в определенном графике, который называется календарем прививок. Министерство здравоохранения РФ утвердило Российский Национальный календарь профилактических прививок, в котором указан возраст ребенка, а также тип рекомендуемой вакцины. При его соблюдении ребенку обеспечивается максимально эффективная защита от многих опасных заболеваний. Прививки детям в первые годы жизни защищают их от наиболее тяжелых и опасных инфекционных болезней: туберкулез, гепатит В, полиомиелит, корь, краснуха, паротит, пневмококковая инфекция, коклюш, дифтерия, столбняк. Конечно, точное соблюдение всех сроков не всегда представляется возможным. Ребенок может заболеть или выбиться из графика вакцинации по иным причинам. В этом случае врачом-педиатром, наблюдающим ребенка, составляется индивидуальный график вакцинации.
Помимо вакцинации по национальному календарю, существует ряд вакцин, рекомендуемых Министерством Здравоохранения РФ в некоторых регионах или в определенные времена года. К примеру, сезонная вакцинация против гриппа защитит детей зимой и осенью, а прививка от клещевого энцефалита – весной и летом. Кстати, эта детская вакцина в Омске имеет особенное значение по причине широкой распространенности клещей-переносчиков энцефалита. Также для детей раннего возраста актуальна прививка против гемофильной инфекции, защищающая от менингита и пневмонии.
Детская вакцинация – совершенно безопасная и многократно проверенная процедура, при этом перед самой вакцинацией обязательна консультация педиатра. Это позволяет исключить любые риски постпрививочных осложнений. В нашем Центре применяются современные импортные вакцины, доказавшие свою безопасность и высокую эффективность как в отечественной, так и в европейской практике. Это такие препараты, как «Гардасил», «Инфанрикс», «Окавакс», «Пентаксим» и другие.

В рандомизированном исследовании живая аттенуированная четырехвалентная вакцина против денге TV003 хорошо переносится и обладает высокой иммуногенностью у субъектов, подвергшихся воздействию флавивируса до вакцинации

Abstract

Инфекция, вызываемая четырьмя серотипами вируса денге (DENV-1-4), является основной причиной болезней, передаваемых комарами. Клинически тяжелая болезнь денге чаще встречается, когда вторичная инфекция денге возникает после предшествующей инфекции гетерологичным серотипом денге. Другие флавивирусы, такие как вирус желтой лихорадки, вирус японского энцефалита и вирус Зика, также могут вызывать антитела, перекрестно реагирующие с DENV.По мере того как вакцины-кандидаты от денге становятся доступными в эндемичных условиях и для лиц, получивших вакцины от других флавивирусов, важно изучить безопасность и иммуногенность вакцины в этих популяциях, подвергшихся воздействию флавивирусов. Мы провели рандомизированное контролируемое испытание Национального института здоровья — кандидата живой аттенуированной четырехвалентной вакцины против лихорадки денге (TV003) у 58 человек, ранее имевших контакт с флавивирусной инфекцией или вакциной. Как и в предыдущих исследованиях этой вакцины на добровольцах, ранее не подвергавшихся флавивирусу, субъекты, испытавшие флавивирус, получали две дозы вакцины с интервалом в шесть месяцев, и за ними внимательно наблюдали на предмет клинических событий, лабораторных изменений, вирусемии и титров нейтрализующих антител.TV003 хорошо переносился с небольшим количеством побочных эффектов, кроме сыпи, которая была преимущественно легкой. После введения одной дозы 87% вакцинированных имели ответ антител ко всем четырем серотипам (четырехвалентный ответ), что свидетельствует об устойчивом иммунном ответе. Кроме того, 76% вакцинированных были виремическими; средние пиковые титры находились в диапазоне 0,68–1,1 log 10 БОЕ / мл и не различались по серотипу. Вторая доза TV003 не была связана с виремией, сыпью или устойчивым повышением титров антител, что указывает на то, что однократной дозы вакцины, вероятно, достаточно для предотвращения репликации вируса и, таким образом, защиты от болезни.По сравнению с виремией и ответом нейтрализующих антител, вызванным TV003 у субъектов, ранее не подвергавшихся флавивирусу, из предыдущих исследований, мы обнаружили, что субъекты, которые подвергались воздействию флавивируса до вакцинации, демонстрировали несколько более высокую виремию DENV-3, более высокие титры нейтрализующих антител к DENV-2, -3 и -4, и более высокая частота четырехвалентного ответа после введения TV003. Таким образом, мы демонстрируем, что четырехвалентная вакцина против лихорадки денге TV003 Национального института здравоохранения (NIH) хорошо переносится людьми, испытавшими флавивирус, и выявляет устойчивые титры нейтрализующих антител после вакцинации.

Информация об авторе

По мере разработки живых аттенуированных вакцин-кандидатов против денге важно удостовериться в их безопасности для всех групп населения, независимо от того, подвергались ли они денге, близкородственным флавивирусам или аналогичным вакцинам в прошлом. Каждый из четырех серотипов вируса денге (DENV) может вызывать клиническое заболевание. Тяжелая форма лихорадки денге может быть опасной для жизни и эпидемиологически связана с вторичной инфекцией с серотипом, отличным от первой инфекции. Четырехвалентные вакцины-кандидаты от денге предназначены для индукции нейтрализующих антител ко всем серотипам, но необходимо подтверждение того, что сама вакцинация, как вторичное воздействие, не связано с развитием повышенной реактогенности.Национальные институты здравоохранения — кандидат живой аттенуированной четырехвалентной вакцины против денге, TV003, ранее был признан безопасным и иммуногенным для популяций, не инфицированных флавивирусами. Мы провели рандомизированное плацебо-контролируемое клиническое испытание TV003 у лиц, ранее подвергавшихся воздействию флавивирусов, и продемонстрировали переносимость и сильную, широкую иммуногенность по всем серотипам. Ни у одного из субъектов не было болезни, похожей на денге. Виремия вакцинации была самоограниченной и встречалась на приемлемо низких уровнях по сравнению с таковой, связанной с тяжелой лихорадкой денге, вызванной естественной инфекцией.TV003 хорошо переносится здоровыми взрослыми, независимо от воздействия флавивируса, и в дальнейшем будет оцениваться в эндемичных для DENV условиях.

Образец цитирования: Whitehead SS, Durbin AP, Pierce KK, Elwood D, McElvany BD, Fraser EA, et al. (2017) В рандомизированном исследовании живая аттенуированная четырехвалентная вакцина против денге TV003 хорошо переносится и обладает высокой иммуногенностью у субъектов, подвергшихся воздействию флавивируса до вакцинации. PLoS Negl Trop Dis 11 (5): e0005584. https: // doi.org / 10.1371 / journal.pntd.0005584

Редактор: Уильям Б. Мессер, Орегонский университет здравоохранения и науки, США

Поступила: 5 августа 2016 г .; Принята к печати: 19 апреля 2017 г .; Опубликовано: 8 мая 2017 г.

Это статья в открытом доступе, свободная от всех авторских прав, и ее можно свободно воспроизводить, распространять, передавать, изменять, строить или иным образом использовать в любых законных целях. Работа сделана доступной по лицензии Creative Commons CC0 как общественное достояние.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документе и его файлах с вспомогательной информацией.

Финансирование: Эта работа была поддержана Программой внутренних исследований Национальных институтов аллергии и инфекционных заболеваний, Национальных институтов здравоохранения (контракт HHSN2722000C). Спонсор не принимал участия в разработке исследования, сборе и анализе данных, решении о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что конкурирующих интересов не существует.

Введение

Четыре серотипа вируса денге (DENV-1–4) являются основной причиной вирусных заболеваний, переносимых комарами, во всем мире. Примерно 40% населения мира подвержено риску заражения денге, и все серотипы вызывают клиническое заболевание [1, 2]. Заболеваемость лихорадкой денге резко возрастает во всем мире, как в регионах с известными заболеваниями, так и в новых районах, где распространились комары-переносчики Aedes aegypti и Aedes albopictus [3].

Инфекция денге вызывает широкий спектр клинических заболеваний, от субклинической инфекции (наиболее распространенной) до опасного для жизни синдрома сосудистой утечки [4]. Классическая лихорадка денге, состоящая из высокой температуры, миалгии и сыпи, а также нейтропении и тромбоцитопении, обычно наблюдается при первичной инфекции и проходит самостоятельно. Первичная инфекция приводит к пожизненной защите от симптоматической гомотипической инфекции, но только к краткосрочной перекрестной защите от инфекции с другими серотипами [5].Тяжелое заболевание (синдром шока денге и / или геморрагическая лихорадка) может быть связано с поражением органов, утечкой плазмы и необходимостью введения жидкости и может быть фатальным при отсутствии соответствующей медицинской помощи. Тяжелое заболевание чаще всего встречается у младенцев и детей младшего возраста, хотя им подвержены все возрасты [6].

Хотя при первичной лихорадке денге можно увидеть полный спектр заболеваний, в большинстве случаев тяжелое заболевание наблюдается при вторичной гетеротипической инфекции DENV. Считается, что антителозависимое усиление инфекции (ADE) вносит значительный вклад в патофизиологию.В модели ADE антитела, вызванные к серотипу, наблюдаемому при первичной инфекции, все еще связываются, но не нейтрализуют эффективно новый серотип и могут «усиливать» проникновение нового серотипа DENV в чувствительные клетки (например, моноциты) через рецепторы Fcγ, что приводит к к усилению вирусной репликации и вирусемии [7–9]. Уровень виремии DENV был положительно связан с тяжестью болезни денге [10, 11]. После выздоровления от вторичной инфекции или заболевания денге риск тяжелого заболевания очень низок при последующем инфицировании любым из двух оставшихся серотипов (т.е. после вторичного облучения), что свидетельствует о прогрессивном развитии защитного иммунитета [12, 13].

За последнее десятилетие был достигнут прогресс в разработке кандидатных вакцин против лихорадки денге, некоторые из которых представляют собой живые аттенуированные вакцины, содержащие антигены всех четырех серотипов DENV (четырехвалентные вакцины) [14–21]. Одна из них (Sanofi-Pasteur’s Dengvaxia, химерная вакцина против лихорадки денге и четырехвалентной денге, CYD-TDV) была недавно одобрена для ограниченного использования в нескольких странах.В CYD-TDV структурные белки DENV каждого серотипа вставлены в неструктурный генетический каркас вируса желтой лихорадки (YFV). Эффективность CYD-TDV была значительно ниже у лиц, не получавших денге на момент вакцинации, и в более молодых возрастных группах, преимущественно не инфицированных флавивирусами [16, 17]. В течение первого года долгосрочного периода наблюдения за безопасностью более высокая частота госпитализаций из-за лихорадки денге наблюдалась у реципиентов CYD-TDV, которым на момент вакцинации было меньше 9 лет, по сравнению с реципиентами плацебо, которым было меньше 9 лет. лет на момент дозирования [16, 17].По этим причинам Стратегическая консультативная группа экспертов ВОЗ по иммунизации рекомендовала ограниченное использование вакцины лицам в возрасте 9–45 лет в высокоэндемичных по лихорадке денге районах (распространенность серотипа денге ≥ 70%) [22].

Целью вакцинации DENV является защита от болезней, вызываемых каждым из четырех серотипов. Есть опасения, что если иммунологические ответы после вакцинации несбалансированы по серотипам, последующее инфицирование серотипом (ами), для которого вакцина не вызвала защитный иммунный ответ, может привести к более тяжелому заболеванию из-за ADE.Было высказано предположение [23], что ADE может объяснить недавние открытия CYD-TDV, при которых вакцинированные дети в возрасте 2–5 лет имели в 7,45 раза более высокий уровень госпитализации от денге по сравнению с невакцинированными детьми в той же возрастной группе [15, 17]. Теоретически репликация живого вируса вакцины DENV также может быть увеличена за счет перекрестно-реактивных антител у лиц, ранее подвергавшихся воздействию DENV или другого флавивируса, хотя маловероятно, что уровень вирусемии вакцины от денге достигнет уровня, связанного с клиническим заболеванием.

Живая аттенуированная четырехвалентная вакцина против денге TV003 NIH ослаблена одной или несколькими делециями по 30 нуклеотидов в 3 ’нетранслируемой области вирусного генома, что ограничивает репликацию in vivo [24]. Как показано в серии предыдущих клинических испытаний фазы I, эта однократная вакцина безопасна и иммуногенна против всех четырех серотипов денге, вызывая четырехвалентный ответ антител у более чем двух третей субъектов после однократной дозы [19, 25–27]. . TV003 обеспечивал полную защиту от экспериментального заражения контрольным штаммом DENV-2 [26].Чтобы дополнительно задокументировать безопасность четырехвалентной вакцины против денге TV003 у субъектов, которые, возможно, ранее подвергались воздействию флавивируса, мы провели рандомизированное контролируемое клиническое испытание TV003 на здоровых взрослых, испытавших флавивирус. До этого исследования оценка вакцины TV003 проводилась исключительно в когортах взрослых, не получавших флавивирус [19, 25, 28].

Материалы и методы

Заявление об этике

Это исследование было проведено в соответствии с утвержденной FDA заявкой на исследуемый новый лекарственный препарат и одобрено институциональными наблюдательными советами Университета Джона Хопкинса и Университета Вермонта.Письменное информированное согласие было получено в соответствии с федеральными и международными правилами (21CFR50, ICHE6), и на протяжении всего исследования соблюдались правила надлежащей клинической практики (GCP). Совет по мониторингу безопасности данных NIAID проверял все данные по безопасности каждые 6 месяцев, и был проведен внешний независимый мониторинг.

Дизайн исследования и условия исследования

Это рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование фазы 1 было проведено в Балтиморе, Мэриленд, и Берлингтоне, VT. Субъекты исследования были включены в протокол исследования CIR 280 (ClinicalTrials.gov NCT01506570). В исследовании оценивали безопасность и иммуногенность живой аттенуированной четырехвалентной вакцины NIH (TV003) у 58 взрослых, подвергшихся воздействию флавивируса. Чтобы определить влияние второй вакцинации на частоту сероконверсии, четырехвалентный ответ и средний титр нейтрализующих антител, вторую дозу той же вакцины вводили через шесть месяцев после первой дозы. Субъекты получили одинаковое назначение (вакцина или плацебо) для обеих доз ( Рис. 1) . Субъекты были рандомизированы с использованием генератора случайных чисел на блоки по семь, каждый блок содержал пять реципиентов вакцины и двух реципиентов плацебо.Исследовательские группы из клинических центров не знали о назначении лечения. Данные были открыты через 270 дней после того, как все субъекты в блоке получили первую лечебную дозу. Протокол клинических испытаний включен в справочную информацию .

Рис. 1. CONSORT-диаграмма включения и последующего наблюдения субъектов для первой и второй дозировок TV003 у субъектов, подвергшихся воздействию флавивируса до вакцинации TV003 (исследование CIR280).

График заборов крови для серологического и вирусологического тестирования указан в заштрихованном поле справа.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0005584.g001

Исследуемая популяция

Было набрано и зачислено

здоровых взрослых людей в возрасте 18–50 лет из исследовательских центров. Критерии отбора были такими, как описано ранее [19], с добавлением критерия включения, требующего доказательства воздействия любого из следующих флавивирусов: DENV1-4, YFV, вирус японского энцефалита (JEV), вирус Западного Нила (WNV), St. Вирус энцефалита Луи (SLEV) или вирус клещевого энцефалита (TBEV).Серологические доказательства включали нейтрализующие антитела к DENV-1-4, YFV, WNV, JEV, SLEV или TBEV. Документированная история вакцинации YFV, JEV или экспериментальной вакциной DENV также была принята как демонстрация прошлого воздействия флавивирусов. Приемлемые субъекты должны были быть серонегативными на вирусы гепатита B, гепатита C и иммунодефицита человека, а также иметь нормальные гематологические показатели крови, химический состав сыворотки и результаты физикального обследования.

Исследуемый продукт / вакцина

Живая аттенуированная вакцина против денге (TV003) содержит все четыре серотипа денге (DENV1-4) в четырехвалентной смеси.Вакцинные конструкции, основанные на ограничении репликации вируса путем делеции 30-нуклеотидной последовательности в 3’-нетранслируемой области вирусного генома (ов), описаны в другом месте [24]. Разработка четырехвалентных составов, безопасность и иммуногенность компонентов вакцины и выбор TV003 в качестве ведущего кандидата также описаны в другом месте [28]. Компонент DENV-2, rDEN2 / 4Δ30, был дополнительно аттенуирован путем химеризации, при которой белки prM и E DENV-2 заменяли белки DENV-4 в конструкции rDEN4Δ30.TV003 содержит rDENV1Δ30 [29], rDEN2 / 4Δ30 [30], rDENV3Δ30,31 [28] или rDENV4Δ30 [31]. Компоненты вакцины были произведены в виде посевных вирусов в клетках Vero в Лаборатории инфекционных заболеваний (LID), NIAID, а вакцина была произведена на клетках Vero в лаборатории биофармацевтических услуг Charles River Laboratories (CRL) в Малверне, штат Пенсильвания (rDENV1Δ30, DENV2 / 4D30). и компоненты rDENV4Δ30) или Meridian Life Science, Memphis TN (компонент DEN3Δ30 / 31) в условиях GMP. Вирусные запасы хранили при -80 ° C ± 15 ° C перед размораживанием, разбавлением и приготовлением смеси, содержащей 3.3 log 10 бляшкообразующих единиц (БОЕ) каждого серотипа. Конечная смесь обеспечивала конечную дозу 3 log 10 БОЕ на дозу 0,5 мл. Окончательные титры активности были подтверждены после приготовления. Разбавитель (подходящая среда Лейбовица L-15) использовали в качестве плацебо.

Клинические процедуры

Субъекты были случайным образом отобраны для введения 0,5 мл вакцины (n = 41) или плацебо (n = 17), вводимых подкожно в день 0. Затем субъектов оценивали как амбулаторных пациентов с клиническими оценками и осмотрами через день в течение первых 16 дней и затем на 21, 28, 56 и 90 день.Испытуемые также регистрировали симптомы и температуру во рту. На 150 день субъекты были повторно оценены с учетом критериев включения и исключения, а затем получили вторую дозу вакцины или плацебо на 180 день. График последующего наблюдения и самостоятельная регистрация температуры и симптомов субъекта были такими же, как и первая доза. Кровь для лабораторных исследований безопасности, включая титрование вирусов, брали за 60 дней до введения дозы, а также в дни 0, 8, 10, 12, 14, 16, 21 и 28 относительно как первого, так и второго дозирования.Кровь для анализа титра нейтрализующих антител отбирали в дни 0, 28, 56, 90, 150 и 180 относительно как первого, так и второго дозирования (, фиг. 1, ).

Неблагоприятные события

Неблагоприятные события были зарегистрированы и классифицированы на основе интенсивности (легкая, умеренная, тяжелая) и связи с вакцинацией, как описано [25]. Сыпь, похожая на вакцину против денге, была определена как макулопапулезная сыпь, обычно обнаруживаемая на туловище и проксимальных отделах конечностей и наиболее часто наблюдаемая через 10–16 дней после вакцинации.Стандартные таблицы токсичности (https://www.fda.gov/downloads/BiologicsBloodVaccines/ucm0) использовались для оценки и сообщения аномальных клинических лабораторных данных.

Лабораторные анализы и определения

Было установлено, что субъект инфицирован вакциной, если в крови был обнаружен какой-либо серотип DENV или если субъект сероконверсировал к любому серотипу DENV (как показано ниже) в любой момент времени после вакцинации. «Болезнь, похожая на денге» определялась как инфекция с лихорадкой и ≥ 2 симптомами средней интенсивности, длящимися ≥ 12 часов (т.е. головная боль, светобоязнь, миалгии, артралгии). Для выявления вирусемии амплификацию и прямое титрование DENV на монослоях клеток веро проводили с использованием серотип-специфичных моноклональных антител [19, 32]. Нейтрализующие антитела к DENV определяли с помощью анализов титра нейтрализации уменьшения бляшек (PRNT), как описано [32]. Величина, обратная наименьшему расчетному разведению, которое снижает вирус на 50% (PRNT 50 ), указывается как нейтрализующий титр. Серопозитивность была определена как PRNT 50 ≥1: 10 в любой момент времени до 90-го дня после вакцинации включительно.Сероконверсия определяется как четырехкратное повышение PRNT со дня 0. Для тех, кто был серонегативен к DENV в день 0 (PRNT 50 ≤ 1: 5), титр 1: 2,5 был назначен в качестве начального титра и, следовательно, титр ≥ 1:10 указывает на сероконверсию. «Усиление» антител определяли как повышение в ≥4 раза титра антител, нейтрализующих сыворотку, при сравнении титра антител во время второй дозы (180-й день) с пиковыми титрами до 270-го дня после вакцинации.

Данные и статистический анализ

Был проведен анализ по протоколу, хотя безопасность была оценена для всех субъектов, получавших вакцину.Для анализа нежелательных явлений, демографических характеристик и различий в процентном соотношении респондентов использовался точный тест Фишера. Для сравнения пиковых титров использовался анализ суммы рангов Вилкоксона (после вакцинации были включены только данные от серопозитивных субъектов, однако, как только субъект стал серопозитивным, титры от этого субъекта были включены во все последующие анализы). Для проверки частот серопозитивности использовали точный критерий хи-квадрат пропорций. Для сравнения ответов на TV003 у субъектов, которые не были инфицированы флавивирусом на момент вакцинации, мы использовали данные, собранные из двух предыдущих когорт (CIR268, n = 20 и CIR279, n = 38) [19].Что касается процедур оценки клинической безопасности, оценки вирусемии и процедур лабораторных анализов, эти исследования идентичны описанным здесь. В когорте изучаемых флавивирусов, не принимавших флавивирусов, было одно незначительное различие в одной временной точке в подгруппе изучаемых субъектов. Для субъектов CIR268 сыворотку для нейтрализующего антитела собирали на 0, 28, 56 и 180 сутки после введения дозы; для субъектов CIR279 нейтрализующие антитела собирали на 0, 28, 56, 90 и 180 день после введения дозы (идентично этому исследованию).Использовались пакеты статистического программного обеспечения SAS версии 9.3 (институт SAS, Кэри, Северная Каролина).

Результаты

Демографические характеристики и количество учащихся

Сто четырнадцать субъектов были оценены на соответствие критериям отбора, включая доказательства предшествующего воздействия флавивируса с помощью серологии на нейтрализующие антитела против DENV1-4, вируса желтой лихорадки (YFV), вируса Западного Нила (WNV), вируса энцефалита Сент-Луиса (SLEV). ), или вируса японского энцефалита (JEV), либо путем документирования вакцинации против YFV или JEV.Субъекты также соответствовали критериям на основании документально подтвержденного предыдущего участия в клинических испытаниях экспериментальной моновалентной вакцины DENV — rDENV1Δ30 [29], rDEN2 / 4Δ30 [30], rDENV3Δ30,31 [28] или rDENV4Δ30 [31]. (См. Вспомогательную информацию для клинического протокола и контрольного списка CONSORT 2010). В исследование были включены пятьдесят восемь субъектов, которым были введены дозы (, рис. 1, ). Из них 25 (43,1%) были чернокожими / афроамериканцами, 29 (50%) были белыми, 2 (3,4%) были азиатами и 2 (3,4%) сами сообщили о более чем одной расовой категории.Средний возраст субъектов составлял 30 лет (от 20 до 50 лет), из них 46% — мужчины. Из 58 субъектов, получивших первую дозу, 41 был вакцинирован, а 17 — плацебо. Не было разницы в среднем возрасте или поле между вакцинированными и получателями плацебо.

Сорок восемь субъектов имели доказательства антител к вирусу желтой лихорадки, шестнадцать — свидетельства вакцинации. Пятнадцать субъектов получили дозу моновалентной вакцины против денге. Ни один субъект не получил вакцину против JEV.У одного, пяти и шести субъектов были антитела к JEV, WNV, SLEV соответственно. У семи субъектов были признаки предшествующего контакта с более чем одним флавивирусом ( S1, таблица ). Между первой и второй дозами десять субъектов были исключены или исключены из исследования: один субъект был исключен из-за беременности, один субъект был заключен в тюрьму, три субъекта покинули это место, один субъект не соблюдал протокол исследования, один Субъект был недоступен для приема второй дозы, один субъект тем временем путешествовал в эндемичную по денге область, у одного субъекта была ранее нераскрытая исходная медицинская проблема (анафилактическая реакция), а еще один был недоступен для последующих посещений.Информация о безопасности была собрана по всем 58 субъектам, получавшим первую дозу (n = 41 для TV003 и n = 17 для плацебо), но из-за сроков прекращения исследования были собраны полные данные об иммуногенности для 55 из них (n = 38 для TV003, и n = 15 для плацебо). Сорок восемь субъектов получили вторую дозу (n = 33 для TV003 и n = 15 плацебо). Все, кроме двух субъектов (одна из-за беременности и одна из-за переезда из области исследования) наблюдались на протяжении оставшейся части исследования. Однако из-за времени исключения из исследования были собраны полные данные по безопасности и иммуногенности для всех субъектов, получавших вторую дозу.

Безопасность и реактогенность

В целом обе дозы хорошо переносились. Неблагоприятные события после первой дозы представлены в Таблица 1 . Сыпь была единственным нежелательным явлением, которое значительно чаще возникало у реципиентов вакцины по сравнению с плацебо ( P <0,001). У 27 вакцинированных (66%) возникла сыпь, напоминающая вакцину против денге, после введения первой дозы. Сыпь была легкой в ​​22/27 (81%) вакцинах. Из-за дополнительного зуда сыпь была оценена как умеренная у 5/27 (18.5%) вакцинированных. Добровольцу не потребовались лекарства от зуда. У одного реципиента плацебо появилась преходящая сыпь, похожая на сыпь, похожую на сыпь, похожую на вакцину от денге.

Сообщалось о двух серьезных нежелательных явлениях, оба у одного и того же реципиента вакцины, и оба были оценены как не связанные с вакцинацией. Первым серьезным нежелательным явлением было обморок, произошедший через 51 день после вакцинации, а вторым — временная ишемическая атака через 77 дней после первой вакцинации. У четырех вакцинированных развилась короткоживущая нейтропения: два случая были легкой степени тяжести (абсолютное количество нейтрофилов [ANC] 880 / мм 3 на 10-й день и 870 / мм 3 на 16-й день, соответственно) и два случая были умеренными (ANC). надир 718 / мм 3 на 8-е сутки и 704 / мм 3 на 16-е сутки соответственно).Трое из этих четырех субъектов, идентифицированных как темнокожие / афроамериканцы, и все имели относительно низкий уровень АНК перед вакцинацией (1940 / мм 3 и 1010 / мм 3 , 1256 / мм 3 , 1056 / мм 3 , соответственно. ). Эталонный диапазон АНК составляет 1 500–8 850 / мм 3 (Лаборатория Медицинского центра Университета Вермонта / Служба медицинских лабораторий Джона Хопкинса). У двух субъектов была повышенная температура, возможно, связанная с вакциной; у одного добровольца лихорадка длилась один час, а у другого добровольца лихорадка длилась один день.Один из этих субъектов пожаловался на группу легких симптомов со стороны верхних дыхательных путей после вакцинации, начиная с 9-го дня после вакцинации, что совпало с домашним заболеванием. Лихорадка до максимума 101,5 ° F была отмечена на 12-й день, но исчезла на следующий день, а мазок из носа оказался отрицательным на грипп и RSV.

Репликация вируса вакцины

После первой дозы TV003 вирус вакцины был обнаружен у 31 субъекта (76%) в первые шестнадцать дней наблюдения. Серотип, титр, день начала и продолжительность вакцинной виремии показаны в Таблице 2 .В большинстве случаев виремия была недолгой, в среднем 1-3 дня. Среди субъектов с виремией 18 (58%) имели виремию из-за одного серотипа денге, 12 (39%) из-за двух серотипов и один (3%) из-за трех серотипов. DENV-3 был наиболее распространенным; он был обнаружен у 22 человек, 54% всех вакцинированных. Средние пиковые титры достоверно не различались между серотипами и составляли от 0,68 до 1,1 log 10 БОЕ / мл. Максимальный титр 2,4 log 10 БОЕ / мл для DENV-2 и DENV-3 наблюдался у каждого добровольца.Примечательно, что после введения второй дозы вирусемия не наблюдалась ни у одного добровольца. По сравнению с субъектами, ранее не получавшими флавивирус и получавшими TV003 [19], пиковые титры вирусемии для DENV-1, 2 и 4 не были значительно выше у лиц, испытавших флавивирус. Средние пиковые титры DENV-3 (DEN3Δ30 / 31), хотя и все еще низкие, были выше у лиц, подвергшихся воздействию флавивируса (0,97 log 10 БОЕ / мл против 0,56 log 10 БОЕ / мл, P = 0,04). Вместе эти результаты показывают, что TV003 индуцирует низкий уровень вакцинной виремии у вакцинированных, ранее подвергавшихся воздействию флавивируса, до уровней, которые в значительной степени соответствуют вакцинной виремии, индуцированной этой вакциной у субъектов, не подвергавшихся воздействию флавивирусов, без признаков повышенной реактогенности по сравнению с флавивирусом. наивные вакцинированные.

Серологический ответ на DENV

Ответы нейтрализующих антител

для всех серотипов индуцировались у субъектов, испытавших флавивирус, после однократной дозы TV003 (, таблица 3, ). Пик ответа для нейтрализующих антител DENV-1 и DENV-2 был широким в течение первых 90 дней, тогда как самые высокие пики нейтрализующих антител DENV-3 и DENV-4 наблюдались раньше (день 28 после вакцинации) ( рис. 2, ). После второй дозы не наблюдалось значительного изменения средних пиковых титров антител для любого серотипа по сравнению с титром до второй дозы (день 180) ни по величине (, таблица 3, ), ни по продолжительности (, фиг.2, ). .

Рис. 2.

Среднее уменьшение налета (50%) нейтрализующих титров (PRNT 50 ) для DENV-1 ( A ), DENV-2 ( B ), DENV-3 ( C ) и DENV-4 ( D ) после одной или двух доз TV003 у субъектов, испытавших флавивирус (n = 41 для дозы 1 и n = 33 для дозы 2). Все данные представляют собой средние титры (GMT) ± 95% доверительный интервал. Пунктирная линия указывает на серопозитивность (PRNT 50 ≥ 1:10), а серая область представляет диапазон уровней антител к каждому серотипу, наблюдаемый у субъектов, получавших плацебо (n = 17 для дозы 1 и n = 15 для дозы 2).

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0005584.g002

Мы также сравнили ответы нейтрализующих антител вакцинированных TV003 с предыдущим воздействием флавивируса с субъектами из предыдущих исследований TV003 [19], которые не получали флавивирус. во время вакцинации. Как видно из таблицы 3 , ответы антител на DENV-1 ( P = 0,09), DENV-2 ( P = 0,001), DENV-3 ( P = 0,0003) и DENV-4 ( P = 0,004) после дозы 1 TV003 были значительно выше у субъектов, подвергшихся воздействию флавивируса, даже после корректировки для множественных сравнений.Нейтрализующие антитела DENV-2 оставались повышенными ( P <0,0001) после введения дозы 2 TV003 у субъектов, подвергшихся воздействию флавивируса, по сравнению с теми, кто не был наивен в начале испытания.

Затем мы оценили средние титры нейтрализующих антител к DENV-1 до -4 через шесть месяцев после одной или двух доз TV003. Через шесть месяцев после приема одной дозы TV003 средние титры нейтрализующих антител к DENV-2 были выше у вакцинированных вакцинированным флавивирусом по сравнению с вакцинами, не содержащими флавивируса (, таблица 4, ).DENV-2 ( P <0,0001), DENV-3 ( P = 0,02) и DENV-4 ( P = 0,01), но не DENV-1 ( P = 0,56), ответы антител были через 6 месяцев после второй дозы TV003 у вакцинированных с флавивирусом вакцинированных по сравнению с вакцинированными против флавивируса ( Таблица 4 ).

Таблица 4. Взаимные средние титры нейтрализующих антител через 6 месяцев после дозы 1 (день 180) и дозы 2 (день 360) после вакцинации TV003 субъектов, которые были либо испытаны флавивирусом, либо не были наивными a во время первой вакцинации .

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0005584.t004

В нашей зарегистрированной когорте, испытанной флавивирусом, было 29 субъектов с предшествующим контактом с желтой лихорадкой либо серологически (n = 17), либо через документацию о вакцинации против YFV (n = 12), назначенный плечу TV003. Одиннадцать субъектов, отнесенных к группе TV003, ранее имели контакт с лихорадкой денге (серологически, n = 3, либо в результате участия в предыдущем испытании моновалентной вакцины DENV, n = 8) [28–31]. Не было различий в типе воздействия флавивируса в разных группах лечения ( S1, таблица ).Не было разницы в DENV-виремии или реактогенности вакцины ( S2, таблица ) или пиковой иммуногенности DENV ( S1, фиг. ) после однократной дозы TV003 в зависимости от метода установления предшествующего воздействия флавивируса (серология и документация по вакцинации). Кроме того, среди тех, кто получил TV003, было тридцать пять субъектов с одним воздействием флавивируса и шесть с более чем одним воздействием. Также не было различий в DENV-виремии, вызванной TV003, или реактогенности ( S2 таблица ) или иммуногенности DENV ( S1, фиг. ) в зависимости от того, было ли предшествующее воздействие флавивируса, которое соответствовало критериям включения, связано с одним или несколькими воздействиями различных флавивирусов.

Ответы анамнестических антител на вакцину YFV, JEV или DENV наблюдались у субъектов, подвергшихся воздействию гетерологичного флавивируса до вакцинации [33–36]. Кроме того, четырехвалентная вакцина против денге CYD-TDV защищала от болезни денге только тех людей, которые были примированы DENV до вакцинации [16, 17]. Таким образом, мы исследовали, влияет ли предшествующее воздействие YFV или вируса денге на средний пиковый уровень нейтрализующих антител после одной дозы TV003. Мы обнаружили, что воздействие YFV или DENV до вакцинации TV003 было связано со значительно более высокими титрами нейтрализующих антител к DENV-2, DENV-3 и DENV-4 после однократной дозы TV003 ( рис. 3 ).

Рис. 3.

Средний пик титров нейтрализующих антител (PRNT 50 ) для DENV-1 ( A ), DENV-2 ( B ), DENV-3 ( C ) и DENV-4 ( D) до 90 дней после одной дозы TV003 у субъектов, ранее не получавших флавивирус (n = 58, из ссылки [19]), у всех субъектов, испытавших флавивирус (все FV +) (n = 38), и у двух подгрупп — пациенты с вирусом желтой лихорадки (YF +, n = 31) или подвержены воздействию вируса денге (Dengue, n = 11). Все данные представляют собой средние титры (GMT) ± 95% доверительный интервал.Статистическая значимость различий между группами, ранее не получавшими FV, оценивалась односторонним дисперсионным анализом с поправкой Сидака для множественных сравнений. *, P <0,05, **, P <0,01, *** P , <0,001.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0005584.g003

Мы также оценили общую серопозитивность к каждому серотипу DENV после одной или двух доз TV003 в зависимости от статуса воздействия флавивируса на момент первого приема TV003.В соответствии с предыдущими результатами для этой вакцины у субъектов, не инфицированных флавивирусом [19–21, 25, 28], вакцинация TV003 привела к более чем 89% сероконверсии ко всем серотипам DENV у субъектов, испытавших флавивирус. В частности, предшествующее воздействие флавивируса было связано с устойчивым эффектом на серопозитивность DENV-2 после вакцинации TV003 (, таблица 5, ).

TV003, как было показано, выявляет нейтрализующие антитела к каждому серотипу DENV у вакцинированных, не подвергавшихся флавивирусу [19]. Поэтому мы оценили валентность DENV-специфических ответов антител после вакцинации TV003 у субъектов, ранее подвергавшихся воздействию флавивируса.В целом, 87% субъектов, испытавших флавивирус, достигли четырехвалентного ответа антител и еще 10% достигли трехвалентного ответа на вакцинацию после однократной дозы TV003 ( таблица 6, ). Мы также обнаружили, что воздействие флавивируса до вакцинации TV003 было значительно связано с увеличением доли субъектов с четырехвалентным ответом по сравнению с долей четырехвалентных респондеров, которые не были наивными по отношению к флавивирусу [19] до получения TV003 ( P = 0). .013).

Обсуждение

Здесь мы оценили безопасность и иммуногенность живой аттенуированной четырехвалентной вакцины против денге TV003 NIH в рандомизированном контролируемом исследовании здоровых взрослых субъектов с известным предыдущим воздействием флавивирусов. Субъекты имели доказательства воздействия DENV, YFV, WNV, SLEV или JEV. Вакцинированные с флавивирусом получали две дозы TV003 или плацебо с интервалом в шесть месяцев. Вакцина TV003 хорошо переносилась и имела широкую иммуногенность против всех четырех вирусных серотипов, что приводило к 87% четырехвалентному ответу после однократной дозы.Как ранее было продемонстрировано для вакцинированных против флавивирусов [19, 25, 27], вторая доза TV003 не повлияла на общую иммуногенность и, вероятно, не нужна для оптимальной эффективности вакцины. Побочные эффекты или поствакцинальная реактогенность TV003 не отличались у субъектов, испытавших флавивирус, по сравнению с субъектами, не получавшими флавивируса, оцененными в предыдущих исследованиях этой вакцины [19, 25, 28]. Как и ожидалось, единственным значимым событием при сравнении вакцинированных и получателей плацебо была саморазрешающаяся сыпь у большинства (66%) субъектов после первой, но не второй дозы TV003.Критерии, определенные протоколом для заболевания, похожего на денге, не соблюдались ни у одного участника исследования.

Как сообщалось ранее, после первой вакцинации TV003 три четверти субъектов, ранее не подвергавшихся флавивирусу, испытали виремию после первой вакцинации и ни у одного не возникла виреемия после второй дозы [19, 28]. Здесь, у субъектов, которые были подвержены воздействию флавивируса до вакцинации TV003, мы также наблюдали, что 76% субъектов стали виремическими. Частота вызванной TV003 виремии не зависела от типа воздействия флавивируса ( S2 таблица ).Хотя вакцина-индуцированная вирусемия обычно приводит к развитию защитного и стерилизующего иммунитета, она не коррелирует строго с иммуногенностью. При прямом сравнении с вакцинированными вакцинами, ранее не получавшими флавивируса, из недавнего испытания TV003 [19] титры вируса для всех серотипов DENV имели тенденцию к более высокому у вакцинированных флавивирусом вакцинированных, но только средний пиковый титр вируса DENV-3 был значительно повышен у пациентов, подвергшихся воздействию флавивируса ( Таблица 2). Следовательно, возможно, что ранее существовавшие антитела к флавивирусу могут играть второстепенную роль в временном усилении вирусемии вакцины DENV на серотип-специфической основе.В недавнем сообщении было высказано предположение, что существующие антитела к JEV могут временно увеличивать виремию YFV после вакцинации YFV [36]. Виремия CYD-TDV не усиливалась при предшествующем воздействии YFV, но общая инфекционность CYD-TDV в этом исследовании была очень низкой [37]. Важно отметить, что виремия вакцины DENV не была связана с какой-либо повышенной реактогенностью по сравнению с той, которая наблюдалась у вакцинированных против флавивируса. Средний день начала и средняя продолжительность виремии для всех серотипов в ответ на TV003 также не различались между серотипами или по сравнению с данными, полученными от ранее вакцинированных TV003 субъектов.В целом, уровни DENV-виремии, которые мы наблюдали у субъектов, подвергшихся воздействию флавивируса или ранее не вакцинированных TV003, составляли порядка 0,7–1,1 log 10 БОЕ / мл по оценке по культуре живого вируса. При естественной лихорадке денге некоторые оценки виремии во время болезни были основаны на дозах заражения комарами или геномных эквивалентах, предполагая, что уровни виремии превышают 7-8 log [10, 11]. Таким образом, с отмеченным предупреждением о различных методах это предполагает, что уровень виремии, наблюдаемый после TV003, относительно низок и не зависит от глобального статуса флавивируса.Тем не менее, при вакцинации живой аттенуированной DENV виремия сама по себе является одним из нескольких индикаторов инфекции, наряду с иммунным ответом и клиническими признаками, такими как сыпь, напоминающая вакцину против денге. Хотя точная корреляция / взаимодействие этих сигналов до сих пор неизвестна, инфекционность вакцины остается основным показателем того, что живая вакцина работает должным образом.

После первой дозы TV003 ответы нейтрализующих антител (PRNT 50 ) на DENV-2, -3 и -4 были выше, чем те, которые наблюдались ранее у лиц, не получавших флавивируса во время первого введения TV003 [19 ].В настоящее время механизм анамнестических ответов флавивирусов на TV003 неизвестен, но изучается. Неясно, почему на титры антител к DENV-1 после вакцинации не повлиял предыдущий опыт с флавивирусами. Сероконверсия в DENV1 после вакцинации CYD-TDV была отложена по сравнению с сероконверсией DENV-2, -3 и -4 у субъектов, примированных флавивирусом [37]. Как и ожидалось в исследованиях вакцинированных TV003, ранее не получавших флавивирус [19, 25, 28], средние пиковые титры антител после TV003 у субъектов, испытавших флавивирус, постепенно снижались в течение шести месяцев наблюдения до уровня покоя, превышающего наблюдаемый в день 0 ( Рис 2 ).Однако вторая доза TV003 не вызвала значительного увеличения нейтрализующих антител к серотипу DENV у субъектов, переживших флавивирус. В соответствии с этим результатом вторая доза TV003 также не смогла увеличить нейтрализующие антитела у субъектов, не инфицированных флавивирусом во время первой вакцинации [19, 25, 27]. Отсутствие четкого усиления (4-кратного или более) после второй дозы убедительно свидетельствует о потенциале TV003 в качестве однократной вакцины, поскольку оказывается, что иммунитет, повышенный к первой дозе, может обеспечить стерилизующий иммунитет против инфекции при второй дозе.

Результаты недавних испытаний CYD-TDV показали значительную эффективность только у субъектов, подвергшихся воздействию DENV до вакцинации CYD-TDV [15, 16, 38]. Однако другие флавивирусы, такие как YFV или вирус Зика (ZIKV), имеют те же векторы, что и DENV, часто совместно циркулируют, а в случае YFV в Америке широко распространена вакцинация. Среди экспозиций флавивирусов в когорте вакцинированных флавивирусом, которую мы исследовали здесь, экспозиции YFV или DENV составили самые большие фракции. Это дало возможность проверить, было ли воздействие DENV per se определяющим фактором для учета повышенной иммуногенности после TV003 в когорте, подвергшейся воздействию флавивируса, по сравнению с когортой вакцины TV003, не получавшей флавивируса.В соответствии с другими результатами [37, 39], мы обнаружили, что вакцинация субъектов, подвергшихся воздействию DENV, живой аттенуированной четырехвалентной вакциной против денге способствовала увеличению титров нейтрализующих антител к DENV по сравнению с вакцинами, не получавшими флавивируса. Интересно, что мы также обнаружили, что у субъектов, подвергшихся воздействию YFV, наблюдались пиковые титры нейтрализующих антител к TV003, которые были аналогичны таковым у вакцинированных DENV. Таким образом, наши результаты с TV003 согласуются с праймирующим эффектом воздействия YFV на нейтрализующие реакции антител, вызванные живыми моновалентными вакцинами DENV2 [35] и живыми аттенуированными четырехвалентными вакцинами CYD-TDV [37].Поскольку CYD-TDV основан на генетической основе YFV, тогда как TV003 содержит только геном DENV, возможно, что задействованы различные механизмы анамнестических ответов YFV / DENV. Действительно, TV003 индуцировал сбалансированный нейтрализующий ответ по всем серотипам у субъектов, подвергшихся воздействию флавивируса, что согласуется с нашими результатами у не вакцинированных флавивирусом [19, 25, 26]. Взятые вместе с данными об эффективности CYD-TDV, наши результаты подтверждают мнение о том, что предшествующее воздействие флавивируса способствует анамнестическому ответу на живую аттенуированную четырехвалентную вакцинацию против лихорадки денге.

Считается, что защитный иммунитет DENV, будь то вакцинация или естественная инфекция, состоит из нескольких факторов, включая нейтрализующие антитела, а также активацию CD8 + и CD4 + Т-клеток [40–42]. Недавно мы узнали, что CD8 + Т-клетки преимущественно нацелены на консервативные неструктурные (NS) элементы DENV при естественной инфекции и после иммунизации живой аттенуированной вакциной DENV TV003 [43, 44]. Точно так же CD4 + Т-клетки нацелены преимущественно на капсид и NS3 и NS5 [42].Неструктурные гены более консервативны среди флавивирусов, чем структурные гены [45]. Таким образом, механически возможно, что панфлавивирусные Т-клетки памяти, которые, как ожидается, должны присутствовать у людей, испытавших флавивирус, могут способствовать усилению иммунного ответа на TV003 по сравнению с индивидуумами, ранее не получавшими флавивируса, у которых отсутствует такая Т-клеточная память.

Это исследование имеет несколько ограничений, включая тот факт, что оно не проводилось в эндемичных по флавивирусам регионах. Большинство контактов было связано с YFV или DENV с меньшим представительством других флавивирусов и отсутствием контакта с TBEV.На момент проведения этого исследования у нас не было возможностей для тестирования на вирус Зика, поскольку исследование проводилось задолго до вспышки вируса Зика в 2015–2016 годах в Северной и Южной Америке. Кроме того, сравнение титров нейтрализующих антител в этой когорте с ранее изученными (не инфицированными флавивирусом) субъектами [19] является несовершенным. Тем не менее, мы отмечаем, что процедуры набора, демографические данные исследования и показатели удержания были сопоставимы с таковыми для предыдущих испытаний TV003 у субъектов, не получавших флавивирус [19, 25, 28] ( S3, таблица ).Хотя основные анализы (PRNT 50 ) были выполнены одинаково, они не были выполнены одновременно для двух исследований. Другое ограничение состоит в том, что для двадцати изучаемых вакцинированных вакцинами, ранее не получавших флавивирус (из 58), не было 90 дней для оценки титра нейтрализующих антител. Однако в совокупности мы обнаружили, что 91% вакцинированных против флавивирусов, которые прошли тестирование на нейтрализующие антитела до 90-го дня, продемонстрировали пиковые уровни антител к 56-му дню ( S4, таблица ).Кроме того, хотя нейтрализующие антитела являются общепринятым в настоящее время показателем иммуногенности вакцины против денге, неизвестно, достаточна ли эта мера per se для прогнозирования защиты от клинической болезни денге. У нескольких субъектов перед введением дозы наблюдались множественные антитела к флавивирусу (вероятно, перекрестно-реактивные), и исходная инфекция флавивируса не могла быть определена.

Таким образом, эта работа демонстрирует переносимость и иммуногенность однократной дозы вакцины NIH TV003 у субъектов, переживших флавивирус, и дополняет существующие данные о безопасности этой вакцины у взрослых, ранее не получавших флавивирусы.У субъектов, испытавших флавивирус, мы обнаружили ограниченную реактогенность на TV003, что согласуется с предыдущими результатами, полученными для этой вакцины у субъектов, ранее не инфицированных флавивирусом, которые получали TV003. Мы обнаружили более высокую вирусемию вакцины DENV-3 после введения TV003 у субъектов, испытавших флавивирус, по сравнению с субъектами, не получавшими флавивируса; однако уровни репликации вакцинного вируса оставались низкими у всех субъектов. Живая аттенуированная вакцина против лихорадки денге TV003 вызвала более высокие титры нейтрализующих антител (в трех из четырех серотипов) у субъектов, испытавших флавивирус, по сравнению с уровнями, наблюдаемыми после введения TV003 у субъектов, ранее не подвергавшихся флавивирусу [19].Эти данные послужили основой для клинической разработки TV003 и способствовали продвижению этого живого аттенуированного кандидата на вакцину против лихорадки денге в исследованиях фазы 2 и 3, которые в настоящее время проводятся в эндемичных по денге Таиланде и Бразилии, соответственно.

Вспомогательная информация

S2 Таблица. Частота и средний пик виремии DENV1-4 и частота появления сыпи, напоминающей вакцину против денге, после приема одной дозы TV003, в зависимости от количества предшествующих контактов с флавивирусом, типа воздействия и метода проверки (серология или документация).

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0005584.s002

(DOCX)

Благодарности

Мы благодарим всех, кто посвятил себя этому делу, а также отличных медсестер-исследователей и сотрудников Центра клинических исследований Медицинского центра UVM и Центра исследований иммунизации JHU.

Вклад авторов

  1. Концептуализация: SSW APD BDK.
  2. Обработка данных: APD DMD.
  3. Формальный анализ: SSW APD SAD KKP MPC DMD BDK.
  4. Приобретение финансирования: SSW APD KS BDK.
  5. Исследование: APD KKP DE BDM EAF MPC CMT NAH MJ JML CJLa EAD.
  6. Методология: APD KKP NAH CJLa BDK.
  7. Администрация проекта: APD CJLu BDK.
  8. Контроль: APD BDK.
  9. Проверка: SSW APD SAD KKP MPC DMD BDK.
  10. Визуализация: APD SAD DMD BDK.
  11. Написание — черновик: САД БДК.
  12. Написание — просмотр и редактирование: SSW APD SAD BDK.

Ссылки

  1. 1. Битти М.Э., Стоун А., Фитцсимонс Д.В., Ханна Дж. Н., Лам С.К., Вонг С. и др. Передовой опыт эпиднадзора за денге: отчет Совета по профилактике лихорадки денге в Азиатско-Тихоокеанском регионе и Америке. PLoS Negl Trop Dis. 2010; 4 (11): e890. Epub 2010/11/26. PubMed Central PMCID: PMC2982842. pmid: 21103381
  2. 2. (ПАОЗ / ВОЗ) ПАХОВО. Пятикратное увеличение случаев лихорадки денге в Северной и Южной Америке за последнее десятилетие Вашингтон, Д.C.2014, 29 мая. Доступно по адресу: http://www.paho.org/hq/index.php?option=com_content&view=article&id=9657&Itemid=1926.
  3. 3. Kraemer MU, Sinka ME, Duda KA, Mylne AQ, Shearer FM, Barker CM, et al. Глобальное распространение арбовирусных векторов Aedes aegypti и Ae. albopictus. Элиф. 2015; 4: e08347. Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC4493616. pmid: 26126267
  4. 4. Симмонс С.П., Фаррар Дж. Дж., Нгуен против В., Уиллс Б. Денге. N Engl J Med. 2012. 366 (15): 1423–32.Epub 2012/04/13. pmid: 22494122
  5. 5. Сабин А. Исследования денге во время Второй мировой войны. Am J Trop Med Hyg. 1952; 1 (1): 30–50. pmid: 14
  6. 4
  7. 6. Бхатт С., Гетинг П. У., Брэди О. Дж., Мессина Дж. П., Фарлоу А. В., Мойес С. Л. и др. Глобальное распространение и бремя денге. Природа. 2013. 496 (7446): 504–7. pmid: 23563266
  8. 7. Тейлор А., Фу С.С., Бруззон Р., Ву Динь Л., Кинг Нью-Джерси, Махалингам С. Рецепторы Fc в антителозависимом усилении вирусных инфекций.Immunol Rev.2015; 268 (1): 340–64. pmid: 26497532
  9. 8. Холстед SB. Наблюдения, связанные с возбудителем геморрагической лихорадки денге. VI. Гипотезы и обсуждение. Yale J Biol Med. 1970. 42 (5): 350–62. Epub 1970/04/01. PubMed Central PMCID: PMC25. pmid: 5419208
  10. 9. Холстед С.Б., Нимманнитя С., Коэн С.Н. Наблюдения, связанные с патогенезом геморрагической лихорадки денге. IV. Связь тяжести заболевания с ответом антител и выздоровлением вируса. Yale J Biol Med.1970. 42 (5): 311–28. pmid: 5419206
  11. 10. Vaughn DW, Green S, Kalayanarooj S, Innis BL, Nimmannitya S, Suntayakorn S и др. Титр вируса денге, характер ответа антител и серотип вируса коррелируют с тяжестью заболевания. J Infect Dis. 2000. 181 (1): 2–9. pmid: 10608744
  12. 11. Libraty DH, Endy TP, Houng HS, Green S, Kalayanarooj S, Suntayakorn S и др. Различное влияние вирусной нагрузки и иммунной активации на тяжесть заболевания при вторичных инфекциях, вызванных вирусом денге-3.J Infect Dis. 2002. 185 (9): 1213–21. pmid: 12001037
  13. 12. Гиббонс Р.В., Каланарудж С., Джарман Р.Г., Нисалак А., Вон Д.В., Энди Т.П. и др. Анализ повторных госпитализаций по поводу денге для оценки частоты третьей или четвертой инфекций денге, приводящих к госпитализации и геморрагической лихорадки денге, а также последовательностей серотипов. Am J Trop Med Hyg. 2007. 77 (5): 910–3. Epub 2007/11/07. pmid: 17984352
  14. 13. Olkowski S, Forshey BM, Morrison AC, Rocha C, Vilcarromero S, Halsey ES и др.Снижение риска заболеваний при вторичных инфекциях, вызванных вирусом денге. J Infect Dis. 2013. 208 (6): 1026–33. Epub 2013.06.19. PubMed Central PMCID: PMC3749012. pmid: 23776195
  15. 14. Sabchareon A, Wallace D, Sirivichayakul C, Limkittikul K, Chanthavanich P, Suvannadabba S и др. Защитная эффективность рекомбинантной живой аттенуированной четырехвалентной вакцины против денге против CYD у тайских школьников: рандомизированное контролируемое исследование фазы 2b. Ланцет. 2012. 380 (9853): 1559–67. Epub 2012/09/15.pmid: 22975340
  16. 15. Capeding MR, Tran NH, Hadinegoro SR, Ismail HI, Chotpitayasunondh T., Chua MN, et al. Клиническая эффективность и безопасность новой четырехвалентной вакцины против денге у здоровых детей в Азии: рандомизированное плацебо-контролируемое исследование фазы 3 с маскировкой наблюдателей. Ланцет. 2014. 384 (9951): 1358–65. pmid: 25018116
  17. 16. Вильяр Л., Дайан Г. Х., Арредондо-Гарсия Дж. Л., Ривера Д. М., Кунья Р., Деседа С. и др. Эффективность четырехвалентной вакцины против денге у детей в Латинской Америке.N Engl J Med. 2015; 372 (2): 113–23. pmid: 25365753
  18. 17. Хадинегоро С.Р., Арредондо-Гарсия Дж. Л., Кэпдинг М. Р., Деседа С., Чотпитаясунонд Т., Дитце Р. и др. Эффективность и долгосрочная безопасность вакцины против денге в регионах эндемических заболеваний. N Engl J Med. 2015. Epub 2015/07/28.
  19. 18. Дурбин А.П., Уайтхед СС. Модель вызова человека денге: пришло ли время принять этот вызов? J Infect Dis. 2013. 207 (5): 697–9. pmid: 23225898
  20. 19. Киркпатрик Б.Д., Дарбин А.П., Пирс К.К., Кармолли М.П., ​​Тайбери С.М., Гриер П.Л. и др.Устойчивый и сбалансированный иммунный ответ на все 4 серотипа вируса денге после введения одной дозы живой ослабленной четырехвалентной вакцины денге здоровым взрослым, не имеющим отношения к флавивирусу. J Infect Dis. 2015; 212 (5): 702–10. pmid: 25801652
  21. 20. Бауэр К., Эсквилин И.О., Корниер А.С., Томас С.Дж., Кинтеро Дель Рио А.И., Бертран-Пасарелл Дж. И др. Фаза II, рандомизированное исследование безопасности и иммуногенности повторно полученной живой ослабленной вакцины против вируса денге у здоровых детей и взрослых, проживающих в Пуэрто-Рико.Am J Trop Med Hyg. 2015; 93 (3): 441–53. Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC4559678. pmid: 26175027
  22. 21. Джордж С.Л., Вонг М.А., Дубе Т.Дж., Районы К.Л., Стовалл Д.Л., Луи Б.Е. и др. Безопасность и иммуногенность живой аттенуированной тетравалентной вакцины против денге у взрослых, не инфицированных флавивирусами: рандомизированное двойное слепое клиническое испытание фазы 1. J Infect Dis. 2015; 212 (7): 1032–41. Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC4559193. pmid: 257
  23. 22. КТО. Вакцина против денге: позиционный документ ВОЗ — июль 2016 г.Wkly Epidemiol Rec. 2016. 91 (30): 349–64. pmid: 27476189
  24. 23. Агияр М., Штолленверк Н., Холстед С.Б. Воздействие недавно лицензированной вакцины против денге в эндемичных странах. PLoS Negl Trop Dis. 2016; 10 (12): e0005179. Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC5176165. pmid: 28002420
  25. 24. Блейни Дж. Э. младший, Дурбин А. П., Мерфи Б. Р., Уайтхед СС. Разработка живой аттенуированной вакцины против вируса денге с использованием обратной генетики. Viral Immunol. 2006. 19 (1): 10–32. pmid: 16553547
  26. 25.Дурбин А.П., Киркпатрик Б.Д., Пирс К.К., Элвуд Д., Ларссон С.Дж., Линдоу Дж.С. и др. Одна доза любой из четырех различных живых аттенуированных четырехвалентных вакцин денге безопасна и иммуногенна для взрослых, не инфицированных флавивирусами: рандомизированное двойное слепое клиническое испытание. J Infect Dis. 2013. 207 (6): 957–65. PubMed Central PMCID: PMC3571448. pmid: 23329850
  27. 26. Киркпатрик Б.Д., Уайтхед С.С., Пирс К.К., Тайбери С.М., Гриер П.Л., Хайнс Н.А. и др. Живая аттенуированная вакцина против денге TV003 обеспечивает полную защиту от денге на модели заражения человека.Sci Transl Med. 2016; 8 (330): 330ra36.
  28. 27. Дурбин А.П., Киркпатрик Б.Д., Пирс К.К., Кармолли М.П., ​​Тайбери С.М., Гриер П.Л. и др. Исследование дозирования с 12-месячным интервалом у взрослых показывает, что однократная доза четырехвалентной вакцины против денге Национального института аллергии и инфекционных заболеваний вызывает устойчивый нейтрализующий ответ антител. J Infect Dis. 2016. Epub 16 февраля, 2016.
  29. 28. Дурбин А.П., Киркпатрик Б.Д., Пирс К.К., Шмидт А.С., Уайтхед СС. Разработка и клиническая оценка нескольких экспериментальных моновалентных вакцин DENV для определения компонентов для включения в живую аттенуированную четырехвалентную вакцину DENV.Вакцина. 2011. 29 (42): 7242–50. Epub 26.07.2011. pmid: 21781997
  30. 29. Дурбин А.П., МакАртур Дж., Маррон Дж. А., Блейни Дж. Э. мл., Тумар Б., Ванионек К. и др. Живая аттенуированная вакцина против лихорадки денге серотипа 1 rDEN1Delta30 безопасна и обладает высокой иммуногенностью для здоровых взрослых добровольцев. Hum Vaccin. 2006. 2 (4): 167–73. pmid: 17012875
  31. 30. Дурбин А.П., МакАртур Дж. Х., Маррон Дж. А., Блейни Дж. Э., Тумар Б., Ванионек К. и др. rDEN2 / 4Delta30 (ME), живая аттенуированная химерная вакцина против лихорадки денге серотипа 2, безопасна и обладает высокой иммуногенностью для здоровых взрослых, не инфицированных лихорадкой денге.Hum Vaccin. 2006. 2 (6): 255–60. pmid: 17106267
  32. 31. Дурбин А.П., Уайтхед СС, МакАртур Дж., Перро Дж. Р., Блейни Дж. Младший, Тумар Б. и др. rDEN4delta30, живой аттенуированный кандидат на вакцину против вируса денге типа 4, безопасен, иммуногенен и очень заразен для здоровых взрослых добровольцев. J Infect Dis. 2005. 191 (5): 710–8. pmid: 15688284
  33. 32. Дурбин А.П., Каррон Р.А., Сан В., Вон Д.В., Рейнольдс М.Дж., Перро Дж. Р. и др. Ослабление и иммуногенность у человека вакцины-кандидата от живого вируса денге типа 4 с делецией 30 нуклеотидов в его 3′-нетранслируемой области.Am J Trop Med Hyg. 2001. 65 (5): 405–13. pmid: 11716091
  34. 33. Wisseman CL Jr., Sweet BH, Kitaoka M, Tamiya T. Иммунологические исследования с вирусами группы B, переносимыми членистоногими. I. Расширенный спектр нейтрализующих антител, индуцированных вакциной против желтой лихорадки штаммом 17D, у людей, ранее инфицированных вирусом японского энцефалита. Am J Trop Med Hyg. 1962; 11: 550–61. pmid: 14007700
  35. 34. Wisseman CL Jr., Китаока М., Тамия Т. Иммунологические исследования с вирусами группы B, переносимыми членистоногими.V. Оценка перекрестного иммунитета против лихорадки денге 1 типа у людей, выздоравливающих от субклинической инфекции вируса естественного японского энцефалита и вакцинированных вакциной против желтой лихорадки штамма 17D. Am J Trop Med Hyg. 1966. 15 (4): 588–600. pmid: 4287392
  36. 35. Скотт Р.М., Экелс К.Х., Бэнкрофт У.Х., Саммерс П.Л., МакКаун Дж. М., Андерсон Дж. Х. и др. Вакцина против денге 2: доза-реакция у добровольцев в зависимости от иммунного статуса против желтой лихорадки. J Infect Dis. 1983. 148 (6): 1055–60. pmid: 6655288
  37. 36.Чан К.Р., Ван Х, Сарон В.А., Ган Э.С., Тан Х.С., Мок Д.З. и др. Перекрестно-реактивные антитела усиливают живую аттенуированную вирусную инфекцию для повышения иммуногенности. Nat Microbiol. 2016: 16164. pmid: 27642668
  38. 37. Цяо М., Шоу Д., Форрат Р., Wartel-Tram A, Ланг Дж. Примирующий эффект вакцинации против денге и желтой лихорадки на иммуногенность, инфекционность и безопасность четырехвалентной вакцины против денге у людей. Am J Trop Med Hyg. 2011; 85 (4): 724–31. Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC3183784.pmid: 21976579
  39. 38. Гай Б., Джексон Н. Вакцина против денге: гипотезы для понимания защиты, индуцированной CYD-TDV. Nat Rev Microbiol. 2016; 14 (1): 45–54. pmid: 26639777
  40. 39. Henein S, Swanstrom J, Byers AM, Moser JM, Shaik SF, Bonaparte M, et al. Расщепление антител, индуцированных химерной желтой лихорадкой денге, живой аттенуированной четырехвалентной вакциной против денге (CYD-TDV) у наивных лиц и лиц, подвергшихся воздействию денге. J Infect Dis. 2016.
  41. 40. Weiskopf D, Cerpas C, Angelo MA, Bangs DJ, Sidney J, Paul S и др.Человеческие CD8 + Т-клеточные ответы против 4 серотипов вируса денге связаны с различными паттернами белковых мишеней. J Infect Dis. 2015; 212 (11): 1743–51. PubMed Central PMCID: PMC4633759. pmid: 25980035
  42. 41. Вейскопф Д., Сетте А. Т-клеточный иммунитет к инфекции вирусом денге у людей. Фронт Иммунол. 2014; 5: 93. PubMed Central PMCID: PMC3945531. pmid: 24639680
  43. 42. Анджело М.А., Грифони А., О’Рурк PH, Сидни Дж., Пол С., Петерс Б. и др. Ответы CD4 + Т-клеток человека на ослабленную четырехвалентную вакцину против денге параллельны ответам, вызванным естественной инфекцией, по величине, ограничению HLA и антигенной специфичности.J Virol. 2016.
  44. 43. Вейскопф Д., Анджело М.А., де Азередо Е.Л., Сидней Дж., Гринбаум Дж. А., Фернандо А.Н. и др. Всесторонний анализ ответов, специфичных для вируса денге, подтверждает HLA-связанную защитную роль CD8 + Т-клеток. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2013; 110 (22): E2046–53. Epub 2013/04/13. Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPmc3670335. pmid: 23580623
  45. 44. Вайскопф Д., Анджело М.А., Bangs DJ, Сидни Дж., Пол С., Петерс Б. и др. Ответы CD8 + Т-клеток человека, индуцированные живой аттенуированной четырехвалентной вакциной против денге, направлены против высококонсервативных эпитопов.J Virol. 2015; 89 (1): 120–8. PubMed Central PMCID: PMC4301095. pmid: 25320311
  46. 45. Lindenbach BD, Rice CM. Молекулярная биология флавивирусов. Adv Virus Res. 2003. 59: 23–61. pmid: 14696326

Стимуляция В-клеточного иммунитета у индивидуумов, наивных флавивирусов, с помощью четырехвалентной живой ослабленной вакцины против денге TV003

https://doi.org/10.1016/j.xcrm.2020.100155Получить права и контент

Основные моменты

Четырехвалентный живой аттенуированный вакцина TV003 стимулирует плазмобласты

Устойчивый плазмобластный ответ связан со стерильной защитой от заражения

DENV-специфические В-клетки памяти сохраняются через 6 месяцев после вакцинации

DENV-специфические CD4 + Т-корреляты нейтрализующих клеток

Резюме

Четырехвалентная живая аттенуированная вакцина против лихорадки денге TV003 индуцирует нейтрализующие антитела против всех четырех серотипов вируса денге (DENV1 – DENV4) и защищает людей от экспериментального заражения DENV2.Здесь мы отслеживаем вакцинную виремию, а также В- и Т-клеточные реакции на эту модель вакцинации / заражения, чтобы понять, как вакцинная виремия связывает адаптивный иммунитет и развитие защитных ответов антител. Виремия TV003 вызывает острый ответ плазмобластов, который в сочетании с DENV-специфическими Т-клетками CD4 + коррелирует с сывороточными нейтрализующими антителами. Вакцинированные TV003 развивают DENV2-реактивные В-клетки памяти, включая серотип-специфические и поливалентные специфичности в соответствии с составом сывороточных антител.У вакцинированных не наблюдается ответа плазмобластов после заражения, хотя более сильные и ранние ответы плазмобластов после заражения связаны со стерильной гуморальной защитой от заражения DENV2. Вакцина TV003 запускает плазмобласты и В-клетки памяти, которые при поддержке Т-лимфоцитов CD4 + функционально связывают раннюю вакцинную виремию и сывороточные ответы антител.

Ключевые слова

вакцина против денге

четырехвалентная живая аттенуированная вакцина

гуморальный иммунный ответ

нейтрализующие антитела

В-клетки памяти

Т-клетки CD4

защитный иммунитет

TV003

-специфические статьи

(0)

© 2020 Автор (ы).

Рекомендуемые статьи

Ссылки на статьи

Обзор живых аттенуированных рекомбинантных вирусов псевдобешенства для использования в качестве новых вакцин

Вирус псевдобешенства (PRV) представляет собой двухцепочечный вирус свиней на основе ДНК с размером генома около 150 т.п.н. PRV имеет много несущественных генов, которые можно заменить генами, кодирующими гетерологичные антигены, но без вредного воздействия на размножение вируса. Рекомбинантные PRV, экспрессирующие как нативные, так и чужеродные антигены, способны стимулировать иммунные ответы.В этой статье мы рассматриваем текущее состояние живых аттенуированных рекомбинантных PRV и живых векторных вакцин на основе PRV с потенциалом для борьбы с вирусными инфекциями у животных.

1. Введение
1.1. Общая информация о PRV

Вирус псевдобешенства (PRV) является членом семейства Herpesviridae, подсемейства Alphaherpesvirinae [1] и возбудителем псевдобешенства (PR) или болезни Ауежского. Инфекции PRV приводят к нервным расстройствам, респираторной недостаточности, потере веса, гибели молодых поросят и аборту [2].Вирус имеет геном двухцепочечной линейной ДНК длиной 1,43 × 10 5 т.п.н. [3] и содержит уникальную длинную область (UL), уникальную короткую область (US), последовательность концевого повтора (TRS) и внутреннюю повторяющиеся последовательности (IRS) [4].

На сегодняшний день идентифицировано по крайней мере 11 различных гликопротеинов PRV (gB, gC, gD, gE, gG, gH, gI, gK, gL, gM или gN) и секвенированы гены, кодирующие эти белки. Основные гликопротеины PRV включают gB, gD, gH, gL и gK; остальные считаются несущественными [5, 6].Существует несколько неструктурных белков PRV, таких как тимус-киназа (TK) и протеинкиназа (PK), которые связаны с вирулентностью [6, 7]; однако это подмножество генов может быть заменено гетерологичными генами, не влияя на инфекционность или размножение вируса, при условии, что основные гены остаются нетронутыми. Схематическое изображение общих сайтов для встраивания генов в геном PRV показано на рисунке 1.


Эффективность поливалентных вакцин PRV была исследована. Здесь мы рассматриваем прогресс исследований с использованием аттенуированных рекомбинантных PRV (rPRV) в качестве кандидатов на вакцины с применением для продвижения разработки векторных вакцин rPRV.

1.2. Введение в живые ослабленные вакцины против PRV

Рекомбинантные вирусы представляют собой особенно многообещающее направление исследований вакцин как для улучшения существующих вакцин, так и для разработки новых [8, 9]. В принципе, дизайн векторных вакцин PRV основан на использовании генома живого PRV для вставки и экспрессии генов, кодирующих защитные антигены других патогенов, включая вирусы, бактерии и паразиты [10]. Экспрессированные чужеродные антигены можно впоследствии использовать для стимуляции соответствующих иммунных ответов [11].Существование множества несущественных генов в большом геноме PRV позволяет одновременно вставлять несколько чужеродных генов в надежде провести вакцинацию против нескольких заболеваний одновременно [12].

PRV Bartha-K61 — обычный родительский штамм rPRV. Это ослабленный PRV, который неоднократно пассировал в клетках почек свиней, куриных яйцах и клетках куриных эмбрионов [13]. В этом штамме удалены все гены gE и часть генов gI [14]. Тем не менее, эта конструкция оказалась успешной при разработке поливалентных вакцин для борьбы с различными инфекционными заболеваниями [4, 10, 15].

Обычная стратегия использования rPRV включает конструирование вектора-переноса, несущего часть генома PRV. Этим вектором трансфицируют чувствительные клетки вместе с нативным PRV, а затем клетки проверяют на присутствие рекомбинанта. В дополнение к части генома PRV вектор для переноса также содержит промотор, представляющие интерес чужеродные гены и репортерный ген. Последовательности PRV должны появляться в начале и в конце вектора, чтобы обеспечить гомологичную рекомбинацию между плечами вектора и геномами вируса.Одно исследование продемонстрировало, что промотор цитомегаловируса человека (CMV) более эффективен, чем промотор PRV, в управлении синтезом вирусных генов [4]. Таким образом, промотор немедленного раннего гена CMV стал наиболее распространенным промотором, используемым в этих конструкциях. Его также можно использовать для идентификации rPRV. В дополнение к традиционным подходам к созданию рекомбинантов вирусные геномы можно клонировать в векторы искусственной бактериальной хромосомы (ВАС). Было рассмотрено использование ВАС вируса герпеса для создания сайт-направленных и транспозонных мутагенных рекомбинантов [16].

2. Эффективность живых ослабленных вакцин PRV

На сегодняшний день большинство чужеродных генов, которые были вставлены в геном PRV, кодируют ключевые антигены, полученные из вирусов животных. Сводная информация о конструкциях, разработанных на сегодняшний день, представлена ​​в таблице 1, которая включает родительские штаммы PRV, чужеродные гены и сайты встраивания. В следующих примерах более подробно рассказывается об успехах использования этой технологии.

T82 штамм GP 905 PRRSV [24] 905 -трансфераза (Sj26GST) и белок, связывающий жирные кислоты (SjFABP) Schistosoma japonicum [59] Гликопротеин E2 оболочки CSFV [51]

Сайты встраивания в геном PRV Родительские штаммы PRV Чужеродные гены [ссылки]

Ген TK Штамм Bartha-K61 Ген HA SIV подтипа h4N2 [55]
Между геном PK и gG Штамм Bartha-K61 Главный иммунный антиген 1 (TgSAG1) простейшего паразита, T.gondii [57]
Между PK и геном gG Штамм Bartha-K61 Гликопротеин вируса бешенства [61]
Между PK и геном gG Bartha-K61 Штамм
ген gG TK- / gG- / LacZ + штамм Ген VP1 вируса ящура [38]
ген gG штамм TK- / gG- / LacZ + Кодирующие области предшественника капсида [39]
ген gG TK- / gG- / EGFP + штамм Основной поверхностный антиген 1 (SAG1) и микронемный белок MIC3 простейшего паразита, T.Gondii [58]
ген gG TK- / gG- / LacZ + штамм Ген NS1 вируса японского энцефалита [60]
ген gD штамм gE- / gD-82
ген gI TK- / gE- / gI-штамм Ген VP2 [44]
Между геном gE и gI TK- / gE- / gI- / LacZ + штамм Два основных мембраносвязанных белка (GP5 и / или M) (GP5 содержит нативный GP5 и модифицированный GP5) вируса РРСС [11]
Между геном gE и gI TK — / gE- / LacZ + штамм ORF1 и частичный ген ORF2 / ген ORF2 PCV2 [10, 31]
Между геном gE и gI TK- / gE- / gI-штамм Предшественник капсида полипептид P12A и неструктурный белок 3C вируса ящура [40]
Между геном gE и gI TK- / gE- / LacZ + штамм 9 0579 Белок-предшественник P1-2A вируса ящура и белок VP2 PPV [12]
ген gE TK- / gE- / LacZ + штамм Модифицированный GP5 [25]

2.1. Вакцины с рекомбинантным вирусом PRRS / PRV

Вирус репродуктивного и респираторного синдрома свиней (PRRSV) представляет собой оболочечный вирус с положительной цепью РНК, который является членом семейства Arteriviridae [17]. Это вызывает огромные экономические потери во всем мире и является одной из самых серьезных болезней в странах, где интенсивно разводят свиней [18–20]. Геном PRRSV имеет длину 15 т.п.н. и содержит девять открытых рамок считывания (ORF), обозначенных ORF1a, ORF1b, ORF2a, ORF2b, ORF3, ORF4, ORF5, ORF6 и ORF7 [21–23].

Десять лет назад был разработан ослабленный rPRV, rPRV-GP5, который экспрессирует белок оболочки GP5 вируса PRRS; белок GP5 кодируется ORF5. RPRV-GP5 был способен обеспечить значительную защиту от клинических симптомов и уменьшить патогенные поражения, вызванные провокацией PRRSV у вакцинированных свиней. Свиньи, иммунизированные вакциной, инактивированной rPRV, или вакциной, инактивированной вирусом PRRS, оставались клинически здоровыми до и после заражения. После иммунизации наблюдается только короткий период (3 дня) легкой лихорадки (≤41 ° C), постепенное улучшение поражения легких и почек и кратковременная виремия (2 и 3 недели, соответственно.) в результате; однако перед контрольным заражением не было обнаружено антител против вируса РРСС [24]. Чтобы улучшить защитную эффективность rPRV-GP5, был синтезирован модифицированный ген GP5 (GP5 m), в котором последовательность эпитопа Т-хелперных клеток Pan DR (PADRE) была вставлена ​​между N-концом и нейтрализующим эпитопом GP5. Новый rPRV-GP5 вызывал более высокий уровень PRRSV-специфических нейтрализующих антител и клеточных иммунных ответов, чем rPRV-GP5 [25].

Недавно эта группа создала другую конструкцию, названную rPRV-GP5 m-M, которая экспрессирует два основных мембранно-ассоциированных белка (GP5 и M) PRRSV в одном и том же векторе [11].У мышей, иммунизированных rPRV-GP5 m-M, развивались PRV-специфические гуморальные иммунные ответы и обеспечивалась полная защита от летального заражения PRV. В то же время у иммунизированных мышей наблюдались высокие уровни специфичных к вирусу РРСС нейтрализующих антител и реакции пролиферации лимфоцитов. Как только доказательство принципа было продемонстрировано на мышах, исследования перешли на поросят. По сравнению с коммерчески доступной убитой вакциной против вируса РРСС, животные, иммунизированные rPRV-GP5 m-M, вырабатывали более высокие нейтрализующие антитела, специфичные для вируса РРСС, и более высокие реакции пролиферации лимфоцитов, что приводило к лучшей защите от вируса РРСС.Эти данные показывают, что PRV является отличным вектором для разработки вирусных вакцин против PRV и PRRSV.

2.2. Вакцина на основе рекомбинантного вируса PCV2 / PRV

Цирковирус свиней типа 2 (PCV2) является основной причиной мультисистемного синдрома истощения после отъема (PMWS), который является всемирным заболеванием, изнуряющим свиней лимфаденопатией и интерстициальной пневмонией [26, 27]. PCV2 — это вирус с одноцепочечной кольцевой ДНК, член семейства Circoviridae [28]. PCV2 имеет три основных ORF; ORF1 кодирует два связанных с репликацией белка, Rep и Rep ’, которые необходимы для репликации вирусной ДНК [29]; ORF2 кодирует главный капсидный белок PCV2; ORF3 кодирует неструктурный белок ORF3 [30].Был сконструирован rPRV, экспрессирующий слитый белок ORF1 и 2, и его иммуногенность проверена на мышах и свиньях [10]. RPRV-PCV2 вызывал сильные антитела против PRV и против PCV2 у мышей BALB / c, где rPRV-PCV2 защищал мышей от летального заражения вирулентным PRV. У свиней rPRV-PCV2 вызывал значительные иммунные ответы против PRV и PCV2.

Был сконструирован второй rPRV, экспрессирующий только ген ORF2, который также использовали для иммунизации поросят. Результаты показали, что rPRV-ORF2 вызывал значительные гуморальные иммунные ответы как на PRV, так и на PCV2, при этом специфичные для PCV2 ответы пролиферации лимфоцитов можно было обнаружить через 49 дней после иммунизации [31].RPRV-ORF2 лучше вызывал защитные иммунные ответы у поросят, чем rPRV, экспрессирующий как ORF1, так и 2. Эти результаты демонстрируют, что rPRV-PCV2 может быть подходящей бивалентной вакциной против PRV и PCV2 и что множественность не всегда является оптимальным подходом к разработке вакцины. .

2.3. Вакцина на основе рекомбинантного вируса ящура / PRV

Вирус ящура (ящур) очень заразен и поражает всех парнокопытных домашних животных, включая крупный рогатый скот, овец, коз, свиней и буйволов [32].Это положительный вирус с одноцепочечной РНК длиной около 8,5 т.п.н. и принадлежит к семейству Picornaviridae. Предшественник капсида ящура P1-2A отщепляется и высвобождается из полипротеина L-протеазой и процессируется вирусной протеазой 3C с образованием четырех структурных белков: VP1, VP2, VP3 и VP4 [33]. Ящур имеет семь серотипов: A, O, C, Asia1, SAT1, SAT2 и SAT3, каждый из которых содержит несколько подтипов [34–37].

Используя PRV в качестве вектора, ген VP1 был слит с геномом PRV. Иммуногенность рекомбинантного продукта была протестирована на 15 белых свиньях, серонегативных по вирусу ящура.Хотя уровни антител были ниже, чем уровни, индуцированные коммерчески доступными вакцинами против ящура, и защиты от вирулентного вируса ящура не наблюдали, конструкция rPRV-VP1 по-прежнему облегчала клинические симптомы у инфицированных свиней [38]. Для улучшения иммунного ответа был создан другой rPRV, который экспрессирует P1-2A вируса ящура; его защитные эффекты были оценены на белых свиньях [39]. В отличие от более ранней версии, эти свиньи демонстрировали высокие уровни нейтрализующих антител как к ящурному вирусу, так и к PRV, а также демонстрировали сильные ответы ЦТЛ против активации антигена вируса ящура.После заражения репликация вируса ящура была значительно ниже у свиней, вакцинированных новой конструкцией rPRV, по сравнению с коммерчески доступной вакциной.

Недавно был разработан и испытан на поросятах другой rPRV, который коэкспрессирует P1-2A и вирусную протеазу 3C [40]. Эти результаты показали, что rPRV-P12A3C индуцировал высокий уровень нейтрализующих антител и пролиферативные ответы лимфоцитов, специфичных для вируса ящура. По сравнению с инактивированной вакциной против ящура, которая обеспечивала 100% защиту, rPRV-P12A3C вызывала только 60% защиты у зараженных поросят, но была способна уменьшить патогенные поражения.Эти данные свидетельствуют о том, что rPRV-P12A3C лучше защищал поросят, чем предыдущие конструкции, и поддерживает дальнейшую разработку вакцин как против ящура, так и против PRV. Теперь работа должна быть сосредоточена на других серотипах вируса ящура в надежде найти одну вакцину с хорошей эффективностью против всех или большинства серотипов.

2.4. Вакцина на основе рекомбинантного вируса PPV / PRV

Парвовирус свиней (PPV) является важной причиной репродуктивной недостаточности у свиней. Он характеризуется гибелью плода, мумификацией, мертворождением и увеличенными интервалами между опоросами [41].PPV представляет собой одноцепочечный ДНК-вирус, который является членом семейства Parvoviridae. Его геном имеет размер 5kb и содержит две большие рамки считывания; левая ORF кодирует неструктурный белок NS1, а правая ORF кодирует три капсидных белка [42]. Один из трех капсидных белков, VP2, может самособираться в вирусоподобные частицы (VLP), которые иммунологически неотличимы от инактивированных цельновирусных вакцин [43].

Был сконструирован rPRV для экспрессии гена VP2 PPV [44]. Поросята, вакцинированные rPRV-VP2, вызывали PRV- и PPV-специфические гуморальные иммунные ответы и генерировали полную защиту от летальной дозы PRV.Это открытие является дополнительным аргументом в пользу разработки бивалентных вакцин, в частности против PRV и PPV.

2,5. Вакцина на основе рекомбинантного вируса ящура / PPV / PRV

Была сконструирована rPRV, коэкспрессирующая P1-2A вируса ящура и VP2 PPV, который был использован для вакцинации мышей BALB / c [12]. Как общие антитела, так и уровни нейтрализующих антител к PRV были эквивалентны коммерчески доступной вакцине PRV. Защита от ящура или PPV была> 60% по сравнению с инактивированными вакцинами. Титры нейтрализующих антител, индуцированные конструкцией rPRV против ящура или PPV, составляли 50% от уровня, индуцированного их соответствующими инактивированными вакцинами.

В отличие от предыдущих конструкций, эта вакцина-кандидат продемонстрировала возможность использования rPRV для разработки трехвалентных вакцин, в частности против PRV, ящура и PPV. В будущем следует провести работу на свиньях, чтобы проверить применимость такой вакцины на естественном хозяине для этих вирусов.

2.6. Рекомбинантная вирусная вакцина CSFV / PRV

Вирус классической чумы свиней (CSFV) является серьезным препятствием для глобальной торговли продуктами из свинины и приводит к значительным финансовым потерям [45].CSFV представляет собой оболочечный, положительный, одноцепочечный РНК-вирус, который принадлежит к роду Pestivirus семейства Flaviviridiae [46, 47]. Его геном длиной 12,3 т.п.н. кодирует один гликопротеин [48], гликопротеин E1 (позже названный E2), который является высокоиммуногенным и способен вызывать защитные иммунные ответы [49, 50].

Был синтезирован двухвалентный rPRV, который был отрицательным по gD / gE и экспрессировал гликопротеин E2. Вакцинация поросят продемонстрировала сильную защиту как от болезни Ауески, так и от CSFV [51], поддерживая использование бивалентных вакцин на основе rPRV против CSFV.

2.7. Вакцина на основе рекомбинантного вируса SIV / PRV

Вирус свиного гриппа (SIV) представляет собой вирус типа A, который имеет оболочку и состоит из отрицательной одноцепочечной РНК. Он является членом семейства Orthomyxoviridae, и его геном кодирует 10 вирусных белков. Сегмент РНК 4 содержит ген, кодирующий гликопротеин большого гемагглютинина (НА), который является основным поверхностным гликопротеином. Он также является основным иммуногеном, который индуцирует подтип-специфические защитные клеточные и гуморальные иммунные ответы у животных [52, 53].Сегмент 5 кодирует ген нуклеопротеина (NP) [54]

Был сконструирован rPRV, экспрессирующий ген НА серотипа h4N2 подтипа SIV (A / Swine / Inner Mongolia / 547/2001) [55], и его иммуногенность была протестирована на мышах. После заражения вирус не может быть выделен из вакцинированных мышей; однако в легких наблюдались легкие патологические поражения. В то же время конструкция rPRV-HA также защищала мышей от заражения с использованием гетерологичного вирулентного SIV (A / Swine / Heilongjiang / 74/2000). Вакцина rPRV-HA представляет собой кандидатную вакцину против SIV.Недавно Klingbeil et al. [56] использовали технологию ВАС для создания вакцины на основе HA, полученной из вируса h2N1 свиньи, клонированного в PrV. Полученный вирус мало отличался от родительского штамма. Свиньи, получившие однократную инъекцию вакцины, продуцировали высокие уровни антител, направленных против белка НА, производного от h2N1, и были защищены от клинических признаков инфекции при заражении.

2,8. Другие вакцины против rPRV

PRV имеет широкий спектр хозяев, включая свиней, овец, крупный рогатый скот и собак [3].Таким образом, вектор PRV использовался для разработки рекомбинантных вакцин для других хозяев и в системах, не связанных с вирусной защитой, то есть простейших паразитов.

2.8.1.
Toxoplasma gondii / PRV Рекомбинанты

Был сконструирован rPRV, экспрессирующий SAG1 из простейшего паразита, T. gondii [57]. Белковый домен SAG1 принадлежит к группе гликозилфосфатидилинозитол (GPI) -связанных белков с последовательностями, родственными SAG1, которые можно найти на поверхности паразита.Защитный характер конструкции rPRV-SAG1 был протестирован на мышах BALB / c. Все мыши, вакцинированные rPRV-SAG1, вырабатывали высокие уровни специфических антител против лизатного антигена (TLA) T. gondii и нейтрализующих антител. Кроме того, они наблюдали усиление пролиферативного ответа спленоцитов, IFN-, γ и IL-2 и сильные ответы цитотоксических Т-лимфоцитов. Когда мышей заражали высоковирулентным штаммом RH T. gondii , конструкция rPRV-SAG1 индуцировала частичную защиту (60%).Вероятно, это связано со значительно сложным жизненным циклом простейших паразитов и стадийной специфичностью экспрессии SAG1.

Для улучшения защитного ответа были разработаны два дополнительных rPRV, экспрессирующих SAG1 или микронемный белок MIC3 (rPRV-MIC3), которые использовали для иммунизации мышей BALB / c отдельно и одновременно [58]. Все мыши, вакцинированные rPRV, индуцировали высокие уровни антител к лизатному антигену T. gondii , пролиферацию спленоцитов, IFN-γ и IL-2.Дальнейшие эксперименты показали, что rPRV стимулировали гуморальные и клеточные иммунные ответы in vivo. Вакцинированные мыши выжили после смертельного заражения штаммом T. gondii RH; однако защита не была полной.

Эти результаты подтверждают предыдущие исследования, показывающие полезность экспрессии защитных антигенов T. gondii в PRV в качестве нового подхода к разработке вакцин-кандидатов против псевдобешенства и токсоплазмоза; однако необходимы дополнительные исследования для повышения выживаемости животных-хозяев перед заражением паразитами.Один из подходов заключается в создании поливалентной вакцины, нацеленной на более чем одну стадию инфекции, или в тестировании антигенов других паразитов. В отличие от вирусов, паразиты намного сложнее как биологически, так и генетически, что усложняет подход к разработке рекомбинантных вакцин.

2.8.2.
Schistosoma japonicum / PRV Рекомбинанты

Были сконструированы три rPRV, экспрессирующие глутатион-S-трансферазу S. japonicum (Sj26GST), белок, связывающий жирные кислоты (SjFABP), или оба они были названы rPRV / Sj26GST, rPRV / SjFAB и Sj26GST-SjFABP соответственно [59].Оценивали их способность защищать мышей и овец от заражения S. japonicum . Результаты показали, что все rPRV индуцировали специфические ответы антител против общих экстрактов червей, увеличивали пролиферацию спленоцитов и повышали уровни IFN-γ и IL-2 у иммунизированных мышей. Однако у животных, которым вводили rPRV / Sj26GST-SjFABP, наблюдалась лучшая иммунная стимуляция, чем у животных, которым вводили либо rPRV / Sj26GST, либо rPRV / SjFABP. Кроме того, для всех иммунизированных овец лечение было признано безопасным, и после заражения количество червей и яиц было заметно снижено.

Эти результаты показали, что поливалентные вакцины на основе rPRV для S. japonicum могут обеспечивать значительную защиту и способны предотвращать заражение простейшими паразитами. Однако менее 100% -ная защита, которая очень часто встречается среди предполагаемых паразитарных вакцин, препятствует их принятию и дальнейшему развитию.

2.8.3. Рекомбинанты JEV / PRV

Был сконструирован rPRV, экспрессирующий белок NS1 вируса японского энцефалита (JEV) [60]. Иммунизировали как мышей BALB / c, так и свиней.Тест с использованием 10 6 БОЕ на мышах, поросятах и ​​супоросных свиноматках показал хороший профиль безопасности для rPRV. У животных, которым вводили вирус rPRV-NS1, развились гуморальные и клеточные иммунные ответы, специфичные для JEV, и они защищали животных от летального заражения вирулентным штаммом Ea PRV. Эти эксперименты предоставили доказательства того, что rPRV может служить кандидатом для создания новой вакцины, которая может использоваться для борьбы с псевдобешенством и японским энцефалитом.

2.8.4. Рекомбинанты вируса бешенства / PRV

Был сконструирован rPRV, экспрессирующий гликопротеин вируса бешенства [61].Этот рекомбинантный вирус был признан безопасным для собак при пероральном и внутримышечном введении и вызывал защитные иммунные ответы как против бешенства, так и против псевдобешенства. Титры нейтрализующих антител против бешенства и псевдобешенства были явно повышены через 5 недель после вакцинации и оставались такими же в течение по крайней мере 6 месяцев. Этот эксперимент показывает, что сконструированные здесь конструкции хорошо выжили в организме хозяина, так что иммунный профиль вакцинированных животных был долгоживущим.

3. Другие вирусные векторы

Очевидно, что существуют и другие вирусные геномы, которые могут служить векторами вакцины, такие как аденовирус, поксвирус и бакуловирус.Все они были протестированы в качестве носителей для доставки экзогенных антигенов, которые ранее экспрессировались в векторах PRV. Аденовирусы в настоящее время являются одной из наиболее применяемых систем доставки генов. Как векторы, они обладают высокой способностью встраивать чужеродные гены (5–36 т.п.н.), способны трансдуцировать широкий спектр типов клеток [62] и коммерчески доступны в форме наборов для последующей генетической модификации.

Поксвирусы — самая крупная из известных групп ДНК-вирусов животных. Они широко используются в качестве векторов экспрессии для вакцинации, экспрессии крупных чужеродных генов и индукции клеточных и гуморальных иммунных ответов [63].Среди наиболее распространенных поксвирусов — модифицированный вирус осповакцины Анкара (MVA), вирус оспы птиц и вирус orf. MVA была противооспенной вакциной в течение многих лет, а в последнее время она использовалась в качестве вирусного вектора для предотвращения как рака, так и инфекционных заболеваний [64]. Другие примеры включают использование рекомбинанта на основе оспы канареек, содержащего гены PrM и E вируса Западного Нила (WNV), для индукции защиты у кошек и собак. Это исследование привело к экспрессии генов WNV и индукции защитного иммунитета [65].Вирус orf был использован для создания защитного иммунитета против CSV с использованием гена E2 [66] и псевдобешенства у свиней [67]. Поскольку вирус orf редко вызывает системные инфекции и имеет узкий круг хозяев инфекции; это логичный выбор для разработки поливалентных вирусных вакцин.

Бакуловирус — отличный инструмент для сверхэкспрессии рекомбинантных белков в клетках насекомых. Первоначально считалось, что его специфичность к хозяину ограничивается клетками, происходящими от членистоногих; однако недавние исследования показали, что бакуловирусы, несущие активные в отношении клеток млекопитающих промоторы, способны переносить и экспрессировать чужеродные гены в различных типах клеток млекопитающих, а также в моделях на животных [68].Бакуловирусные системы были очень популярны, потому что, как и аденовирусы, они также коммерчески доступны и в форме наборов для легкой генетической модификации.

Вышеупомянутые вирусы также использовались для разработки рекомбинантных живых вирусов, несущих компоненты PRRSV, PCV2, FMDV, CSFV и SIV. Сравнение ключевых иммунологических эффективностей среди этих многих вирусных векторов показано в таблице 2.

(dpi) достигал пика при 42 dpi, максимальный титр = 16 905 Высокий IFN- γ (147,84 пг / мл) 908 [11]

9057 и неструктурный белок 3C 905 IFN- (1917 пг / мл) гликпроигрыш882 905 905 E9 .8 (21 dpi)
Титр = 218,8 (35 dpi) 905 9057 9057 905 905 9057 905 SIV 9 0582 HA-ингибирующее Ab (HI) появлялось при 14 dpi с максимумом при 35 dpi
Titer = 8;
Максимальный титр = 32
Защита = 83.3%

Вирусы и векторы Вставленный ген Хозяин Ссылка

PRRSV
Собачий аденовирусный тип Анти-PRRSV Ab появлялся при 14 dpi; CTL появился при 28 dpi [7]
Аденовирус GP5 и M Мышь Появился при 14 dpi с пиком при 56 dpi, максимальный титр = 102 Специфические лимфоцитарные ответы появились при 28 dpi ; CTL появлялся при 28 dpi [69]
MVA (Poxvirus) GP5 и M Mouse появлялся при 14 dpi с максимальным титром 70 dpi = 8.12 Высокий IFN- (72,6 пг / мл) [60]
Бакуловирус GP5 и M Мышь Появляется при 21 dpi с максимальным титром 42 dpi 65 = 8 [52]
PRV GP5 и M Мышь Отображается при 42 dpi с пиком при 70 dpi максимальные титры = 21,3
GP5m и M Поросята Появлялись при 42 dpi с максимальным значением 84 dpi, максимальный титр = 160 Anti-PRRSV Ab появлялся при 28 dpi
PCV2
Аденовирус ORF2 Поросята 27 Титров = 1: 36 Dpi) и 1:48 (37 dpi) Специфические Ab появлялись при 10 dpi; защита = 60% [55]
Бакуловирус ORF2 Мышь Появляется при 21 dpi с пиком при 42 dpi, максимальный титр = 16 Специфические Ab появляются при 21 dpi; высокий IFN- γ (286 пг / мл) [70]
PRV ORF2 Поросята Появились при 21 dpi
PCV2 Ab не обнаружены
Удельные Ab; ЦВС-2-специфическая пролиферация лимфоцитов появлялась при 49 dpi (низкое) [71]

FMDV
Поросята не обнаружено Защита = 75% низкое Ab [72]
Вирус оспы птиц (поксвирус) цельный капсид и неструктурный белок 3C Мышь Определенное Ab появилось при 10 dpi
Поросята Пиковое значение 30 dpi уменьшилось на 49 dpi 10dpi Specific Ab; защита = 75% [21]
бакуловирус псевдотипа цельный капсид и неструктурный белок 3C Мышь Титр = 13 (21 точек на дюйм)
Титр = 35 (49 точек на дюйм)
Высокий [73]
PRV цельный капсид и неструктурный белок 3C Поросята Появляются с 21 dpi (переменная) Вирус-специфичные лимфоциты и неспецифические лимфоциты -пролиферативные ответы выше, чем рекомбинантные; защита = 60% [63]

CSFV
[43]
Поросята Уровень антител был 90% ингибирования Защита
Вирус Orf (Поксвирус) Гликопротеин E2 Поросята Появился при 21 dpi
Титр = 37 (49 dpi)
Защита = 100% 905 905 905 905 9057 PR 9057 9057 9057 PR Гликопротеин E2 Поросята Появление при 42 dpi
Титр = 37
Защита = 100% [6]


Аденовирусы Ген НА типа h4N2 Мышь Появляется с разрешением 14 dpi [31]
PRV Ген HA типа h4N2 Mouse HI Ab появился при 21 dpi Максимум 42 dpi
Титр = 2
80 Максимальный титр = 4 Защита %.
[9]

Прошлые успехи rPRV в качестве вектора для экспрессии экзогенных антигенов привели к созданию новых rPRV, которые менее патогены. Есть много преимуществ rPRV.Во-первых, живой аттенуированный PRV имеет большой геном, в котором половина генома считается несущественной, что позволяет модифицировать, не затрагивая ключевые характеристики, такие как инфекционность. Хотя некоторые из этих генов связаны с вирулентностью, их делеция и замена чужеродными генами не оказывает неблагоприятного воздействия на распространение PRV [31]. Репрезентативная информация относительно общих сайтов инсерции в родительских вирусах суммирована в таблице 1. Преимущества вирусных векторов заключаются в том, что они экспрессируют не только свои собственные защитные антигены, но также любые вставленные экзогенные гены.Поскольку они используют аппарат хозяина для репликации и экспрессии белков, полученные экзогенные генные продукты с большей вероятностью будут правильно модифицированы или свернуты посттрансляционно, чего не хватает в бактериальных системах. Таким образом, продукты, полученные из rPRV, с большей вероятностью имитируют нативные иммуногены и правильно вызывают гуморальные и / или клеточные ответы у иммунизированных животных. Как показано выше, с помощью одной векторной конструкции можно воздействовать на несколько заболеваний. Во-вторых, существует минимальный риск при использовании вакцин с делецией гена PRV.Штаммы вакцины PRV используются в течение десятилетий и демонстрируют высокие профили безопасности и эффективности in vivo. В-третьих, PRV имеет широкий диапазон хозяев, включая свиней, крупный рогатый скот, коз и собак. Это позволяет воздействовать на болезни животных у нескольких хозяев, не прибегая к множеству векторных конструкций для экспрессии антигенов. В-четвертых, нативный PRV индуцирует клеточный иммунитет и вызывает скрытую инфекцию. Следовательно, rPRV могут поддерживаться в течение длительных периодов времени у данного хозяина, тем самым обеспечивая постоянную стимуляцию защитных иммунных ответов.Наконец, PRV может размножаться в различных клеточных линиях, включая клетки фибробластов куриных эмбрионов SPF. Это позволяет упростить производство вирусов и держать производственные затраты под контролем.

Другие моменты, которые следует учитывать при разработке векторных вакцин на основе PRV, заключаются в том, что эта векторная система требует сильного промотора для поддержания высоких и стабильных уровней экспрессии. Кроме того, выбор несущественных генов в геноме PRV для замены интересующими чужеродными генами может повлиять на оптимизацию иммунного ответа.Учитывая конкурирующие интересы между иммунными ответами на основе вектора и экзогенного белка, рекомбинантные конструкции должны быть охарактеризованы в отношении оптимальной дозировки инокуляции. Для разработки эффективных вакцин против rPRV во всей будущей работе необходимо учитывать патогенные особенности, защитные механизмы и эпидемиологию заболеваний.

Многие из вакцин-кандидатов rPRV, о которых здесь сообщалось, либо не исследовались, либо еще не были коммерчески доступны.В целом, есть факторы, затрудняющие продвижение этих продуктов на рынок. Во-первых, оптимизация вирусной инфекции и репликации необходима для производства эффективных и безопасных вакцин, пригодных для выпуска в окружающую среду. С этой целью идентификация более подходящих несущественных областей внутри вируса необходима для усиления экспрессии экзогенных генов, особенно при разработке поливалентных rPRV. Это нетривиальная задача ввиду большого размера генома PRV и взаимодействия между важными регионами и экзогенными генами, которые могут влиять на вирулентность и репликацию вируса.Во-вторых, модификации родительского PRV при генерации rPRV часто требуются для устранения или замены существующих маркерных генов или важных регуляторных элементов, чтобы сделать конструкцию более подходящей для клинического применения. В-третьих, необходимы планы перехода от имеющихся прививок к вакцинам, полученным от rPRV. Одновременные или частично совпадающие вакцинации этих двух вакцинаций будут иметь значительное и пагубное влияние на эффективность и распространение последующих иммунизаций на основе rPRV. Наконец, многие исследования с использованием rPRV не были продвинуты на естественном хозяине, то есть на свинье.Проблемы с высокой стоимостью клинических испытаний, производством достаточных количеств для продвижения этих исследований и выбросом биологических препаратов в окружающую среду часто являются ограничивающими факторами. Тем не менее, эти исследования необходимы для получения более полной картины иммуногенности экспрессируемых генов, устойчивости вирусной инфекции и продолжительности действия стимуляции у естественного хозяина, а также для изучения возможности канцерогенеза при использовании уникально модифицированных векторов на основе rPRV. .

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов в отношении публикации данной статьи.

Выражение признательности

Исследование авторов частично поддержано финансированием Программы выдающихся талантов нового века при Университете Министерства образования Китая (NCET-10-0144), Программы исследовательской группы по научным и технологическим инновациям в Китае. Провинциальный университет Хэйлунцзян (2011TD001) и ключевой проект Министерства образования Китая (212038).

Клинические разработки и нормативные положения для рассмотрения в отношении живых аттенуированных вакцин против денге второго поколения

@article {94da6c272e3c43ed8f62fb4326e329ba,

title = «Клинические разработки и нормативные положения для рассмотрения в отношении живых аттенуированных вакцин против денге второго поколения 0004 =

«Лицензирование и решения об использовании вакцины в общественном здравоохранении основываются на надежной программе клинических разработок, которая позволяет проводить оценку риска и пользы продукта для целевой группы населения.Исследования, проведенные на ранних этапах клинической разработки, а также хорошо спланированные базовые испытания позволяют получить такую ​​надежную характеристику. В 2012 году ВОЗ опубликовала руководство по качеству, безопасности и эффективности живых аттенуированных четырехвалентных вакцин против денге. Впоследствии стали доступны данные об эффективности и долгосрочных наблюдениях по результатам двух параллельных испытаний вакцины против лихорадки денге 3 фазы, и вакцина была лицензирована в декабре 2015 года. Выводы и интерпретация результатов этих испытаний были опубликованы ранее. и после того, как лицензирование выявило ключевые сложности для четырехвалентных вакцин против денге, в том числе опасения, что вакцинация может увеличить заболеваемость лихорадкой денге в определенных подгруппах населения.В этом отчете обобщены клинические и нормативные моменты для рассмотрения, которые могут помочь разработчикам вакцин по некоторым аспектам дизайна испытаний и облегчить нормативный обзор, чтобы сделать более широкие рекомендации общественного здравоохранения для вакцин против лихорадки денге. «,

keywords =» Денге, вакцина против денге, Улучшение , Клинические испытания вакцин, Регулирование вакцин «,

author =» Ваннис, {Кирстен С.} и Аннелис Уайлдер-Смит и Барретт, {Алан Д.Т.} и Калинка Каррихо, и Марко Кавалери и {де Сильва}, Аравинда и Дурбин, { Анна П.} и Тим Энди, Ева Харрис и Иннис, {Брюс Л.} и Кацельник, {Лия К.} и Смит, {Питер Г.} и Веллингтон Сан и Томас, {Стивен Дж.} и Иоахим Хомбах »,

note = «Информация о финансировании: Мнения, выраженные в этой статье, являются личными взглядами авторов и не могут быть истолкованы или цитированы как высказанные от имени или отражающие позицию агентств или организаций, с которыми связаны авторы. JH является сотрудником Всемирной организации здравоохранения, как и KV во время этой работы.AWS является консультантом ВОЗ по вопросам, связанным с арбовирусными заболеваниями. BI — сотрудник PATH; он бывший сотрудник GSK. Э. Х. входила в Научно-консультативный совет Санофи Пастер во время испытаний вакцины на третьем этапе, а ее лаборатория получила средства на исследования от компании Takeda Vaccines, Inc. для анализа образцов, полученных от реципиентов вакцины. PGS является членом Независимого комитета по мониторингу данных по испытаниям вакцины CYD-TDV. APD проконсультировалась с Merck & Co по вакцинам от денге. ST входит в состав консультативных советов и советов по безопасности компаний Sanofi Pasteur и Takeda Vaccines, Inc., и выполняла консультационную работу для GSK Vaccines и Merck & Co. ADS консультировала по вакцинам против денге для компаний Takeda, Merck и Glaxo Smith Kline. Его группа получила финансирование от Sanofi и Takeda для анализа иммунных ответов, вызванных вакцинами. Он указан как изобретатель патентов, связанных с флавивирусными вакцинами и диагностическими средствами. Вклад WS {\ textquoteright} представляет собой неформальное общение и отражает его здравое суждение. Эти комментарии не связывают и не обязывают FDA США. MC является штатным сотрудником EMA.KC является сотрудником бразильского агентства по регулированию здравоохранения — Anvisa. Выраженные здесь взгляды и мнения не должны использоваться вместо нормативных актов, опубликованных руководящих документов или прямых обсуждений с Anvisa. Авторские права издателя: {\ textcopyright} 2018 Авторы «,

год =» 2018 «,

месяц = ​​июн,

день =» 7 «,

doi =» 10.1016 / j.vaccine.2018.02.062 «,

language = «Английский (США)»,

volume = «36»,

pages = «3411—3417»,

journal = «Vaccine»,

issn = «0264-410X»,

publisher = «Elsevier BV»,

number = «24»,

}

(PDF) Тетравалентная живая аттенуированная вакцина против вируса денге стимулирует сбалансированный иммунитет к нескольким серотипам у людей

Титр nAb DENV2 для людей с предикторным уровнем nAb выше против.на уровне

или ниже указанного порогового значения. Мы использовали пакет мозаики в R для выполнения анализа отношения шансов

. Мы оценили пороговые значения, соответствующие каждому децилю (от 20-го до 80-го

процентилей) для каждой переменной-предиктора. Поскольку это исследовательский анализ, мы представляем

порогового значения для дециля с наиболее значимой взаимосвязью с увеличением кратности

. Порог, соответствующий 20-му процентилю, имел самое низкое значение p

для предикторов: общее количество nAb DENV2, nAb TS DENV2 и% nAb TS DENV2.

Порог, соответствующий 40-му процентилю, был наиболее значимым для предиктора

Среднее геометрическое значение титров nAb для всех четырех серотипов DENV.

Сводка отчетов. Дополнительная информация о дизайне исследования доступна в сводке отчетов по исследованиям Nature

, связанной с этой статьей.

Доступность данных

Авторы заявляют, что все основные данные, полученные или проанализированные в ходе этого исследования, подтверждающие

результатов, доступны в статье и дополнительных информационных файлах.Дополнительные данные

, подтверждающие результаты этого исследования, можно получить у соответствующего автора

по разумному запросу. Исходные данные, лежащие в основе рисунков, предоставляются в качестве файла данных источника

вместе с этим документом. Полное подробное исследование или клинический протокол клинического исследования

предоставляется в виде отдельного файла. На страницах 35–37 протокола исследования описаны ключевые цели

клинического испытания, которые оценивались для получения заранее определенных результатов, указанных в

этой рукописи.Исходные данные предоставлены вместе с этой статьей.

Поступила: 13.03.2020 г .; Принята в печать: 26 января 2021 г .;

Ссылки

1. Bhatt, S. et al. Глобальное распространение и бремя денге. Nature 496,

504–507 (2013).

2. Radke, E. G. et al. Вспышка денге в Ки-Уэст, Флорида, США, 2009 г. Emerg.

Заражение. Дис. 18, 135–137 (2012).

3. Шаффнер Ф. и Матис А. Переносчики денге и денге в Европейском регионе ВОЗ

: прошлое, настоящее и сценарии на будущее.Lancet Infect. Дис. 14,

1271–1280 (2014).

4. Сабин, А. Б. Исследования денге во время Второй мировой войны. Являюсь. J. Trop. Med. Hyg.

1,30–50 (1952).

5. Montoya, M. et al. Симптоматический и неявный исход при повторных вирусных инфекциях денге

зависит от временного интервала между инфекциями и исследованием

год. PLoS Negl. Троп. Дис. 7, e2357 (2013).

6. Холстед, С. Б. Этиология экспериментальной лихорадки Силлера и Симмонса.

Am. J. Trop. Med. Hyg. 23, 974–982 (1974).

7. Guzman, M. G. et al. Эпидемиологические исследования денге в Сантьяго-де-Куба,

1997. Am. J. Epidemiol. 152, 793–799 (2000). обсуждение 804.

8. de Alwis, R. et al. Углубленный анализ ответа антител людей

, подвергшихся первичной инфекции вируса денге. PLoS Negl. Троп. Дис. 5, e1188

(2011).

9. de Alwis, R. et al. Вирусы денге усилены отдельными популяциями перекрестно-реактивных антител серотипа

в иммунной сыворотке человека.PLoS Pathog. 10,

e1004386 (2014).

10. Ларсен, К. П., Уайтхед, С. С. и Дурбин, А. П. Инфекция человека денге

моделей для продвижения разработки вакцины против денге. Vaccine 33, 7075–7082

(2015).

11. Киркпатрик, Б. Д. и др. Живая аттенуированная вакцина против денге TV003 вызывает

полную защиту от денге в модели заражения человека. Sci. Пер.

Мед. 8, 330ra336 (2016).

12. Capeding, M. R. et al. Клиническая эффективность и безопасность новой четырехвалентной вакцины против лихорадки денге

у здоровых детей в Азии: рандомизированное плацебо-контролируемое испытание

фаза 3, рандомизированное, с маскировкой наблюдателя.Ланцет 384. С. 1358–1365 (2014).

13. Хадинегоро, С. Р. и др. Эффективность и долгосрочная безопасность вакцины против денге в

регионах эндемических заболеваний. N. Engl. J. Med. 373, 1195–1206 (2015).

14. Sridhar, S. et al. Влияние серологического статуса денге на безопасность вакцины против денге и эффективность

. N. Engl. J. Med. 379, 327–340 (2018).

15. Guirakhoo, F. et al. Виремия и иммуногенность у нечеловеческих приматов четырехвалентной химерной вакцины против желтой лихорадки и денге

: генетические реконструкции, корректировка дозы

и ответы антител против

изолятов вируса денге дикого типа.Virology 298, 146–159 (2002).

16. Guy, B. et al. Оценка интерференции между серотипами вакцины против денге в модели

обезьяны. Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 80, 302–311 (2009).

17. Osorio, J. E. et al. Эффективность четырехвалентной химерной вакцины против денге (DENVax)

на макак Cynomolgus. Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 84. С. 978–987 (2011).

18. Morrison, D. et al. Новая четырехвалентная вакцина против денге хорошо переносится и обладает иммуногенностью

против всех 4 серотипов у взрослых, не инфицированных вирусом авивируса.J. Infect. Дис.

201, 370–377 (2010).

19. Dayan, G.H. et al. Оценка состава двухвалентной и четырехвалентной вакцины против денге

у взрослых, не инфицированных вирусом авивируса, в Мексике. Гм. Вакцин. Immunother.

10, 2853–2863 (2014).

20. Torresi, J. et al. Репликация и экскреция живой аттенуированной четырехвалентной вакцины против денге CYD-TDV

у взрослого населения, не инфицированного вирусом денге: оценка

вакцинной вирусемии и выделения вируса. Дж.Заразить. Дис. 216, 834–841 (2017).

21. Henein, S. et al. Расщепление антител, индуцированных химерной желтой лихорадкой —

лихорадка денге, живая аттенуированная четырехвалентная вакцина против денге (CYD-TDV) у наивных и

людей, подвергшихся воздействию денге. J. Infect. Дис. 215. С. 351–358 (2017).

22. Dayan, G.H. et al. Оценка долгосрочной эффективности вакцины против денге

против симптоматической, вирусологически подтвержденной болезни денге по исходному серостатусу

денге.Vaccine 38, 3531–3536 (2020).

23. Durbin, A. P. et al. Однократная доза любой из четырех различных живых аттенуированных четырехвалентных вакцин против денге

является безопасной и иммуногенной для взрослых, не инфицированных вирусом

: рандомизированное двойное слепое клиническое испытание. J. Infect. Дис. 207, 957–965

(2013).

24. Durbin, A. P. et al. rDEN4delta30, живой аттенуированный кандидат на вакцину против вируса денге типа 4

, является безопасным, иммуногенным и высоко заразным для здоровых взрослых добровольцев

.J. Infect. Дис. 191, 710–718 (2005).

25. Durbin, A. P. et al. rDEN2 / 4Delta30 (ME), живая аттенуированная химерная вакцина против денге

серотипа 2, безопасна и высокоиммуногенна для здоровых взрослых людей, не инфицированных денге

. Гм. Вакцин. 2, 255–260 (2006).

26. Durbin, A. P. et al. Живая аттенуированная вакцина против денге серотипа 1

rDEN1Delta30 является безопасной и высокоиммуногенной для здоровых взрослых добровольцев.

Hum. Вакцин. 2. С. 167–173 (2006).

27.Дурбин, А.П., Киркпатрик, Б.Д., Пирс, К.К., Шмидт, А.С. и Уайтхед, С.

S. Разработка и клиническая оценка нескольких экспериментальных моновалентных вакцин

DENV для определения компонентов для включения в живую аттенуированную четырехвалентную вакцину

DENV . Vaccine 29, 7242–7250 (2011).

28. Киркпатрик, Б. Д. и др. Устойчивый и сбалансированный иммунный ответ на все 4 серотипа вируса денге

после введения разовой дозы живой ослабленной четырехвалентной вакцины

здоровым взрослым, не инфицированным вирусом денге.J.

Заражение. Дис. 212, 702–710 (2015).

29. Gallichotte, E. N. et al. Генетическая изменчивость между штаммами вируса денге типа 4

влияет на связывание и нейтрализацию человеческих антител. Cell Rep. 25, 1214–1224

(2018).

30. Fibriansah, G. et al. Мощное человеческое антитело против лихорадки денге предпочтительно

распознает конформацию мономеров белка Е, собранных на поверхности вируса

. EMBO Mol. Мед.6, 358–371 (2014).

31.Fibriansah, G. et al. ВИРУС ДЕНГЕ. Крио-ЭМ структура антитела

нейтрализует вирус денге 2 типа, блокируя димеры белка E. Science 349,

88–91 (2015).

32. Fibriansah, G. et al. Высокоэффективное человеческое антитело нейтрализует вирус денге

серотипа 3, связываясь с тремя поверхностными белками. Nat. Commun. 6, 6341

(2015).

33. Nivarthi, U. K. et al. Картирование человеческих В-клеток памяти и сыворотки

нейтрализующих антител в ответ на инфекцию вируса денге серотипа 4 и вакцинацию

.Дж. Вирол.91 https://doi.org/10.1128/JVI.02041-16 (2017).

34. Swanstrom, J. A. et al. Помимо уровней нейтрализующих антител: эпитоп

, специфичный для антител, индуцированных национальными институтами здравоохранения моновалентной вакцины против вируса денге

. J. Infect. Дис. 220. С. 219–227 (2019).

35. Gallichotte, E. N. et al. Эпитоп с новой четвертичной структурой на вирусе денге

серотипа 2 является мишенью для устойчивых типоспецифичных нейтрализующих антител. MBio

6, e01461-01415 (2015).

36. Gallichotte, E. N. et al. Нейтрализующие антитела

серотипа 2 вируса денге человека нацелены на два различных четвертичных эпитопа. PLoS Pathog. 14, e1006934

(2018).

37. Widman, D. G. et al. Трансплантация четвертичной структуры, нейтрализующей эпитоп антител

из серотипа 3 вируса денге в серотип 4. Sci. Реп.7,

17169 (2017).

38. Lai, C.J. et al. Детерминанты эпитопа вируса денге шимпанзе типа 4

(DENV-4) -нейтрализующее антитело и защита против заражения DENV-4 у мышей

и макак-резусов с помощью пассивно перенесенного гуманизированного антитела.J.

Virol. 81, 12766–12774 (2007).

39. Dejnirattisai, W. et al. Новый класс высокоэффективных, широко нейтрализующих антител

, выделенных от пациентов с вирусом денге, инфицированных вирусом денге. Nat.

Immunol. 16. С. 170–177 (2015).

40. Smith, S. A. et al. Выделение специфичных для вируса денге В-клеток памяти с живым антигеном вируса

от людей после естественного инфицирования выявило присутствие

различных новых функциональных групп клонов антител.J. Virol. 88,

12233–12241 (2014).

41. Гай, Б., Бриан, О., Ланг, Дж., Сэвилл, М., Джексон, Н. Разработка четырехвалентной вакцины против денге

Sano Pasteur: еще один шаг вперед. Vaccine 33,

7100–7111 (2015).

42. Osorio, J. E. et al. Безопасность и иммуногенность рекомбинантной живой аттенуированной четырехвалентной вакцины против денге

(DENVax) у здоровых взрослых, не инфицированных вирусом авивируса, в

Колумбия: рандомизированное плацебо-контролируемое исследование фазы 1.Lancet Infect. Дис.

14, 830–838 (2014).

43. Осорио, Дж. Э., Уоллес, Д. и Стинчкомб, Д. Т. Рекомбинантная химерная вакцина-кандидат в четырехвалентную вакцину против денге

на основе основной цепи вируса денге серотипа 2

. Эксперт Rev. Vaccines 15, 497–508 (2016).

СВЯЗЬ В ПРИРОДЕ | https://doi.org/10.1038/s41467-021-21384-0 СТАТЬЯ

СВЯЗЬ В ПРИРОДЕ | (2021) 12: 1102 | https://doi.org/10.1038/s41467-021-21384-0 | www.nature.com / naturecommu nications 11

Содержимое любезно предоставлено Springer Nature, применяются условия использования. Права защищены

Анализ in silico эпитопной вакцины-кандидата против туберкулеза с использованием обратной вакцинологии

  • 1.

    Minch, K. J. et al. ДНК-связывающая сеть Mycobacterium tuberculosis . Нат. Commun. 6 , 5829 (2015).

    ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 2.

    Maji, A. et al. Микробиом кишечника способствует снижению иммунитета у больных туберкулезом легких за счет изменения продуцентов бутирата и пропионата. Environ. Microbiol. 20 , 402–419 (2018).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 3.

    Khan, P. Y. et al. Передача лекарственно-устойчивого туберкулеза в эндемичных по ВИЧ условиях. Ланцет. Заразить. Dis 19 , e77 – e88 (2019).

    PubMed Статья Google ученый

  • 4.

    Singhvi, N. et al. Взаимодействие микробиома кишечника человека в здоровье и благополучии. Indian J. Microbiol. 20 , 1–11 (2020).

    Google ученый

  • 5.

    Prabowo, S. A. et al. Историческая вакцинация БЦЖ в сочетании с медикаментозным лечением усиливает ингибирование роста микобактерий ex vivo в клетках периферической крови человека. Sci. Отчет 9 , 1–12 (2019).

    CAS Статья Google ученый

  • 6.

    Дальсасс, М., Броцци, А., Медини, Д. и Раппуоли, Р. Сравнение программ обратной вакцинологии с открытым исходным кодом для обнаружения антигена бактериальной вакцины. Фронт. Иммунол. 10 , 113 (2019).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 7.

    Мендес-Самперио, П. Глобальные усилия по разработке вакцин против туберкулеза: требования к улучшенным вакцинам против Mycobacterium tuberculosis . Сканд. J. Immunol. 84 , 204–210 (2016).

    PubMed Статья Google ученый

  • 8.

    Мендес-Самперио, П. (Медицина будущего, 2016).

  • 9.

    Зентено-Куэвас, Р. Успехи и неудачи в разработке вакцины против туберкулеза для человека. Мнение эксперта. Биол. Ther. 17 , 1481–1491 (2017).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 10.

    Бали, П., Тусиф, С., Дас, Г. и Ван Каер, Л. Стратегии повышения эффективности вакцины БЦЖ. Иммунотерапия 7 , 945–948 (2015).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 11.

    Романо, М.И Хюйген, К. Обновленная информация о вакцинах от туберкулеза — это нечто большее, чем просто снижение эффективности БЦЖ со временем. Мнение эксперта. Биол. Ther. 12 , 1601–1610 (2012).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 12.

    Детмер А. и Глентинг Дж. Живые бактериальные вакцины — обзор и определение потенциальных опасностей. Microb. Cell Fact. 5 , 23 (2006).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 13.

    Evans, T. G., Schrager, L. & Thole, J. Состояние исследований вакцин и разработки вакцин против туберкулеза. Вакцина 34 , 2911–2914 (2016).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 14.

    Уилки, М. Э. М. и МакШейн, Разработка вакцины против туберкулеза: где мы находимся и почему это так сложно ?. Грудь 70 , 299–301 (2015).

    PubMed Статья Google ученый

  • 15.

    Gillard, P. et al. Безопасность и иммуногенность кандидатной противотуберкулезной вакцины M72 / AS01E у взрослых с туберкулезом: рандомизированное исследование фазы II. Туберкулез 100 , 118–127 (2016).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 16.

    Кагина Б.М. Н. и др. Новая противотуберкулезная вакцина, AERAS-402, безопасна для здоровых младенцев, ранее вакцинированных БЦЖ, и вызывает дозозависимые ответы клеток CD4 и CD8T. Вакцина 32 , 5908–5917 (2014).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 17.

    Ли В., Джоши М. Д., Сингхания С., Рэмси К. Х. и Мурти А. К. Пептидная вакцина: прогресс и проблемы. Вакцины 2 , 515–536 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 18.

    Slingluff, C. L. Jr. Настоящее и будущее пептидных вакцин против рака: одиночные или множественные, длинные или короткие, по отдельности или в комбинации ?. Рак Дж. (Садбери, Массачусетс) 17 , 343 (2011).

    CAS Статья Google ученый

  • 19.

    Онг, Э., Хе, Й. и Янг, З. Распространенность эпитопов и популяционный охват белковых антигенов Mycobacterium tuberculosis в текущих субъединичных вакцинах, находящихся в стадии разработки. Заражение. Genet. Evol. 80 , 104186 (2020).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 20.

    Lindestam Arlehamn, C. S. et al. Количественный анализ сложности человеческих патоген-специфичных ответов Т-лимфоцитов CD4 у здоровых M. tuberculosis инфицированных южноафриканцев. PLoS Pathog. 12 , e1005760 (2016).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 21.

    Rodo, M. J. et al. Сравнение антиген-специфических Т-клеточных ответов, вызванных шестью новыми кандидатами противотуберкулезной вакцины. PLoS Pathog. 15 , e1007643 (2019).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 22.

    Луабея, А. К. К. et al. Первое испытание на людях постконтактной противотуберкулезной вакцины H56: IC31 на Mycobacterium tuberculosis инфицированных и неинфицированных здоровых взрослых. Вакцина 33 , 4130–4140 (2015).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 23.

    Penn-Nicholson, A. et al. Безопасность и иммуногенность новой противотуберкулезной вакцины ID93 + GLA-SE у здоровых взрослых, вакцинированных БЦЖ, в Южной Африке: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование фазы 1. Ланцет Респир. Med. 6 , 287–298 (2018).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 24.

    Suliman, S. et al. Оптимизация дозы вакцины H56: IC31 для популяций, эндемичных по туберкулезу. Двойное слепое плацебо-контролируемое испытание по выбору дозы. Am. J. Respir. Крит. Care Med. 199 , 220–231 (2019).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 25.

    Кумар В. и Йена М. Обратный подход вакцинологии к разработке мультиэпитопной вакцины in-silico против SARS-CoV-2.(2020).

  • 26.

    Rahman, M. S. et al. Дизайн химерной пептидной вакцины на основе эпитопа против белков S, M и E этиологического агента SARS-CoV-2 глобальной пандемии COVID-19: подход in silico. PeerJ 8 , e9572 (2020).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 27.

    Rahman, N. et al. Дизайн вакцины из ансамбля поверхностных гликопротеиновых эпитопов SARS-CoV-2: иммуноинформатический подход. Вакцины 8 , 423 (2020).

    PubMed Central Статья PubMed Google ученый

  • 28.

    Уллах А., Саркар Б. и Ислам С. С. Использование подхода обратной вакцинологии для разработки новой субъединичной вакцины против вируса Эбола. Иммунобиология 20 , 151949 (2020).

    Артикул CAS Google ученый

  • 29.

    Дамфо, С. А., Рече, П., Гатерер, Д. и Флауэр, Д. Р. Разработка in silico вакцин на основе ансамбля эпитопов Plasmodium falciparum, основанных на знаниях. J. Mol. График. Модель. 78 , 195–205 (2017).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 30.

    Соланки В. и Тивари В. Вычитающая протеомика для определения новых лекарственных мишеней и обратная вакцинология для разработки химерной вакцины против Acinetobacter baumannii . Sci. Отчет 8 , 1–19 (2018).

    CAS Статья Google ученый

  • 31.

    Ahmadi, K. et al. Иммуноинформатическое исследование на основе эпитопов нового слитого белка Hla-MntC-SACOL0723 из Staphylococcus aureus : индукция множественных иммунных ответов. Мол. Иммунол. 114 , 88–99 (2019).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 32.

    Yazdani, Z. et al. Разработка мощной пептидной вакцины против ВПЧ на основе белка L1: биоинформатический подход. Comput. Биол. Chem. 85 , 107209 (2020).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 33.

    Watt, J. & Liu, J. Доклинический прогресс субъединичной и живой аттенуированной вакцины Mycobacterium tuberculosis : обзор после первого испытания эффективности на людях. Фармацевтика 12 , 848 (2020).

    CAS PubMed Central Статья PubMed Google ученый

  • 34.

    Skwark, M. J. et al. Mabellini: полногеномная база данных для понимания структурного протеома и оценки предполагаемых противомикробных мишеней появляющегося патогена Mycobacterium abscessus . База данных 2019 , baz113 (2019).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 35.

    Kapopoulou, A., Lew, J. M. & Cole, S. T. Портал MycoBrowser: исчерпывающий и вручную аннотированный ресурс по геномам микобактерий. Туберкулез 91 , 8–13 (2011).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 36.

    Larsen, M. V. et al. Масштабная проверка методов прогнозирования эпитопа цитотоксических Т-лимфоцитов. BMC Bioinform. 8 , 424 (2007).

    Артикул CAS Google ученый

  • 37.

    Петерс Б., Булик С., Тампе Р., Ван Эндерт П. М. и Хольцхюттер Х.-Г. Идентификация эпитопов MHC класса I путем прогнозирования эффективности транспорта TAP предшественников эпитопов. J. Immunol. , , 171, , 1741–1749 (2003).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 38.

    Zhang, Q. et al. Ресурс анализа базы данных иммунных эпитопов (IEDB-AR). Nucleic Acids Res. 36 , W513 – W518 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 39.

    Дханда, С. К., Вир, П. и Рагхава, Г. П. С. Разработка связывающих веществ класса II MHC, индуцирующих гамма-интерферон. Biol. Прямой 8 , 30 (2013).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 40.

    Saha, S. & Raghava, G. P. S. Предсказание непрерывных эпитопов B-клеток в антигене с использованием рекуррентной нейронной сети. Prot. Struct. Функц. Биоинформ. 65 , 40–48 (2006).

    CAS Статья Google ученый

  • 41.

    Magnan, C. N. et al. Прогнозирование антигенности белков с высокой пропускной способностью с использованием данных микрочипов белков. Биоинформатика 26 , 2936–2943 (2010).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 42.

    Дойчинова И. А. и Флауэр Д. Р. VaxiJen: сервер для прогнозирования защитных антигенов, опухолевых антигенов и субъединичных вакцин. BMC Bioinform. 8 , 4 (2007).

    Артикул CAS Google ученый

  • 43.

    Пандей Р. К., Оджа Р., Атманатан В.С., Кришнан М. и Праджапати В. К. Иммуноинформатические подходы к разработке новой мультиэпитопной субъединичной вакцины против ВИЧ-инфекции. Вакцина 36 , 2262–2272 (2018).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 44.

    Димитров И., Бангов И., Флауэр Д. Р., Дойчинова И. AllerTOP v.2 — сервер для прогнозирования аллергенов in silico. J. Mol. Модель. 20 , 2278 (2014).

    PubMed Статья CAS Google ученый

  • 45.

    Димитров И., Нанева Л., Дойчинова И. и Бангов И. AllergenFP: Прогнозирование аллергенности по отпечаткам дескрипторов. Биоинформатика 30 , 846–851 (2014).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 46.

    Шахид Ф., Ашфак У. А., Джавид А. и Халид Х.Иммуноинформатика направила рациональный дизайн вакцины на основе мультиэпитопов на основе пептидов (MEBP) следующего поколения путем изучения протеома вируса Зика. Заражение. Genet. Evol. 80 , 104199 (2020).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 47.

    Gupta, S. et al. Подход in silico для прогнозирования токсичности пептидов и белков. PLoS One 8 , e73957 (2013).

    ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 48.

    Kling, A. et al. Нацеленность на ДНК для лечения туберкулеза с использованием новых гризелимицинов. Наука 348 , 1106–1112 (2015).

    ADS CAS PubMed Статья Google ученый

  • 49.

    Gasteiger, E. et al. Справочник по протоколам протеомики 571–607 (Springer, Berlin, 2005).

    Забронировать Google ученый

  • 50.

    Hebditch, M., Carballo-Amador, M. A., Charonis, S., Curtis, R. & Warwicker, J. Protein – Sol: веб-инструмент для прогнозирования растворимости белка по последовательности. Биоинформатика 33 , 3098–3100 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 51.

    Макгаффин, Л. Дж., Брайсон, К. и Джонс, Д. Т. Сервер прогнозирования структуры белка PSIPRED. Биоинформатика 16 , 404–405 (2000).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 52.

    Ван, С., Пэн, Дж., Ма, Дж. И Сюй, Дж. Предсказание вторичной структуры белка с использованием глубоких сверточных нейронных полей. Sci. Отчет 6 , 1–11 (2016).

    Артикул CAS Google ученый

  • 53.

    Yang, J. et al. The I-TASSER Suite: предсказание структуры и функции белков. Нат. Методы 12 , 7–8 (2015).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 54.

    Zhang, Y. & Skolnick, J. Функция подсчета баллов для автоматической оценки качества матрицы структуры белка. Prot. Н. Ю. 68 , 1020 (2007).

    CAS Google ученый

  • 55.

    Shey, R.A. et al. Дизайн in-silico мультиэпитопной вакцины-кандидата против онхоцеркоза и родственных филяриозных заболеваний. Sci. Отчет 9 , 1–18 (2019).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 56.

    Хео, Л., Парк, Х. и Сок, К. GalaxyRefine: Улучшение структуры белка за счет переупаковки боковых цепей. Nucleic Acids Res. 41 , W384 – W388 (2013).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 57.

    Хатун, Н., Пандей, Р. К. и Праджапати, В. К. Изучение секреторных белков Leishmania для разработки вакцины с мультиэпитопными субъединицами В и Т-клеток с использованием иммуноинформатического подхода. Sci. Отчет 7 , 1–12 (2017).

    CAS Статья Google ученый

  • 58.

    Видерштейн, М. и Сиппл, М. Дж. ProSA-web: Интерактивный веб-сервис для распознавания ошибок в трехмерных структурах белков. Nucleic Acids Res. 35 , W407 – W410 (2007).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 59.

    Lovell, S.C. et al. Подтверждение конструкции по геометрии Cα: отклонение ϕ, ψ и Cβ. Prot. Struct. Функц. Биоинформ. 50 , 437–450 (2003).

    CAS Статья Google ученый

  • 60.

    Бхати, С., Kaushik, V. и Singh, J. Идентификация in silico пиперазин-связанных производных тиогидантоина в качестве нового антагониста андрогенов при лечении рака простаты. Внутр. J. Pept. Res. Ther. 25 , 845–860 (2019).

    CAS Статья Google ученый

  • 61.

    Weng, G. et al. HawkDock: веб-сервер для прогнозирования и анализа белково-белкового комплекса на основе вычислительной стыковки и MM / GBSA. Nucleic Acids Res. 47 , W322 – W330 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 62.

    Лопес-Бланко, Дж. Р., Гарсон, Дж. И. и Чакон, П. iMod: Многоцелевой анализ нормального режима во внутренних координатах. Биоинформатика 27 , 2843–2850 (2011).

    PubMed Статья CAS Google ученый

  • 63.

    Али, М. et al. Изучение генома денге для создания субъединичной вакцины на основе множества эпитопов с использованием иммуноинформатического подхода для борьбы с инфекцией денге. Sci. Отчет 7 , 1–13 (2017).

    Артикул CAS Google ученый

  • 64.

    Пил, К. А., Сриханса, Т., Крупаниди, С., Сай, А. В. и Венкатесварулу, Т. Дизайн мультиэпитопной вакцины-кандидата против SARS-CoV-2: исследование in-silico. J. Biomol. Struct. Дин. 1 , 20 (2020).

    Google ученый

  • 65.

    Икаи А. Термостабильность и алифатический индекс глобулярных белков. J. Biochem. 88 , 1895–1898 (1980).

    CAS PubMed Google ученый

  • 66.

    Riccomi, A. et al. Парентеральная вакцинация субъединичной вакциной против туберкулеза в присутствии ретиноевой кислоты обеспечивает раннюю, но временную защиту M.tuberculosis инфекция. Фронт. Иммунол. 10 , 934 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 67.

    Реджинальд К., Чан Ю., Плебански М. и Пох С. Л. Разработка пептидных вакцин против лихорадки денге. Curr. Pharm. Des. 24 , 1157–1173 (2018).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 68.

    Бахрами, А.А., Пайандех, З., Халили, С., Закери, А., Бандехпур, М. Иммуноинформатика: подходы in silico и компьютерный дизайн мультиэпитопного иммуногенного белка. Внутр. Rev. Immunol. 38 , 307–322 (2019).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 69.

    Galluzzi, L., Buqué, A., Kepp, O., Zitvogel, L. & Kroemer, G. Иммуногенная клеточная смерть при раке и инфекционных заболеваниях. Нат. Rev. Immunol. 17 , 97 (2017).

    CAS Статья Google ученый

  • 70.

    Dubey, K. K. et al. Производство вакцин и антител на заводах: разработки и вычислительные инструменты. Краткое. Функц. Геном. 17 , 295–307 (2018).

    CAS Статья Google ученый

  • 71.

    Лу Л. Л., Сускович Т.Дж., Форчун С. М. и Альтер Г. Помимо связывания: эффекторные функции антител при инфекционных заболеваниях. Нат. Rev. Immunol. 18 , 46 (2018).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 72.

    Эль-Манзалави, Ю., Доббс, Д. и Хонавар, В. Предсказание линейных эпитопов В-клеток с использованием ядер цепочек. J. Mol. Узнай. Междисциплинарный. J. 21 , 243–255 (2008).

    CAS Статья Google ученый

  • 73.

    Krocova, Z. et al. Роль В-клеток в раннем иммунном ответе на Mycobacterium bovis . Microb. Патог. 140 , 103937 (2020).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 74.

    Верма С., Сингхви Н., Сингх Ю. и Шукла П. Вычислительные подходы к конструированию эпитопов с использованием ДНК-связывающих белков в качестве кандидата на вакцину для Mycobacterium tuberculosis . Заражение. Genet. Evol. 20 , 104357 (2020).

    Google ученый

  • 75.

    Eickhoff, C. S. et al. Высококонсервативные Т-клеточные эпитопы гриппа индуцируют широкий защитный иммунитет. Вакцина 37 , 5371–5381 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 76.

    Патанкар, Ю.R. et al. Ограниченное распознавание макрофагов, инфицированных Mycobacterium tuberculosis , поликлональными CD4 и CD8 Т-клетками из легких инфицированных мышей. Mucosal Immunol. 20 , 1–9 (2019).

    Google ученый

  • 77.

    Russell, S. L. et al. Нарушение метаболического перепрограммирования является ранним индикатором дисфункции CD8 + Т-клеток во время хронической инфекции Mycobacterium tuberculosis . Cell Rep. 29 , 3564–3579 (2019).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 78.

    Meza, B., Ascencio, F., Sierra-Beltrán, AP, Torres, J. & Angulo, C. Новый дизайн мультиантигенной, многоступенчатой ​​и мультиэпитопной вакцины против Helicobacter pylori : подход in silico. Заражение. Genet. Evol. 49 , 309–317 (2017).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 79.

    Arai, R., Ueda, H., Kitayama, A., Kamiya, N. & Nagamune, T. Разработка линкеров, которые эффективно разделяют домены бифункционального слитого белка. Protein Eng. 14 , 529–532 (2001).

    CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

  • 80.

    Sakai, S. et al. CD4 T-клеточный IFN-γ играет минимальную роль в контроле легочной инфекции Mycobacterium tuberculosis и должен активно подавляться PD-1 для предотвращения летального исхода. PLoS Pathog. 12 , e1005667 (2016).

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 81.

    Corradin, G., Villard, V. & Kajava, A. V. Стратегии на основе структуры белка для открытия антигена и разработки вакцины против малярии и других патогенов. Endocrine Metab. Иммунное расстройство. Drug Targets (ранее Curr. Drug Targets Immune Endocrine Metab, Disord.) 7 , 259–265 (2007).

    CAS Google ученый

  • 82.

    Гори, А., Лонги, Р., Пери, С. и Коломбо, Г. Пептиды для иммунологических целей: дизайн, стратегии и применения. Аминокислоты 45 , 257–268 (2013).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 83.

    Chen, R. Бактериальные экспрессионные системы для продукции рекомбинантных белков: E.coli и выше. Biotechnol. Adv. 30 , 1102–1107 (2012).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 84.

    Розано Г. Л. и Чеккарелли Е. А. Экспрессия рекомбинантного белка в Escherichia coli : достижения и проблемы. Фронт. Microbiol. 5 , 172 (2014).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • % PDF-1.3 % 1 0 объект > эндобдж 8 0 объект > поток Подключаемый модуль Adobe Acrobat 9.3 Paper CapturePaperPort 11.02013-12-13T21: 08: 47 + 02: 002013-12-13T21: 10: 41 + 02: 002013-12-13T21: 10: 41 + 02: 00application / pdf

  • uuid: d25c92d3-5b3c-4d05-beeb-c9458d0098d7uuid: e3f8a2f6-ce75-4b20-92f3-904ffbd3a210 конечный поток эндобдж 5 0 obj > эндобдж 4 0 obj > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 9 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 12 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 15 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 18 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 21 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 24 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 27 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 30 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 33 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 36 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 39 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 101 0 объект > поток HVnF} Вт / м \ Gl) R (; KI:) bA̙Y} ʹW`c ^ gbI>} — sV P {FȇlU? Y9cFE˼r.
  • Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *