Прививка от гриппа | Прививочные реакции и осложнения после прививки от гриппа

Прививка от гриппа у детей

Прививка от гриппа  должна проводится уже на первом году, так как в этом возрасте наблюдается высокая заболеваемость и тяжелое течение. Так, в сезон 2007/08 гг. удельный вес детей 0-2 лет среди заболевших гриппом составил 38,4%, 3-6 лет — 43,5%, тогда как школьников только 14%, а взрослых — 2,8%. Среди госпитализированных с подтвержденным гриппом детей 50% составляли дети в возрасте до 6 мес, 2/3 — дети до 1 года и 80% — до 2 лет. В другом исследовании было показано, что из числа заболевших гриппом детей в возрасте 2-5 лет госпитализируется каждый 250-й, 6-24 мес. — каждый 100-й. а 0-6 мес. — каждый 10-й.. По сводным данным Американской академии педиатрии частота госпитализации по поводу этого заболевания составляет 240-720 на 100 000 детей 0-6 мес. и 17-45 на 100 000 детей 2-5 лет; 37% госпитализированных относились к группе риска — их частота госпитализации составляет 500 на 100 000.

И хотя смертность детей равна 1/10 от смертности пожилых лиц (0,1 и 1,0 на 100 000), специальное исследование в США этого вопроса в 2004-2005 гг. показало) что у детей первого полугодия этот показатель составляет 0,88 на 100 000.

Симптомы гриппа у детей раннего возраста нередко отличаются от классической картины — высокая лихорадка + интоксикация + кашель и насморк. В этом возрасте на фоне высокой температуры нередки фебрильные судороги, грипп часто вызывает круп, бронхиолит, обострение астмы, нередко осложняется средним отитом, синуситом и пневмонией. Частота отита у детей с гриппом составляет 18-40% по данным разных торов, намного чаще у детей до 2 лет. Осложнение миокардитом, а также со стороны нервной системы — не редкость. Так, в одном из исследований из 842 детей с подтвержденным лабораторно гриппом у 72 имели место неврологические осложнения: энцефалопатия у 10 детей, фебрильные судороги у 27 и афебрильные — у 29, менингит 2 и мозговой инсульта вследствие гипотензии — у 4.

Кто должен прививаться?

Контингента, указанные в Национальном календаре не включают ряд групп, прививка от гриппа которых дает несомненный эффект и может быть рекомендована; Календарь иммунопрофилактики по эпидпоказаниям не расшифровывает группы риска. Рекомендации, действующие в США, представлены ниже, прививка от гриппа должна проводится следующим категориям людей:

• Здоровые дети в возрасте старше 6 мес.
• Астма и другие хронические болезни легких, такие как муковисцидоз.
• Болезни сердца с гемодинамическими нарушениями.
• Состояния, чреватые нарушениями дыхательных функций (аспирацией, застоем мокроты) — эпилепсия, нейромышечные болезни, повреждения спинного мозга, отставание психического развития
• Иммунодефициты, в том числе ВИЧ-инфекция.
• Серповидно-клеточная анемия и другие гемоглобинопатии.
• Хронические болезни почек, обмена веществ, сахарный диабет,
• Болезни, требующие длительной терапии ацетилсалициловой кислотой (ревматические болезни, синдром Кавасаки) как профилактика синдрома Рея.
• Члены семьи и персонал, ухаживающий за детьми в возрасте до 5 лет (особенно важно в отношении детей в возрасте до 6 мес.)

Эти рекомендации, хотя и не включают такие очевидные группы риска, как больные с органическими поражениями центральной нервной системы, у которых гриппвызывает длительное апноэ, детей с пороками развития легких и бронхолегочной дисплазией, вполне приемлемы и для наших условий. Конечно, и у нас следует рекомендовать прививку на индивидуальной основе всем детям и взрослым.

Прививка от гриппа для лиц с хроническими заболеваниями безопасна. Опубликовано достаточно убедительных работ, позволяющих спокойно вакцинировать эти контингенты.

Вакцинация против гриппа. Виды вакцин, показания и противопоказания

Наступление осенне-зимнего периода всегда сочетается с сезонным повышением заболеваемости респираторными вирусным инфекциями. Самой опасной из них считают грипп. Опасность заключается в развитии таких осложнений как пневмония, миокардит, менинго-энцефалит, синдром Рея. По данным ВОЗ грипп и его осложнения входят в десятку главных причин смертности в мире.Неспецифическая профилактика ОРЗ, в том числе и гриппа, подразумевает избегание контакта с заболевшими, регулярное проветривание помещений, промывание носа физиологическим раствором, отказ от посещения мест с большой скученностью людей, частое мытье рук, ношение повязки при первых симптомах ОРВИ. К сожалению, эти меры не всегда оказываются эффективными, поэтому для гриппа, как наиболее опасной инфекции, была разработана специфическая профилактика.

Какие вакцины бывают?

Живые,
Инактивированные:

• Цельновирионные,
• Сплит-вакцины,
• Субъединичные.

Живые вакцины призваны вызвать заболевание в легкой форме с формированием естественного иммунитета. Однако в настоящее время от их использования отказались ввиду технологической сложности производства и высокой реактогенности.
Инактивированные вакцины содержат убитые вирусы (цельновирионные) либо их фрагменты (субъединичные и сплит-вакцины), а следовательно, не могут вызвать заболевания.

Подобно живым, цельновирионные инактивированные вакцины вызывают частые побочные реакции и имеют большое количество противопоказаний, поэтому несмотря на эффективность, их применение в современной медицине резко ограничено.
Преимуществом субъединичных и сплит-вакцин является высокая эффективность и безопасность, которая достигается путем очистки от липидных составляющих и различных примесей.
Разница между этими двумя вариантами заключается в антигенах, входящих в их состав. Так, субъединичная вакцина содержит только поверхностные антигены вируса гриппа (гемагглютинин и нейраминидазу), являющиеся основными факторами агрессии, и за счет которых вирус способен мутировать.
Сплит-вакцина, кроме поверхностных гликопротеидов, в своем составе содержит внутренние белки, которые практически не изменяются, и за счет этого возможно формирование иммунитета не только к мутировавшим штаммам, но и частично ко всем возможным вариантам вируса. Теоретически, сплит-вакцина имеет большую эффективность, но на практике оказалось, что обе эти вакцины сравнимы по своей эффективности и безопасности.
Для массовой вакцинации используют трехвалентные субъединичные (гриппол, гриппол плюс, гриппол нео, инфлювак) и сплит-вакцины (ваксигрипп, флюварикс, флюваксин, бегривак).

Зачем нужна прививка?

Вакцинация способствует развитию специфического иммунитета против вируса гриппа, вследствие чего заболевание не развивается или переносится в легкой форме. Также считается, что привитые реже болеют ОВИ засчет повышения неспецифического иммунитета.

Кому необходимо привиться в первую очередь?

К наиболее уязвимым в отношении гриппа категориям относятся:
— дети (разрешена вакцинация с 6-тимесячного возраста),
— лица пожилого и старческого возраста,
— беременные (2 и 3-й триместры),
— лица, страдающие хроническими заболеваниями легких (бронхиты, обструктивная болезнь легких, астма, бронхоэктазы),
— лица, страдающие другими хроническими заболеваниями (ИБС, гипертония, сахарный диабет, хронические заболевания почек, нервной системы),

— лица со сниженным иммунитетом (ВИЧ, другие иммунодефициты, анемии, аутоиммунные заболевания), в том числе в результате приема цитостатиков, иммуносупрессоров, кортикостероидов,
— медицинские работники,
— лица, которые в силу своей профессии имеют многочисленные контакты с людьми (работники дошкольных учреждений, школ, продавцы, военнослужащие и др.)

Есть ли противопоказания для выполнения прививки?

Как и любое лекарство, вакцина имеет свои противопоказания. К ним относятся:
-установленная аллергия на любую составляющую вакцины,
-аллергические реакции в прошлом на любые противогриппозные вакцины,
-аллергия на белок куриного яйца,
-острые и обострения хронических заболеваний,
-состояния, сопровождающиеся лихорадкой.

Можно ли заболеть в результате вакцинации?

Возможность заболеть гриппом после прививки исключена, так как вакцина не содержит живых вирусов.
Однако в редких случаях может наблюдаться субфебрильная температура, небольшой насморк, болезненность в месте инъекции, общее недомогание. Данные симптомы являются кратковременным, проходят в течение 3-х дней и лечить их нет необходимости.

Помните, что отказавшись от вакцинации, вы подвергаете риску не только себя, но и других людей, которые по различным причинам не имели возможности привиться.

Столетняя война: история вакцин против гриппа

Но выпустить вакцину от гриппа оказалось не так просто: тогда ученые еще не знали, что вирус быстро мутирует, ускользая от атак иммунитета. В 1940 году Томас Фрэнсис из Рокфеллеровского института в США нашел новый вирус, который вызывал очень похожие на грипп симптомы, но не реагировал на антитела, которые были специально разработаны для противостояния гриппу, выделенному британскими учеными в 1933 году. На поверку вирус оказался новым штаммом, пополнив недавно разработанную вирусологами классификацию, а Фрэнсис занялся полиомиелитом и через четырнадцать лет после этого открытия уже организовывал клинические испытания вакцины Солка. Грипп тоже перестал быть неуловимым: в 1945 году первая вакцина против него была одобрена для американской армии, а в 1946-м — и для гражданского населения.

Империя наносит ответный удар

Но до конца борьбы было еще далеко. В 1957 году Морис Хиллеман, известный американский вирусолог, поучаствовавший в разработке более 40 вакцин, и его коллеги-медики из Минобороны США обнаружили новый вирус гриппа, который вызвал пандемию, начавшуюся со вспышки в Гонконге. Вирус совсем не боялся антител против новых штаммов, зато люди, которые пережили пандемию гриппа 1889–1890 годов, проявляли к нему устойчивость, а в их крови нашли антитела, реагирующие на вирус. В кратчайшие сроки, работая по 14 часов в сутки, Хиллеман понял, какие белки помогают вирусу избегать внимания иммунитета, разработал вакцину, подходящую для нового штамма, и убедил производителей изготовить сорок миллионов доз.

За два года по всему миру от нового штамма погибло два миллиона человек, но в США смертей было всего 69 тысяч, тогда как без помощи Хиллемана, по некоторым оценкам, только число жертв в США достигло бы миллиона. В 1968 году Хиллеману доставили из Гонконга еще один новый штамм гриппа типа A2 (знаменитый «гонконгский грипп»). Чтобы изучить его и произвести девять миллионов доз вакцины, у исследователя ушло четыре месяца, и сотни тысяч жизней удалось спасти. Однако азиатов эпидемия десятилетней давности контролировать распространение вирусов не научила. Новая вспышка быстро распространилась по Вьетнаму и Сингапуру, затем перекинулась на Индию, Филиппины, Австралию и Европу, а в США прибыла вместе с возвращавшимися домой солдатами. В одном только Гонконге заболело полмиллиона человек (15% населения).

Тот же самый вирус возвращался в конце 1969, в 1970 и 1972 годах, но благодаря вакцинации, спасавшим от вторичных бактериальный инфекций антибиотикам и формированию иммунитета среди выживших в предыдущие пандемии настолько разрушительных последствий не вызывал. Однако угроза новых пандемий нависала над планетой еще не раз. В 1977–1978 годах опасный штамм обнаружился в России, но уже в следующем году новая вакцина содержала его белки, чтобы не дать вирусу распространиться. Врасплох застали человечество вспышки птичьего и свиного гриппа в первое десятилетие XXI века.

Грипп: после этих 20 вопросов вы будете знать всё о вакцинации

Вакцинация против гриппа: 20 вопросов и ответов.

По оценке Всемирной организации здравоохранения, ежегодно сезонным гриппом заболевают около 1 миллиарда человек, еще 3 млн из них, к сожалению, погибает. Именно поэтому так актуален вопрос: «Насколько вакцинация против гриппа эффективна и безопасна? Давайте попробуем разобраться.

Грипп опасен тем, что в короткий срок может быстро привести к эпидемии и даже пандемии заболевания с довольно тяжелым течением и последствиями.

Чтобы свести к минимуму заболеваемость гриппом и развитие летальных осложнений медики всех стран ежегодно призывают население вакцинироваться против гриппа. Что представляет собой вакцинация?

Вакцинация представляет собой введение антигенного материала вируса (самого вируса или его частичек) с целью вызвать иммунитет к болезни, который должен предотвратить заболевание или облегчить его течение. В нашей статье Вы узнаете все о вакцинации и профилактике гриппа в вопросах и ответах.

Немного из истории вакцинации.

Еще в 1918г, во время пандемии Испанского гриппа, унесшей жизни, по разным данным, от 20 до 40 млн человек, врачи “испытывали все, что они знали и все, о чем они слышали, начиная от древнего ремесла пускания крови до дачи кислорода, разработки новых вакцин и сывороток”.

К сожалению, все разработки тогда велись на основании гемофильной палочки (Haemophilus influenzae), которую тогда считали основной причиной заболевания. Но в то время единственный способ, показавший эффективность в лечении заболевания, стало переливание крови от выздоравливающих больных вновь заболевшим. В 1931 году впервые открыли рост вируса на куриных белках, а в 1940г военные США разработали инактивированные вакцины, которые широко использовались во время Второй мировой войны.

В 1950-х годах была создана современная технология получения вакцины против гриппа, основанная на куриных яйцах. С тех пор, благодаря молекулярной технологии, вакцины постоянно модернизировались, что сделало их более безопасными для применения.

1. Какие виды вакцин против гриппа существуют?

Все вакцины, которые применяются в мире против гриппа, делятся на две группы-живые и убитые (инактивированные). Что они из себя представляют:

1.Живая вакцина-основана на том, что содержит в своем составе живой, но ослабленный штамм вируса гриппа.

2.Инактивированная (убитая) вакцина-содержит в своем составе убитый целый вирус гриппа или его отдельные частички (антигены). В свою очередь инактивированные вакцины подразделяются на:

-цельновирионные-содержат целый, но убитый, вирус гриппа,

-субъединичные-содержат только наружные частички вируса,

-сплит-вакцины-содержат в своем составе отдельные наружные и внутренние частички вируса.

Все вышеперечисленные вакцины призваны на создание надежного иммунитета к вирусу гриппа и, тем самым, снижают риск развития заболевания и его осложнений.

В странах СНГ противогриппозные вакцины представлены следующими видами:

-живая вакцина: аллантоисная гриппозная живая вакцина-ЖГВ (Россия),

-инактивированная цельновирионная: Грипповак (Россия), инактивированная гриппозная вакцина-ИГВ (Россия),

-инактивированная субъединичная: Гриппол (Россия), Гриппол-нео (Россия), Инфлювак (Нидерланды),

-сплит-вакцина: Ваксигрип (Франция), Флюарикс (Бельгия), Флюваксин (Китай).

Необходимо отметить, что при введении живых вакцин риск развития аллергических реакций выше, чем у инактивированных. Также нужно знать, что состав вакцин ежегодно меняется в зависимости от рекомендаций ВОЗ, поскольку к нам могут прийти в новый сезон иные штаммы вируса гриппа, нежели в прошедшем году.

2. Как узнают, какой штамм вируса к нам придет в новом сезоне?

Как правило, почти всегда вирус гриппа, приводящий к подъему весенней заболеваемости в Юго-Восточной Азии, осенью приходит в Европу. Мировые лаборатории строго отслеживают вирус гриппа, делают соответствующие анализы и после этого ВОЗ примерно к апрелю-маю текущего года дает рекомендации по вариантам вируса гриппа, которые необходимо включить в вакцины.

Причем названия вакцин при этом не изменяется, меняется просто их состав. За последние 20 лет рекомендации ВОЗ совпали на 90%.

3. Какая вакцина лучше: тривалентная или квадривалентная?

Для того, чтобы понять, какая из них лучше, необходимо знать, что они из себя представляют. Итак, как уже говорилось, каждый год состав вакцин меняется в соответствии с рекомендациями ВОЗ, поскольку каждый год циркулируют разные варианты вируса гриппа. При этом учитываются те варианты вируса, большинство из которых в прошлом году отвечали за заболеваемость гриппом.

Вакцины могут быть тривалентные и квадривалентные, которые отличаются своим составом:

-тривалентные вакцины содержат в себе антигены от 2-х вариантов вируса гриппа А (А/h2N1 и А/h4N2) и 1 вариант вируса гриппа В, защищая от трех штаммов вируса,

-квадривалентные вакцины содержат такие же антигены, как и тривалентные, плюс к этому дополнительно еще 1 вариант вируса гриппа В, таким образом в ней содержится 2 варианта вируса гриппа А и 2 варианта вируса гриппа В, защищая от четырех штаммов вируса.

Поскольку точно угадать невозможно, какой вариант гриппа в новом сезоне будет ответственен за развитие заболевания, а в основном за эпидемию ответственен вирус гриппа А, то в вакцинах содержится всегда антигены 2-х вариантов вируса гриппа А.

И поскольку вирус гриппа В меньше приводит к сезонной заболеваемости гриппом, то в большинстве вакцин он представлен 1 вариантом, который больше всего встречался в предыдущем сезоне, конечно, с учетом данных по Юго-Восточной Азии.

Таким образом, в настоящее время все препараты, применяемые для вакцинации против гриппа, являются в основном тривалентными.

Квадривалентная вакцина представлена рынке под торговым названием Флюарикс Тетра и ничем не уступает тривалентным вакцинам по стойкости иммунитета и аллергическим реакциям, но более дороже в производстве и менее доступна.

Какая из них лучше-трудно сказать, они оба эффективны, а выбор остается за Вами и Вашим врачом.

4. Как вводятся вакцины?

Существует несколько путей введения противогриппозных вакцин:

-живые вакцины вводятся интраназально, путем распыления в нос как назальным спреем,

-инактивированные вакцины-вводятся внутримышечно в плечо или подкожно в подлопаточную область, причем первый вариант отличается лучшей всасываемостью и большей эффективностью, поэтому является предпочтительным.

5. Как долго держится иммунитет после вакцинации?

После введения противогриппозной вакцины иммунитет формируется в течение 14-20 дней и держится на протяжении 9-12 месяцев. По прошествии этого срока рекомендуется вакцинироваться повторно, поскольку к этому времени вакцина разрушается или значительно ослабевает, к тому же приходит новый штамм вируса гриппа.

6. Когда лучше всего вакцинироваться?

Вакцинация против гриппа делается каждый год в октябре-ноябре перед началом нового сезона гриппа. Это связано с тем, что для надежной защиты должен сформироваться иммунитет, а на это нужно время и не известно, когда грянет всплеск заболеваемости. Поэтому рекомендуется вакцинироваться заранее.

7. Кому рекомендуют вакцинироваться в первую очередь?

Вообще, медики рекомендуют всем пройти профилактическую вакцинацию против гриппа. Но в первую очередь пройти вакцинацию советуют людям из группы риска, к которой относятся:

-люди старше 60 лет,

-дети старше 2-х лет,

-дети и взрослые люди, страдающие хроническими заболеваниями дыхательных путей, сердечно-сосудистой системы, печеночной или почечной недостаточностью, сахарным диабетом и другими эндокринными заболеваниями, хронической патологией нервной системы,

-люди с врожденным или приобретенным иммунодефицитом, ВИЧ-инфекция,

-люди, принимающие препараты, направленные на подавление иммунитета (например, при проведении химиотерапии, после трансплантации органов и прочее),

-женщины, планирующие беременность, или беременные во втором и третьем триместре,

-пациенты домов престарелых и пансионатов,

-люди в силу особенностей их профессии: медицинский персонал, преподаватели, воспитатели дошкольных учреждений, продавцы и другие лица, чья работа связана с общением с людьми.

8. Кому противопоказана вакцинация против гриппа?

Как и для обычных препаратов, у прививки от гриппа тоже есть противопоказания, к которым относятся:

-острая фаза какого-либо заболевания с повышением температуры тела выше 38,5С,

-обострение хронического заболевания,

-аллергические реакции на куриное яйцо в виде анафилактического шока, отека Квинке, крапивницы и прочее, поскольку в состав вакцины входит яичный белок.

Люди с острым заболеванием или обострением хронического заболевания могут вакцинироваться после стихания острого процесса и нормализации состояния.

9. От чего зависит эффективность противогриппозной вакцины?

Никакая вакцина не обеспечит Вам 100% защиту от заболевания, и это факт, который нужно учитывать.

Эффективность противогриппозной вакцины зависит от различных факторов: возраст и состояние здоровья пациента, индивидуальные особенности организма и прочее.

Как мы уже писали выше, состав вакцины ежегодно меняется, и если штаммы вируса, входящие в состав вакцины, не совпали с пришедшим вирусом в новом сезоне, то эффективность вакцины снижается. Как правило, благодаря постоянному мониторингу, в 90% случаев состав вакцины совпадает с пришедшим штаммов вируса гриппа.

К тому же производители перестраховываются и включают в состав вакцин антигены 3 или 4 подтипов вируса. При хорошем совпадении наблюдается эффективная защита в 80%.

Пожилые люди часто имеют слабый иммунный ответ, так что вакцины у них могут действовать не надежно. Тем не менее, при вакцинации пожилых людей риск заболеть вирусом гриппа снижается у них в 2 раза: если в сезон гриппа из 100 непривитых заболевают 10 человек, то из 100 привитых гриппом заболевают 4-6 человек.

У людей с иммунодефицитом, вызванным различными заболеваниями или приемом препаратов, подавляющих иммунитет, может наблюдаться слабый иммунный ответ на введение вакцины, что снижает эффективность вакцины, но, тем не менее, снижает риск развития осложнений в случае заболевания гриппом.

В среднем из 100 привитых 70-98 человек не заболевают гриппом в зависимости от “попадания” состава вакцины с циркулирующим штаммом вируса.

10. Как проявляется реакция на вакцину?

Прививка против гриппа, в принципе, переносится достаточно хорошо. Но, как и для всех препаратов, на нее могут тоже случиться ряд реакций, в том числе и аллергических.

Реакции в ответ на введение инактивированной вакцины могут быть:

-местные. В месте укола появляется покраснение, припухлость и болезненность. Из 100 привитых такое может встретиться у 2-8 человек.

-общие. Озноб, дрожь, повышение температуры тела, общее чувство недомогания, тошнота, мышечная боль. Из 100 привитых общие реакции встречаются у 1-7 человек.

Все вышеперечисленные реакции не требуют лечения и самостоятельно проходит в течение 2-3 дней.

Как видно, реакции встречаются достаточно редко, и чаще всего они встречаются на живые вакцины-из 100 привитых они могут быть у 8-15 человек.

Самыми опасными реакциями на введение противогриппозной вакцины являются аллергические реакции по типу анафилактического шока, отека Квинке, меньше всего-крапивница.

11 .Можно ли при легкой простуде вакцинироваться против гриппа?

Легкое ОРВИ с температурой тела в пределах 37,5С не является абсолютным противопоказанием к вакцинации против гриппа.

Наша иммунная система способна выполнять несколько задач одновременно.

Нельзя вакцинироваться только в случае ОРВИ с подъемом температуры тела до 38,5С и выше и тяжелым течением.

12. Может ли прививка вызвать грипп?

Как правило, применяемые сегодня вакцины не могут привести к заболеванию гриппом. Обыкновенная, ежегодно применяемая, инактивированная противогриппозная вакцина не содержит никаких возбудителей заболевания, а только их частицы, которые не способны к размножению и заражению. Все предположения, что прививка может вызвать грипп, основывается на 2-х обстоятельствах:

-человек вакцинировался в инкубационном периоде заболевания ОРВИ или гриппом, сам того не зная. В итоге он заболевает ОРВИ и связывает это с прививкой и развитием гриппа, поскольку картина обоих заболеваний гриппа очень схожа. Случай, когда он и правда заболел сразу после вакцинации вирусом, говорит лишь о том, что он уже был заражен до вакцинации и иммунитет не успел еще сформироваться.

-другой ошибкой является прием общей реакции организма в ответ на введение вакцины за грипп. Такая реакция проходит самостоятельно в течение 3-х дней.

Несколько по-другому обстоят дела с живой противогриппозной вакциной, применяемой у детей и подростков: поскольку она содержит живой, но ослабленный штамм вируса гриппа. Она способна привести к развитию заболевания, но очень редко и, как правило, в случае

• сильно ослабленного иммунитета,
• вследствие врожденного или приобретенного иммунитета,
• приема ряда препаратов и прочее.

Поэтому она не рекомендуется к применению у данной группы пациентов.

13. Что делать, если не успел своевременно сделать прививку?

Если Вы не успели привиться в октябре или ноябре, Вы можете это сделать позже, в особенности, если волна гриппа еще не началась, предварительно посоветовавшись со своим врачом.

Инактивированными вакцинами можно прививаться весь сезон эпидемии, а живыми нет: только до наступления сезона гриппа.

14. Может ли человек не делать прививку, если он вакцинировался в прошлом сезоне или болел тогда гриппом?

Вакцинироваться от гриппа рекомендуется ежегодно, поскольку каждый раз к нам приходят разные штаммы вируса гриппа, которые могли быть не включены в прошлогодние вакцины.

К тому же, иммунитет после перенесенного заболевания длится 9-12 месяцев.

Как правило, к этому времени выработанные организмом защитные антитела значительно ослабевают или уменьшаются в количестве, что не создает эффективной защиты перед заболеванием. К тому же надо учитывать, что эти антитела вырабатываются к определенному варианту вируса, а не ко всем.

15. Сколько раз делают прививку от гриппа в течении года?

Вакцинируются 1 раз в год в октябре-ноябре, или же, если не успели, позже. Исключение составляют дети, которые ранее не прививались и не болели гриппом: они вакцинируются 2 раза с интервалом в 4 недели.

16. Почему вакцинация против гриппа рекомендуется беременным женщинам?

Во время беременности в организме женщины происходят разнообразные изменения, направленные на рождение ребенка.

Иммунитет у беременных снижается и они могут легко заболеть гриппом, да и не только им, причем в достаточно тяжелой форме, с определенным риском для женщины и плода.

Поэтому и рекомендуется прививка беременным женщинам инактивированными вакцинами. Вакцинацию им проводят во 2-3 триместре беременности.

Женщины, которые имеют хронические заболевания, сопряженные со снижением иммунитета, должны привиться еще на стадии планирования беременности.

17. Могут ли прививаться кормящие матери?

Кормящие матери могут спокойно прививаться против гриппа.

Через вакцину они защищают себя и своего ребенка от заболевания — с грудным молоком матери он получает защитные антитела против вируса гриппа. С 6 месяцев детей можно уже прививать против гриппа-это будет для них слабой тренировкой иммунной системы для защиты организма.

Если вакцина безопасна в плане осложнений, то антигены настоящего вируса гриппа могут вызвать развитие заболевания с осложнениями. Известно, что у детей заболевание протекает тяжелее, чем у взрослых.

18. Должны ли пожилые люди получать противогриппозную вакцину с усиленным действием?

Поскольку у пожилых людей часто снижен иммунный ответ то эффективность вакцинации у них может снижаться.

В последние годы были разработаны усиленные противогриппозные вакцины (адъюванты), которые должны у пожилых людей, пациентов с хроническими заболеваниями и иммунодефицитными состояниями лучшую защиту гарантировать.

Пока остается не ясным, насколько надежно такая вакцина защищает перед вирусом гриппа. Но необходимо обратить внимание, что при прививании такой вакциной гораздо чаще встречаются местные или общие реакции.

19. Можно ли одновременно вакцинироваться против пневмококка или дифтерии?

Вакцинироваться одновременно против гриппа и пневмококка или дифтерии можно, исключение составляет вакцина против туберкулеза-БЦЖ. Единственным условием является то, что они должны проводиться в разных участках тела.

20. Какие еще есть меры профилактики гриппа, кроме прививки?

Для профилактики заболевания гриппом подходят те же меры, что и при ОРВИ:

-сокращение контакта с зараженными людьми, избегание общественных мест,

-соблюдение правил личной гигиены-мытье рук после улицы, контакта с другими людьми, пребывания в общественных местах, не дотрагивайтесь грязными руками до носа, глаз, лица,

-увлажнение слизистой оболочки носа солевыми растворами, морской солью или физраствором,

-частое проветривание помещения, влажная уборку,

-соблюдение здорового питания, пища должна быть богата минеральными веществами и витаминами,

— регулярные прогулки на свежем воздухе,

-занятия физическими тренировками, посещение сауны,

-избегание стрессовых ситуаций,

-в качестве профилактики подойдут растительные препараты, повышающие защитные свойства иммунной системы. Например, препараты из Эхинацеи пурпурной или сироп солодки, витамин С.

Грипп является достаточно опасным для жизни заболеванием, риски которого сегодня стало возможным снизить благодаря вакцинации. Ни в коем случае не занимайтесь самолечением, а обратитесь к врачу. В том числе Вы должны заранее проконсультироваться у своего врача по поводу вакцинации против гриппа.

Берегите себя и будьте здоровы!

Вконтакте

Facebook

Twitter

Google+

Одноклассники

Вакцинация против гриппа

Есть ли люди, которым вакцинация является обязательной?

Да, есть.

Согласно Постановлению Правительства РФ от 15 июля 1999 г. N 825 «Об утверждении перечня работ, выполнение которых связано с высоким риском заболевания инфекционными болезнями и требует обязательного проведения профилактических прививок» обязательным прививкам подлежат лица, занятые следующими работами:

1. Сельскохозяйственные, гидромелиоративные, строительные и другие работы по выемке и перемещению грунта, заготовительные, промысловые, геологические, изыскательские, экспедиционные, дератизационные и дезинсекционные работы на территориях, неблагополучных по инфекциям, общим для человека и животных.

2. Работы по лесозаготовке, расчистке и благоустройству леса, зон оздоровления и отдыха населения на территориях, неблагополучных по инфекциям, общим для человека и животных.

3. Работы в организациях по заготовке, хранению, обработке сырья и продуктов животноводства, полученных из хозяйств, неблагополучных по инфекциям, общим для человека и животных.

4. Работы по заготовке, хранению и переработке сельскохозяйственной продукции на территориях, неблагополучных по инфекциям, общим для человека и животных.

5. Работы по убою скота, больного инфекциями, общими для человека и животных, заготовке и переработке полученных от него мяса и мясопродуктов.

6. Работы, связанные с уходом за животными и обслуживанием животноводческих объектов в животноводческих хозяйствах, неблагополучных по инфекциям, общим для человека и животных.

7. Работы по отлову и содержанию безнадзорных животных.

8. Работы по обслуживанию канализационных сооружений, оборудования и сетей.

9. Работы с больными инфекционными заболеваниями.

10. Работы с живыми культурами возбудителей инфекционных заболеваний.

11. Работы с кровью и биологическими жидкостями человека.

12. Работы во всех типах и видах образовательных учреждений.

Работникам из этого списка отказ от прививок влечет за собой отстранение от работы.

Вакцинация против гриппа. Справка — РИА Новости, 05.09.2009

Основным принципом вакцинации является то, что пациенту дается ослабленный или убитый болезнетворный агент (или искусственно синтезированный белок, который идентичен белку агента) для того, чтобы стимулировать продукцию антител для борьбы с возбудителем заболевания.

Среди микроорганизмов, против которых успешно борются при помощи прививок, могут быть вирусы (например, возбудители кори, краснухи, свинки, полиомиелита, гепатита В) или бактерии (возбудители туберкулеза, дифтерии, коклюша, столбняка, гемофильной инфекции).

Вакцинация бывает как однократной (корь, паротит, туберкулез), так и многократной (полиомиелит). Кратность говорит о том, сколько раз необходимо получить вакцину для образования иммунитета.

Перспективность борьбы с гриппом с помощью вакцинации признается специалистами всего мира, что отражено в решениях многих совещаний, проведенных Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ), рекомендациях Комитета США по практике иммунизации и официальных документах Министерства здравоохранения России.

Вирус гриппа состоит из белковой оболочки, внутри которой находится генетическая информация – молекулы рибонуклеиновой кислоты, которые кодируют семь структурных белков. Из них наиболее специфичны два – нейраминидаза и гамагглютинин. Именно они обеспечивают болезнетворное действие вируса на организм человека, и по ним же вирус опознается иммунной системой.

Как известно, вирусы гриппа подвержены высокой изменчивости. Считается, что время перебора всех возможных вариантов вируса гриппа – около 70 лет.

В теплом воздухе вирус гриппа живет всего несколько часов. А в холодном воздухе (даже при – 70º С) вирус держится гораздо дольше, да и в охлажденных слизистых оболочках размножается быстрее. Именно поэтому эпидемии гриппа возникают, как правило, в холодное время года.

Типы вакцин против вируса гриппа

Для вакцинации против вируса гриппа производятся и применяются на практике живые, инактивированные цельновирионные, субвирионные или расщепленные (сплит), а также субъединичные поливалентные гриппозные вакцины.

Живые гриппозные вакцины изготавливаются из аттенуированных (ослабленных), безопасных для человека штаммов вируса гриппа типов А и В, культивируемых в аллантоисной (принадлежащий к одной из зародышевых оболочек) жидкости куриных эмбрионов. При введении живой гриппозной вакцины воспроизводится ослабленная естественная инфекция, в ходе которой формируется как местный, так и общий клеточный и гуморальный (относящийся к жидким внутренним средам организма) иммунитет.

Реактогенность (свойство вакцины вызывать при введении в организм какие-либо побочные эффекты) таких вакцин значительно выше, чем у инактивированных, однако они более экономичны. Могут использоваться у детей старше 3-х лет и взрослых. Однако живые вакцины имеют довольно много противопоказаний.

Противопоказания: острые заболевания; обострения хронических заболеваний; хронические заболевания легких и верхних дыхательных путей; хронический отит; сердечнососудистая недостаточность и гипертоническая болезнь II и III стадий; злокачественные новообразования, болезни крови; иммунодефицитные состояния; аллергические заболевания; болезни центральной нервной системы, почек, эндокринной системы; эпилепсия с частыми припадками; гидроцефалия в стадии декомпенсации и субкомпенсации; беременность.

Побочные реакции: повышение температуры, недомогание, головная боль, катаральные явления (воспаление слизистой оболочки верхних дыхательных путей).

Инактивированные вакцины представляют собой вирусы гриппа типов А и В, полученные из вируссодержащей аллантоисной жидкости куриных эмбрионов, инактивированных формалином или ультрафиолетовым излучением. При введении инактивированных вакцин формируется и местный (на слизистых), и общий иммунитет, обеспечивающий надежную защиту от гриппа. Такие вакцины имеют меньше противопоказаний и поэтому широко рекомендуются для иммунизации детей от 7 лет (в том числе с различными хроническими заболеваниями), а также лиц преклонного возраста. Ввиду их плохой переносимости не могут применяться у маленьких детей.

Противопоказания:

1. При парентеральном введении (инъекция): острые заболевания, обострение хронических заболеваний, аллергические заболевания, аллергия к куриному белку, бронхиальная астма, диффузные заболевания соединительной ткани, заболевания надпочечников, заболевания нервной системы.

2. При интраназальном введении (через нос): аллергия на белок куриного яйца, хронический ринит, острые заболевания, обострение хронических заболеваний.

Побочные реакции: недомогание, головная боль, повышение температуры, местные реакции в месте укола (покраснение, отек), у части привитых могут образовываться инфильтраты (скопление в тканях организма клеточных элементов с примесью крови и лимфы.)

Расщепленные (Сплит-вакцины) – вакцины второго поколения – содержат поверхностные и внутренние антигены вируса гриппа. По данным зарубежных исследователей, благодаря высокой степени очистки можно применять во всех возрастных группах, в том числе для прививки против гриппа детей, начиная с 6-месячного возраста.

Противопоказания: острое заболевание с температурой; обострение хронического заболевания; аллергия на белок куриного яйца; аллергия к другим компонентам вакцины.

Побочные реакции: местные реакции в виде отека, болезненности и покраснения –встречаются у не более 3% привитых; общие реакции (крайне редко) в виде общего недомогания, головной боли, повышения температуры; крайне редко  – аллергические реакции

Субъединичные вакцины (вакцины третьего поколения) готовятся только из поверхностных белков вируса – гемагглютинина и нейраминидазы. Внутренние белки отсутствуют.

Противопоказания: острое заболевание с температурой; обострение хронического заболевания; аллергия на белок куриного яйца; аллергия к другим компонентам вакцины.

Побочные реакции: местные реакции в виде отека, болезненности и покраснения встречаются у не более 3% привитых; общие реакции (крайне редко) в виде общего недомогания, головной боли, повышения температуры; крайне редко – аллергические реакции.

Безопасность вакцины против сезонного гриппа: резюме для врачей

CDC и FDA контролируют безопасность всех вакцин, лицензированных в США, включая вакцины против сезонного гриппа. В этом резюме содержится информация о:

• Безопасность инактивированной вакцины против гриппа (IIV), инактивированной вакцины против гриппа на основе культур клеток (ccIIV3), рекомбинантной вакцины против гриппа (RIV) и живой аттенуированной вакцины против гриппа (LAIV), включая побочные эффекты после иммунизации, противопоказания и меры предосторожности.
  • Неблагоприятное событие после иммунизации (AEFI) : Неблагоприятные события или проблемы со здоровьем, возникающие после или во время введения вакцины, которые могут быть вызваны вакциной или могут быть случайными и не связанными с вакцинацией.
  • Противопоказания : Состояние реципиента вакцины, повышающее риск серьезной побочной реакции. Вакцину нельзя вводить при наличии противопоказаний.
  • Меры предосторожности : Состояние реципиента вакцины, которое может увеличить риск серьезной побочной реакции или может поставить под угрозу способность вакцины вызывать иммунитет.
• Безопасное введение вакцины.
• Сообщение о нежелательных явлениях в Системе сообщений о побочных эффектах вакцин (VAERS).
• Дополнительные ресурсы для врачей о безопасности вакцины против гриппа.

Инактивированная вакцина против гриппа (IIV)

Исследования подтверждают безопасность ежегодной вакцинации IIV у детей и взрослых. IIV вводится в виде инъекции и может вызывать боль, покраснение и отек в месте инъекции, а также может вызывать лихорадку, недомогание и миалгию, которые обычно легкие и проходят сами по себе.IIV содержит инактивированный вирус и не может вызвать грипп.

• Боль и другие реакции в месте инъекции — внешний значок — часто возникают после вакцинации IIV как у детей, так и у взрослых. В клинических испытаниях IIV (внешний значок) до 65% людей, вакцинированных IIV, испытывают боль в месте инъекции в течение первой недели после вакцинации, которая обычно не мешает активности.
• Лихорадка, недомогание, миалгия и другие системные симптомы могут возникать после вакцинации IIV, чаще всего поражая людей, которые ранее не контактировали с антигенами вируса гриппа, содержащимися в вакцине (например,г., маленькие дети). У взрослых частота появления этих симптомов одинакова после IIV и после инъекции плацебо.
• Компоненты вакцины в редких случаях могут вызывать аллергические реакции (гиперчувствительность немедленного типа). Проявления гиперчувствительности немедленного типа варьируются от легкой крапивницы (крапивница) и ангионевротического отека (припухлость под кожей) до анафилаксии.
• В некоторые сезоны IIV ассоциировался с фебрильными судорогами у детей раннего возраста, особенно при введении вместе с 13-валентной пневмококковой конъюгированной вакциной (PCV13) и вакцинами от дифтерии, столбняка и коклюша (DTaP).Состав вакцины против гриппа часто меняется из года в год, и CDC и FDA будут продолжать внимательно следить за безопасностью вакцин против гриппа каждый сезон.
• Синдром Гийена-Барре (СГБ) после IIV встречается редко. Причина СГБ, серьезного неврологического состояния, которое может вызвать паралич, неизвестна, однако известные факторы риска — инфекции желудочно-кишечного тракта и верхних дыхательных путей.

Вакцинация от гриппа: краткое изложение для клиницистов

CDC рекомендует использовать любую лицензированную вакцину против гриппа, соответствующую возрасту, в течение сезона гриппа 2020-2021 гг., Включая инактивированную вакцину против гриппа [IIV], рекомбинантную вакцину против гриппа [RIV] или живую аттенуированную вакцину. вакцина против гриппа (LAIV).Ни одна вакцина против гриппа не предпочтительнее другой. Будут доступны как трехвалентные (трехкомпонентные), так и четырехвалентные (четырехкомпонентные) вакцины от гриппа.

Трехвалентные вакцины против гриппа включают:

Трехвалентная прививка от гриппа, сделанная с использованием адъюванта (ингредиент, который помогает создать более сильный иммунный ответ), одобрен для людей в возрасте 65 лет и старше.

Четырехвалентные вакцины против гриппа включают:

Стандартные дозы четырехвалентных прививок от гриппа, которые производятся с использованием вируса, выращенного в яйцах.К ним относятся Afluria Quadrivalent, Fluarix Quadrivalent, FluLaval Quadrivalent и Fluzone Quadrivalent. Разные прививки от гриппа разрешены для разных возрастных групп. Некоторые из них предназначены для детей в возрасте от 6 месяцев. Большинство прививок от гриппа делается в мышцу руки с помощью иглы. Одна прививка от четырехвалентного гриппа (Afluria Quadrivalent) может быть сделана либо с помощью иглы (для людей в возрасте 6 месяцев и старше), либо с помощью струйного инъектора (только для людей в возрасте от 18 до 64 лет).

Четырехвалентная вакцина против гриппа на основе клеток (Flucelvax Quadrivalent), содержащая вирус, выращенный в культуре клеток, который лицензирован для людей от 4 лет и старше.В этом сезоне все четыре вакцинных вируса, используемых в Flucelvax, были выращены в клетках, что сделало вакцину полностью свободной от яиц.

Рекомбинантная четырехвалентная вакцина против гриппа (Flublok Quadrivalent), вакцина без яиц, одобренная для людей от 18 лет и старше.

Четырехвалентная прививка от гриппа с адъювантом (ингредиент, который помогает создать более сильный иммунный ответ), одобренный для людей в возрасте 65 лет и старше.

Четырехвалентная высокодозная вакцина против гриппа (Fluzone High-Dose), лицензированная для людей 65 лет и старше.

Есть много вариантов вакцины от гриппа на выбор, но самое главное, чтобы все люди в возрасте 6 месяцев и старше получали вакцину от гриппа каждый год. Если у вас есть вопросы о том, какая вакцина лучше всего подходит для вас, поговорите со своим врачом или другим медицинским работником. Более подробная информация об утвержденных вакцинах против гриппа для сезона 2020-2021 гг. И возрастные показатели для каждой вакцины доступны в Таблице CDC: Продукты вакцины против гриппа в США для сезона 2020-2021 гг.

ВОЗ | Грипп

• Глобальный
• Регионы Региональные веб-сайты ВОЗ
  • Африка
  • Америка
  • Юго-Восточная Азия
  • Европа
  • Восточное Средиземноморье
  • Западная часть Тихого океана

Типы вакцины против сезонного гриппа

Широко доступны два типа противогриппозных вакцин: инактивированные противогриппозные вакцины (IIV) и живые аттенуированные противогриппозные вакцины (LAIV).Традиционно вакцины против гриппа (как IIV, так и LAIV) производились для защиты от 3 различных вирусов сезонного гриппа (также называемых трехвалентными вакцинами). В большинстве стран это все еще так, и существующие трехвалентные вакцины содержат вирусы гриппа A (h4N2), пандемический A (h2N1) и 1 из 2 вирусов гриппа B. Однако недавно в некоторых странах стали доступны вакцины, защищающие от 4 различных вирусов, включая оба вируса гриппа линии B (четырехвалентные вакцины).

Независимо от типа или состава вакцины против сезонного гриппа вакцинацию следует проводить ежегодно, чтобы обеспечить оптимальную защиту от инфекции.

Ежегодная выборка вирусов

Состав противогриппозных вакцин (как IIV, так и LAIV) ежегодно обновляется ВОЗ на основе информации, полученной из Глобальной системы эпиднадзора за гриппом и ответных мер (GISRS), партнерства 141 национального центра по гриппу в 111 странах, 6 сотрудничающих центров ВОЗ и 4 Основные регулирующие лаборатории ВОЗ.

ГСЭГО ВОЗ собирает и анализирует образцы вируса гриппа со всего мира на постоянной основе. Ежегодно один или несколько компонентов вакцины, предназначенной для наступающего сезона гриппа в северном и / или южном полушарии, могут изменяться, чтобы отразить наиболее частые и недавно циркулирующие вирусы гриппа A и B.

Производство

Поскольку производство вакцины занимает около 6 месяцев, каждый год вакцина против гриппа производится в условиях ограниченного времени, требующего своевременного представления вирусов в ГСЭГО ВОЗ.Производство вакцин против сезонного гриппа основано на размножении вируса в зародышевых яйцах или культурах клеток.

Инактивированные вакцины против гриппа (IIV)

IIV разрешен к применению у лиц от 6 месяцев и старше, включая беременных женщин и лиц с хроническими заболеваниями. Рекомендуется одна доза, вводимая в дельтовидную мышцу бедра или в мышцу. Однако дети в возрасте от 6 месяцев до 8 лет, которые не получали вакцину от сезонного гриппа в течение предыдущего сезона гриппа, должны получать 2 дозы, вводимые с интервалом не менее 4 недель.Вакцинация против гриппа во время беременности защитит от гриппа как мать, так и ее новорожденного.

Вирусы, включенные в эти вакцины, инактивированы, поэтому они не вызывают грипп, хотя могут возникать незначительные побочные эффекты, включая местные реакции в месте инъекции. Лица, ранее не контактировавшие с антигенами вакцины против гриппа, могут испытывать преходящую лихорадку, недомогание, миалгию (мышечную боль) и другие системные побочные эффекты.

Живые аттенуированные вакцины против гриппа (LAIV)

LAIV одобрен для использования только людьми в возрасте от 2 до 49 лет, у которых нет сопутствующих заболеваний.Однако вакцину нельзя вводить беременным женщинам. LAIV применяется в виде назального спрея, только 1 доза; но дети в возрасте 2–8 лет, которые не получали вакцину от сезонного гриппа в течение предыдущего сезона гриппа, должны получить 2 дозы с интервалом не менее 4 недель.

LAIV состоит из ослабленных или ослабленных вирусов и не вызывает гриппа, хотя может вызывать легкие признаки или симптомы (включая ринорею, заложенность носа, лихорадку или боль в горле). Наиболее частые побочные эффекты вакцины легкие и преходящие по сравнению с симптомами инфекции гриппа.

границ | Улучшенная инактивированная вакцина против гриппа с усиленной перекрестной защитой

Введение

Современные инактивированные вакцины против гриппа, трехвалентные или четырехвалентные (TIV или QIV; h2N1, h4N2 и один или два штамма B), являются штаммоспецифичными и малоэффективны против вариантных или несовпадающих вирусов. Они лишь умеренно эффективны против сезонного гриппа с эффективностью 59% у взрослых в возрасте 18–65 лет, как показал метаанализ клинических исследований за несколько сезонов гриппа (1).Их эффективность может значительно снизиться с несовпадающими вирусами и составлять всего 19%, как это было недавно в сезоне 2014–2015 годов (2, 3). Такое несоответствие вакцин все еще часто встречается, несмотря на ежегодный обмен штаммов вакцины, предназначенный для сопоставления циркулирующих вирусов. Это также произошло в текущем сезоне гриппа (2017–2018 гг.) С промежуточной оценкой эффективности вакцины в 36% (3). Это подчеркивает тот факт, что вирусы гриппа претерпевают постоянные генетические и антигенные изменения, и подчеркивает острую необходимость в разработке более совершенных вакцин с более широким спектром защиты (4, 5).С этой целью NIAID из NIH недавно опубликовал стратегический план разработки универсальной вакцины против гриппа (6).

Гемагглютинин (НА) — защитный антиген в инактивированных вакцинах против гриппа (7). Эти вакцины стандартизированы на основе определенного количества белка HA или активности, измеренной методом однократной радиальной диффузии (SRD) (8). Они вызывают штамм-специфические ответы антител, измеряемые по ингибированию гемагглютинации (HAI) и нейтрализации. Титр HAI 1:40 считается защитным для человека.HA — это тримерный белок, состоящий из трех идентичных субъединиц. Каждая субъединица состоит из двух частей, HA1 и HA2. HA1 составляет глобулярную головку HA и является основной мишенью иммунных ответов. Он содержит сайт связывания клеточного рецептора и, следовательно, является основой для активности гемагглютинации и анализа HAI. Он сильно варьируется, что является основной причиной несоответствия вакцины. С другой стороны, HA2 составляет основную часть ствола HA и менее иммуногенен, но высококонсервативен в пределах подтипа или близкородственных подтипов (9).Он состоит из нескольких отдельных доменов, включая слитый пептид и спирали C и D или длинную альфа-спираль (LAH) (10). Во время проникновения в клетку вирус попадает в эндосомы после связывания с рецептором, где HA подвергается воздействию среды с низким pH внутри эндосомы (~ pH 5 при 37 ° C). В условиях низкого pH, HA претерпевает резкие конформационные изменения, включая диссоциацию глобулярной головки HA1 и рефолдинг и подъем HA2 (11, 12). Эти конформационные изменения облегчают слияние мембран и последующую доставку вирусного генома в цитоплазму клетки.

HA2, будучи высококонсервативным, стал главной целью при разработке универсальной противогриппозной вакцины широкого спектра действия. Он образует центральную часть стебля ГА. Современные инактивированные вакцины индуцируют только минимальный уровень анти-HA2 или стволовых антител HA (13). Это согласуется с тем, что ствол HA маскируется шаровидной головкой HA1. Однако антитела, индуцированные против ствола НА, нейтрализующие или ненейтрализующие, могут иметь широкую защиту (13–16). Все чаще признается, что ненейтрализующие антитела против консервативных доменов играют важную роль в перекрестной защите через антитело-зависимую цитотоксичность (ADCC) (15-17).Оцениваются различные подходы для усиления иммунных ответов против HA2 или ствола HA, включая химерный HA (18), стволовые конструкции HA (19–21) и отдельные домены HA2, включая CD или LAH (22, 23). Основываясь на воздействии HA2 при низком pH, инактивированные антигены, обработанные при pH 5,0 и 37 ° C, также были оценены, но было обнаружено, что они неспособны вызывать какие-либо повышенные перекрестно-реактивные ответы антител или повышенную перекрестную защиту (24).

Для дальнейшей оценки потенциала обработанных с низким pH антигенов для повышения перекрестного иммунного ответа и перекрестной защиты, мы обрабатывали антигены в широком диапазоне условий низкого pH, характеризуя их на основе различных антигенных и структурных параметров (антигенность, морфология, чувствительность к протеазе и реактивность с анти-CD-антителом), и оценили антигены, генерируемые в различных условиях низкого pH, на иммуногенность и защиту у мышей.Было обнаружено, что именно антигены, обработанные в условиях умеренно низкого pH (при ≤25 ° C), но не антигены, обработанные в условиях сильного низкого pH (37 ° C), могут вызывать усиленный ответ антител против HA2 и перекрестную защиту. Эти антигены проявляли только умеренные структурные изменения в HA по сравнению с антигенами, генерируемыми в условиях сильного низкого pH (37 ° C). Эти результаты вместе потенциально могут стать основой для улучшенной инактивированной вакцины против гриппа с повышенной перекрестной защитой.

Материалы и методы

Антигены

Антигены гриппа, использованные в настоящих исследованиях, включали (1) антигены инактивированного цельного вируса (IWV) A / New Caledonia / 20/99 (h2h2 NC), A / Puerto Rico / 8/34 (h2N1 PR8), A / Victoria / 361/2011 (h4N2 Vic) и A / Hong Kong / 1/1968 (h4N2 HK), (2) инактивированные противогриппозные вакцины: TIV 2011–2012 [Flulaval; содержащие A / California / 7/09 (h2N1), A / Victoria / 210/2009 (h4N2) и B / Brisbane / 60/2008], одновалентный h2N1 CA (A / California / 07/2009) и одновалентный H5N1 VN ( A / Vietnam / 1203/04) вакцина и (3) рекомбинантные НА h2N1 NC, h2N1 PR8, h2N1 CA, h4N2 Vic, h4N2 HK, h3N2 SG (A / Singapore / 1/57) и H5N1 VN (ресурсы BEI , NIAID, NIH и Sino Biologicals, Inc.). Антигены IWV получали путем очистки от инфицированных клеток MDCK и инактивации формальдегидом, как описано ранее (25, 26). Инактивацию проводили путем выдерживания вирусных препаратов в 0,01% формальдегиде при 4 ° C в течение не менее 3 дней. Затем вирусы осаждали для удаления формальдегида, ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере (PBS; 20 мМ фосфат, 150 мМ NaCl, pH 7,4) и хранили при 4 ° C перед использованием. Концентрации антигенного белка определяли с помощью анализа бицинхониновой кислоты (BCA) (Thermofisher Scientific).

Обработка с низким pH

Для обработки с низким pH pH растворов антигенов в PBS доводили до различных уровней (4,8–6,2 с шагом 0,2) с помощью лимонно-фосфатных (Na ₂ HPO ₄ ) буферов с низким pH (pH 4,4–5,4 с шагом 0,2). с шагом 0,2 M) или разбавленной HCl (0,1 M). Использование одних и тех же буферов с низким pH с возрастающей разницей в pH должно было гарантировать постоянную концентрацию буфера в обработанном препарате антигена и лучший контроль различных pH в широком используемом диапазоне.Затем антигены инкубировали при 0 ° C (на льду), 4 ° C, 25 ° C [комнатная температура (RT)] или 37 ° C в течение 15 минут, после чего pH доводили до ~ 7,0 с помощью 1 M pH 8,0 лимонной кислоты. -фосфатный буфер. Пробные запуски выполнялись перед каждым экспериментом, чтобы гарантировать достижение правильного pH после корректировки pH. Обработанные антигены перед использованием хранили при 4 ° C. В случае очищенных живых вирусов формальдегид добавляли для инактивации вирусов, как описано выше, сразу после обработки с низким pH. Затем вирусы осаждали и суспендировали в PBS и хранили при 4 ° C перед использованием.

Сила

Эффективность инактивированных антигенов или количество белка HA измеряли с помощью теста SRD, как описано ранее (8), с использованием контрольных сывороток против HA и контрольных антигенов (h2N1 NC и h4N2 Vic), полученных из Центра оценки и исследований биологических препаратов. FDA. Тестируемый и эталонный антигены использовали в соответствующих концентрациях в соответствии с инструкциями по применению реагентов. Каждое разведение тестируемого и эталонного антигенов тестировали в двух экземплярах, и диаметр кольца преципитации измеряли как в горизонтальном, так и в вертикальном направлениях, чтобы получить средний диаметр.Концентрацию НА (мкг / мл) в тестируемых антигенах рассчитывали на основе средних размеров (диаметров) колец преципитации путем линейной регрессии с эталонными антигенами в качестве стандартов.

Просвечивающая электронная микроскопия (ПЭМ)

Просвечивающая электронная микроскопия была выполнена с использованием отрицательного окрашивания на фосфовольфрамат натрия для изучения морфологии вирусных частиц в Центре визуализации Колледжа ветеринарной медицины и биомедицинских наук Техасского университета A&M.

Иммунизация и заражение

Все исследования на животных были проведены с одобрения Институционального комитета по использованию и уходу за животными Техасского университета A&M.Самок мышей Balb / c в возрасте 6-8 недель ( n = 5-7) иммунизировали обработанными или необработанными IWV или вакцинными антигенами в 50 мкл путем внутримышечной инъекции дважды с интервалом 4 недели. Доза антигена составляла 5 мкг общего белка или 1 мкг HA / мышь. Образцы сыворотки собирали каждые 2 недели до 2 недель после второй иммунизации. Заражение проводили на 3-й неделе после второй иммунизации путем интраназальной доставки летальной дозы h2N1 PR8 (1 × 10 ⁶ TCID ₅₀ ) или h4N2 HK (1 × 10 ⁵ TCID ₅₀ ) в 50 мкл. .Во время контрольного заражения мышей на короткое время успокаивали изофлураном. После заражения ежедневно контролировали массу тела и выживаемость в течение 14 дней.

ELISA

Непрямой ELISA использовали для измерения сывороточно-специфических антител. 96-луночные планшеты Maxisorp (NUNC, Inc., Naperville, IL, USA) покрывали в течение ночи при 4 ° C IWV (5 мкг / мл) или рекомбинантной HA (1 мкг / мл) в 50 мМ карбонатном буфере (pH 9,6). ) (100 мкл / лунку). Планшеты трижды промывали буфером PBS-T (PBS с 0,025% Tween 20 и 0.02% NaN ₃ ), а затем блокировали в течение 2 часов PBS-T, содержащим 3% BSA (Sigma Chemical Co.). Образцы сыворотки серийно разбавляли в том же буфере с 3% BSA и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 часов при комнатной температуре. После промывки, как описано выше, добавляли целую молекулу антимышиного IgG, конъюгированную с аффинно очищенной щелочной фосфатазой (Sigma Chemical Co.), при разведении 1: 5000 (100 мкл / лунку) и инкубировали при комнатной температуре в течение 1 часа. После промывания в каждую лунку вводили 100 мкл субстрата п-нитрофенилфосфата, приготовленного в соответствии с инструкциями производителя (Pierce, Rockford, IL, USA).Реакцию останавливали после 30-минутной инкубации добавлением 50 мкл 2 М NaOH. Затем измеряли оптическую плотность при 405 нм.

Для измерения структурных изменений HA, вызванных низким pH, был проведен ELISA (анти-CD ELISA) с мышиным поликлональным антителом против CD (сыворотка), которое было создано с доменом CD консенсусной последовательности подтипа h2, слитой с наночастицей. носитель (EcDps, ДНК-связывающий белок из голодных клеток бактерий из E. coli ) (23). Необработанные и обработанные с низким pH антигены наносили на планшеты, как описано выше.Альтернативно, необработанные антигены наносили на планшеты с последующей обработкой на планшете при различных pH 20 мМ лимонно-фосфатным буфером в физиологическом растворе. Остальные этапы ELISA выполняли, как описано выше. Антитело к CD использовали в разведении 1: 2000 или выше.

Подавление гемагглютинации

Ингибирование гемагглютинации проводили с использованием куриных эритроцитов, как описано в руководстве ВОЗ по диагностике и эпиднадзору за гриппом животных (27). Вкратце, объединенные образцы сыворотки обрабатывали разрушающим рецептор ферментом при 37 ° C в течение ночи, а затем инактивировали при 56 ° C в течение 30 минут перед использованием в тесте HAI со свежими куриными эритроцитами.Титр HAI был наивысшим разведением с полным ингибированием агглютинации (стекание точек эритроцитов вниз при наклоне планшета).

Тест нейтрализации (NT)

Тест нейтрализации проводили с клетками MDCK в 96-луночных планшетах. Объединенные образцы сыворотки из каждой группы инактивировали при 56 ° C в течение 30 минут и серийно разводили в два раза перед смешиванием с 100 TCID ₅₀ вируса в двух экземплярах. После инкубации при 37 ° C в течение 1 часа смеси переносили в клетки MDCK и инкубировали при 37 ° C в течение 1 часа.Затем планшеты дважды промывали PBS после удаления смесей и добавляли свежую бессывороточную среду, содержащую 1 мкг / мл трипсина. Планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 72 ч, затем фиксировали в формалине и окрашивали кристаллическим фиолетовым. Титр нейтрализации считали наивысшим разведением для монослоя интактных клеток.

Иммуноблот

Антигенные белки разделяли с помощью SDS-PAGE и наносили на поливинилидендифторидные мембраны Immobilon P (Millipore). Блотированные мембраны сначала блокировали при комнатной температуре в буфере PBS-T, содержащем 3% BSA, в течение 2 часов.Затем их зондировали при комнатной температуре в течение 2 часов с образцом объединенной сыворотки, разведенным в соотношении 1: 2000 или выше в том же буфере с BSA. После промывки PBS-T их инкубировали при комнатной температуре в течение 1 ч с Fc антимышиных IgG, конъюгированных с щелочной фосфатазой (Sigma Chemical Co., Сент-Луис, Миссури, США). Мембраны проявляли с субстратом BCIP (5-бром-4-хлор-3-индолилфосфат) –NBT (нитросиний тетразолий) (Sigma Chemical Co.) в течение 30 мин. Денситометрию выполняли с использованием NIH ImageJ (http://rsbweb.nih.gov/ij/) для сравнения оптических плотностей положительных полос на одном и том же блоте.Для каждого блоттинга измерение плотности выполняли дважды с представлением среднего значения.

Статистика

Каждый образец сыворотки был протестирован в двух экземплярах со средним значением. Каждый иммуноблот-тест повторяли не менее одного раза. Денситометрические измерения для каждого иммуноблота выполнялись дважды, при этом было представлено среднее значение. Средняя масса тела определялась для каждой группы животных. Линейная регрессия использовалась для расчета концентраций белка и антигена для анализов BCA и SRD.Средние значения сравнивали с использованием теста Стьюдента t . Повышенную выживаемость обработанного антигеном с низким pH анализировали относительно необработанного антигена с помощью критерия согласия по критерию хи-квадрат. Значение p ≤0,05 считается значимым.

Результаты

Индукция антигенных и структурных изменений в HA в корреляции с условиями обработки с низким pH

Инактивированные антигены гриппа, вакцины или очищенные живые вирусы обрабатывали при низком pH в различных условиях, а затем оценивали на антигенные изменения по активности и на структурные изменения с помощью электронной микроскопии (EM), чувствительность к протеазам и реактивность с поликлональными антителами, специфичными для CD домен HA2.В случае живых вирусов вирусы подвергали инактивации сразу после обработки с низким pH, как описано в разделе «Материалы и методы».

Антигенные изменения

Антигенные изменения обработанных антигенов измеряли с помощью анализа SRD, который проводился с использованием эталонных поликлональных антител против НА для отдельных вакцинных штаммов. Было обнаружено, что эффективность инактивированных антигенов снижалась в прямой корреляции с повышением строгости условий обработки с низким pH.Снижение активности было показано уменьшением размера кольца преципитации на пластине SRD (Фигуры 1A, B). Более высокие температуры и более низкий pH привели к большей потере активности (Рисунки 1A, B). Повышение температуры резко усилило эффект низкого pH (Рисунки 1A, B). Результаты одного эксперимента с антигенами IWV NC h2N1, обработанными при pH 5,2 и различных температурах, показаны в таблице 1. Полный диапазон потери активности (10–90%) может быть получен путем изменения температуры от 0 до 37 ° C в использовался низкий pH (таблица 1).

Рисунок 1 . Анализ инактивированного гриппом цельного вирусного антигена (h2N1 NC) методом однократной радиальной диффузии (SRD) после обработки с низким pH. Обработку с низким pH и SRD проводили, как описано в разделе «Материалы и методы». (A) Пластина SRD. (B) Процент размеров колец преципитации по сравнению с необработанным контролем.

Таблица 1 . Эффективность и иммуногенность антигенов цельного вируса, инактивированных NC h2N1, обработанных при pH 5.2 и разные температуры.

Структурные изменения

Чувствительность к протеазе

Известно, что структурные изменения ГК, индуцированные при низком pH, делают его чувствительным к перевариванию протеазой (11, 12). Таким образом, антигены IWV (h2N1 NC), обработанные при различных условиях низкого pH, анализировали на чувствительность к протеазе (трипсину). Результаты показали, что НА1 в обработанных антигенах постепенно переваривался вместе с повышением строгости условий обработки с низким pH (pH 5.2 и 0–37 ° C) (рисунки 2A, B). HA1 в антигене, обработанном при 37 ° C, почти полностью исчез, тогда как большая часть HA1 в антигене, обработанном при 0 ° C, осталась нетронутой. Таким образом, постепенное переваривание HA1 и связанные с ним структурные изменения коррелировали с условиями лечения (Рисунки 2A, B). Эффект на HA2 не наблюдался, поскольку он мигрировал вместе с белком M1.

Рисунок 2 . Анализ инактивированного гриппом цельного вирусного антигена (h2N1 NC) путем переваривания протеазой после обработки с низким pH.Антиген обрабатывали при pH 5,2 и различных температурах (0, 25 и 37 ° C), а затем подвергали расщеплению трипсином. (A) Гель SDS-PAGE, окрашенный кумасси синим. (B) Денситометрический анализ полос белка в геле SDS-PAGE. Измерение плотности было выполнено дважды, и представлены средние значения. Закрытая стрелка указывает на HA1, открытая стрелка указывает на продукт переваривания HA1 (DP1), скобка указывает на HA2 / M1, а закрытая стрелка указывает на трипсин.

Электронная микроскопия

Те же обработанные антигены IWV (h2N1 NC) затем исследовали на морфологические изменения с помощью ЭМ. Пик HA в антигене, обработанном при pH 5,2 и 0 ° C, не показал видимых изменений по сравнению с необработанным контролем (Фигуры 3A, B). Однако антиген, обработанный при pH 5,2 и 25 ° C, оказался менее четко определенным, но сохранил общий вид спайков (рис. 3C). Спайковая структура НА полностью утрачивалась в антигенах, обработанных при pH 5.2 и 37 ° C, когда шипы HA схлопываются в аморфную массу на поверхности вирусных частиц (рис. 3D). Эти результаты показали, что изменение морфологии спайков ГК также увеличивалось в связи с повышением строгости условий обработки с низким pH (от 0 до 37 ° C).

Рисунок 3 . Электронная микроскопия антигена цельного вируса, инактивированного гриппом (h2N1 NC), обработанного при pH 5,2 и различных температурах. (A) Необработанный контроль. (B) Обработано при 0 ° C. (C) Обработано при 25 ° C. (D) Обработано при 37 ° C.

Реакция с антителом против домена CD

CD или LAH (а.о. 76–130) HA2 образует центральную часть ножки HA. Он частично скрыт в нормальной конформации ГК, но повторно складывается и полностью экспонируется при воздействии среды с низким pH внутри эндосом (~ pH 5,0 и 37 ° C) (11, 12). Чтобы дополнительно охарактеризовать структурные изменения НА, вызванные низким pH, использовали поликлональные антитела против CD для реакции с обработанными антигенами гриппа.Это специфическое антитело было создано у мышей с использованием домена CD (консенсус h2), слитого с белком-носителем наночастиц (23). Было показано, что он защищает от летального заражения (23), тем самым подтверждая его способность распознавать соответствующие домены в нативных антигенах.

Анализ с помощью ELISA показал, что антигены, обработанные при различных условиях низкого pH, как указано в Таблице 1, проявляли повышенный уровень реакции с этим антителом наряду с увеличением строгости условий обработки при низком pH (от 0 до 37 ° C) (Рисунок 4A). , что указывает на повышенное воздействие HA2 после обработки с низким pH.Антитело использовали в высоком разведении (≥2000) для ограничения уровня реакции с контрольными или необработанными антигенами. Примерно 2-кратное увеличение реакции наблюдалось с антигеном, обработанным при 0 ° C, по сравнению с необработанным антигеном, в то время как самый высокий уровень реакции был получен с антигеном, обработанным при 37 ° C (> 4-кратное) (рис. 4A ).

Рисунок 4 . Анализ инактивированных антигенов гриппа с помощью анти-CD ELISA после обработки при низком pH. (A) Антигены инактивированного цельного вируса (IWV) (h2N1 NC), обработанные при pH 5.2 и различные температуры (0, 25 и 37 ° C) были использованы для покрытия планшета для ELISA. (B) Необработанный антиген IWV (h2N1 NC) наносили на планшет с последующей обработкой на планшете при различных pH и 37 ° C перед промывкой и стадией блокирования для ELISA. (C) Необработанный TIV (2011–2012) наносили на планшет в качестве антигена с последующей обработкой на планшете при различных pH и 37 ° C перед отмывкой и этапом блокирования для ELISA. Антитело к CD использовали в разведении ≥1: 2000.

Дальнейший анализ показал, что полный спектр реакции с этим анти-CD антителом может быть получен путем постепенного снижения pH при 37 ° C до максимального уровня реакции (≤pH 5.0) был достигнут. Максимальный уровень реакции, вероятно, представляет собой полное воздействие ЦД или структурные изменения ГК (11, 12). Таким образом, степень структурных изменений в различных условиях можно оценить по этому максимальному уровню реакции для данного антигена (% максимальной реакции). Эти результаты были получены как с IWV NC h2N1 (рис. 4B), так и с TIV (2011–2012), который содержит штамм h2N1 2009 г. (рис. 4C). Кроме того, этот анализ может быть выполнен с антигенами, нанесенными на планшет, и с обработкой на планшете с низким pH (Рисунки 4B, C), предполагая, что этот анти-CD ELISA может быть простым анализом для оценки чувствительности антигенов гриппа к низким pH. быстро.

Вместе эти результаты показали, что антигенные и структурные изменения HA, измеренные по различным параметрам, хорошо коррелируют друг с другом при различных условиях обработки с низким pH, и полный спектр таких изменений HA может быть вызван в прямой корреляции с условиями обработки с низким pH.

Индукция повышенных перекрестно-реактивных ответов антител инактивированными антигенами с низким pH

Антигены с низким pH, полученные в таблице 1, использовали для иммунизации мышей для анализа антител, как описано в разделе «Материалы и методы».”

Антитела к HAI и NT

Объединенные образцы сыворотки были протестированы с помощью HAI и NT с использованием как гомологичных, так и гетерологичных вирусов. Обработанные антигены индуцировали более низкие титры HAI и NT против гомологичного вируса (h2N1 NC), что коррелировало со снижением их активности (таблица 1). Однако антигены, обработанные в мягких условиях (0–25 ° C) с частичной потерей активности (12–45%), все же могут индуцировать высокие уровни HAI и NT-антител, которые были либо такими же, либо только в два раза ниже по сравнению с необработанным антигеном. (Таблица 1).Ни необработанные, ни обработанные антигены не индуцировали каких-либо обнаруживаемых HAI или NT-антител против гетерологичного вируса h2N1 PR8 (A / Puerto Rico / 8/34), за исключением одного, обработанного при 25 ° C в самом низком разведении (1:10 или 1:20). (Таблица 1).

Повышенные перекрестно-реактивные ответы антител по данным ELISA

Объединенную сыворотку от каждой группы мышей тестировали против гомологичных и гетерологичных антигенов rHA с помощью ELISA. Как необработанные, так и обработанные антигены индуцировали высокие уровни специфических антител против гомологичного антигена (h2N1 NC) (рис. 5A).Антигены, обработанные при 25 и 37 ° C, индуцировали титры в два раза больше, чем титры, индуцированные необработанным антигеном, или титры, обработанные при 0 ° C (таблица 1; фиг. 5A). Это указывает на то, что обработанные антигены оставались высоко иммуногенными. При тестировании против гетерологичного антигена (h2N1 PR8) общие уровни реакции были намного ниже, чем уровни с гомологичным антигеном (Таблица 1; Рисунок 5B). Однако все три обработанных антигена индуцировали повышенную перекрестную реактивность с гетерологичным антигеном с большим увеличением (в четыре раза), показанным для антигенов, обработанных при 25 и 37 ° C (таблица 1; фигура 5B).

Рисунок 5 . Индукция перекрестно-реактивного ответа антител и перекрестная защита антигенами инактивированного цельного вируса (IWV), обработанными низким pH (NC h2N1), у мышей. Мышей ( n = 7) иммунизировали дважды с интервалом 4 недели, обрабатывая антигеном IWV при pH 5,2 и различных температурах (0, 25 или 37 ° C). Объединенные образцы сыворотки получали через 2 недели после второй иммунизации и тестировали на перекрестно-реактивный ответ антител. Мышей заражали высоколетальной дозой гетерологичного вируса h2N1 PR8 на 3 неделе после второй иммунизации. (A) ELISA с гомологичным антигеном rHA (h2N1 NC), (B) ELISA с гетерологичным антигеном rHA (h2N1 PR8). (C) Иммуноблоттинг с гомологичным (h2N1 NC) и гетерологичным (h2N1 PR8) антигенами IWV. (D) Денситометрический анализ положительных полос НА1 и НА2 в иммуноблоттинге. Измерение плотности выполняли дважды для каждого блота, и представлены средние значения. (E) Выживание после испытания. (F) Масса тела после испытания.Стрелки указывают на HA1. Скобки обозначают HA2. Символ * указывает на существенные различия ( p <0,05).

Повышенная перекрестная реакция с HA2 по данным иммуноблота

Объединенные сыворотки были протестированы с помощью иммуноблоттинга с использованием как гомологичных (h2N1 NC), так и гетерологичных (h2N1 PR8) антигенов IWV (рис. 5C). Было обнаружено, что все обработанные антигены индуцировали больший ответ антител против HA2 по сравнению с необработанными антигенами. Антигены, обработанные при 25 ° C, продемонстрировали наибольшее усиление реакции с HA2 (рис. 5C).Это было ≥2 раза выше по сравнению с необработанным антигеном, как определено с помощью денситометрического анализа (рис. 5D). С другой стороны, антиген, обработанный при 37 ° C, вызывал наибольшее усиление реакции с HA1 (≥4-кратное), хотя он также вызывал усиление реакции с HA2 (рисунки 5C, D). Это предполагает, что антигенные или структурные изменения не только количественные, но и качественные при различных условиях обработки с низким pH. Важно отметить, что усиление реакции с HA2 также происходило с гетерологичным антигеном (h2N1 PR8) (рис. 5C).В совокупности эти результаты позволяют предположить, что антигены, обработанные при низком pH, могут индуцировать повышенный ответ антител против HA2 как гомологичных, так и гетерологичных штаммов, но более высокий уровень такого ответа антител может быть получен у тех, кто лечится в условиях умеренно низкого pH (0 и 25 ° C. ) по сравнению с условиями сильного низкого pH (37 ° C) (Рисунки 5C, D; Таблица 1). Как показано выше с помощью антигенного и структурного анализа, антигены, обработанные в мягких условиях, проявляли только ограниченные или умеренные структурные изменения в HA, тогда как антигены, обработанные в сильных условиях, демонстрировали максимальный уровень таких изменений (рисунки 1–4).Это предполагает, что степень структурных изменений HA важна для индукции повышенного ответа против HA2.

Повышенная перекрестная защита против гетерологичного заражения инактивированными антигенами, обработанными в условиях умеренно низкого pH

Мышей, иммунизированных антигенами, перечисленными в таблице 1, заражали гетерологичным вирусом h2N1 PR8 в высоколетальной дозе (1 × 10 ⁶ TCID ₅₀ ). Вирус контрольного заражения (h2N1 PR8) представлял собой вирус, несовместимый с антигеном (h2N1 NC), поскольку у него не обнаруживались титры HAI или NT с последним (таблица 1).Антигены, обработанные в мягких условиях (0 и 25 ° C), показали значительно более высокую перекрестную защиту на основе выживаемости (43%) по сравнению с необработанным антигеном (14%) ( p <0,05) (Фигуры 5E, F). Напротив, не было получено заметного повышения защиты с антигеном, обработанным при 37 ° C (Фигуры 5E, F). Антиген, обработанный при 25 ° C, обеспечивал наибольшую перекрестную защиту, поскольку мыши в этой группе выживали дольше или восстанавливали массу тела быстрее, достигая> 90% исходной массы тела к концу 2-недельного периода наблюдения (рис. 5F).Поскольку этот антиген индуцировал наибольшую реакцию с HA2, наблюдаемая повышенная перекрестная защита, по-видимому, связана с умеренными структурными изменениями в HA и повышенной перекрестной реактивностью с HA2, полученной в условиях умеренного низкого pH.

Повышенная перекрестная защита за счет мягкой обработки с низким pH антигеном h4N2

Затем мы создали и оценили IWV h4N2 (A / Victoria / 361/2011), обработанного в условиях умеренно низкого pH для повышения перекрестной защиты. Обработку с низким pH проводили при двух различных pH (5.2 и 5.6) и при 0 ° C очищенными живыми вирусами с последующей инактивацией формальдегидом, как описано в разделе «Материалы и методы». Антиген, обработанный при pH 5,2, терял активность на 55,3%, тогда как антиген, обработанный при pH 5,6, не испытывал видимой потери активности. Как правило, при использованных условиях SRD было трудно различить различия в пределах 5%.

Оба обработанных антигена индуцировали те же титры HAI, что и необработанный контроль против гомологичного вируса (h4N2 Vic) (таблица 2), что снова указывает на то, что антигены, обработанные в мягких условиях, остаются способными индуцировать высокий уровень HAI-антител.Ни один из антигенов не индуцировал детектируемый титр HAI против гетерологичного вируса (h4N2 HK), как ожидалось (таблица 2). Согласно измерениям с помощью ELISA, обработанные антигены индуцировали в два раза более высокий ответ антител, чем необработанный контроль, против гомологичного антигена IWV (h4N2 Vic) (таблица 2; фигура 6A), что снова указывает на то, что они остаются высоко иммуногенными. Важно отметить, что они вызывали гораздо большее (четырехкратное) увеличение ответа против гетерологичного антигена IWV (h4N2 HK), хотя их общие уровни ответа против гетерологичного антигена (h4N2 HK) были намного ниже, чем в отношении гомологичного антигена (h4N2 Vic) (Таблица 2 ; Рисунок 6B).При иммуноблоттинге обработанные антигены также вызывали усиленную реакцию с HA2. Наивысшая реакция была получена с антигеном, обработанным при pH 5,2 (фиг. 6C), который был почти в два раза выше по сравнению с необработанным антигеном, как определено с помощью денситометрического анализа (фиг. 6D).

Таблица 2 . Эффективность и иммуногенность h4N2 Vic инактивировали цельные вирусные антигены, обработанные в различных условиях низкого pH.

Рисунок 6 . Индукция перекрестно-реактивного ответа антител и перекрестная защита антигенами инактивированного цельного вируса (IWV), обработанными низким pH (h4N2 Vic).Мышей ( n = 5) иммунизировали дважды с интервалом 4 недели инактивированным антигеном WV (h4N2 Vic), обработанным при pH 5,2 или 5,6 и при 0 ° C. Объединенные образцы сыворотки получали через 2 недели после второй иммунизации и тестировали на перекрестно-реактивный ответ антител. Мышей заражали гетерологичным вирусом h4N2 HK на 3 неделе после второй иммунизации. (A) ELISA с гомологичным антигеном IWV (h4N2 Vic). (B) ELISA с гетерологичным антигеном IWV (h4N2 HK). (C) Иммуноблоттинг с гомологичным (h4N2 Vic) и гетерологичным (h4N2 HK) антигенами IWV. (D) Денситометрический анализ положительных полос HA2 в иммуноблоттинге. Измерение плотности выполняли дважды для каждого блота, и представлены средние значения. (E) выживаемость после испытания. (F) Масса тела после испытания. Скобки обозначают HA2. Символ * указывает на существенные различия ( p <0,05).

Мышей заражали гетерологичным вирусом h4N2 HK, который представлял собой вирус, несовместимый с антигеном (h4N2 Vic), поскольку он не проявлял детектируемого титра HAI с последним (таблица 2).Все иммунизированные мыши выжили, в то время как 60% неиммунизированных контрольных мышей погибли (фиг. 6E). Однако мыши, иммунизированные обработанными антигенами, испытали гораздо меньшую потерю и более быстрое восстановление массы тела по сравнению с мышами, получавшими необработанный антиген (фигура 6F). Антиген, обработанный при pH 5,2, приводил к наименьшей потере веса и наиболее быстрому выздоровлению со значительной разницей, наблюдаемой на 8-й день по сравнению с мышами, получавшими необработанный антиген ( p ≤ 0,05, тест Стьюдента t ) (Фиг.6F).Эти результаты снова показали, что антигены, обработанные в условиях умеренного низкого pH с умеренной потерей активности, могут вызывать усиленный ответ антител против HA2 и перекрестную защиту.

Дальнейшая оценка перекрестной реакции с HA2, индуцированной антигенами, обработанными в условиях умеренно низкого pH

HA2 является высококонсервативным в пределах подтипа и близкородственных подтипов на основании предыдущих исследований (9), которые подтверждаются нашим собственным анализом выравнивания последовательностей (данные не показаны). Таким образом, дополнительные антигены различных подтипов анализировали с помощью иммуноблоттинга для дальнейшей оценки перекрестной реакции с HA2, индуцированной антигенами, обработанными в условиях умеренно низкого pH.Антитела против обработанного антигена были аналогичным образом получены с помощью IWV NC h2N1, обработанного при pH 5,1 и 0 ° C, со снижением активности на 21,1% у мышей ( n = 5), как описано в разделе «Материалы и методы», но без контрольного заражения. и использовали как объединенный образец сыворотки. Используемые инактивированные антигены включали моновалентные инактивированные вакцины h2N1 CA и H5N1 VN.

Результаты показали, что антитела, индуцированные обработанным антигеном, проявляли гораздо более высокую реакцию (≥2-кратную) с HA2 не только с вакциной h2N1 NC IWV и h2N1 CA, но также с вакциной H5N1 VN по сравнению с таковыми необработанного антигена ( Рисунки 7A, B).Эти результаты были дополнительно подтверждены рекомбинантными антигенами НА. Рекомбинантные НА сначала обрабатывали трипсином для генерации НА2 (28) перед иммуноблот-анализом. Результаты показали, что обработанный антиген также увеличивал реакцию антитела с HA2 всех трех протестированных рекомбинантных HA (h2N1 CA, h3N2 SG и H5N1 VN) по сравнению с необработанным антигеном (Фигуры 7C, D). Это согласуется с тем фактом, что подтипы h2, h3 и H5 все находятся в одной филогенетической кладе. Эти результаты вместе предполагают, что усиленный ответ антител против HA2, индуцированный антигенами, обработанными в условиях умеренно низкого pH, возможно, может быть перекрестной защитой против вирусов из близкородственных подтипов.

Рисунок 7 . Дальнейшая оценка перекрестной реакции с HA2, индуцированной антигенами, обработанными в условиях умеренно низкого pH. Антитела против антигена, обработанного в условиях умеренного низкого pH, были аналогично генерированы с помощью инактивированного цельного вируса h2N1 NC (IWV), обработанного при pH 5,1 и 0 ° C со снижением активности на 21,1% у мышей ( n = 5), как описано в разделе «Материалы и методы», но без проверки и использованный в качестве объединенного образца сыворотки. (A) Иммуноблоттинг с вакцинами h2N1 NC IWV и моновалентными вакцинами h2N1 CA и H5N1 VN. (B) Денситометрический анализ положительных полос HA2 в иммуноблоте (A). (C) Иммуноблоттинг с h2N1 NC IWV и рекомбинантными HAs h2N1 CA, h3N2 SG и H5N1 VN. Рекомбинантные HA сначала обрабатывали трипсином для образования HA2. (D) Денситометрический анализ положительных полос HA2 в иммуноблоте (C) . Открытые стрелки указывают на HA2.

Обсуждение

Доступные в настоящее время инактивированные вакцины против гриппа малоэффективны против вариантных или несовпадающих вирусов.Описанные здесь исследования предлагают потенциально весьма практичный подход к улучшению этих вакцин за счет повышения их способности к перекрестной защите от несовпадающих вирусов. Этот подход основан на открытии того факта, что антигены, обработанные в условиях умеренно низкого pH, могут индуцировать более высокий уровень ответа антител против более консервативного HA2 и усиливать перекрестную защиту от заражения гетерологичными или несовместимыми вирусами.

HA — один из наиболее изученных белков вирусной мембраны. Воздействие среды с низким pH внутри эндосом (~ pH 5.0, 37 ° C) вызывает резкие конформационные изменения в HA, которые необходимы для слияния мембран во время проникновения вирусных клеток (10, 12, 29). Эти изменения включают диссоциацию HA1 и рефолдинг и подъем HA2, так что он имеет мало конформационного сходства с его нативной или исходной структурой. Таким образом, антитела, генерируемые против таких измененных антигенов, вероятно, не обладают или обладают меньшей защитой против вируса, несущего нативный НА, поскольку только иммунный ответ против нативной структуры может иметь высокую защиту.Это согласуется с наблюдением, что антигены, обработанные в таких сильных условиях (~ pH 5,0 и 37 ° C), неспособны создавать какую-либо усиленную перекрестную защиту (ECP), даже если повторно свернутый HA2 полностью экспонируется, как показано в настоящих исследованиях, а также другими (24). Напротив, обработка в условиях умеренно низкого pH (низкий pH и ≤25 ° C), вероятно, вызвала только умеренные структурные изменения, которые включают повышенное воздействие HA2, но в его более естественной конформации без повторной укладки. Это подтверждается умеренно повышенной реакцией с анти-CD-антителом и ЕМ, показывающей, что пик НА, хотя и менее четко выражен, оставался вертикальным.Таким образом, результирующий усиленный ответ антител против HA2 может быть реактивным с нативными антигенами и, следовательно, защитным. Этот предполагаемый механизм ECP антигенами, обработанными в условиях умеренно низкого pH, схематически представлен на рисунке 8.

Рисунок 8 . Схематическое изображение структурных изменений ГК после обработки в условиях умеренного низкого pH (≤25 ° C) и сильного низкого pH (≥37 ° C). Сокращения: ECP, усиленная перекрестная защита; HA, гемагглютинин.

Усиленный ответ антител против НА2 антигенами, обработанными в условиях умеренно низкого pH, был четко продемонстрирован иммуноблоттингом в настоящих исследованиях. Это свидетельствует о вероятном участии линейных эпитопов на HA2. Антитела, специфичные к линейным эпитопам на НА, могут обладать высокой защитой, как показано на примере моноклональных антител (30). Перекрестная реактивность на основе такого эпитопа, вероятно, более тесно связана с гомологией аминокислотной последовательности. С другой стороны, эти антигены не индуцировали значительного увеличения перекрестной нейтрализации.Таким образом, эти антитела против HA2, вероятно, не сильно нейтрализуют и могут в основном передавать ECP через ADCC. Это согласуется с предыдущими исследованиями, показывающими, что ненейтрализующие антитела против ствола НА способны защищать от гриппа через ADCC (15-17). Кроме того, ингибирование высвобождения вируса может быть другим механизмом защиты с помощью таких антител (31).

Похоже, что усиленная перекрестная реакция и защита могут быть получены в самых мягких условиях с низким pH, включая условия, не вызывающие видимой потери активности.Однако наибольшее повышение перекрестной защиты было получено в условиях, дающих потерю эффективности ~ 50%. Это наблюдалось как с антигенами h2N1, так и с h4N2. Обработанные антигены с потерей активности ~ 50% оставались способными генерировать высокий титр HAI без снижения или ≤2-кратного снижения по сравнению с необработанными антигенами. Конкретные условия (pH и температура), используемые для получения оптимальных антигенных и структурных изменений, могут быть легко идентифицированы для данного штамма вируса путем простого скрининга условий обработки.Этому может способствовать анти-CD ELISA, который дает результаты в прямой корреляции с SRD и который проще и быстрее выполнять. Это также может быть выполнено с использованием обработки покрытых антигенов при низком pH на планшете. Поскольку CD или HA2 хорошо консервативны в пределах подтипа, поликлональные антитела, специфичные к домену CD консенсусной последовательности подтипа, могут хорошо перекрестно реагировать с отдельными штаммами внутри подтипа, как показано в настоящем исследовании, что делает его более предпочтительным, чем моноклональное антитело для такой анализ.Этот анти-CD ELISA потенциально может также использоваться для оценки инактивированных вакцин и отдельных вирусов на структурную целостность HA и чувствительность к кислотам.

Следовательно, антигены, обработанные в условиях умеренно низкого pH, могут быть использованы в улучшенной вакцине против гриппа с ECP. Они могут быть легко составлены в качестве окончательной вакцины, соответствующей стандарту активности, с включением дополнительных обработанных или необработанных антигенов, если необходимо. Использование любых дополнительных антигенов, вероятно, находится в пределах безопасности, поскольку уже существуют лицензированные инактивированные вакцины против гриппа с высокими дозами, которые содержат в четыре раза больше антигена, чем в обычных вакцинах.Он также может быть составлен с адъювантом без необходимости в дополнительном антигене. Для существующих инактивированных вакцин их эффективность (≥15 мкг HA для каждого штамма), измеренная с помощью SRD, коррелирует с титром и защитой штамм-специфичных антител HAI. Титр HAI 1:40 считается защитным для человека. Таким образом, улучшенная вакцина с антигенами, обработанными в условиях умеренно низкого pH, может не только обеспечивать штамм-специфическую защиту (исходное показание для вакцины), но также и ECP. Такое повышение эффективности вакцины могло бы привести к значительному снижению бремени гриппа, которое может достигать 35 миллионов случаев ежегодно только в США (32, 33).Это может быть особенно верно в свете того, что эффективность существующих инактивированных вакцин может быть очень низкой или составлять всего 19% в последние годы, в основном из-за появления несовпадающих вирусов (3). Включение стадии обработки с низким pH в производство вакцины включает использование только простой кислоты и основания для регулирования pH, что не вносит никаких примесей и может выполняться без каких-либо серьезных изменений производственного процесса.

Известно, что HA1, где расположен сайт связывания рецептора, в первую очередь отвечает за индукцию штамм-специфичных антител против HAI.Он очень вариабелен по сравнению с более консервативным HA2. Таким образом, улучшенная вакцина с антигенами, обработанными в условиях умеренно низкого pH, использует преимущество более сбалансированного использования HA1 и HA2 за счет комбинирования штамм-специфических иммунных ответов, опосредованных HA1, с перекрестно-реактивными иммунными ответами, обеспечиваемыми HA2. Он особенно хорошо подходит в качестве TIV или QIV, поскольку еще более широкая перекрестная реакция и защита могут быть получены путем включения обработанных антигенов из подтипов h2 и h4. Такая перекрестная защита могла бы быть распространена на вирусы из близкородственных подтипов.

Заявление об этике

Все исследования на животных были проведены с одобрения Институционального комитета по использованию и уходу за животными Техасского университета A&M.

Взносы авторов

YN и JG разработали эксперименты. JG, YN и DT проводили эксперименты. YN, JG и IT рассмотрели и проанализировали результаты. Ю.Н. подготовил рукопись. JG, DT и IT просмотрели рукопись.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Финансирование

Эта работа была частично поддержана грантами SBIR R43AI108072 и R43AI092923 Национального института аллергии и инфекционных заболеваний (NIAID) Национального института здравоохранения (NIH).

Список литературы

1. Остерхольм М.Т., Келли Н.С., Соммер А., Белонгиа Е.А. Эффективность и действенность вакцин против гриппа: систематический обзор и метаанализ. Lancet Infect Dis (2012) 12: 36–44. DOI: 10.1016 / S1473-3099 (11) 70295-X

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

2.Циммерман Р.К., Новолк М.П., ​​Чанг Дж., Джексон М.Л., Джексон Л.А., Петри Дж. Г. и др. Эффективность вакцины против гриппа 2014-2015 гг. В США по типу вакцины. Clin Infect Dis (2016) 63: 1564–73. DOI: 10.1093 / cid / ciw635

CrossRef Полный текст | Google Scholar

6. Эрбелдинг Э. Дж., Пост Д., Стемми Э., Робертс П. С., Августин А. Д., Фергюсон С. и др. Универсальная вакцина против гриппа: стратегический план национального института аллергии и инфекционных болезней. J Infect Dis (2018) 218 ​​(3): 347–54.DOI: 10.1093 / infdis / jiy103

CrossRef Полный текст | Google Scholar

7. Фукуда К., Левандовски Р.А., Бриджес CB, Кокс, штат Нью-Джерси. Инактивированные вакцины против гриппа. 4-е изд. В кн .: Плоткин С.А., Оренштейн В.А., Оффит П.А., ред. Вакцины . Филадельфия: Сондерс (2003). п. 339–70.

Google Scholar

8. Вуд Дж., Шилд Дж., Ньюман Р., Сигроатт В. Применение усовершенствованного метода однократной радиальной иммунодиффузии для анализа содержания антигена гемагглютинина во всех вирусных и субъединичных вакцинах против гриппа. Dev Biol Stand (1997) 39: 193–200.

Google Scholar

9. Фушье Р.А., Мюнстер В., Валленстен А., Бестеброер TM, Херфст С., Смит Д. и др. Характеристика нового подтипа гемагглютинина вируса гриппа А (h26), полученного от черноголовых чаек. J Virol (2005) 79: 2814–22. DOI: 10.1128 / JVI.79.5.2814-2822.2005

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

11. Карр К.М., Чаудри С., Ким П.С. Гемагглютинин гриппа подпружинен за счет метастабильной нативной конформации. Proc Natl Acad Sci U S. A (1997) 94: 14306–13. DOI: 10.1073 / pnas.94.26.14306

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

12. Скехел Дж. Дж., Вили, округ Колумбия. Связывание рецепторов и слияние мембран при проникновении вируса: НА гриппа. Annu Rev Biochem (2000) 69: 531–69. DOI: 10.1146 / annurev.biochem.69.1.531

CrossRef Полный текст | Google Scholar

13. Чиу К., Враммерт Дж., Ли Г.М., Маккосланд М., Уилсон П.К., Ахмед Р. Перекрестные гуморальные реакции на грипп и их значение для универсальной вакцины. Ann N Y Acad Sci (2013) 1283: 13–21. DOI: 10.1111 / nyas.12012

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

14. Корти Д., Сугитан А. Л. мл., Пинна Д., Силаччи С., Фернандес-Родригес Б. М., Ванцетта Ф. и др. Гетероподтипные нейтрализующие антитела вырабатываются лицами, иммунизированными вакциной против сезонного гриппа. J Clin Invest (2010) 120: 1663–73. DOI: 10.1172 / JCI41902

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

15.Jegaskanda S, Job ER, Kramski M, Laurie K, Isitman G, de Rose R и др. Перекрестно-реактивные антитела против гриппа, зависимые от клеточной цитотоксичности, в отсутствие нейтрализующих антител. J Immunol (2013) 190: 1837–48. DOI: 10.4049 / jimmunol.1201574

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

16. ДиЛилло Д. Д., Тан Г. С., Палезе П., Раветч СП. Широко нейтрализующие гемагглютининовые антитела, специфичные для стеблей, требуют взаимодействия FcγR для защиты от вируса гриппа in vivo. Nat Med (2014) 20: 143–51. DOI: 10,1038 / нм.3443

CrossRef Полный текст | Google Scholar

17. Вандервен HA, Jegaskanda S, Wheatley AK, Kent SJ. Антителозависимая клеточная цитотоксичность и вирус гриппа. Curr Opin Virol (2017) 22: 89–96. DOI: 10.1016 / j.coviro.2016.12.002

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

18. Краммер Ф., Пика Н., Хай Р., Марджин И., Палезе П. Вакцинные конструкции против химерного гемагглютинина вируса гриппа вырабатывают широкие защитные антитела, специфичные для стеблей. J Virol (2013) 87: 6542-50. DOI: 10.1128 / JVI.00641-13

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

19. Steel J, Lowen AC, Wang TT, Yondola M, Gao Q, Haye K и др. Вакцина против вируса гриппа на основе консервативного стержневого домена гемагглютинина. MBio (2010) 1 (1): e00018–10. DOI: 10.1128 / mBio.00018-10

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

20. Impagliazzo A, Milder F, Kuipers H, Wagner MV, Zhu X, Hoffman RM и др.Стабильный тримерный ствол гемагглютинина гриппа как широко защитный иммуноген. Наука (2015) 349: 1301–6. DOI: 10.1126 / science.aac7263

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

21. Яссин Х.М., Бойингтон Дж. К., МакТэмни П. М., Вэй С.Дж., Канэкио М., Конг В.П. и др. Наночастицы гемагглютинина на основе ствола создают гетероподтипную защиту от гриппа. Нат Мед (2015) 21: 1065–70. DOI: 10,1038 / нм.3927

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

22.Ван Т.Т., Тан Г.С., Хай Р., Пика Н., Нгаи Л., Экиерт Д.К. и др. Вакцинация синтетическим пептидом гемагглютинина вируса гриппа обеспечивает защиту от различных подтипов вируса. Proc Natl Acad Sci U S. A (2010) 107: 18979–84. DOI: 10.1073 / pnas.1013387107

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

23. Ni Y, Guo J, Turner D, Tizard I. Разработка новой конструкции антигена в виде наночастиц с двойным доменом для универсальной противогриппозной вакцины. Vaccine (2017) 35: 7026–32.DOI: 10.1016 / j.vaccine.2017.10.051

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

24. Quan FS, Li ZN, Kim MC, Yang D, Compans RW, Steinhauer DA, et al. Иммуногенность цельной вирусной вакцины против гриппа, обработанной низким pH. Вирусология (2011) 417: 196–202. DOI: 10.1016 / j.virol.2011.05.014

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

25. Барретт Т., Инглис, Южная Каролина. Рост, очистка и титрование вирусов гриппа. В: Mahy WJ, редактор. Вирусология — практический подход . Оксфорд: IRL Press (1985). п. 119–50.

Google Scholar

28. Ван К., Хольц К.М., Андерсон К., Чубет Р., Махмуд В., Кокс М.М. Экспрессия и очистка гемагглютинина гриппа — на шаг ближе к вакцине против гриппа на основе рекомбинантных белков. Vaccine (2006) 24: 2176–85. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2005.11.005

CrossRef Полный текст | Google Scholar

29. Ди Лелла С., Херрманн А., Майр СМ. Модуляция pH-стабильности гемагглютинина вируса гриппа: стратегия адаптации клетки-хозяина. Biophys J (2016) 110: 2293–301. DOI: 10.1016 / j.bpj.2016.04.035

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

30. Тан Г.С., Леон П.Е., Альбрехт Р.А., Марджин И., Хирш А., Бахл Дж. И др. Широкореактивные нейтрализующие и ненейтрализующие антитела, направленные против гемагглютинина вируса гриппа H7, обнаруживают различные механизмы защиты. PLoS Pathog (2016) 12 (4): e1005578. DOI: 10.1371 / journal.ppat.1005578

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

31.Ямаёси С., Ураки Р., Ито М., Кисо М., Накацу С., Ясухара А. и др. Широкореактивное человеческое моноклональное моноклональное антитело против гемагглютинина, которое ингибирует высвобождение частиц вируса гриппа А. EBioMedicine (2017) 17: 182–91. DOI: 10.1016 / j.ebiom.2017.03.007

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

границ | Вакцинация от гриппа: эффективность, показания и ограничения в педиатрической популяции

Введение

Болезнь человека грипп в первую очередь возникает в результате заражения вирусами гриппа A и гриппа B.Вирус типа А можно классифицировать с использованием поверхностных антигенов гемагглютинина и нейраминидазы. В последние годы основными циркулирующими штаммами А были пандемический штамм h2N1 и штамм h4N2 (1). Двумя основными антигенно-вирусными линиями B являются B / Victoria и B / Yamagata (2). Каждый год оба штамма вируса B циркулируют совместно, и на их долю приходится около 25% случаев заболевания гриппом (3). Однако доля циркулирующих штаммов гриппа B варьируется в зависимости от сезона и страны (4–6). Различные штаммы обладают разной вирулентностью и предпочитают инфицировать разные возрастные группы, вероятно, на основании предыдущего контакта с антигенно схожими вирусами (1).В частности, вирус гриппа B может поражать детей и молодых людей. Детские госпитализации и смертельные случаи гриппа в основном связаны с подтипом В (1).

Ежегодно 15–45% детей заражаются вирусом гриппа, а к 6 годам большинство детей заражаются вирусом гриппа хотя бы один раз (7). Титры вируса у детей выше, чем у взрослых, и выделение вируса продолжается более длительные периоды (8, 9). Следовательно, дети представляют собой важнейший источник передачи гриппа и выдерживают ежегодные эпидемии (9).

Около 870 000 детей в возрасте до 5 лет и около 300 000 детей в возрасте до 1 года во всем мире ежегодно госпитализируются из-за гриппа, и 10–15% детей нуждаются в медицинской помощи при заболеваниях, связанных с гриппом (9, 10). По оценкам, от 28 000 до 111 500 детей в возрасте до 5 лет ежегодно умирают из-за причин, связанных с гриппом, большинство из них в развивающихся странах (9–11), а с 2009 г. в 8/9 сезонов сообщалось о течении заболевания гриппом. в педиатрической популяции — от средней до тяжелой (11).

Это не вызывает сомнений, что вакцина против гриппа (IV) является наиболее эффективным способом профилактики гриппа (2). Первая вакцина, живая аттенуированная моновалентная вакцина, содержащая вирус А, была разработана сразу после выделения вируса гриппа в 1933 году. К счастью, за последние десятилетия в области профилактики гриппа многое изменилось с точки зрения производства вакцины и типа вакцин. и охват деформации. В настоящее время в основном используются два типа IV: инактивированный (IIV) и живой ослабленный (LAIV).IIV может содержать три или четыре штамма вируса. Трехвалентные (IIV3) в настоящее время нацелены против вируса h2N1, вируса h4N2 и вируса B, тогда как четырехвалентные (IIV4) нацелены на оба вируса A и оба вируса B. IIV3 в настоящее время доступны в трех различных формах. : цельновирусные вакцины, сплит-вирусные вакцины и субъединичные вакцины. Разработаны и промаркированы две вакцины IIV4: сплит-инактивированная вакцина и субъединичная. Существуют также сезонные внутривенные инъекции с адъювантами, но в большинстве стран они все еще не лицензированы для использования детьми.LAIV — это четырехвалентная вакцина, содержащая как вирусы A, так и B (12–14).

В этом обзоре мы обсуждаем эффективность, показания, ограничения и текущую направленность внутривенных инъекций в педиатрической популяции на основе последних данных.

Показания к вакцинации против гриппа

Хотя сезонные внутривенные вакцины доступны уже много десятилетий и рекомендованы с 1960 года, первые практические показания для иммунизации детей были выпущены в начале двухтысячного периода и только для детей с состояниями высокого риска.

Спустя 50 лет после первого выпуска польза вакцинации у детей с хроническими заболеваниями остается неоспоримой. Тем не менее, стратегия вакцинации, основанная только на прямой защите субъектов, подвергающихся наибольшему риску, не оказалась очень эффективной в снижении заболеваемости и смертности от гриппа, а также неэффективна с точки зрения затрат (15). Более того, здоровые или хронически больные дети, особенно дети младше 5 лет, подвергаются более высокому риску серьезных осложнений, связанных с гриппом, таких как сопутствующие бактериальные инфекции (например,g., S. pneumonia e или S. aureus ), судороги, грипп-ассоциированный энцефалит / энцефалопатии, а также фульминантный миокардит и перикардит (16–22).

Распространение сезонной программы внутривенного введения на всех детей направлено на снижение воздействия гриппа на здоровье населения путем обеспечения прямой защиты, а также снижения показателей передачи (23). Снижение передачи гриппа в сообществе предотвратит множество случаев тяжелых случаев гриппа и связанных с гриппом смертей среди пожилых людей и людей с клиническими факторами риска.Кроме того, с экономической точки зрения во всех анализах было показано, что внутривенное введение является рентабельным для детей (24, 25).

Различные типы рекомендаций были выпущены во всем мире. Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) рекомендует проводить ежегодную вакцинацию, отдавая приоритет группам высокого риска, включая беременных женщин, детей в возрасте до 5 лет, пожилых людей и лиц с сопутствующими заболеваниями (26).

В Соединенных Штатах (США) Консультативный комитет по практике иммунизации впервые включил здоровых детей в возрасте 6–23 месяцев в целевую популяцию вакцины против гриппа в 2004 г., а всех здоровых детей в возрасте старше 6 месяцев включил только в 2010 г. ( 27, 28).

Многие страны предлагают вакцинировать детей старше 6 месяцев только с состояниями высокого риска; лишь немногие универсально рекомендуют вакцинацию для всего педиатрического населения, начиная с 6-месячного возраста, и предлагают ее бесплатно до 5-летнего возраста (например, Канада, Австралия) (13, 29, 30). В Европе Европейский центр по контролю и профилактике заболеваний (ECDC) имеет ограниченную власть над национальной политикой IV. Поэтому каждая страна устанавливает свои собственные стратегии по рекомендации вакцинации.Не во всех государствах-членах есть официальный национальный план действий по вакцинации, и в большинстве стран рекомендации по сезонной вакцинации включают только целевые группы или группы риска. В течение сезона гриппа 2017–2018 гг. Только 6 из 30 штатов рекомендовали сезонные внутривенные инъекции здоровым детям и подросткам (31–33).

Эти различия в политике иммунизации можно объяснить несколькими причинами: в первую очередь, доступность экономических ресурсов. Реализация ресурсов, выделенных на вакцинацию против гриппа, не всегда считается приоритетом для национальных органов здравоохранения.Некоторые экономические оценки важны для помощи директивным органам в определении стоимости программ вакцинации против гриппа и их финансовой эффективности. Во-вторых, вакцинация против гриппа требует дополнительной работы, которая должна быть эффективно организована с учетом каждого национального календаря иммунизации: это чрезвычайно важно для успеха кампании вакцинации против гриппа. Несмотря на осознание этих экономических и организационных барьеров, по нашему мнению, распространение рекомендации на весь педиатрический возраст может принести большую пользу с точки зрения социального равенства.

ECDC, Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC) и Американская академия педиатрии (AAP) указывают, что инактивированные вакцины должны быть основным выбором для всех детей старше 6 месяцев. Однако они не указывают, какой из IIV3 и IIV4 следует предпочесть. Действительно, тип состава в настоящее время обсуждается, учитывая, что распространенность вирусов B относительно невысока и варьируется в зависимости от сезона (17, 20, 33). LAIV не рекомендовался ни в каких условиях в последние два сезона гриппа на основании данных, демонстрирующих низкую эффективность против гриппа A (h2N1) (34, 35).Однако в отношении сезона гриппа 2018–2019 гг. AAP вновь ввела использование LAIV для здоровых детей старше 2 лет, которые иначе не получили бы вакцину против гриппа (13, 35). AAP поддерживает использование LAIV с целью достижения наилучшего охвата вакцинацией и оптимальной защиты детей всех возрастов (13).

Что касается схемы внутривенного введения, то внутривенное введение следует повторять каждый год, поскольку недавние исследования показали, что нет убедительных доказательств того, что защита распространяется более чем на один сезон гриппа, и эффективность вакцины, похоже, не снижается при частой вакцинации (36–42).

Эффективность вакцины против гриппа в детском возрасте

Интересным аргументом в дискуссии является эффективность вакцины (ЭВ) имеющейся внутривенной вакцины. Поскольку рандомизированные контролируемые исследования не подходят для мониторинга ВЭ в разные сезоны, с 2004 г. был введен тест-негативный дизайн (TND), модифицированное исследование случай-контроль (43, 44). По результатам исследований TND, VE, по-видимому, варьируется от сезона к сезону, по возрастной группе, истории вакцинации и по стране. За прошедшие годы было предложено множество теорий и факторов для объяснения этих несоответствий, таких как субоптимальное соответствие вакцины и штамма, различные типы вакцины (инактивированная vs.LAIV), производство вакцины (например, создание индуцированных яйцами мутаций в гемагглютинине, влияющих на антигенность), возрастные паттерны защиты (например, «Исходный антигенный грех» — OAS — и более поздняя модель OAS: «Антигенный старшинство»), статус питания, невосприимчивость некоторых хозяев к вакцине против гриппа, уровень охвата вакцинацией в сообществе, предшествующая вакцинация против гриппа (например, «гипотеза антигенного расстояния», теоретическая основа, объясняющая переменный эффект повторная вакцинация) и трудность точного измерения ВЭ (45–54).Список возможных факторов, влияющих на VE, представлен на рисунке 1. Вклад и относительная важность каждого фактора в определении VE в значительной степени неизвестны, и это интригующая область будущих исследований.

Рисунок 1 . Факторы и условия, влияющие на эффективность вакцины против гриппа (VE). OAS, Первородный антигенный грех.

Кроме того, объединение и интерпретация различий в оценках ЭВ из имеющихся исследований является чрезвычайно сложной задачей, поскольку ЭВ оценивается ежегодно (из-за частой смены вакцины) и из-за различий в дизайне исследований, возрасте привлеченных детей, сезонах гриппа и странах, где исследования были проведены.

Учитывая эти наблюдения, чрезвычайно сложно дать данные о ВЭ в детском возрасте. Однако, насколько нам известно, мы суммировали имеющиеся данные следующим образом:

a) Дети старше 2 лет: трехвалентная инактивированная внутривенная инъекция показала более высокую VE против A / h2N1pdm09 (до 70%) по сравнению с LAIV (до 39%). Однако они имели схожую эффективность против гриппа A / h4N2 и B (55, 56). Четырехвалентная инактивированная субъединичная антигенная вакцина показала VE в предотвращении гриппа в диапазоне от 45 до 65% против любого типа гриппа, 51-71% против гриппа A и 32-34% против B.По мнению некоторых авторов, для этой вакцины ВЭ наиболее высока у детей младшего возраста в возрасте 1–5 лет (57–59).

b) Дети в возрасте от 6 месяцев до 2 лет: существует несколько исследований, специально посвященных оценке VE инактивированных вакцин в возрасте от 6 до 24 месяцев. В подавляющем большинстве исследований проводился анализ эффективности или объединенный анализ VE, чаще всего с участием детей в возрасте от 2 до 59 месяцев или от 2 до 7–9 лет. По имеющимся данным, ВЭ у детей в возрасте от 6 до 24 месяцев колеблется от 18 до 85% для трехвалентной инактивированной вакцины (60–64).

Исследования эффективности показали, что недавно введенная четырехвалентная инактивированная вакцина с расщепленным вирионом была эффективна против гриппоподобных штаммов (эффективность 50,9% против любого типа A или B и 68,4% против гриппа, вызванного вакциноподобными штаммами) у детей в возрасте от 6 до 35 месяцев. (65). Данные по НЭ в настоящее время недоступны, однако ожидается, что эффективность будет аналогична той, о которой сообщалось в исследованиях эффективности.

Пределы вакцинации против гриппа в педиатрическом возрасте

Одним из основных ограничений внутривенного введения в педиатрическом возрасте является отсутствие рекомендаций для младенцев младше 6 месяцев.Младенцы младшего возраста имеют больший риск тяжелой инфекции гриппа и чаще госпитализируются, чем младенцы старшего возраста (66). Риск еще выше, если у них есть хронические заболевания (10). До сих пор внутривенные инъекции не были одобрены регулирующими органами для использования у младенцев, и в настоящее время их использование не по назначению и является произвольным. Помимо хорошо известной стратегии «кокон», выполнение которой чрезвычайно сложно, иммунизация матери во время беременности может преодолеть этот предел и является единственной мерой, одобренной органами здравоохранения (67).В этой области быстро накапливаются данные об иммуногенности и эффективности. Вакцина с адъювантом IIV или A (h2N1) MF59 во время беременности приводит к трансплацентарному переносу выработанных антител (68). Согласно различным исследованиям, эффективность вакцинации беременных женщин в предотвращении заболевания и госпитализации младенцев в связи с гриппом оценивается примерно в 50–60% (69–71). Тем не менее, несколько вопросов остаются без ответа: какое время должно быть наилучшим для иммунизации матерей, чтобы обеспечить наилучшую и длительную защиту новорожденных и младенцев, и какова иммунологическая роль грудного вскармливания.В частности, некоторые авторы сообщали об отсутствии защитных уровней антител при рождении и об ограниченной иммунологической и клинической защите до 3-го месяца жизни (72, 73). Другие показали, что клиническая защита от гриппа и гриппозависимой пневмонии сохраняется до 6-го месяца жизни (74, 75). Принимая во внимание доступные данные, определение продолжительности приобретенной защиты неточно, имеется мало данных об иммунологии и эффективности между третьим и шестым месяцами жизни младенца. Более того, не сообщалось о долгосрочном неблагоприятном воздействии материнской иммунизации на младенцев, и необходимы дополнительные исследования безопасности.Тем не менее иммунизация матерей остается наилучшим методом защиты детей от гриппа в первые месяцы жизни, и ее следует поощрять.

Еще одним потенциальным ограничением внутривенной вакцинации в педиатрическом возрасте является необходимость 2 прививок младшим наивным детям, особенно младенцам с очень полным графиком иммунизации. Исследования показали, что вторая доза не всегда принималась или откладывалась далеко за пределы рекомендуемого интервала в 28 дней (76, 77). Вероятно, было несколько причин неполной вакцинации, таких как сложность графика, частые инфекции между дозами, трудности с назначением визита к врачу, финансовые препятствия и отсутствие обсуждений между поставщиками и родителями о важности второй дозы (78).Следует приложить усилия, чтобы преодолеть два прививки с помощью одной эффективной разовой дозы для каждого возраста. Это изменение потенциально может упростить процедуры внутривенного введения и улучшить соблюдение графика внутривенного введения.

Внутривенные инъекции остаются основным выбором для всех детей, даже несмотря на то, что LAIV, помимо его способности индуцировать антитела IgA слизистой оболочки, обеспечивать защиту в месте проникновения вируса от последующей инфекции и вызывать как гуморальный, так и клеточный иммунные ответы, также может улучшить соблюдение режима лечения благодаря неинвазивному применению (эндоназальный спрей) (79).

Текущее обсуждение и перспективы на будущее

Показано, что характеристики иммунной системы маленьких детей, с одной стороны, и наличие иммуносупрессивного заболевания, с другой, влияют на внутривенный ответ (12, 80, 81). Это вызвало дебаты о наилучшем подходе к усилению иммунного ответа на IV в этих двух конкретных разных группах. Были протестированы некоторые стратегии, такие как использование более высоких доз антигена и адъювантов (82). В 2009 г. трехвалентная инактивированная внутривенная вакцина в высоких дозах (содержащая в четыре раза больше гемагглютинина, чем в стандартных дозах) была лицензирована для использования у пожилых людей на основании ее профиля безопасности и превосходной иммуногенности (83).В педиатрической популяции недавние исследования показали, что высокая доза внутривенного введения была более иммуногенной, чем стандартная, у детей с лейкемией или солидными опухолями и у пациентов с трансплантацией твердых органов, но не у детей с ВИЧ (84), с хорошо известным профилем безопасности (84). –86). Учитывая относительно небольшую исследуемую популяцию, несмотря на доказательства того, что дети с ослабленным иммунитетом вызывают более низкий иммунный ответ на стандартную дозу внутривенного введения по сравнению со здоровыми субъектами (87), нельзя дать окончательных рекомендаций относительно использования высоких доз внутривенного введения.Примечательно, что нет данных об использовании этой высокой дозы в / в у детей с ослабленным иммунитетом в возрасте до 2 лет. Необходимы дальнейшие исследования.

Другим подходом к усилению иммунного ответа было использование адъюванта «масло в воде» MF59 ^® , впервые одобренного в 1990 году для взрослых старше 65 лет. В 2018 году первое испытание оценило относительную эффективность, иммуногенность и безопасность четырехвалентной инактивированной субъединицы IV (aQIV) с адъювантом MF59 по сравнению с лицензированной в США неадъювантной вакциной против гриппа в большой когорте детей в возрасте от 6 месяцев до 5 лет. лет в 2 сезона подряд (88).Авторы показали, что у самых маленьких детей (6–23 месяцев) aQIV обеспечивает большую защиту от гриппа, чем вакцина без адъюванта. Клиническая польза была продемонстрирована после первой вакцинации у детей, не вакцинированных. Профили эффективности и безопасности вакцины aQIV были аналогичны характеристикам неадъювантной вакцины сравнения, за исключением основных запрошенных нежелательных явлений. Недавно Daily и его коллеги оценили влияние повторной вакцинации на иммуногенность и безопасность aQIV у детей в возрасте от 6 месяцев до 5 лет.Это исследование подтвердило повышенную иммуногенность и аналогичный профиль безопасности после повторной вакцинации aQIV по сравнению с повторной вакцинацией против гриппа без адъюванта (89). Учитывая многообещающие результаты, если они будут подтверждены в продолжающихся исследованиях, aQIV может стать действенным вариантом для рутинного использования в педиатрической популяции в ближайшем будущем.

Четырехвалентная рекомбинантная вакцина, доступная в настоящее время для взрослых, недавно была изучена на детях (6–17 лет), и было обнаружено, что она сопоставима с вакциной IIV с точки зрения безопасности и иммуногенности (90).

Комитет по лекарственным препаратам для человека Европейского агентства по лекарственным средствам и Европейская комиссия (в октябре 2018 г. и в январе 2019 г. соответственно) одобрили четырехвалентную вакцину против гриппа на основе инактивированных клеток (QIVc) для использования у пациентов старше 9 лет. QIVc предполагается использовать уже в следующем сезоне гриппа (2019–2020 гг.). Различный процесс производства вакцины (клеточная вакцина по сравнению с куриными яйцами с эмбрионом) представляет собой шаг вперед в предотвращении изменений, адаптированных к яйцам, огромного количества яиц и длительного времени производства при сравнительной или даже лучшей степени эффективности (91) .

Выводы

Иммунизация против гриппа — наилучшая доступная стратегия снижения заболеваемости, смертности и распространения вируса, связанных с гриппом. Тем не менее, вопросы и ограничения в отношении вакцины против гриппа в педиатрической популяции остаются открытыми (Таблица 1). Во-первых, эффективность вакцины у детей непостоянна и неоптимальна, при этом сообщается о различиях в зависимости от типа вакцины, сезона и возраста ребенка. Оценка средней эффективности остается сложной задачей. Во-вторых, вакцина против гриппа в настоящее время является единственной вакциной, требующей ежегодной иммунизации, с двумя прививками для наивных детей, которые могут повлиять на использование вакцины, особенно у детей младшего возраста.В-третьих, не существует вакцины против гриппа, которая непосредственно защищает детей младше 6 месяцев. Наиболее многообещающей стратегией защиты детей, которые слишком малы для вакцинации, является иммунизация матерей с предполагаемой эффективностью 50–60%. Наконец, многообещающие рекомбинантные вакцины, вакцины с адъювантами и вакцины с высокими дозами все еще не получили всеобщего одобрения в педиатрической популяции. Решение этих проблем вместе с лучшим пониманием сложных иммунных реакций, вызываемых естественной инфекцией гриппа, будет иметь исключительное значение для окончательной разработки будущей универсальной вакцины.

Таблица 1 . Визуальное резюме.

Взносы авторов

CM, IC и MF написали статью. Г.З. отредактировал рукопись. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Список литературы

2. Шоу MW, Xu X, Li Y, Normand S, Ueki RT, Kunimoto GY и др.Повторное появление и глобальное распространение вариантов вирусов гриппа линии B / Victoria / 2/87 в сезонах 2000–2001 и 2001–2002 годов. Вирусология. (2002) 303: 1–8. DOI: 10.1006 / viro.2002.1719

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

3. Бакстер Д. Оценка случая использования трехвалентных или четырехвалентных вакцин против гриппа. Human Vacc Immunother. (2016) 12: 2712–7. DOI: 10.1080 / 21645515.2015.1091130

CrossRef Полный текст | Google Scholar

4.Пол Глезен В., Шмир Дж. К., Куен С. М., Райан К. Дж., Оксфорд Дж. Бремя гриппа B: структурированный обзор литературы. Am J Public Health. (2013) 103: e43 – e51.3. DOI: 10.2105 / AJPH.2012.301137

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

5. Дженнингс Л., Хуанг К.С., Барр И., Ли П.И., Ким В.Дж., Бучи П.и др. Обзор литературы по эпидемиологии гриппа B в 15 странах Азиатско-Тихоокеанского региона. Другие респирные вирусы гриппа. (2018) 12: 383–41.DOI: 10.1111 / irv.12522

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

6. Адлхоч К., Снакен Р., Мелиду А., Ионеску С., Пенттинен П. Доминирующая циркуляция вирусов гриппа A. (h4N2) и B / Ямагата в ЕС / ЕЭЗ, сезоны 2016/17 и 2017/18, соответственно. Евронаблюдение. (2018) 23: 18–00146. DOI: 10.2807 / 1560-7917.ES.2018.23.13.18-00146

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

7. Наир Х., Брукс В.А., Кац М., Рока А., Беркли Дж. А., Мадхи С.А. и др.Глобальное бремя респираторных инфекций, вызванных сезонным гриппом среди детей раннего возраста: систематический обзор и метаанализ. Ланцет. (2011) 378: 1917–30. DOI: 10.1016 / S0140-6736 (11) 61051-9

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

11. Лафонд К.Е., Наир Х., Расули М.Х., Валенте Ф., Буи Р., Рахман М. и др. Глобальная роль и бремя гриппа в госпитализации детей с респираторными заболеваниями, 1982–2012 гг .: систематический анализ. PLoS Med. (2016) 13: e1001977.DOI: 10.1371 / journal.pmed.1002060

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

13. Американская академия педиатрии. Комитет по инфекционным болезням. рекомендации по профилактике гриппа у детей и борьбе с ним, 2017–2018 гг. Педиатрия. (2017) 140: e20172550. DOI: 10.1542 / peds.2017-2550

CrossRef Полный текст | Google Scholar

15. Бамбери Б., Дуглас Т., Селгелид М.Дж., Маслен Х., Джубилини А., Поллард А.Дж. и др. Стратегии вакцинации против гриппа должны быть нацелены на детей. Этика общественного здравоохранения. (2017) 11: 221–34. DOI: 10.1093 / phe / phx021

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

16. Хейккинен Т., Сильвеннойнен Х., Пелтола В., Циглер Т., Вайнионпяя Р., Вуоринен Т. и др. Бремя гриппа у детей в обществе. J Infect Dis. (2004) 190: 1369–73. DOI: 10.1086 / 424527

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

18. Рид К., Каллен А.Дж., Паттон М., Арнольд К.Э., Фарли М.М., Хагеман Дж. И др.Инфекция Staphylococcus aureus с внебольничной инфекцией и вирусом гриппа у госпитализированных детей. Pediatr Infect Dis J. (2009) 28: 572–6. DOI: 10.1097 / INF.0b013e31819d8b71

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

20. Морпария К., Пешковск С., Калянараман М. Гнойный перикардит, вторичный по отношению к гриппу, и внебольничная коинфекция, вызванная метициллин-устойчивым Staphylococcus aureus . Cardiol Young. (2018) 28: 1481–3.DOI: 10.1017 / S1047951118001580

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

21. Кабрал М., Брито М.Дж., Конде М., Оливейра М., Феррейра Г.К. Фульминантный миокардит, связанный с пандемическим вирусом гриппа h2N1 A. Rev Portug Cardiol. (2012) 31: 517–20. DOI: 10.1016 / j.repc.2011.11.012

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

22. Grohskopf LA, Sokolow LZ, Broder KR, Walter EB, Fry AM, Jernigan DB. Профилактика сезонного гриппа и борьба с ним с помощью вакцин: рекомендации консультативного комитета по практике иммунизации — США, сезон гриппа 2018–1919 гг. MMWR Рекомендуемый представитель . (2018) 67: 1. DOI: 10.15585 / mmwr.rr6703a1

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

23. Цанг Т.К., Фанг В.Дж., ИП Д.К., Перера Р.А., Со ХК, Леунг Г.М. и др. Непрямая защита от вакцинации детей от гриппа в домашних условиях. Nat Commun. (2019) 10: 106. DOI: 10.1038 / s41467-018-08036-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

25. Д’Анджолелла Л.С., Лафранкони А., Кортеси ПА, Рота С., Чезана Дж., Мантовани Л.Г.Стоимость и эффективность вакцинации против гриппа: систематический обзор. Ann dell’Istituto Super Sanita . (2018) 54: 49–57. DOI: 10.4415 / ANN_18_01_10

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

26. Harper SA, Fukuda K, Uyeki TM, Cox NJ, Bridges CB. Профилактика и борьба с гриппом: рекомендации консультативного комитета по практике иммунизации (ACIP). MMWR Рекомендуемый представитель . (2005) 54: 1–41.

PubMed Аннотация | Google Scholar

27.Центры по контролю и профилактике заболеваний. Профилактика гриппа и борьба с ним с помощью вакцин. MMWR . (2010) 59: 1–62.

Google Scholar

31. Европейский центр профилактики и контроля заболеваний. Научные рекомендации ECDC по сезонной вакцинации детей и беременных женщин от гриппа . Стокгольм: ECDC (2012).

Google Scholar

32. Европейский центр профилактики и контроля заболеваний. Сезонная вакцинация против гриппа и использование противовирусных препаратов в государствах-членах ЕС / ЕЭЗ — Обзор рекомендаций по вакцинам на 2017–2018 гг. И показателей охвата вакцинацией на 2015–2016 и 2016–2017 гг. Сезоны гриппа .Стокгольм: ECDC (2018).

33. Каспард Х., Гаглани М., Клипер Л., Белонгиа Е.А., штаб-квартира Маклина, Гриффин М.Р. и др. Эффективность живой аттенуированной противогриппозной вакцины и инактивированной противогриппозной вакцины у детей в возрасте 2–17 лет в 2013–2014 годах в США. Вакцина. (2016) 34: 77–82. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2015.11.010

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

34. Grohskopf LA, Sokolow LZ, Fry AM, Walter EB, Jernigan DB. Обновление: рекомендации ACIP по использованию четырехвалентной живой аттенуированной противогриппозной вакцины (LAIV4) — США, сезон гриппа 2018–1919 гг. MMWR. (2018) 67: 643. DOI: 10.15585 / mmwr.mm6722a5

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

35. Белонгиа Е.А., Сковронски Д.М., штаб-квартира Маклина, Чемберс С., Сундарам М.Э., Де Серрес Г. Повторная ежегодная вакцинация против гриппа и эффективность вакцины: обзор доказательств. Expert Rev Vaccines. (2017) 16: 723–36. DOI: 10.1080 / 14760584.2017.1334554

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

36. Штаб-квартира Маклина, Томпсон М.Г., Сундарам М.Э., Мис Дж.К., МакКлюр Д.Л., Фридрих Т.К. и др.Влияние повторной вакцинации на эффективность вакцины против гриппа A (h4N2) и B в течение 8 сезонов. Clin Infect Dis. (2014) 59: 1375–85. DOI: 10.1093 / cid / ciu680

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

37. Ramsay LC, Buchan SA, Stirling RG, Cowling BJ, Feng S, Kwong JC и др. Влияние повторной вакцинации на эффективность вакцины против гриппа: систематический обзор и метаанализ. BMC Med. (2019) 17: 9. DOI: 10.1186 / s12916-018-1239-8

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

38.Томпсон М.Г., Клиппард Дж., Петри Дж. Г., Джексон М.Л., штаб-квартира Маклина, Гаглани М. и др. Эффективность вакцины против гриппа для полностью или частично вакцинированных детей от 6 месяцев до 8 лет в 2011–2012 и 2012–2013 годах: важность двух первичных доз. Pediatr Infect Dis J. (2016) 35: 299. DOI: 10.1097 / INF.0000000000001006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

39. Gilca V, De Serres G, Hamelin ME, Boivin G, Ouakki M, Boulianne N, et al. Сохранение антител и реакция на трехвалентную вакцину против гриппа 2010–2011 гг. Через год после однократного введения детям пандемической вакцины против h2N1 с адъювантом AS03 2009 г. Вакцина. (2011) 30: 35–41. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2011.10.062

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

40. Fu C, Xu J, Lin J, Wang M, Li K, Ge J, et al. Одновременная и межсезонная защита инактивированной противогриппозной вакцины против болезни A (h2N1) pdm09 среди детей раннего возраста: оценка эффективности вакцины против гриппа в 2012–2013 гг. Вакцина. (2015) 33: 2917–21. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2015.04.063

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

41.McLean HQ, Caspard H, Griffin MR, Gaglani M, Peters TR, Poehling KA и др. Связь предшествующей вакцинации с эффективностью вакцины против гриппа у детей, получавших живую аттенуированную или инактивированную вакцину. JAMA Netw Open. (2018) 1: e183742. DOI: 10.1001 / jamanetworkopen.2018.3742

CrossRef Полный текст | Google Scholar

43. Сковронски Д.М., Гилберт М., Твид С.А., Петрик М., Ли Ю., Мак А. Эффективность вакцины против консультации с врачом в связи с лабораторно подтвержденным гриппом: результаты пилотного проекта дозорных врачей в Британской Колумбии, 2004–2005 гг. Can Commun Dis Rep. (2005) 31: 181–91.

44. Tricco AC, Chit A, Soobiah C, Hallett D, Meier G, Chen MH и др. Сравнение эффективности противогриппозной вакцины против несовместимых и совпадающих штаммов: систематический обзор и метаанализ. BMC Med. (2013) 11: 153. DOI: 10.1186 / 1741-7015-11-153

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

45. Охмит С.Е., Петри Дж. Г., Малош Р. Э., Каулинг Б. Дж., Томпсон М. Г., Шей Д. К. и др. Эффективность вакцины против гриппа в обществе и домашнем хозяйстве. Clin Infect Dis. (2013) 56: 1363–9. DOI: 10.1093 / cid / cit060

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

46. Стейси Х., Барджестех Н., Маплетофт Дж., Миллер М. «Гноти Сьютон»: использование реакции хозяина для повышения эффективности вакцины против вируса гриппа. Вакцины. (2018) 6:23. Doi: 10.3390 / Vacines6020023

CrossRef Полный текст | Google Scholar

47. Мозер Х.А.С., Галиндо Фрага А., Ортис Эрнандес А.А., Гу В., Хунсбергер С., Галан Эррера Дж. Ф. и др.Недостаточный вес, избыточный вес и ожирение как независимые факторы риска госпитализации взрослых и детей от гриппа и других респираторных вирусов. Другие респирные вирусы гриппа. (2019) 13: 3–9. DOI: 10.1111 / irv.12618

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

49. Фрэнсис Т. О доктрине первородного антигенного греха. Proc Am Philos Soc. (1960) 104: 572–8.

Google Scholar

51. Кухарский А.Ю., Гог-младший.Роль социальных контактов и первозданного антигенного греха в формировании возрастной структуры иммунитета к сезонному гриппу. PLoS Comput Biol. (2012) 8: e1002741. DOI: 10.1371 / journal.pcbi.1002741

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

52. Ребер А. Дж., Ким Дж. Х., Коулман Л. А., Спенсер С. М., Чанг Дж. Р., Чен Дж. И др. Вакцинация детей от сезонного гриппа вызывает гуморальный и клеточный иммунитет сверх текущего сезона: перекрестная реактивность с прошлыми и будущими штаммами. J Infect Dis. (2016) 214010: 1477–86. DOI: 10.1093 / infdis / jiw380

CrossRef Полный текст | Google Scholar

53. Смит Д. Д., Форрест С., Экли Д. Х., Перельсон А. С.. Различная эффективность повторной ежегодной вакцинации против гриппа. Proc Natl Acad Sci USA. (1999) 96: 14001–6. DOI: 10.1073 / pnas.96.24.14001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

54. Чанг Дж. Р., Фланнери Б., Амброуз С. С., Беге Р. Э., Каспард Н., Демаркус Л.Эффективность живой аттенуированной и инактивированной вакцины против гриппа. Педиатрия. (2019) 143: e20182094. DOI: 10.1542 / педс.2018-2094

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

55. Джексон М.Л., Чанг Дж.Р., Джексон Л.А., Филлипс С.Х., Бенуа Дж., Монто А.С. и др. Эффективность вакцины против гриппа в США в сезоне 2015–2016 гг. N Engl J Med. (2017) 377: 534–43. DOI: 10.1056 / NEJMoa1700153

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

56.Сугая Н., Синджо М., Наката Ю., Цунемацу К., Ямагути Ю., Комияма О. и др. Эффективность трехсезонной инактивированной вакцины против гриппа в профилактике гриппа и госпитализации детей в Японии, 2013–2016 гг. Вакцина. (2018) 36: 1063–71. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2018.01.024

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

57. Андо С. Эффективность четырехвалентной противогриппозной вакцины на основе результатов исследования отрицательного контроля у детей в сезоне 2016–2017 гг. J Infect Chemother. (2018) 24: 782–8. DOI: 10.1016 / j.jiac.2018.05.012

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

58. Poehling KA, Caspard H, Peters TR, Belongia EA, Congeni B, Gaglani M, et al. 2015–2016 гг. Эффективность живых аттенуированных и инактивированных противогриппозных вакцин у детей в США. Clin Infect Dis. (2017) 66: 665–72. DOI: 10.1093 / cid / cix869

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

59.Ян З., Дун З., Фу С. Эффективность вакцины против сезонного гриппа среди детей в возрасте от 6 до 59 месяцев в южном Китае. PLoS ONE. (2012) 7: e30424. DOI: 10.1371 / journal.pone.0030424

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

60. Шен С., Кампителли М.А., Кальцавара А., Гутманн А., Квонг Дж. К.. Эффективность вакцины против сезонного гриппа у недоношенных и доношенных детей в возрасте 6–23 месяцев в течение нескольких сезонов. Вакцина. (2013) 31: 2974–8. DOI: 10.1016 / j.вакцина.2013.05.011

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

61. Су WJ, Chan TC, Chuang PH, Liu YL, Lee PI, Liu M T и др. Оценка эффективности вакцины против гриппа с использованием данных рутинного эпиднадзора среди детей в возрасте 6–59 месяцев в течение пяти сезонов гриппа подряд. Int J Infect Dis. (2015) 30: 115–21. DOI: 10.1016 / j.ijid.2014.11.011

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

62. Бучан С.А., Чунг Х., Кампителли М.А., Кроукрофт Н.С., Губбай Дж. Б., Карнаучоу Т. и др.Эффективность вакцины против лабораторно подтвержденных госпитализаций гриппа среди детей раннего возраста в сезон гриппа 2010-11–2013-14 гг. В Онтарио, Канада. PLoS ONE. (2017) 12: e0187834. DOI: 10.1371 / journal.pone.0187834

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

63. Блит CC, Джейкоби П., Эффлер П.В., Келли Х., Смит Д.В., Робинс С. и др. Эффективность трехвалентной вакцины против гриппа у здоровых детей раннего возраста. Педиатрия. (2014) 133: e1218 – e1225.DOI: 10.1542 / пед.2013-3707

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

64. Pepin S, Dupuy M, Borja-Tabora CFC, Montellano M, Bravo L, Santos J, et al. Эффективность, иммуногенность и безопасность четырехвалентной инактивированной вакцины против гриппа у детей в возрасте 6–35 месяцев: многосезонное рандомизированное плацебо-контролируемое исследование в северном и южном полушариях. Вакцина. (2019) 37: 1876–84. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2018.11.074

CrossRef Полный текст | Google Scholar

65.Poehling KA, Edwards KM, Weinberg GA, Szilagyi P, Staat MA, Iwane MK, et al. Недооценка бремени гриппа у детей младшего возраста. N Engl J Med. (2006) 355: 31–40. DOI: 10.1056 / NEJMoa054869

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

67. Zuccotti G, Pogliani L, Pariani E, Amendola A, Zanetti A. Трансплацентарный перенос антител после иммунизации матери вакциной с адъювантом против пандемического гриппа A (h2N1) 2009 г. MF59. JAMA. (2010) 304: 2360–1.DOI: 10.1001 / jama.2010.1729

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

68. Manske JM. Эффективность и действенность вакцинации против гриппа матери во время беременности: обзор доказательств. Mater Child Health J. (2014) 18: 1599–609. DOI: 10.1007 / s10995-013-1399-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

69. Мадхи С.А., Катленд С.Л., Куванда Л., Вайнберг А., Хьюго А., Джонс С. и др. Вакцинация беременных женщин против гриппа и защита их младенцев. N Engl J Med. (2014) 371: 918–31. DOI: 10.1056 / NEJMoa1401480

CrossRef Полный текст | Google Scholar

70. Заман К., Рой Е., Арифин С.Е., Рахман М., Ракиб Р., Уилсон Е. и др. Эффективность иммунизации материнского гриппа у матерей и младенцев. N Engl J Med. (2008) 359: 1555–64. DOI: 10.1056 / NEJMoa0708630

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

71. Нуньес М.С., Катленд С.Л., Джонс С., Даунс С., Вайнберг А., Ортиз Дж. Р. и др.Эффективность вакцинации матери против гриппа против всех причин госпитализации младенцев с инфекциями нижних дыхательных путей: результаты рандомизированного контролируемого исследования. Clin Infect Dis. (2017) 65: 1066–71. DOI: 10.1093 / cid / cix497

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

72. Дабрера Г., Чжао Х., Эндрюс Н., Бегум Ф., Грин Х. К., Эллис Дж. И др. Эффективность вакцинации против сезонного гриппа во время беременности в профилактике гриппа у младенцев, Англия, 2013/14. Евронаблюдение. (2014) 19: 20959. DOI: 10.2807 / 1560-7917.ES2014.19.45.20959

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

73. Тапиа М.Д., Соу С.О., Тамбура Б., Тегете И., Пасетти М.Ф., Кодио М. и др. Иммунизация матерей трехвалентной инактивированной вакциной против гриппа для профилактики гриппа у младенцев в Мали: проспективное, активно контролируемое, слепое рандомизированное испытание фазы 4. Lancet Infect Dis. (2016) 16: 1026–35. DOI: 10.1016 / S1473-3099 (16) 30054-8

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

74. Омер С.Б., Кларк Д.Р., Акил А.Р., Тапиа М.Д., Нунес М.С., Кодзуки Н. и др. Иммунизация материнского гриппа и профилактика тяжелой клинической пневмонии у младенцев. Pediatr Infect Dis J. (2018) 37: 436–40. DOI: 10.1097 / INF.0000000000001914

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

75. Hu Y, Chen Y, Zhang B. Охват и своевременность вакцинации против сезонного гриппа двумя дозами среди детей в возрасте от 6 месяцев до 3 лет: данные за период с 2010–11 по 2014–2015 годы в провинции Чжэцзян, Восточный Китай. Hum Vacc Immunother. (2017) 13: 75–80. DOI: 10.1080 / 21645515.2016.1225640

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

76. Лин X, Fiebelkorn AP, Pabst LJ. Тенденции соблюдения рекомендаций по введению двух доз вакцины против гриппа детям в возрасте от 6 месяцев до 8 лет, 2010–2015 гг. Вакцина. (2016) 34: 5623–8. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2016.09.037

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

77. Хофстеттер А.М., Барретт А., Стоквелл М.С.Факторы, влияющие на вакцинацию против гриппа городских латиноамериканских детей с низким доходом в возрасте до девяти лет, которым требуется две дозы в сезоне 2010–2011 гг. J Commun Health. (2015) 40: 227–34. DOI: 10.1007 / s10900-014-9921-z

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

79. Бектас О., Карадениз С., Огуз А., Бербероглу С., Йилмаз Н., Цитак С. Оценка иммунного ответа на трехвалентную сплит-вакцину против гриппа у детей с солидными опухолями. Детский рак крови. (2007) 49: 914–7. DOI: 10.1002 / pbc.21106

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

80. Гуссен Г.М., Кремер Л.С., ван де Ветеринг, доктор медицины. Вакцинация против гриппа у детей, получающих химиотерапию от рака. Кокрановская база данных Syst Rev. (2013) 8: CD006484. DOI: 10.1002 / 14651858.CD006484.pub3

CrossRef Полный текст | Google Scholar

81. DiazGranados CA, Dunning AJ, Kimmel M, Kirby D, Treanor J, Collins A, et al.Эффективность высоких доз вакцины против гриппа по сравнению со стандартной дозой у пожилых людей. N Engl J Med. (2014) 371: 635–45. DOI: 10.1056 / NEJMoa1315727

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

82. Hakim H, Allison KJ, Van de Velde LA, Tang L, Sun Y, Flynn PM и др. Иммуногенность и безопасность трехвалентной инактивированной вакцины против гриппа в высоких дозах по сравнению со стандартной дозой вакцины у детей и молодых людей с онкологическими заболеваниями или ВИЧ-инфекцией. Вакцина. (2016) 34: 3141–8.DOI: 10.1016 / j.vaccine.2016.04.053

CrossRef Полный текст | Google Scholar

83. ДжаКвинта С., Майклс М.Г., МакКуллерс Дж. А., Ван Л., Фоннесбек С., О’Ши А. и др. Рандомизированное двойное слепое сравнение стандартной дозы и трехвалентной инактивированной противогриппозной вакцины с высокой дозой у детей после трансплантации твердых органов. Педиатр трансплантологии. (2015) 19: 219–28. DOI: 10.1111 / petr.12419

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

84.McManus M, Frangoul H, McCullers JA, Wang L, O’shea A, Halasa N. Безопасность высоких доз трехвалентной инактивированной вакцины против гриппа у педиатрических пациентов с острым лимфобластным лейкозом. Детский рак крови. (2014) 61: 815–20. DOI: 10.1002 / pbc.24863

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

85. Бек С.Р., Маккензи Б.К., Хашим А.Б., Харрис Р.С., Занудана А., Агбоадо Г. и др. Вакцинация против гриппа для пациентов с ослабленным иммунитетом: резюме систематического обзора и метаанализа. Другие респирные вирусы гриппа. (2013) 7: 72–5. DOI: 10.1111 / irv.12084

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

86. Весикари Т., Кирштейн Дж., Го Г.Д., Лив Б., Ружицкий М.Е., Исаков Л. и др. Оценка эффективности, иммуногенности и безопасности четырехвалентного гриппа с адъювантом MF59.