Желтое тело в: Желтое тело в правом яичнике на УЗИ

Содержание

Киста желтого тела — MyPathologyReport.ca

Что такое киста желтого тела?

Киста желтого тела — это незлокачественное изменение, которое можно увидеть при исследовании яичника женщины репродуктивного возраста под микроскопом. Оно создается желтым телом, которое не может превратиться в белое тело в конце менструального цикла. Вместо этого желтое тело растет, и центр становится открытым пространством, называемым киста. Кисты желтого тела могут не вызывать никаких симптомов. Однако большие кисты могут разорваться, что может вызвать кровотечение в брюшной полости и боль. 

Яичник

Яичники являются частью женского репродуктивного тракта. Это небольшие органы, которые прикрепляются к матке маточными трубами. Наружная поверхность яичника выстлана тонким слоем специальной ткани, которая образует барьер вокруг внешней стороны яичника, называемый эпителий.

Ткань под эпителием называется строма. Внутри стромы находятся большие клетки, называемые яйцеклетками, которые содержат половину генетического материала, необходимого для создания нового человека.

Другая половина генетического материала поступает из мужских сперматозоидов во время оплодотворения.

Яйца окружены специализированными стромальными клетками, которые поддерживают яйцеклетку до тех пор, пока она не выйдет из яичника. Яйцеклетка и стромальные клетки образуют небольшие круглые структуры, называемые фолликулами. Эти фолликулы отправляют и получают сигналы, которые создают менструальный цикл.

Каждый месяц небольшое количество фолликулов начинает созревать, пока из яичника не выйдет одна яйцеклетка (а иногда и больше). Это называется овуляцией. Освободившаяся яйцеклетка прорывается через эпителий на поверхности яичника, прежде чем попасть в маточную трубу.

Фолликул, оставшийся в яичнике, называется желтым телом. Если оплодотворение не происходит, желтое тело становится альбикансом. Желтое и белое тело можно увидеть, когда патолог исследует яичник под микроскопом.

 

Эмили Гобель, MD FRCPC, обновлено 15 декабря 2020 г.

Желтое тело — это… Что такое Желтое тело?

  • ЖЕЛТОЕ ТЕЛО — ЖЕЛТОЕ ТЕЛО, corpus lute urn (Malpi ghi), образование, возникающее в яичнике на месте лопнувшего фоликула (Граафоза пузырька) и признаваемое в наст. время железой с внутренней секрецией. Ж. т. на высоте развития имеет плотную консистенцию,… …   Большая медицинская энциклопедия

  • ЖЕЛТОЕ ТЕЛО — временная железа внутренней секреции у млекопитающих животных и человека. Развивается в яичнике после овуляции. В случае оплодотворения яйцеклетки желтое тело выделяет гормон прогестерон, необходимый для сохранения и нормального протекания… …   Большой Энциклопедический словарь

  • ЖЕЛТОЕ ТЕЛО — ЖЕЛТОЕ ТЕЛО, участок ткани желтого цвета, образующийся в ГРААФОВОМ ПУЗЫРЬКЕ в ЯИЧНИКЕ млекопитающих после образования яйцеклетки. Если ЯЙЦЕКЛЕТКА оплодотворяется, желтое тело выделяет ПРОГЕСТЕРОН, гормон, необходимый для подготовки матки к… …   Научно-технический энциклопедический словарь

  • желтое тело — Временная железа внутренней секреции, развивающаяся в яичнике из клеток фолликула после его разрыва и выхода яйцеклетки. [ГОСТ 18157 88] Тематики продукты убоя скота Обобщающие термины перечень биологических терминов, применяемых в мясной… …   Справочник технического переводчика

  • желтое тело — ЭМБРИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ ЖЕЛТОЕ ТЕЛО – временная железа внутренней секреции, образующаяся в яичнике на месте овулировавшего фолликула, т.е. после выхода из него яйцеклетки. Выделяет в кровь прогестерон – гормон, задерживающий созревание следующего… …   Общая эмбриология: Терминологический словарь

  • желтое тело — временная железа внутренней секреции, развивающаяся в яичнике из клеток зернистого слоя фолликула после овуляции. В желтом теле продуцируется гормон прогестерон. При наступлении беременности желтое тело начинает развиваться дальше, так как желтое …   Медицинские термины

  • ЖЕЛТОЕ ТЕЛО — Временная железа внутренней секреции, образующаяся в яичнике на месте овулировавшего фолликула, выделяющая в кровь прогестерон. У небеременных самок желтое тело, функционирующее в течение одного полового цикла, называется циклическим, при… …   Термины и определения, используемые в селекции, генетике и воспроизводстве сельскохозяйственных животных

  • Желтое тело — 11. Желтое тело Временная железа внутренней секреции, развивающаяся в яичнике из клеток фолликула после его разрыва и выхода яйцеклетки Источник: ГОСТ 18157 88: Продукты убоя скота. Термины и определения оригинал документа …   Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации

  • желтое тело — (corpus luteum, PNA, BNA, JNA, LNH) железа внутренней секреции, формирующаяся в яичнике из клеток зернистого слоя фолликула после овуляции; выделяет прогестерон …   Большой медицинский словарь

  • Желтое тело — эндокринная структура, продуцирующая прогестерон. Развивается внутри лопнувшего яичкового овариального фолликула. * * * временная железа внутренней секреции, каждый месяц формирующаяся в яичнике женщины на месте вышедшей из него яйцеклетки;… …   Энциклопедический словарь по психологии и педагогике

  • Персистентное желтое тело яичника / Акушерско-гинекологические заболевания cельскохозяйственных животных / Московский Ветеринарный WEB-Центр

    Персистентным желтым телом считают желтое тело в яичнике небеременной коровы, задержавшееся и функционирующее более 25 — 30 дней.

    Этиология. Чаще всего оно образуется из циклического желтого тела при хронических воспалительных процессах в половых органах, а также после неоднократных пропусков (без осеменения животного) половых циклов. Желтое тело беременности, независимо от характера течения родов и послеродового периода, подвергается инволюции в первые дни после родов (концентрация прогестерона в периферической крови составляет 0,2-0,5 нг/мл), и переход его в персистентное не наблюдается.

    Симптомы и течение. Концентрация прогестерона в крови при данной патологии соответствует лютеиновой фазе полового цикла (более 2 нг/мл). Рога матки, как правило, свисают в брюшную полость, несколько увеличены, стенки их расслаблены, ригидность понижена. Исследование состояния матки проводят очень тщательно и осторожно, чтобы выявить ее заболевание или исключить беременность.

    Диагноз. При диагностике персистентного желтого тела необходимо вести точные записи о состоянии яичников и матки при каждом исследовании для их сопоставления. Диагностика персистентного желтого тела осуществляется путем двукратного ректального исследования коров и телок с интервалом 2 — 3 недели и ежедневным наблюдением за животными. Желтое тело за этот период не претерпевает изменений в расположении, величине, а животное не проявляет стадию возбуждения полового цикла.

    Лечение. Бесплодным коровам с персистентными желтыми телами или с функционирующими желтыми телами полового цикла однократно вводят один из препаратов простагландина в вышеуказанных дозах. Для повышения эффективности назначения животным препаратов простагландина сочетают с однократной инъекцией гонадотропина СЖК в дозе 2,5 — 3 тыс. м.е. При использовании гормональных препаратов для восстановления плодовитости у половозрелых телок дозы гонадотропных препаратов снижают на 700 — 1000 м.е., а простагландинов на 150 — 200 мкг. Во всех случаях использования гормональных препаратов для нормализации функции яичников у животных желательно назначать препараты витаминов, макро- и микроэлементов.

    Лютеиновая фаза, овуляция, жёлтое тело

    Что происходит после овуляции? Про жёлтое тело и гормоны лютеиновой фазы рассказывает Игорь Иванович Гузов, акушер-гинеколог, к.м.н., главный врач ЦИР.

    Для того чтобы понять, что происходит внутри яичника, представим себе, что происходит во второй половине менструального цикла у женщины.

    Прошла овуляция, и внутри яичника на месте лопнувшего доминантного фолликула имеется особый гормонально активный орган, который называется «желтое тело» или по-латыни corpus luteum. Поэтому и название этой фазы — лютеиновая, то есть фаза желтого тела.

    Яичник во время второй фазы цикла производит большое количество прогестерона. Это специфический гормон второй фазы цикла у всех млекопитающих. У женщины яичник также производит достаточно большое количество гормона эстрадиола. Это бывает не у всех млекопитающих, у человека (у приматов) желтое тело во вторую фазу цикла производит большое количество эстрадиола.

    Эта функция яичника – выработка большого количества прогестерона, большого количества эстрогенов — определенным образом модулирует работу гипоталамо-гипофизарной системы. И гипоталамо-гипофизарная система в этот момент (мы говорим условно, на очень примитивном уровне) «молчит» и не пытается запускать дополнительную овуляцию.

    Когда идет вторая фаза желтого тела, и уже произошла овуляция — у человека не может быть суперовуляции, то есть чтобы какой-то фолликул дополнительно овулировал, и наступала следующая беременность. Или, допустим, суперфетации— когда уже на фоне наступившей беременности наступает следующая беременность. У человека это невозможно. То есть желтое тело внутри яичника, которое функционирует и находится там во время второй фазы цикла, не дает запустить следующий процесс параллельного созревания дополнительных фолликул.

    Желтое тело у человека и у приматов существует достаточно автономно. Это структура, которая существует после овуляции в течение примерно 12-14 дней. Желтое тело и вырабатываемый прогестерон по сути обеспечивают имплантацию. То есть они готовят слизистую оболочку матки, производя там так называемую секреторную трансформацию эндометрия. Они обеспечивают созревание слизистой оболочки матки, для того чтобы имплантация произошла успешно.

    И если эта имплантация происходит, то тогда внедрившийся в слизистую оболочку матки эмбрион налаживает контакт с кровеносной системой матери. Он начинает омываться материнской кровью, и посылает в материнскую кровь, в материнский организм, гормон, который вырабатывается, начиная с самых ранних сроков беременности – хорионический гормон человека (ХГЧ). И этот хорионический гормон человека действует на желтое тело, обеспечивая продолжение его работы.


    И желтое тело, которое образовалось после того, как яйцеклетка вышла из яичника (то есть после овуляции) на месте овулировавшего доминантного фолликула, продолжает работать и во время беременности, поддерживая беременность малого срока в случае, если получит сигнал со стороны плодного яйца.

    А если оно не получит этот сигнала? Если желтое тело не получило этого сигнала, то через 12-14 дней прекращает свою работу. Оно прекращает вырабатывать эстрадиол, прекращает вырабатывать прогестерон. Уровень этих 2-х главных гормонов второй фазы цикла  у женщин резко падает за счет того, что желтое тело прекратило свою работу, не получив дополнительного сигнала со стороны плодного яйца.

    И в ответ на падение уровня гормонов, у женщины происходит закономерная реакция отторжения функционального слоя слизистой оболочки матки (менструация). Матка «плачет кровавыми слезами» по несостоявшейся беременности, и, таким образом, начинается новый цикл.


    Начинается новый цикл, и репродуктивная система женщины опять начинает готовиться к беременности.

    Прогестерондефицитные состояния

    Прогестерон в организме женщины – основной гормон, обеспечивающий наступление беременности и ее поддержание. Фактически более не для чего этот гормон не нужен. Его дополнительные свойства дублированы другими гормонами, имеющими с ним сходную химическую структуру. Прогестерондефицитные состояния время от времени возникают в организме любой женщины. Проявляется это нарушениями в менструальном цикле и гиперпластическими процессами в эндометрии и молочной железе и снижением фертильности. В рамках этой книги мы решили выделить в одну главу описание этой проблемы и пути ее решения, поскольку нам показалось нецелесообразным разбивать эту тему на несколько глав.

    Адекватная секреторная трансформация эндометрия является неотъемлемым условием процесса имплантации во время, так называемого, «имплантационного окна». Однако не только полноценное секреторное превращение эндометрия играет роль в процессе имплантации эмбриона. Не менее важным является синхронность трансформации эндометрия созреванию яйцеклетки и в последующем развитию эмбриона на преимплантационной стадии. Другими словами, если этапы секреторной трансформации отстают от стадии развития яйцеклетки или эмбриона, то имплантация может не случиться совсем, или произойти с погрешностями, которые в дальнейшем могут стать причиной прерывания беременности.

    Секреторная трансформация эндометрия и соответственно его способность к адекватной имплантации эмбриона зависят от двух факторов: полноценного воздействия эстрогенов во время первой фазы менструального цикла и достаточной концентрации и длительности секреции прогестерона в лютеиновую фазу.

    Эстрогены являются «подготовительными» гормонами. Они готовят ткани к «разрешающему», если использовать музыкальные сравнения, эффекту прогестерона. В частности эстрогены индуцируют появление рецепторов прогестерона в тканях, а также рецепторов факторов роста, выработка которых стимулируется прогестероном.

    Прогестерон в своей «ощутимой» концентрации появляется в организме женщины только после овуляции, то есть овуляция — «входные ворота для прогестерона». Появляясь в организме, прогестерон начинает готовить организм женщины к беременности, это — его единственная основная задача. Эффект его воздействия на организм сравним с проявителем для отснятой пленки — он «проявляет» функциональный потенциал ткани, подготовленный эстрогенами. Как и проявитель, он не способен коренным образом изменить свойства, он способен лишь усилить или ослабить их.

    Итак, прогестерон это единственный гормон в организме, основная функция которого развитие и поддержание беременности, другие же его свойства дублируются другими гормонами. В связи с тем, что развитие и поддержание беременности требует мобилизации практически всех систем организма, прогестерон прямо или косвенно способен запускать и контролировать множество разносторонних биологических процессов, ряд которых мы перечислим ниже:

    • Матка и яичники: участие в механизме овуляции, обеспечение имплантации, поддержание беременности.
    • Молочная железа: развитие лобулярно-альвеолярной структуры для осуществления лактации, супрессия синтеза молока перед родами.
    • Головной мозг: модуляция механизмов полового поведения.
    • Выделительная система – антиминералкортикоидная активность.

    Костная система — стимуляция активности остеобластов

    • Стимуляция гликогенеза.
    • Циклический метаболизм нуклеотидов.
    • Синтез и секреция белка.
    • Регуляция клеточного цикла.
    • Регуляция внутриклеточных ферментов, метаболизирующих ER и эстрогены.
    • Регуляция цАМФ-зависимой киназы второго типа.
    • Индукция секреции ферментов для метаболизма белков и простагландинов.
    • Индукция секреции гидролаз, фосфотаз, простагландинов, активатора плазминогена и пролактина.

    Хотя прогестерон способен воздействовать на множество процессов в организме, основной его функций является подготовка репродуктивной системы для инициации и поддержания беременности. На уровне матки эти эффекты проявляются в следующем:

    • Дифференцировка стромального компонента эндометрия.
    • Стимуляции секреции желез и накопление в них базальных вакуолей.
    • Изменение паттерна секреции белков эндометрием.
    • Обеспечение «покоя» миометрия.
    • Увеличение потенциала покоя.
    • Уменьшение поступления в клетку экзогенного кальция, за счет уменьшения экспрессии гена, кодирующего субъединицу кальциевого канала.
    • Блокирование возможности эстрогенов индуцировать экспрессию альфа-адренергических рецепторов на клетках миометрия.

    Итак, начало и продолжение беременности невозможно без адекватного воздействия прогестерона на организм женщины. Как отмечалось выше, основным источником прогестерона является желтое тело.

    Желтое тело, по сути, является финальной стадией развития фолликула и, таким образом, основной эндокринной железой яичника. Как известно, яичники содержат около 6-7 на 106 примордиальных фолликулов и только в среднем 350 смогут достичь стадии образования желтого тела, остальные же подвергнутся атрезии.

    После преовуляторной ЛГ-волны происходит лютеинизация гранулезных и тека клеток, которые начинают синтезировать прогестерон и в малых количествах эстрадиол.

    Процесс синтеза прогестерона желтым телом крайне сложен и имеет множество «тонких мест», повреждение которых может нарушить функцию железы.

    Лютеинизация гранулезных и тека клеток в клетки, способные производить в больших количествах прогестерон, сопровождается активизацией ферментов, ответственных за конверсию холестерола в прогестерон. К этим ферментам относятся цитохром Р-450scc и 3 бета гидроксистероиддегидрогеназа. В то же время в этих клетках резко снижается экспрессия ферментов, превращающих прогестерон в эстрадиол (17 альфа гидроксилаза и ароматаза).

    В процессе лютеинизации клеток фолликула происходит образование двух типов клеток: тека-лютеиновых и гранулезо-лютеиновых. Они отличаются друг от друга по своим морфологическим и функциональным качествам. Кроме этого, базальная мембрана фолликула разграничивает эти два вида клеток, выступая в свою очередь в качестве барьера.

    Пролиферация клеток в развивающемся желтом теле по своей интенсивности сравнима с таковой в стремительно растущей опухоли. Под воздействием VEGF в желтом теле развивается богатая капиллярная сеть. Считается, что кровоснабжение этой железы превышает таковое любой другой ткани организма. Большинство мембран лютеиновых клеток прямо прилежит к капиллярам или контактирует с интерстициальным пространством в непосредственной близости с капиллярами. Подобное соположение обеспечивает высокий метаболический «оборот» в желтом теле, так потребление кислорода единицей массы желтого тела в 2-6 раз превышает потребление кислорода печенью, почками или сердцем.

    Основным субстратом для стероидогенеза в желтом теле является холестерин. В норме наибольшее количество холестерина синтезируется в печени, который в виде липопротеинов транспортируется в надпочечники, фолликулы, желтое тело и яички. Транспорт холестерина к желтому телу обеспечивается липопротеидами низкой и высокой плотности. Поглощение липопротеидов лютеиновыми клетками осуществляется посредством рецепторного эндоцитоза. В клетке от липопротеидов отщепляется холестерин, который в свою очередь эстерифицируется, образуя запасы холестерина в клетке в виде эфиров. В дальнейшем холестеролэстераза по мере необходимости высвобождает холестерин, создавая в клетке необходимое количество свободного холестерина.

    Синтез всех стероидных гормонов в большой степени зависит от процесса транспорта холестерина в митохондрии и дальнейшего прохождения холестерина от наружной мембраны митохондрии к внутренней, где расположен ферментный комплекс, отвечающий за отделение от холестерина боковой цепочки, что превращает его в прегненолон.

    В процессе синтеза прогестерона клетками желтого тела в ответ на стимулы, поступающие от тропных гомонов, существует несколько регулируемых точек или этапов, определяющих интенсивность процесса. На этих этапах происходит оперативное изменение скорости и количества образования промежуточных продуктов синтеза. Первой такой точкой является перенос холестерина от наружной мембраны митохондрий к внутренней. Этот процесс регулируется короткоживущим белком StAR (steroidogenic acute regulatory proteine). Как стало известно сравнительно недавно, стимуляция стероидогенеза тропными гормонами нуждается в образовании в клетке, так называемых, короткоживущих белков, которые регулируют определенные этапы синтеза гормонов. Они способны во времени оперативно изменять интенсивность протекания отдельных этапов, тем самым контролируя количество конечного продукта.

    После того, как холестерин переносится от наружной мембраны митохондрии к внутренней ферментным комплексом, состоящим из цитохрома Р-450scc, от него отделяется боковая цепочка, и он превращается в прегненолон. Прегненолон покидает митохондрию и попадает в гладкий эндоплазматический ретикулум, который обычно находится в тесном контакте с митохондрией. В этой органелле прегненолон под воздействием 3 бета гидроксистероиддегидрогеназы превращается в прогестерон, который поступает в цитоплазму клетки и затем посредством диффузии выходит за ее пределы в капиллярное русло.

    С момента своего образования желтое тело постепенно увеличивается в размере, параллельно этому возрастает секреция прогестерона. Когда желтое тело достигает максимума своего развития, оно несколько дней продолжает функционировать, а затем, если не произошло оплодотворение яйцеклетки, постепенно регрессирует.

    Концентрация прогестерона в плазме крови зависит от целого ряда факторов: размера желтого тела, а точнее количества лютеиновых клеток в нем, их функциональных способностей и кровотока в железе. Ключевыми ферментами в процессе синтеза прогестерона является: StAR, Р-450scc и 3 бета ГСД.

    Поддерживают жизнедеятельность желтого тела два основных гормона, имеющих гомологичную структуру — ЛГ и хорионический гонадотропин.

    В случае развития беременности концентрация прогестерона прогрессивно возрастает до 7 недели беременности, после чего наступает плато вплоть до 10 недели гестационного периода, и затем происходит постепенное возрастание уровня прогестерона вплоть до момента родов.

    На ранних этапах беременности основным источником прогестерона является желтое тело, при этом пик его секреции приходится на 6 неделю гестации. Как было показано в эксперименте, удаление желтого тела до 6 недели беременности во всех случаях приводит к выкидышу. После 16 недель беременности секреция прогестерона плацентой становится достаточной чтобы продолжать развитие беременности. Таким образом, адекватное функционирование желтого тела является неотъемлемым условием развития беременности, особенно в первые 6 недель гестации.

    Совершенно не случайно мы привели выше подробное описание нормальной физиологии желтого тела. Мы показали всю сложность и уязвимость организации секреции прогестерона. Самые различные факторы способны нарушить эти тонкие механизмы. В частности к ним относятся: перенесенные ранее и текущие в настоящий момент воспалительные процессы в придатках матки. В первую очередь это связано с тем, что наиболее мощным лютеолитическим эффектом обладают простагландины, и в частности просталгандин F 2альфа. Как известно, воспалительный процесс сопровождается выраженным накоплением простагландинов. Кроме воспалительного процесса накопление простагландинов наблюдается при эндометриозе.

    В свою очередь нарушения во время созревания фолликула могут привести к тому, что сформировавшееся желтое тело будет содержать неполноценные лютеиновые клетки, которые не способны будут синтезировать прогестерон в должных количествах.

    В желтом теле может быть нарушена рецепция к лютеотропным гормонам или к липопротеидам. В конечном итоге могут наблюдаться дефекты в основных ферментах синтеза прогестерона.

    Таким образом, визуализация желтого тела при УЗ исследовании еще не является залогом его полноценного функционирования.

    За последние годы было создано множество различных аналогов прогестерона, некоторые из которых до сих пор используются в клинической практике. Ниже мы хотим привести сравнительную характеристику прогестерона и синтетических прогестинов в аспекте клинического использования при терапии прогестерондефицитных состояний.

    Уже с середины 70-х годов было известно, что изолированное повышение концентрации эстрогенов в крови или экзогенное введение только эстрогенов в значительной степени повышает риск развития рака эндометрия. В связи с этим с начала 80-х годов основной целью клинического использования прогестерона стала защита эндометрия. В частности, был хорошо известен тот факт, что рецепторы эстрогенов, расположенные в ядрах клеток, контролируют клеточный цикл эпителия желез эндометрия, то есть эстрогены индуцируют начало клеточного цикла, а прогестерон блокирует этот процесс, при этом экзогенно введенные синтетические прогестины также обладают этой способностью, но только в другой дозе.

    В процессе подбора оптимальной дозы прогестагенов основное значение придавалось их способности вызывать у женщины в постменопаузе такую же гамму морфологических и биохимических изменений в эндометрии, как во время лютеиновой фазы менструального цикла женщины пременопаузального возраста. Начало кровотечения после 11 дней введения прогестагенов являлось доказательством эффективной защиты эндометрия и наилучшим свидетельством клинической эффективности.

    Однако в процессе накопления опыта фармакологические критерии эффективности и надежности различных прогестагенов претерпели существенные изменения. В контролируемых исследованиях на животных и человеке было показано, что концентрация натурального прогестерона, находящаяся в физиологических рамках лютеиновой фазы менструального цикла, не приводит к развитию каких-либо побочных эффектов. В то же время множество рандомизированных контролируемых исследований, произведенных на животных и человеке, показали, что некоторые из наиболее часто использующихся в клинической практике синтетических прогестинов в обычных дозах вызывают значительные изменения в концентрациях липидов, метаболизме глюкозы, а также оказывают воздействие на стенку артериальных сосудов.

    Для предсказания возможности развития побочных эффектов, исследователи сконцентрировали свое внимание на анализе химической структуры стероидных молекул и их способности связываться с различными рецепторами, используя классические опыты на животных. Однако ценность полученной информации была относительно низкой, поскольку результаты было затруднительно экстраполировать на человеческую модель.

    По своей сути прогестины являются препаратами, повышающими биодоступность прогестерона при пероральном приеме, сохраняя при этом его эффекты на эндометрий. Метаболизм прогестерона ферментами ЖКТ и печени начинается с редукции 5a (в ЖКТ) и b (в печени) кольца А, а на втором этапе — гидроксилирование С20 и/или С17. Любое изменение кольца В снижает аффиннитет 5a или 5b редуктаз и поэтому используется для повышения биодоступности пероральных прогестагенов и улучшения их связывания с рецепторами прогестерона.

    Эти изменения включают подавление С19 (19нор-тестостерон и -прегнина дериватов), добавление 4,6диеновой структуры (дидрогестерон, ципротерон ацетат) или метильного радикала к С6 (медроксипрогестерон). Все эти препараты способны вызывать прогестагенные эффекты на организм в дозе, в 10 раз меньшей по сравнению с пероральным прогестероном.

    Основным побочным эффектом различных синтетических прогестинов является остаточная андрогенная активность (дериваты 19-нортестостерона). Несмотря на уменьшение дневной дозы (по сравнению с прогестероном) некоторые прогестины, отличные по структуре от 19-нортестостерона, могут влиять на метаболизм глюкозы (Wagner 1998) и холестерина (Bongard 1998), а также индуцировать дисфункцию эпителия (Sullivan 1995, Miyagawa 1997). Имевшие место ранее предположения о том, что факторами, обеспечивающими надежность и эффективность прогестинов могут быть: более выраженный эффект при меньшей дозе и низкая андрогенная активность, в настоящий момент не могут быть использованы в качестве критерия для выбора оптимального прогестагена.

    Прогестагены классифицируются на основании их способности связываться с рецепторами прогестерона в эндометрии, а также с рецепторами эстрогенов, кортизола, тестостерона и альдостерона. Однако, эта классификация непригодна для предсказания основных побочных эффектов. К примеру, in vitro медроксипрогестерон ацетат и прогестерон, обладают приблизительно одинаковыми связывающими способностями, в то время как in vivo эти препараты имеют различные влияния на сердечно-сосудистую систему. Открытие рецепторов прогестерона в других тканях — эндотелии сосудов, гладкой мускулатуре артериальной стенки, рецепторов GABA (ГАМК) в головном мозге (Vasquez 1999) позволило пролить свет на эту ситуацию. Например, независимые исследования показали, что в сосудистой стенке и миокарде антагонистическое влияние на рецепторы альдостерона предпочтительнее (Weber 1999), нежели подавление регуляции рецептора эстрадиола прогестинами (Vasquez 1999).

    В целом основные эффекты прогестерона на кожу, мозг и миометрий обусловлены его двумя метаболитами.

    Частичный антиандрогенный эффект осуществляется посредством конкурентного ингибирования процесса метаболического превращения андрогенов в более активные формы (имеется в виду конкуренция за фермент 5-альфа редуктаза), а также за счет конкурентного ингибирования связывания наиболее активного андрогена дигидротестостерона с его рецептором, что обусловлено действием 5-альфа прегнандиона (5-альфа редуцированного метаболита прогестерона). Надо отметить, что эти механизмы не способны оказывать влияние на прямые эффекты тестостерона, однако ингибирование 5-альфа редуктазы имеет большее значение, поскольку именно этот фермент играет ключевую роль в половой дифференцировке плода с 12 по 28 неделю гестации. Кроме этого, указанный выше фермент также регулирует синтез дигидротестостерона в мозговой ткани, который в свою очередь определяет такие эмоциональные явления как злость и агрессивность.

    Релаксирующий эффект (вероятнее всего имеет значение при высоких концентрациях эстрадиола в плазме крови) обусловлен активностью 5-альфа прегнанолона, который связывется с рецепторами ГАМК в головном мозге. Этот метаболит прогестерона обладает антидисфорической активностью, участвует в регулировании процессов сна и бодрствования и, вероятно, оказывает нейропротективный эффект после повреждения мозговой ткани.

    Токолитический эффект осуществляется 5-бета метаболитом прогестерона (5-бета прегнандион и прегнанолон).

    В почках, и в особенности в миометрии и артериальной стенке прогестерон проявляет антиальдостероновый эффект, основанный также на конкурентном механизме.

    Не малое значение имеет способность прогестерона противодействовать эффектам эстрогенов на эндотелий сосудов, при этом синтетические прогестины, за счет своего более выраженного прогестагенного эффекта, способны в значительной степени усиливать проявление этого свойства прогестерона. В частности известно, что прогестерон угнетает пролиферацию эндотелиальных клеток, таким образом, избыточный прогестагенный эффект, обусловленный действием синтетических прогестинов, приводит к нарушениям функций эндотелия (вазодилятация, отложение холестерина, адгезия различных молекул и.т.д.) с последующим изменением морфологии сосудистой стенки.

    В то же время, прогестерон в своей физиологической концентрации оказывает благоприятный эффект на активность различных цитокинов, пролиферацию гладкомышечных клеток артерий и накопление липидов в макрофагах.

    В настоящий момент не существует ни одного синтетического прогестагена, который бы при введении в рекомендуемой дозе мог бы проявлять антиальдостероновый эффект (исключение составляет только дроспиренон). Кроме этого ни одни синтетический прогестин не способен генерировать в организме 5-альфа и 5 — бета редуцированные метаболиты, необходимые для реализации перечисленных выше физиологических эффектов прогестерона, (частичный антиандрогенный, токолитический и анксиолитический).

    При создании различных синтетических прогестинов особый акцент делался на более высокий, чем у прогестерона, аффинитет молекулы к рецептору прогестерона, что помимо положительных моментов несет в себе и отрицательный, обусловленный повышением риска развития сердечно-сосудистых заболеваний по механизму, описанному выше. Целый ряд гинекологических заболеваний требует восполнения недостаточности эндогенного прогестерона. Широко применяющиеся с этой целью препараты несут в себе достаточное количество неудобств для пациентки, проявляющиеся наличием выраженных побочных эффектов, неудобством приема или высокой стоимостью, что во многом обусловлено недостаточным сродством входящих в них активных компонентов с натуральным прогестероном.

    Приведенные выше факты во многом подчеркивают очевидную целесообразность более широкого использования в клинической практике натурального прогестерона, который представлен на отечественном рынке препаратом Дюфастон®.

    Дюфастон® -ретропрогестерон – стереоизомер прогестерона (метильная группа у 10 атома углерода находится в ?-положении)

    Дюфастон® имеет дополнительную двойную связь между 6 и 7 атомом углерода. Основной метаболит Дюфастона (дигидродидрогестерон) – также ретростероид с аналогичной селективной прогестагенной активностью. Дюфастон® является высокоэффективным пероральным прогестагеном, связывающимся избирательно только с прогестероновыми рецепторами. При этом у дюфастона отсутствуют побочные гормональные влияния на органы-мишени.

    При принятии внутрь Дюфастона в организме наблюдается незначительная стероидная нагрузка. К другим характеристикам Дюфастона, делающим его наиболее удобным и эффективным в клинической практике, стоит отнести наличие у него метаболитов с прогестагенной активностью, отсутствие влияния на овуляцию, отсутствие эстрогенной и кортикоидной активности.

    Дюфастон®, в отличии от других прогестагенов, высоко специфичен. Он не обладает маскулинизирующим эффектом на плод женского пола, не обладает антиандрогенным эффектом на плод мужского пола, не вызывает гирсутизма, акне, себореи, алопеции, безопасен при гипертензии и тромбоэмболии в анамнезе.

    В отличии от только микронизированного прогестерона Дюфастон® — микронизированный натуральный прогестерон, подвергшийся уникальному ультрафиолетовому облучению, быстро и полностью абсорбируется, имеет предсказуемую биодоступность, не вызывает сонливости, не оказывает отрицательного влияния на функцию печени.

    На основании многочисленных исследований не было получено доказательств отрицательного воздействия дидрогестерона при применении во время беременности. Согласно статистическим данным 7,5 миллионов беременностей на фоне приема Дюфастона закончились успешно.

    Дюфастон® — ретропрогестерон – стереоизомер прогестерона (метильная группа у 10 атома углерода находится в ?-положении)

    Дюфастон® имеет дополнительную двойную связь между 6 и 7 атомом углерода. Основной метаболит Дюфастона (дигидродидрогестерон) – также ретростероид с аналогичной селективной прогестагенной активностью. Дюфастона является высокоэффективным пероральным прогестагеном, связывающимся избирательно только с прогестероновыми рецепторами. При этом у Дюфастона отсутствуют побочные гормональные влияния на органы-мишени.

    К другим характеристикам Дюфастона, делающим его наиболее удобным и эффективным в клинической практике, стоит отнести наличие у него единственного активного метаболита с с выраженным прогестагенным действием, отсутствие влияния на овуляцию, отсутствие эстрогенной и кортикоидной активности.

    Суммируя все выше сказанное, можно сделать заключение, что для нормального начала и последующего развития беременности на ранних этапах необходимо нормально функционирующее желтое тело. Основной функцией желтого тела является продукция прогестерона. Множество факторов способны нарушить функцию этой железы, при этом подчас обнаружить скрытые дефекты практически невозможно. Учитывая тот факт, что роль прогестерона в инициации и поддержании беременности ключевая, то «полагаться» на сложно устроенное и столь уязвимое желтое тело в случае невынашивания беременности несколько опрометчиво. Одним из самых простых и надежных способов решения данной проблемы является заместительная терапия Дюфастоном, начиная с лютеиновой фазы менструального цикла. Как показали исследования, использование синтетических аналогов прогестерона в репродуктивной гинекологии нежелательно в связи с побочными эффектами и тератогенным воздействием на плод.

    Некоторые примеры использования Дюфастона в клинической практике.

    • Индукция овуляции: при использовании схем индукции овуляции или подозрении на наличие недостаточности лютеиновой фазы менструального цикла – Дюфастон® назначается по 1 таблетке 2 раза в сутки 10 дней с 16 дня менструального цикла.
    • При задержке очередной менструации, особенно в перименопаузе при толщине эндометрия более 8 мм, Дюфастон® может быть рекомендован в качестве гормонального кюретажа – по 1 таблетке 2 раза в сутки 10 дней или до начала менструации. В сомнительных случаях, когда по данным УЗИ имеется подозрение на гиперпластический процесс эндометрия, возможно также проведение гормонального кюретажа с использованием дюфастона с последующий оценкой состояния эндометрия после окончания менструации. В ряде случаев, с использованием такого кюретажа удается избежать инструментального воздействия. В этом случае проба с дюфастоном позволяет дифференцировать истинную гиперплазию эндометрия от функциональной, которая довольно часто встречается в перименопаузе.
    • При лечении угорозы прерывания беременности Дюфастон назначается индивидуально, в зависимости от конкретной ситуации. Если в первом триместре беременности у женщины появляются тянущие боли в нижних отделах живота и кровянистые выделения из половых путей ей следует как можно скорее принять однократно 6 таблеток Дюфастона. В дальнейшем, если клинические проявления угрозы не прогрессировали, прием дюфастона продолжается по схеме: по 2 таблетки х 3 раза в сутки. Если на фоне такой схемы приема клинические проявления угрозы нивелировались не полностью доза Дюфастона может быть повышена до 8 таблеток: 3 таблетки утром, 2 – днем и 3 вечером. На выбранной схеме пациентка должна находиться около недели или до полного исчезновения симптомов. В дальнейшем производится постепенное снижение дозы Дюфастона по 1 таблетке в 4-5 дней. При этом необходимо следить за состоянием пациентки после отмены каждой таблетки. В том случае, если после отмены очередной таблетки признаков угрозы прерывания беремености нет, возможно дальнейшее снижение дозы. В противном случае отмена очередной таблетки переносится на неделю.Индукция овуляции: при использовании схем индукции овуляции или подозрении на наличие недостаточности лютеиновой фазы менструального цикла – Дюфастон® назначается по 1 таблетке 2 раза в сутки 10 дней с 16 дня менструального цикла. При задержке очередной менструации, особенно в перименопаузе при толщине эндометрия более 8 мм, Дюфастон® может быть рекомендован в качестве гормонального кюретажа – по 1 таблетке 2 раза в сутки 10 дней или до начала менструации. В сомнительных случаях, когда по данным УЗИ имеется подозрение на гиперпластический процесс эндометрия, возможно также проведение гормонального кюретажа с использованием дюфастона с последующий оценкой состояния эндометрия после окончания менструации. В ряде случаев, с использованием такого кюретажа удается избежать инструментального воздействия. В этом случае проба с дюфастоном позволяет дифференцировать истинную гиперплазию эндометрия от функциональной, которая довольно часто встречается в перименопаузе.
    • При лечении угорозы прерывания беременности Дюфастон назначается индивидуально, в зависимости от конкретной ситуации. Если в первом триместре беременности у женщины появляются тянущие боли в нижних отделах живота и кровянистые выделения из половых путей ей следует как можно скорее принять однократно 6 таблеток Дюфастона. В дальнейшем, если клинические проявления угрозы не прогрессировали, прием дюфастона продолжается по схеме: по 2 таблетки х 3 раза в сутки. Если на фоне такой схемы приема клинические проявления угрозы нивелировались не полностью доза Дюфастона может быть повышена до 8 таблеток: 3 таблетки утром, 2 – днем и 3 вечером. На выбранной схеме пациентка должна находиться около недели или до полного исчезновения симптомов. В дальнейшем производится постепенное снижение дозы Дюфастона по 1 таблетке в 4-5 дней. При этом необходимо следить за состоянием пациентки после отмены каждой таблетки. В том случае, если после отмены очередной таблетки признаков угрозы прерывания беремености нет, возможно дальнейшее снижение дозы. В противном случае отмена очередной таблетки переносится на неделю.

    Дюфастон может быть назначен для снятия тонуса миометрия, к примеру, если он визуализируется при УЗИ или беременная жалуется на тянущие боли в нижних отделах живота. Доза дюфастона в этом случае подбирается индивидуально.

    Дюфастон® можно принимать до 20 недели беременности.

    • Дюфастон® может быть использован в сочетании с чистыми эстрогенами при некоторых вариантах заместительной гормональной терапии. В этой ситуации он обеспечивает защиту эндометрия от прямых эффектов эстрогенов. В такие препараты как Фемостон (различных форм выпуска) Дюфастон® уже включен в состав.

    Вся информация носит ознакомительный характер. Если у вас возникли проблемы со здоровьем, то необходима консультация специалиста.

    Читайте также

    Желтое тело

    На месте бывшего зрелого фолликула формируется желтое тело (это II фаза овариального цикла).

    В своем формировании желтое тело проходит несколько стадий. Вначале, после разрыва стенки фолликула и после выхода половой клетки вместе с фолликулярной жидкостью, полость заполняется кровью. В первые часы и сутки происходит организация кровяного сгустка и формирование волокнистых структур. Оставшийся фолликулярный эпителий начинает интенсивно пролиферировать, а вокруг этих клеток начинает формироваться густая сеть кровеносных капилляров. Это стадия пролиферации и васкуляризации.

    В стадии железистого метаморфоза зернистые клетки трансформируются в железистые клетки (секреторные), постепенно увеличиваются в размере, начинают вырабатывать и накапливать пигмент желтого цвета – лютеин и гормон – прогестерон, который в небольшом количестве выделяется в кровь.

    В стадии расцвета желтое тело достигает максимального развития, железистые клетки становятся крупными, наполнены пигментом и интенсивно вырабатывают и выделяют в кровь прогестерон.

    Различают 2 разновидности желтого тела:

    1. Менстуральное желтое тело – до 1,5-2 см, продолжительность существования около 2 недель.

    2. Желтое тело беременности – развивается во время беременности, крупное – 5-6 см, существует около 6 месяцев.

    Прогестерон – второй женский половой гормон; вырабатывается желтым телом, определяет вторичные половые признаки и поведенческие черты. Он подавляет рост фолликулов, стимулирует фазу секреции и набухания эндометрия, т.е. готовит эндометрий к имплантации зародыша, создает условия для беременности. Прогестерон сохраняет беременность, укрепляет ее, готовит молочную железу к лактации.

    Развитие желтого тела и выработка прогестерона стимулируются лютеинизирующим гормоном гипофиза.

    В стадии обратного развития происходит атрофия желтого тела, уменьшается выработка и выделение прогестерона, со временем оно замещается соединительной тканью (сначала рыхлой, затем волокнистой) и образуется белое тело.

    Гистофизиология яйцевода (маточной трубы)

    Образовавшиеся яйцеклетки попадают в проксимальный отдел яйцевода, где завершается овогенез, проходит период созревания и в результате образуется зрелая яйцевая клетка, окруженная блестящей оболочкой и лучистым венцом. В норме здесь происходит оплодотворение (в первые 12-24 часа). Далее яйцеклетка или зародыш медленно (около 4 суток) продвигается по яйцеводу к матке. Это продвижение происходит в слизи, в слабощелочной среде.

    Стенка яйцевода содержит 3 оболочки:

    1. Внутренняя, представлена слизистой оболочкой. Основу составляет рыхлая соединительная ткань, которая образует собственную пластинку слизистой. С поверхности она покрыта однослойным призматическим реснитчатым эпителием, в котором имеются ресничные и железистые клетки, вырабатывающие слабощелочной слизистый секрет. Сама слизистая оболочка образует многочисленные складки, которые в значительной степени заполняют просвет маточной трубы. Между складками остаются тонкие щели, заполненные слизистым секретом. В этом секрете во взвешенном состоянии находится яйцевая клетка или зародыш, в составе которого они и продвигаются к полости матки.

    2. Средняя оболочка – мышечная. Внутренний слой ее циркулярный, наружный–продольный. Состоит из гладкой мышечной ткани. Сокращения этой оболочки вызывают продвижение слизи, в которой содержится яйцеклетка или зародыш.

    3. Наружная оболочка – серозная.

    Матка

    Через 4 суток после оплодотворения зародыш попадает в матку, основной функцией которой является создание условий для беременности.

    В стенке матки также выделяют 3 оболочки:

    1. Внутренняя – слизистая, или эндометрий.

    2. Средняя – мышечная, или миометрий.

    3. Наружная – серозная, или периметрий.

    Эндометрий содержит собственную пластинку слизистой из рыхлой соединительной ткани и эпителиальную пластинку, которая представлена однослойным призматическим эпителием (кубическим или цилиндрическим в зависимости от активности).

    Среди эпителиальных клеток выделяют: ресничные и железистые клетки. Последние преобладают, они вырабатывают слабощелочной слизистый секрет. Эпителий образует трубчатые углубления в собственной пластинке слизистой, т.е. в подлежащей соединительной ткани – маточные железы, содержащие железистые клетки.

    В эндометрии выделяют 2 слоя:

    1. Внутренний слой – функциональный. Он обращен в полость матки, которая заполнена секретом. Содержит эпителий, большую часть собственной пластинки и маточные железы (кроме донных отделов маточных желез). Этот слой отторгается в менструальном периоде, восстанавливается в постменструальном, набухает и секретирует в предменструальном периоде. Во внутренний слой происходит имплантация зародыша, который затем в ней развивается и превращается в плод. Внутренний слой участвует в образовании плаценты, входит в состав последа и восстанавливается после родов.

    2. Базальный слой – это узкий слой, прилежит к миометрию. Содержит рыхлую соединительную ткань, донные отделы маточных желез, множество стволовых клеток. За счет этого слоя осуществляется регенерация функционального слоя и восстановление эндометрия.

    Миометрий содержит наиболее широкий средний циркулярный или сосудистый слой, в котором находятся крупные извитые кровеносные сосуды. Внутренний (подслизистый) слой и наружный (надсосудистый) – продольные слои мышечных клеток. Построены эти слои из гладкомышечных клеток, среди которых преобладают звездчатые клетки. Их отростки способны растягиваться в 5-10 раз. Способность к регенерации миометрия невысокая. Образовавшиеся дефекты заполняются соединительной тканью (образуются рубцы).

    Периметрий (брюшина) покрывает большую часть поверхности матки (кроме передней и боковых поверхностей шейки матки. Вокруг шейки матки расположена толстая прослойка жировой клетчатки, называемой параметрием.

    Шейка матки. Ее призматический эпителий отличается высокой секретирующей способностью, выделяя более вязкий секрет. В собственной пластинке имеются слизистые железы. Секрет выходит в просвет шейки, формируется пленка – плотная вязкая. Эта пленка является препятствием для проникновения инфекции. Шейка матки имеет мощно развитый циркулярный слой миометрия. Эпителий канала шейки представлен однослойным призматическим эпителием; эпителий влагалищной части – многослойный неороговевающий. Граница перехода между этими эпителиями резкая.

    Созревание яйцеклеток и желтое тело в цифрах

      1. У женщины с регулярным менструальным циклом в течение жизни образуется около 400 зрелых ооцитов (по некоторым данным — 300–500).
      2. Синхронизированный процесс созревания половых клеток в режиме месячного цикла зависит в первую очередь от развития самого фолликула и выработки им эстрадиола (женский половой гормон).
    1. У женщин рост и развитие фолликула продолжаются дольше (от 90 до 180 дней и больше), а предовуляторныый период больше по сравнению с другими представителями животного мира.
    2. Более 99% всех фолликулов, полученных девочкой при рождении, гибнут в процессе атрезии — обратного развития, или запустевания.
    3. УЗИ не позволяет определить, является фолликул растущим или атрезирующим — на УЗИ яичников все они выглядят одинаково.
    4. Основной гормон, который вырабатывается в процессе созревания фолликула, — это прогестерон. Под влиянием гонадотропинов он может превращаться в мужские и женские половые гормоны.
    5. Уровень прогестерона в фолликуле в сотни раз выше, чем уровень гормона в крови беременной женщины во втором и третьем триместре.
    6. Уровень прогестерона в фолликулярной жидкости в 6 100 раз больше уровня эстрадиола и в 16 900 раз больше уровня тестостерона. Причем данные пропорции уровня гормонов не зависят от зрелости фолликула до овуляции, потому что маленькие фолликулы вырабатывают столько же прогестерона, сколько и большие.
    7. Овуляция — разрыв созревшего фолликула — чаще всего происходит через 17 часов после скачка лютеотропного гормона и занимает около 7 минут.
    8. У женщины может быть даже 2–3 овуляции в цикле, но это случается очень редко.
    9. Обычно овуляция наблюдается в одном яичнике, но может произойти в двух яичниках одновременно или с разницей в несколько дней (не больше 7 суток).
    10. В одном яичнике может наблюдаться овуляция не только одного, но и нескольких фолликулов одновременно или в течение 7 дней.
    11. Предсказать, что рост фолликула и овуляция закончатся выходом созревшей и генетически полноценной яйцеклетки, невозможно, как нельзя определить качество яйцеклеток в фолликулах, а также на момент их овуляции.
    12. Нормальная здоровая яйцеклетка, независимо от возраста женщины, живет 12–24 часа, при этом считается, что фертильными свойствами (способностью к оплодотворению) она обладает не больше 12 часов. В лабораторных условиях яйцеклетка может «жить» до 36 часов.
    13. Таких понятий, как ранняя или поздняя овуляция, не существует. В коротких циклах она происходит раньше 14-го дня, а в длинных — позже 14-го дня. Качество яйцеклеток при этом не меняется.
    14. Созревание яйцеклетки может прерваться в процессе перерождения доминантного фолликула в желтое тело без овуляции. Такое явление называется преждевременной лютеинизацией фолликула.
    15. Прогестероновое действие определяется количеством прогестерона, в том числе его синтетических аналогов (прогестинов), которое способно подавлять овуляцию. Контрацептивный эффект всех существующих гормональных контрацептивов основан именно на этом действии.
    16. Желтое тело — образование так называемой временной железы внутренней секреции — необходимо рассматривать как закономерный этап развития фолликула. Но до того, как возникнет желтое тело, получившее свое название по цвету содержимого, лопнувший фолликул в течение 1–2 минут после овуляции заполняется кровью и формируется геморрагическое тело.
    17. Через 12–14 минут после разрыва размер фолликула начинает увеличиваться и достигает приблизительно 20% максимального размера фолликула до овуляции.
    18. Желтое (лютеиновое) тело вырабатывает наибольшее количество прогестерона у небеременной женщины, поэтому этот вид прогестерона нередко называют лютеиновым прогестероном.
    19. Максимальная выработка прогестерона желтым телом наблюдается на 6–7 день после овуляции — так организм готовится к вынашиванию потомства, подготавливая эндометрий матки к имплантации плодного яйца. Если беременность не наступила, желтое тело после 21 дня цикла начинает регрессировать, выработка прогестерона понижается, начинается менструация, а на месте лопнувшего фолликула возникает рубец — белое тело.
    20. Первые 5–6 недель беременности желтое тело остается эксклюзивным производителем эстрогенов для развивающегося эмбриона. Но после 6–7 недель оно уже не играет никакой роли для прогресса беременности — его функцию берет на себя плацента.

    Эта статья доступна также на украинском языке по этой ссылке.

     

    Поделиться ссылкой:

    Почитать еще

    Желтое тело: развитие, анатомия и функции

    Обзор

    Яичниковый цикл и формирование желтого тела.

    Какое у вас желтое тело?

    Желтое тело — это совершенно нормальная киста, которая образуется на яичнике каждый месяц у женщин детородного возраста. Эта киста на самом деле представляет собой группу клеток внутри ваших яичников, которая формируется во время каждого менструального цикла. Он появляется сразу после того, как яйцеклетка покидает яичник (овуляция). Хотя оно находится внутри ваших яичников, задача желтого тела состоит в том, чтобы сделать вашу матку здоровым местом для роста плода.Он выделяет гормон прогестерон, который подготавливает матку к беременности. Когда потребность в прогестероне отпадает, желтое тело уходит.

    Функция

    Что делает ваше желтое тело?

    Желтое тело формируется после того, как яичники выпускают яйцеклетку, и длится достаточно долго, чтобы помочь матке поддерживать развивающийся плод. Чтобы понять, что делает ваше желтое тело, необходимо понять фазы вашего менструального цикла. Желтое тело становится особенно важным в третьей фазе (лютеиновая фаза).

    Фолликулярная фаза

    Маленькие мешочки внутри яичников, называемые фолликулами, могут создавать яйца (яйцеклетки или ооциты). В течение первых 14 дней менструального цикла формируется доминирующий фолликул, который больше других фолликулов. Внутри него развивается яйцо. Все остальные фолликулы сжимаются и со временем исчезают.

    Фаза овуляции

    Лютеинизирующие гормоны заставляют доминирующий фолликул выделять эту яйцеклетку. Чтобы яйцеклетка покинула фолликул, требуется от 1 до 2 дней.

    Лютеиновая фаза

    Лютеиновая фаза длится около 14 дней. После того, как яйцеклетка покинула фолликул, желтое тело начинает формироваться из материалов, из которых состоит этот фолликул. Желтое тело вырабатывает гормоны эстроген и прогестерон. Однако выработка прогестерона — самая важная задача желтого тела. Прогестерон превращает матку в здоровую среду для развития и роста плода. Прогестерон:

    • Увеличивает матку.
    • Утолщает слизистую оболочку матки (эндометрия), чтобы оплодотворенная яйцеклетка могла закрепиться в ней (имплантация).
    • Обеспечивает снабжение матки достаточным количеством кислорода и крови, чтобы яйцеклетка могла развиться в здоровый плод.

    После формирования желтое тело выполняет одно из двух:

    • Если яйцеклетка оплодотворяется, желтое тело будет выделять прогестерон в течение примерно 12 недель. Примерно на 12 неделе первого триместра беременности орган, в котором находится развивающийся плод (плацента), начнет вырабатывать достаточно прогестерона для плода, так что желтому телу больше не нужно.Желтое тело станет меньше и начнет разрушаться.
    • Если яйцеклетка не оплодотворяется, желтое тело начнет разрушаться примерно через 10 дней после того, как яйцеклетка покинет доминирующий фолликул. Без прогестерона слизистая оболочка матки не претерпит изменений, поддерживающих беременность. Вместо этого вы избавитесь от подкладки во время менструации.

    Анатомия

    Как выглядит желтое тело?

    Желтое тело находится внутри яичников, там, где раньше находился доминантный фолликул.Большинство людей представляют себе фолликул туннельной формы, как волосяной фолликул, но фолликулы внутри яичников разные. Представьте себе каждый фолликул как крошечный мешочек, в котором может находиться развивающаяся яйцеклетка. Когда яйцеклетка выходит из доминирующего фолликула во время овуляции, этот мешок разрывается. На месте фолликула образуется шафраново-желтая масса клеток, которая закрывает разрыв и принимает форму новой структуры. Эта новая структура, ваше желтое тело, по мере роста может варьироваться от чуть менее 2 сантиметров до 5 сантиметров.

    Из чего состоит желтое тело?

    В желтом теле есть два основных типа клеток: клетки фолликулярной теки и клетки фолликулярной гранулезы. Оба типа клеток можно найти в фолликулах яичников. Гормон, называемый хорионическим гонадотропом человека (ХГЧ), побуждает эти клетки вырабатывать прогестерон.

    Состояния и расстройства

    Какие общие состояния и нарушения влияют на желтое тело?

    Иногда желтое тело продолжает расти, а не разрушается, когда должно.Когда это происходит, желтое тело наполняется жидкостью, образуя кисту желтого тела. Дефект желтого тела, также называемый дефектом лютеиновой фазы, возникает, когда желтое тело не производит достаточно прогестерона для утолщения слизистой оболочки матки. Или ваше тело может вырабатывать прогестерон, но прогестерон просто не заставляет слизистую оболочку матки утолщаться, как должно.

    Кисты желтого тела:

    • Обычно безболезненны и безвредны.
    • Чаще всего обнаруживаются вашим врачом во время обычного осмотра на беременность.
    • Может повлиять на людей, у которых менструация, независимо от того, беременны они или нет.
    • Обычно уходит самостоятельно во втором триместре, если вы беременны.
    • Обычно прекращается в течение нескольких недель до трех полных менструальных циклов, если вы не беременны.

    Дефект желтого тела может затруднить беременность или родить ребенка. Это связано с определенными условиями, характеристиками и поведением, но нет ни одной четкой причины, которая его вызывает.К ним относятся:

    Каковы общие признаки или симптомы состояний, связанных с желтым телом?

    Если желтое тело вызывает симптомы, наиболее вероятной причиной является киста. Кисты желтого тела обычно безвредны и безболезненны. Обычно они уходят сами по себе. Но иногда они могут быть неудобными. Симптомы включают:

    • Боль в тазу.
    • Полнота в животе.
    • Боль, когда вы какаете или писаете.
    • Боль в одной стороне тела.
    • Боль в пояснице и нижней части тела.
    • Боль во время полового акта (диспареуния).
    • Кровянистые выделения, когда у вас нет менструации.
    • Нежность в груди или на одной стороне тела.

    Проблемы с беременностью или сохранением беременности могут быть признаком того, что желтое тело не вырабатывает прогестерон, необходимый вашей матке для того, чтобы яйцеклетка могла имплантироваться в слизистую оболочку.

    Какие общие тесты используются для проверки состояния желтого тела?

    Часто медицинские работники обнаруживают кисты желтого тела во время гинекологических осмотров или при рутинной визуализации во время беременности.Если ваш врач считает, что проблемы с желтым телом влияют на вашу фертильность, он может заказать:

    • Трансвагинальное ультразвуковое исследование для измерения толщины слизистой оболочки матки.
    • Тесты для измерения уровня гормонов, особенно фолликулостимулирующих гормонов (ФСГ), лютеинизирующих гормонов (ЛГ) и прогестерона.

    Какие общие методы лечения состояний, связанных с желтым телом?

    Врач может удалить кисту желтого тела, если она болезненна или разрастается настолько, что может представлять опасность.Однако обычно кисты проходят сами по себе. Если ваше желтое тело не вырабатывает достаточно прогестерона, ваш врач может порекомендовать вам принять хорионический гонадотропный гормон (ХГЧ) или цитрат кломфена. Оба гормона запускают в организме процессы, которые побуждают желтое тело вырабатывать прогестерон. Или ваш врач может порекомендовать вам принимать добавки с прогестероном. Поговорите со своим провайдером о лучших доступных вам вариантах.

    Забота

    Какие простые советы помогут сохранить здоровье желтого тела?

    Не беспокойтесь о здоровье желтого тела.В конце концов, вы будете получать новую с каждым менструальным циклом. Вместо этого сосредоточьтесь на том, чтобы поддерживать баланс гормонов. Хорошая новость заключается в том, что многие виды поведения, которые способствуют здоровому образу жизни, также помогают поддерживать ваши гормоны в хорошей форме.

    • Высыпайтесь как следует.
    • Регулярно делайте физические упражнения, стараясь не перенапрягаться.
    • Ешьте здоровую, сбалансированную пищу каждый день, включая много белка и хороших жиров.
    • Узнайте, как управлять стрессом, чтобы он не нарушал баланс гормонов.

    Записка из клиники Кливленда

    Желтое тело играет важную роль в беременности. Прогестерон, который он производит в первом триместре беременности, позволяет яйцеклетке развиться в здоровый плод. Это лишь одна из причин, почему так важно поддерживать здоровый уровень гормонов, чтобы желтое тело могло выполнять эту важную работу, если придет время.

    границ | Глобальный транскриптомный анализ желтого тела собак (CL) во время первой половины диэструса и изменений, вызванных in vivo ингибированием простагландин-синтазы 2 (PTGS2 / COX2)

    Введение

    Желтое тело (CL) играет центральную роль во время беременности за счет выработки прогестерона (P4).У собак он играет еще более важную роль, потому что регулирует всю диэстральную фазу. Действительно, отсутствие стероидогенной активности плаценты у этого вида делает CL единственным источником поддерживающих беременность P4 (1, 2). После исключительно сильной преовуляторной лютеинизации (3) ХЛ продолжает развиваться после овуляции. Как и у других видов, это подтверждается образованием плотной сосудистой сети (4, 5). Уровни P4 в сыворотке крови у разных животных сильно различаются и достигают пика между 15 и 30 днями после овуляции.Вскоре после этого лютеиновая функция начинает снижаться, что сопровождается снижением уровня P4 и появлением признаков клеточной дегенерации (6-8). Функция CL активно прекращается у беременных сук незадолго до родов (примерно на 60 день после овуляции) во время предродового лютеолиза. Это связано с повышенным уровнем циркулирующего простагландина (PG) F2α, по-видимому, продуцируемого плацентой плода (1, 9–12). Интересно, что такой активный механизм не наблюдается при отсутствии беременности (12, 13).У небеременных собак лютеолизин в матке отсутствует, а гистерэктомия не влияет на функцию CL (12, 13). Следовательно, небеременные суки представляют собой физиологическую псевдобеременность с уровнем циркулирующего P4, аналогичным уровням у беременных животных (14, 15). Таким образом, оказывается, что в отсутствие активного лютеолитического принципа продолжительность жизни ХЛ небеременных собак регулируется некоторыми внутренними регуляторными механизмами. На регуляторном уровне КЛ собак также имеет некоторые видоспецифические особенности по сравнению с другими домашними животными.И ЛГ, и пролактин (ПРЛ) играют лютеотропную роль в ХЛ собак (16-18). Однако ПРЛ, по-видимому, является преобладающим фактором и, по-видимому, необходим для поддержания ХЛ, начиная примерно с 25-го дня после овуляции (19, 20). Примечательно, что удаление гипофиза меньше влияло на функцию ХЛ в первые 2–4 недели после овуляции (17). Следовательно, ХЛ собак проявляет временную независимость от гонадотропинов на своих ранних стадиях, прогрессируя до гонадотропин-зависимой стадии в середине диэструса, при этом ПРЛ действует как преобладающий лютеотропный фактор (17, 18, 20).

    Первоначальное наблюдение повышенной экспрессии COX2 / PTGS2 и PGE2-синтазы (PTGES) на ранних стадиях ХЛ показало, что PGs являются возможными важными регуляторами этого органа у собак (21, 22). Дальнейшие исследования показали прямое действие PGE2 на ранние лютеиновые клетки собак, в которых он может увеличивать экспрессию стероидогенного острой регуляции (STAR) и продукцию P4 (23). Следуя этим подсказкам, было исследовано влияние PG на функцию CL in vivo (3, 24). Для этого используется фирококсиб (Previcox, Merial Ltd.), специфический ингибитор ЦОГ2, применялся для лечения сук со дня овуляции до 30 дней спустя с целью вызвать функциональную отмену ПГ (3, 24). Фактически, экспрессия PTGES и уровни PGE2 и PGF2α внутри CL значительно снизились при таком лечении (3). Это также влияло на стероидогенную способность CL (снижение экспрессии 3βHSD и STAR) и подавляло уровни циркулирующего P4 (3, 24). Кроме того, уменьшение размера ядра лютеиновых клеток, вызванное этим лечением, было связано со снижением их транскрипционной способности (24).Эти наблюдения показали причинную связь между COX2 и PTGES-зависимым синтезом PGE2 в CL и установили, что PGs являются важными модуляторами функции CL (3, 24).

    Однако оказывается, что PG могут иметь более широкие эффекты на регуляцию функции CL в дополнение к стероидогенезу. Ингибирование COX2 снижает экспрессию рецептора PRL (PRLR), в то время как, параллельно, PGE2 может увеличивать экспрессию PRLR в изолированных лютеиновых клетках собак (3). Это предполагает косвенную роль PGE2, через усиление экспрессии PRLR, в поддержке лютеотропной функции PRL.Основываясь на этом, а также на том факте, что PGE2 может также увеличивать экспрессию рецептора эндотелина B (ETB; важное сосудорасширяющее средство) (25), было дополнительно исследовано влияние отмены PG на лютеиновые сосудистые и иммунные факторы (26). Лечение отрицательно сказалось на стабилизации кровеносных сосудов, в то время как экспрессия различных провоспалительных факторов увеличилась (26). При этом предполагалось наличие сильных компенсаторных эффектов.

    Учитывая особенности лютеиновой фазы собак, настоящее исследование было направлено на изучение дополнительных потенциальных эффектов отмены PG на физиологию ХЛ.Для этого мы использовали образцы из ранее описанного исследования in vivo (3, 24, 26) и выполнили глубокое секвенирование РНК (RNA-Seq) с применением технологии Next Generation Sequencing (NGS). С помощью этого подхода мы ожидали обеспечить более глубокое понимание важности PG на разных стадиях развития CL: его ранняя независимость от гонадотропинов, затем его переход к зависимости от гормонов гипофиза и, наконец, зависимость зрелой CL главным образом от ПРЛ. Зависящие от времени изменения транскриптома CL, связанные с его развитием, также были исследованы в контрольных образцах.

    Материалы и методы

    Образцы тканей

    Это последующее исследование с использованием тканевого материала, собранного в предшествующих исследованиях in vivo (3, 24, 26). Эксперименты на животных были одобрены ответственным комитетом по этике (разрешение 54/2008) Варминско-Мазурского университета в Ольштыне, Польша. Вкратце, у сук смешанных пород разного возраста (2–7 лет) наблюдали с помощью вагинального цитологического исследования и измерения P4 на предмет начала спонтанной течки. День, когда уровень циркулирующего P4 превышал 5 нг / мл, считался днем ​​овуляции (день 0).Затем животных случайным образом распределили на четыре контрольные и четыре обработанные группы, получавшие перорально и ежедневно либо плацебо, либо 10 мг / кг фирококсиба (Previcox, Merial Ltd), соответственно. Лечение продолжалось в течение 5, 10, 20 или 30 дней после овуляции. Яичники собирали путем овариогистерэктомии в последний день лечения. желтые тела были вырезаны из окружающей ткани яичников и сохранены в RNAlater при –80 ° C до дальнейшего использования, как описано ранее (23).

    Выделение и очистка РНК

    Реагент

    TRIzol (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) использовали для выделения общей РНК в соответствии с инструкциями производителя.Первичную оценку чистоты и концентрации РНК проводили с помощью спектрофотометра NanoDrop 2000C (ThermoFisher Scientific AG, Райнах, Швейцария). Дальнейшую очистку РНК проводили с помощью набора RNeasy Mini Kit (Qiagen GmbH, Хильден, Германия), используя предоставленный протокол очистки РНК. Целостность РНК оценивали с помощью системы Agilent 2200 TapeStation System. Числа целостности РНК (RIN) варьировались от 8,0 до 9,8.

    РНК-секвенирование и оценка данных

    Секвенирование следующего поколения (NGS, RNA-Seq)

    Секвенирование РНК с помощью NGS выполняли для получения количественной оценки экспрессии гена.В общей сложности 32 образца, доступные для этого последующего исследования, были распределены в следующие группы: n = 5 для контроля 5-го дня, n = 4 для обработанного 5-го дня, n = 4 для каждого дня 10-го контроля и на 10-й день лечения, n = 3 для каждого дня 20-го контроля и 20-го дня лечения, n = 4 для 30-го дня контроля и n = 5 для 30-го дня лечения. RNA-Seq был выполнен на n = 4 животных / группа (контрольная и обработанная) с 5, 10 и 30 дней и n = 3 животных / группа с 20 дня после овуляции.Подготовка библиотеки, создание кластеров и секвенирование выполнялись, как описано ранее (27). Все образцы обрабатывались одновременно, чтобы избежать возможных эффектов пакетной обработки. Вкратце, флуорометр Qubit (1.0) (Life Technologies, Карлсбад, Калифорния, США) и Bioanalyzer 2100 (Agilent, Waldbronn, Германия) использовали для оценки количества и качества выделенной РНК. Для дальнейшей обработки образцы должны иметь соотношение 260/280 нм между 1,8 и 2,1 и соотношение 28S / 18S в пределах 1,5–2,0. На следующих этапах комплект TruSeq RNA Sample Prep Kit v2 (Illumina, Inc., Сан-Диего, Калифорния, США). Образцы тотальной РНК (100–1000 нг) обогащали путем отбора поли-А и подвергали обратной транскрипции для получения двухцепочечной кДНК. Кроме того, этапы фрагментации, восстановления концов и полиаденилирования были выполнены на образцах кДНК перед лигированием адаптеров TruSeq, содержащих индекс мультиплексирования. ПЦР использовали для селективного обогащения фрагментов, содержащих адаптеры TruSeq на обоих концах, а качество и количество полученных обогащенных библиотек оценивали с помощью Qubit (1.0) флуорометр и штангенциркуль GX LabChip GX (Caliper Life Sciences Inc., Хопкинтон, Массачусетс, США). Наконец, библиотеки были нормализованы до 10 нМ в Tris-Cl 10 мМ с Tween 20.

    Создание кластера выполнялось с 2 нМ объединенных нормализованных библиотек в системе cBOT с помощью набора TruSeq PE Cluster Kit v4-cBot-HS или TruSeq SR Cluster Kit v4-cBot-HS (Illumina, Inc). Секвенирование выполняли на Illumina HiSeq4000 с одинарным концом 125 п.н. с использованием TruSeq SBS Kit v4-HS (Illumina, Inc.). Необработанные данные (.файлы fastq) были использованы для последующего анализа. Кроме того, они также были депонированы в омнибусе экспрессии генов NCBI и доступны через регистрационный номер серии GEO GSE130369.

    Анализ данных

    Первоначальный анализ данных был выполнен с помощью фреймворка SUSHI (28, 29), разработанного Центром функциональной геномики Цюриха (FGCZ ETH / UZH, Zurich, Switzerland). Программное обеспечение для выравнивания сплайсированных транскриптов по эталону (STAR) использовали для выравнивания набора данных RNA-Seq (30) с эталонным геномом собаки, сборкой генома Ensembl CanFam3.1 (http://www.ensembl.org/Canis_familiaris/Info/Index). Значения экспрессии генов были получены с помощью функции featureCounts из пакета R Rsubread (31). Чтобы считать ген обнаруженным, требовалось минимум 10 считываний по крайней мере в одной группе реплик. После подсчета прочтений был проведен первоначальный контроль качества и исследовательский анализ с помощью фреймворка SUSHI.

    Для анализа дифференциальной экспрессии были определены различные контрасты (попарные сравнения), и дифференциальная экспрессия генов для каждого контраста была оценена с помощью подхода обобщенной линейной модели из пакета Bioconductor DESeq2 (32).Это было выполнено, как описано ранее (27), с использованием теста Вальда для оценки значимости дифференциальной экспрессии. Затем была получена коррекция множественного тестирования с помощью алгоритма Бенджамини-Хохберга, который вычисляет частоту ложного обнаружения (FDR, скорректированное значение P ). Наконец, были применены пороговые значения P -значение <0,01 и скорректированное значение P <0,1 (то есть FDR <10%). Полные списки дифференциально экспрессируемых генов (DEG), полученные для каждого контраста, использовали для последующих анализов и представлены в дополнительной таблице 1 (для эффектов, зависящих от времени) и в дополнительной таблице 2 (для эффектов, вызванных лечением).

    Функциональная характеристика DEG для каждого контраста была выполнена путем определения различных функциональных терминов с использованием доступных ресурсов биоинформатики. Идентификация избыточно представленных функциональных категорий (то есть генных онтологий) и оценки их обогащения были рассчитаны с использованием сетевого программного обеспечения Panther [http://pantherdb.org, (33)]. Этот анализ был дополнительно поддержан и дополнен сетевым программным обеспечением Enrichr [http://amp.pharm.mssm.edu/Enrichr/, (34)].Идентификация и визуализация обогащенных функциональных биологических сетей была получена с помощью приложения ClueGO v2.5.1 (35) для программной платформы Cytoscape v3.6 (36). Программное обеспечение Ingenuity Pathway Analysis (IPA, Qiagen, Редвуд-Сити, Калифорния, США) использовалось для прогнозирования наиболее сильно затронутых канонических путей и выявления, возможно, задействованных вышестоящих регуляторов. Списки до 10 репрезентативных генов, связанных с определенными функциональными терминами (онтологиями генов, функциональными сетями, каноническими путями и вышестоящими регуляторами) из каждого контраста, представлены в дополнительной таблице 3.Кроме того, была построена диаграмма Венна для выявления ДЭГ, одновременно пораженных лечением, в различных контрастах. Для этого анализа пороговые значения были определены для значения P <0,01 и кратного изменения для повышающего (log2Ratio ≥ 1) и понижающего регулирования (log2Ratio <-1). Полные списки DEG, используемых в качестве входных данных для диаграммы Венна, и генов, присутствующих на каждом пересечении, представлены в дополнительной таблице 4.

    Экспрессия выбранных генов-мишеней с помощью полуколичественного метода TaqMan qPCR в реальном времени

    Дальнейшая проверка полученных данных RNA-Seq и анализ конкретных функциональных путей, предложенных нашим анализом, были выполнены путем оценки экспрессии мРНК 20 выбранных генов-кандидатов-мишеней с помощью полуколичественной кПЦР в реальном времени (TaqMan).Все доступные образцы были использованы для экспериментов кПЦР ( n = 32). Полный список использованных праймеров, зондов TaqMan и предварительно разработанных (т.е. имеющихся в продаже) систем TaqMan представлен в таблице 1. Самостоятельно разработанные праймеры и зонды, меченные 6-карбоксифлуоресцеином (6-FAM) и 6-карбокситетраметилродамином (TAMRA). были спроектированы и заказаны в Microsynth AG (Балгач, Швейцария). Конструкция праймеров и зондов IDO1 была основана на опубликованных CDS-последовательностях собак, в то время как для SULT1E1 требовалось молекулярное клонирование собачьей последовательности, и это выполнялось путем субклонирования с использованием вектора pGEM-T, как описано ранее (22, 37, 38) (последовательность представлена ​​в GenBank под регистрационным номером MK728829).Коммерчески доступные системы были получены от Applied Biosystems. Эффективность реакций ПЦР оценивалась примерно как 100% (39).

    Таблица 1 . Список символов генов, соответствующие названия генов и системы TaqMan, используемые для КПЦР в реальном времени.

    Устранение контаминации геномной ДНК, обратная транскрипция (ОТ) и полуколичественная кПЦР TaqMan в реальном времени (ОТ-кПЦР) были выполнены в соответствии с протоколами производителей и нашими ранее опубликованными протоколами (22, 39).Вкратце, образцы тотальной РНК обрабатывали набором ДНКазы, не содержащей РНКазы RQ1 (Promega, Dübendorf, Швейцария), для устранения возможного загрязнения геномной ДНК. Случайные гексамеры использовали в качестве праймеров в последующих реакциях RT с использованием реагентов, полученных от Applied Biosystems. Для RT-qPCR все образцы обрабатывали в двух экземплярах в 96-луночных оптических планшетах с использованием воды в автоклаве и РНК, не подвергнутой RT (минус-RT контроль), вместо кДНК в качестве отрицательного контроля. Реакции проводились в автоматическом флуорометре ABI PRISM 7500 Sequence Detection System (Applied Biosystems) и были установлены следующим образом: начальная денатурация в течение 10 минут при 95 ° C, затем 40 циклов по 15 с при 95 ° C и 1 мин при 60 ° C. каждый.Относительное количественное определение было выполнено с помощью сравнительного метода Ct (ΔΔCt). Данные RT-qPCR были нормализованы с тремя эталонными генами: PTK2, EIF4H и KDM4. На основании собранных здесь данных RNA-Seq было обнаружено, что эти гены стабильно экспрессируются во всех образцах, исследованных с помощью онлайн-инструмента RefFinder и программного обеспечения NormFinder (40, 41). Поскольку данные RT-qPCR были распределены неравномерно, было выполнено логарифмическое преобразование, и результаты представлены в виде среднего геометрического (Xg) ± геометрическое стандартное отклонение (SD).Оценку эффектов, вызванных лечением, проводили с помощью двустороннего теста Стьюдента t , сравнивая группу лечения с контрольной группой в каждый момент времени (день). Кроме того, связанные со временем изменения экспрессии генов-мишеней оценивали у контрольных животных с использованием теста Краскела-Уоллиса (непараметрический дисперсионный анализ) с последующим тестом Данна. Все статистические тесты были выполнены с помощью GraphPad 3 (GraphPad Software Inc., Сан-Диего, Калифорния, США) и значений P <0.05 считались статистически значимыми.

    Результаты

    Первоначальная оценка результатов секвенирования

    Первоначальный исследовательский анализ полученных данных секвенирования был выполнен с помощью приложения CountQC, входящего в структуру SUSHI. Эта функция позволяла оценивать однородность и корреляцию между образцами, а также кластеризацию высокодисперсных характеристик среди всех образцов, представленных для RNA-Seq. Анализ корреляционной матрицы образцов (дополнительное изображение 1A) показал наличие некоторой вариации среди всех секвенированных образцов.На основании анализа этой матрицы и графиков разброса экспрессии генов (не показаны), образцы 10/1 и 30/1 контроля и 10/2 и 30/1, обработанные Previcox, были сочтены выбросами и удалены из набора данных для дальнейшего анализа. . Это позволило получить более однородную корреляцию между образцами в каждой группе (дополнительное изображение 1B). Дальнейшее наблюдение корреляционной матрицы показало более высокую однородность среди образцов каждой контрольной группы по сравнению с соответствующими обработанными группами (дополнительное изображение 1B).Об этом также свидетельствует более однородная кластеризация образцов и генов, видимая на тепловой карте, при этом 2000 генов демонстрируют более высокую дисперсию между контрольными образцами (дополнительное изображение 1C) по сравнению с геном, содержащим все проанализированные образцы (дополнительное изображение 1D). Кластеризация, наблюдаемая на тепловой карте с 2000 генов, показывающих более высокую дисперсию среди всех проанализированных образцов (дополнительное изображение 1D), также предполагает, что, помимо воздействия на иммунную систему и негативной регуляции клеточных процессов на 20-й день, время, по-видимому, имело более высокое значение. глобальное влияние на экспрессию CL этих генов, чем ингибирование COX2.Это было дополнительно визуализировано с использованием графика анализа главных компонентов (PCA) тех же 2000 генов с более высокой дисперсией среди всех образцов (рис. 1). Таким образом, образцы, по-видимому, были разделены на основе временной точки анализа, причем образцы с 5-го и 10-го дней были проксимально распределены по кластеру, а образцы с 20-го и 30-го дней — на другой стороне графика. Рассеянное распределение образцов, обработанных до 20-го дня после овуляции, указывает на более сильные эффекты лечения в этой группе (рис. 1).

    Рисунок 1 . График анализа главных компонентов (PCA) всех образцов, показывающий 2000 генов, которые показали более высокую дисперсию. Распределение образцов, по-видимому, в основном основано на влиянии времени (выделено красной полосой, отделяющей образцы с 5-го и 10-го дней от образцов с 20-го и 30-го дней). Распределение и разброс образцов также предполагает более сильные эффекты лечения на 20-й день, чем в другие изученные временные точки.

    Эффекты, зависящие от времени

    Образцы, доступные для настоящего исследования, были репрезентативными для различных регуляторных стадий раннего развития ХЛ, т.е.е., рано развивающаяся гонадотропин-независимая ХЛ (5-й и 10-й дни) и зрелая ХЛ в переходный период и во время ее зависимости от гонадотропинов (20-е и 30-е дни соответственно). Близкое сходство между образцами с 5-го и 10-го дней с одной стороны и с 20-го и 30-го дней с другой стороны также было предложено из графика PCA (рис. 1). Таким образом, при оценке влияния времени на транскриптом CL образцы были сгруппированы соответственно с анализом дифференциальной экспрессии (попарное сравнение), выполняемым для контраста «20 + 30 дней контроль над 5 + 10 днями контроля».Этот анализ был проведен с использованием пакета DESeq2 для Bioconductor, и предполагалось, что гены дифференциально экспрессируются, если P <0,01 и FDR <0,1. Из общего набора из 19856 генов 13 332 гена считались экспрессированными (выше порога в 10 считываний на ген). На DEG приходилось 3484 признака, из которых 1681 были повышены, а 1803 понижены на 20 + 30 дни по сравнению с ранним развивающимся CL (дни 5 + 10; Таблица 2, Рисунок 2A). Подробный список всех DEG, на которые влияет время, представлен в дополнительной таблице 1.Дополнительное представление DEG на графиках вулканов, отфильтрованных по FDR <0,1 и log2Ratio> 0,5, представлено на дополнительном изображении 2A. После этого была проведена функциональная характеристика ДЭГ. Сначала парное сравнение было классифицировано в соответствии с терминами генной онтологии (GO), относящимися к доменному биологическому процессу (BP). Программное обеспечение Panther использовалось для расчета показателей обогащения для каждого термина, и результаты были дополнительно подтверждены с помощью Enrichr. Списки до десяти (n = 10) репрезентативных генов для различных функциональных терминов, а также вышестоящих регуляторов и сетей, определенных на следующих этапах, представлены в дополнительной таблице 3.

    Таблица 2 . Резюме анализа дифференциальной экспрессии (попарного сравнения) для всех выбранных контрастов, исследованных в настоящем исследовании.

    Рисунок 2 . Функциональная категоризация дифференциально экспрессируемых генов (ДЭГ), затронутых в выбранные моменты времени (контраст «дни 20 + 30 контроль по сравнению с 5 + 10 днями контроля»). (A) Тепловая карта 3484 ° для контраста «дни 20 + 30 по сравнению с контрольными днями 5 + 10». Градиент высокой или низкой экспрессии каждого гена относительно средней экспрессии обозначен красным и синим цветами.1803 гена были более высоко экспрессированы на ранних (5 и 10 дни) стадиях ХЛ, тогда как 1681 ген были более высоко экспрессированы на средних стадиях диэструса (20 и 30 дни) ( P ≤ 0,01, FDR ≤ 0,1). Перечислены репрезентативные излишне представленные функциональные термины в каждой группе активированных генов (статистические данные приведены в тексте и в дополнительной таблице 3). Полный список DEG представлен в дополнительной таблице 1. (B) Функциональные сети, обнаруженные для DEG с пониженной регуляцией по сравнению с контролем «дни 20 + 30» по сравнению с контролем 5 + 10 дней.Показаны чрезмерно представленные функциональные сроки дней «5 + 10 контроль». Избыточные или неинформативные термины были удалены, а полученные сети были перегруппированы вручную. Количество картированных генов указывается размером узла, в то время как значение функциональных терминов обозначается цветом узла (представленным в легенде в правом нижнем углу). Сети, более широко представленные на 5-й и 10-й день контроля (развитие гонадотропин-независимой CL), были связаны с иммунной функцией, внеклеточным матриксом (ECM), внутриклеточной передачей сигналов и апоптозом.

    Гены, более широко представленные на ранних стадиях CL (дни 5 + 10) по сравнению с днями 20 + 30, были сильно связаны с (рис. 2A, дополнительная таблица 3): межклеточной адгезией ( P = 2,40E-3), движением ( P = 1,28E-3), процесс иммунной системы ( P = 1,27E-3), метаболический процесс ( P = 9,67E-4) и клеточный процесс ( P = 2,73E-4) . С другой стороны, функциональные термины, чрезмерно представленные в зрелом CL (20 + 30 дни), включали (рис. 2A, дополнительная таблица 3): процесс биосинтеза жирных кислот ( P = 1.26E-3), метаболический процесс жирных кислот ( P = 2.96E-4), липидный метаболический процесс ( P = 1.12E-6), процесс метаболизма фосфолипидов ( P = 2.35E-3), локализация белка ( P = 1.64E-3), внутриклеточный транспорт белка ( P = 1.04E-3), транспорт ( P = 3.12E-5) и локализация ( P = 1.22E-4).

    Используя в качестве входных данных списки DEG с повышенной и пониженной регуляцией для этого контраста (дополнительная таблица 1), обогащенные функциональные сети были сгруппированы и визуализированы с помощью подключаемого модуля ClueGO для платформы Cytoscape (рисунок 2B, дополнительная таблица 3, дополнительное изображение 3A).Среди наиболее широко представленных функциональных сетей, наблюдаемых на 5-й и 10-й дни, были те, которые относятся к передаче сигналов и метаболизму клеток, внеклеточному матриксу, апоптозу и, в большем количестве, сетям, связанным с иммунной функцией (рис. 2B, дополнительная таблица 3). С другой стороны, сети, наблюдаемые в основном на 20 и 30 дни, были связаны с внутриклеточным транспортом и (липидным) метаболизмом (дополнительная таблица 3, дополнительное изображение 3A).

    Прогноз наиболее сильно затронутых сигнальных путей был получен из программного обеспечения IPA с использованием списка DEG в качестве входных данных ( P <0.01, FDR <0,1). Среди наиболее богатых канонических путей, которые, по прогнозам, активируются с течением времени, были те, которые связаны с (дополнительная таблица 3): синтез холестерина / стероидогенез (суперпуть биосинтеза холестерина, P = 4,90E-5; биосинтез холестерина I, P = 1.20E-4; биосинтез холестерина II, P = 1.20E-4; и биосинтез холестерина III, P = 1.20E-4). С другой стороны, среди значительных путей, которые, как было предсказано, ингибируются временем, были пути, связанные с (дополнительная таблица 3): клеточная пролиферация (передача сигналов EIF2, P = 7.94E-16; Передача сигналов mTOR, P = 3,98E-12), клеточный цикл (циклины и регуляция клеточного цикла, P = 3,63E-7), продукция ECM (ингибирование матриксных металлопротеаз, P = 1,86E-4) и иммунная функция (передача сигналов лейкоцитов при экстравазации, P = 3,55E-8; передача сигналов острофазового ответа, P = 5,89E-6; передача сигналов IL8, P = 3,63E-5; передача сигналов хемокинов, 4,68E-5; созревание дендритных клеток, P = 1,8E-4).

    Анализ DEG с IPA позволил дополнительно идентифицировать вышестоящие регуляторы, возможно, влияющие на экспрессию полученных DEG.Среди прогнозируемых вышестоящих регуляторов были идентифицированы следующие факторы: трансформирующий фактор роста β 1 (TGFβ1, P = 7,27E-33), фактор некроза опухоли (TNF, P = 5,88E-26), бета-эстрадиол ( P = 3,08E-22), тромбоцитарный фактор роста BB (PDGF BB, P = 1,08E-18), гамма-интерферон (INFγ, P = 3,47E-15), прогестерон (P4, P = 3,86E-15), фактор роста инсулина 1 (IGF1, P = 3,85E-13), альфа-ингибитор ядерного фактора каппа B (NFκBIα, P = 5.86E-13) и рецептор 2 простагландина (PG) E2 (PTGER2 / EP2, P = 9,5E-12) (дополнительная таблица 3).

    Эффекты, вызванные лечением

    Анализ дифференциальной экспрессии (попарное сравнение) и диаграмма Венна

    Эффекты лечения Превикоксом на транскриптом ткани CL оценивали с помощью анализа дифференциальной экспрессии, в котором обработанные образцы сравнивали с контрольными образцами в соответствующие моменты времени (дни 5, 10, 20 и 30). Таким образом, были определены следующие контрасты: «день 5 обработан по сравнению с контролем 5 дня», «день 10 обработан по сравнению с контролем 10 дня», «день 20 обработан по сравнению с контролем 20 дня» и «день 30 обработан по сравнению с контролем 30 дня».Как описано для эффектов, зависящих от времени, для получения списков DEG использовался пакет DESeq2 для Bioconductor. Пороговые значения P, <0,01 и FDR <0,1 применялись для рассмотрения гена как экспрессируемого по-разному. Несмотря на все контрасты, всего было идентифицировано 19856 генов; только гены с минимум 10 прочтениями считались экспрессированными и включались в дальнейшие анализы. Сводка анализа DEG представлена ​​в таблице 2, в то время как полные списки DEG в ответ на все обработки в каждый момент времени представлены в дополнительной таблице 2.

    Для контраста на 5 день после фильтрации ( P <0,01, FDR <0,1) 74 гена считались DEG, из которых 47 были активированы, а 27 подавлены после обработки. Что касается контраста «день 10, обработанный по сравнению с контролем на 10 день», экспрессия генов сильно варьировала индивидуально и приводила только к 2 DEG, отфильтрованным с помощью применяемых пороговых значений P / FDR. После того, как на 10-й день было обнаружено небольшое количество ДЭГ, функциональная характеристика этого контраста не могла быть проведена.Напротив, на 20-й день 1741 ген соответствовал критериям P, <0,01 и FDR <0,1, что делает этот контраст, связанный с лечением, с наибольшим количеством DEG. Из этих DEG, 1146 были более высоко экспрессированы в группе, получавшей 20-й день, в то время как 595 были более высоко экспрессированы в контрольной группе 20-го дня. Наконец, для контраста «30 дней, обработанных по сравнению с контролем на 30 дней», по-разному экспрессировались 552 гена ( P <0,01, FDR <0,1), включая 306 повышающих и 246 подавляющих признаков в ответ на отмену простагландина.Дальнейшее представление DEG (FDR <0,1; log2ratio> 0,5) для контрастов «день 5, обработанный по сравнению с контролем дня 5», «день 20, обработанный по сравнению с контролем, день 20» и «день 30, обработанный по сравнению с контролем дня 30» в форме вулкана. Графики показаны на дополнительном изображении 2B – D.

    В попытке идентифицировать гены, на которые будет одновременно воздействовать ингибирование COX2 в разные моменты времени продолжительности жизни CL, пересечения DEG на контрастах на 5, 20 и 30 дни были визуализированы с помощью диаграммы Венна (рис. 3А).Входящие DEG были отфильтрованы для P <0,01 и log2Ratio <-1 (пониженная регуляция) и log2Ratio> 1 (повышенная регуляция), а полный список генов из каждого пересечения представлен в дополнительной таблице 4. Тридцать два гена были затронуты одновременно. лечением на 5-й и 20-й дни, в то время как 78 были распределены между 20-м и 30-м днями. Несмотря на разницу во времени, было обнаружено, что 4 гена одновременно были затронуты на 5-й и 30-й дни. Однако ни один ген не пострадал одновременно от отмены простагландина в разные моменты времени.

    Рисунок 3 . Диаграмма Венна, показывающая распределение и перекрытие дифференциально экспрессируемых генов (DEG), индуцированных лечением в разные моменты времени (A) . Списки DEG из контрастов «день 5, обработанный по сравнению с контролем дня 5», «день 20, обработанный по сравнению с контролем, день 20» и «день 30, обработанный по сравнению с контролем дня 30» использовались в качестве входных данных. Пороговые значения были определены для значения P <0,01 и кратного изменения для повышающих (log2Ratio ≥ 1) и подавляемых (log2Ratio ≤ -1) генов.Ни один ген не был одновременно затронут лечением во всех группах. Полный список генов от каждого контраста и пересечения представлен в дополнительной таблице 4. Тепловая карта и избыточно представленные функциональные термины, присутствующие в дифференциально экспрессируемых генах (DEG), индуцированных лечением в различные изученные временные точки (B – D) . Градиент высокой или низкой экспрессии каждого гена относительно средней экспрессии обозначен красным и синим цветами. Перечислены основные значимые избыточно представленные функциональные термины (генные онтологии) в каждой группе усиленных генов (статистические детали представлены в тексте и в дополнительной таблице 3).Полный список DEG представлен в дополнительной таблице 2. (B) Показана тепловая карта 74 DEG для контраста «день 5, обработанный по сравнению с контролем дня 5» и репрезентативные, значительно перепредставленные функциональные термины в «день 5, обработанный». (C) Тепловая карта 1741 градуса контраста «20-й день лечения по сравнению с контролем 20-го дня» и репрезентативные значительно перепредставленные функциональные термины в «20-й день лечения». (D) Тепловая карта 552 ° контраста «30-й день, обработанный по сравнению с 30-м контролем» и репрезентативные функциональные термины в «30-й день управления».

    Функциональные аннотации, сети и пути

    Дальнейшая характеристика ДЭГ для каждого контраста была проведена путем определения различных обогащенных функциональных терминов. Последовательность анализа была аналогична той, которая применялась при анализе дифференциальной экспрессии связанных со временем эффектов: функциональные термины (GO) были идентифицированы с помощью Panther и Enrichr, функциональные сети были визуализированы с помощью Cytoscape, и было выполнено прогнозирование затронутых канонических путей и задействованных вышестоящих регуляторов. пользователя IPA.На входе DEG были отфильтрованы по P <0,01 и FDR <0,1; списки репрезентативных генов приведены в дополнительной таблице 3.

    Контраст «Обработка 5-го дня по сравнению с контролем»

    Основными функциональными терминами, связанными с генами, более высоко экспрессируемыми в обработанных образцах, начиная с 5 дня, были (Рисунок 3B, дополнительная таблица 3): положительная регуляция внутриклеточного транспорта ( P = 3,48E-8), регуляция подвижности клеток ( P = 1,31E-6), регуляция миграции клеток ( P = 7.40E-6), регуляция движения клеточного компонента ( P = 2,59E-6) и регуляция движения ( P = 2,84E-6). Из-за малого количества входных DEG не удалось идентифицировать значимые генные онтологии среди DEG, подавленных обработкой на этой ранней гонадотропин-независимой лютеиновой фазе. Это также объясняет Cytoscape-анализ функциональных сетей из генов с повышенной и пониженной регуляцией.

    Обогащенные пути, которые, по прогнозам, активируются IPA, в основном связаны с (дополнительная таблица 3): цитоскелет / движение клеток / деление клеток (передача сигналов RhoA, P = 1.10E-6; передача сигналов актинового цитоскелета, P = 4.07E-5; передача сигналов GTPases семейства Rho, P = 6.31E-5; регуляция актиновой подвижности с помощью Rho, P = 1.07E-4). Кроме того, сигнальные пути рецептора смерти ( P = 5,50E-6) и передача сигналов лейкоцитов при экстравазации ( P = 2,75E-4) также должны быть активированы лечением, в то время как передача сигналов RhoGDI ( P = 5,13). E-7) путь должен был быть дезактивирован. Среди предсказанных вышестоящих регуляторов актин альфа сердечная мышца 1 (ACTC1, P = 7.59E-6), PDGF BB ( P = 3,13E-5), актин альфа 2 (ACTA2, P = 2,1E-4), TNF ( P = 2,78E-4) и TGFβ1 ( P = 9.94E-E4) (дополнительная таблица 3).

    Контраст «Обработка 20-го дня по сравнению с контролем 20-го дня»

    Для этого контраста были обнаружены следующие основные термины, более широко представленные в обработанном зрелом CL во время его перехода к зависимости от гонадотропина на 20-й день (рис. 3C, дополнительная таблица 3): пролиферация клеток ( P = 4.78E-4), регуляция клеточного цикла ( P = 7.06E-5), межклеточная адгезия ( P = 9.85E-4), локомоция ( P = 5.58E-5), реакция на внешние стимул ( P = 1.20E-3), дифференцировка клеток ( P = 1.84E-4), регуляция процесса метаболизма фосфатов ( P = 2.03E-4), процесс развития ( P = 1.93E -5), организация клеточного компонента или биогенез ( P = 6.12E-4) и метаболический процесс ( P = 1.46E-3).Высокая функциональная изменчивость была обнаружена для ДЭГ в контрольных образцах на 20-й день, давая только низкие оценки обогащения без сильно обогащенных функциональных терминов и без каких-либо сильно обогащенных функциональных сетей. Это отличалось от образцов CL, полученных от собак, получавших Previcox в течение 20 дней, в которых были обнаружены сильно избыточные сети, относящиеся к дифференцировке клеток, гибели клеток, экспрессии генов, трансляции и передаче сигналов, регуляции гормонов и иммунной функции (Рисунок 4, Дополнительная таблица 3).

    Рисунок 4 . Функциональные сети, обнаруженные в позитивно регулируемых дифференциально экспрессируемых генах (ДЭГ) по сравнению с контрольным «20-м днем, обработанным, по сравнению с контролем на 20-й день». Показаны чрезмерно представленные функциональные термины «20-й день лечения». Избыточные или неинформативные термины были удалены, а полученные сети были перегруппированы вручную. Количество картированных генов указывается размером узла, в то время как значение функциональных терминов обозначается цветом узла (представленным в легенде в правом нижнем углу).Сети, более широко представленные в образцах CL от животных, получавших лечение до 20 дня после овуляции, были связаны с экспрессией и трансляцией генов, передачей сигналов, регуляцией гормонов, дифференцировкой и гибелью клеток и иммунной функцией.

    В ответ на лечение Превикоксом значимые канонические пути, которые, как предполагалось, будут активированы (дополнительная таблица 3), были связаны с помощью анализа IPA с клеточной пролиферацией / ростом (передача сигналов EIF2, P = 5.01E-21; передача сигналов mTOR, P. = 1.86E-9) и иммунной функции (передача сигналов толл-подобных рецепторов, P = 1,66E-4; путь передачи сигналов адреномедулина, P = 1,20E-3; и передача сигналов острой фазы ответа, P = 4,37E-3). ; Передача сигналов NFκB, P = 4.47E-3; передача сигналов IL6, P = 4.47E-3). Кроме того, было предсказано, что сигнальный путь релаксина ( P = 4.68E-4) будет активирован, в то время как сигнальный путь ангиопоэтина ( P = 4.47E-3) будет дезактивирован.Список основных вышестоящих регуляторов наблюдаемых эффектов включал (дополнительная таблица 3): β-эстрадиол ( P = 6,66E-23), PDGF BB ( P = 9,63E-20), TGFβ1 ( P = 2,26E-15), IL1β ( P = 1,1E-14), TNF ( P = 4,27E-14), PGE2 ( P = 3,68E-11), NFκBIA ( P = 1,45E -10), рецептор гибели поверхности клеток Fas (FAS, P = 1,89E-9) и P4 ( P = 2,14E-9).

    Контраст «Обработка 30-го дня по сравнению с контролем 30-го дня»

    Гены, более выраженные в контрольных образцах на 30-й день, были связаны со следующими функциональными терминами (рис. 3D, дополнительная таблица 3): процесс метаболизма стероидов ( P = 2.32E-4), липидный метаболический процесс ( P = 1.07E-4), клеточная адгезия ( P = 1.33E-3), локализация ( P = 1.82E-3) и клеточная коммуникация ( P = 8,96E-4). Для генов, активируемых в ответ на лечение на 30-й день, не было обнаружено значительно обогащенных ГО и сетей, что ограничивалось более высокой функциональной вариабельностью идентифицированных ДЭГ. Однако в контрольных образцах было обнаружено, что функциональные сети, связанные с синтезом оксида азота и ангиогенезом, сильно обогащены (дополнительная таблица 3, дополнительное изображение 3B).

    Интересно, что канонические пути, которые, по прогнозам, дезактивируются при лечении зрелой CL на 30-й день, были связаны с (дополнительная таблица 3): синтез холестерина / стероидогенез (суперпуть биосинтеза холестерина, P = 1,35E-7; биосинтез холестерина I, ). P = 6,31E-6; биосинтез холестерина II, P = 6,31E-6; биосинтез холестерина III, P = 6,31E-6), иммунная сигнализация (передача сигналов острой фазы ответа, P = 1.91E-4; Передача сигналов NFκB, P = 3,47E-4; Передача сигналов TGFβ, P = 5,13E-3; Передача сигналов IL8, P = 6,61E-3; передача сигналов лейкоцитов при экстравазации, P = 8,71E-3) и васкуляризация (передача сигналов VEGF, P = 3,31E-3; передача сигналов PDGF, P = 1,48E-3). Что касается клеточной пролиферации, было предсказано, что путь передачи сигналов EIF2 ( P = 3,16E-13) будет активирован, в то время как путь передачи сигналов mTOR ( P = 2,63E-7) будет дезактивирован.Среди основных вышестоящих регуляторов, предсказанных с помощью программного обеспечения IPA, были (дополнительная таблица 3): TNF ( P = 1,89E-10), гамма-рецептор, активируемый пролифератором пероксисом (PPARγ, P = 9,22E-5), TGFβ1 ( P = 9,58E-5), фактор роста фибробластов 2 (FGF2, P = 1,44E-4) и NFκBIA ( P = 2,25E-4).

    Экспрессия потенциальных генов-мишеней

    Экспрессию генов-кандидатов исследовали с помощью полуколичественной (TaqMan) кПЦР в 32 образцах из различных доступных групп.Все результаты для эффектов, зависящих от времени, и эффектов лечения в совокупности представлены в дополнительной таблице 5. Извлеченные значимые результаты были подготовлены для основного документа и показаны в таблицах 3, 4. Функциональные группы, выбранные для валидации транскрипционного анализа, включали: эйкозаноидсинтазы ( TBXAS1, PTGDS ), иммунные факторы ( TGF β 1, TGF β R1, ICAM1, IDO1, NODAL, FAS, FASLG, NF κ B1, NF κ BIA ), PDGF B, FGF1, FGF2 ), сосудистые регуляторы ( THBS1 ), факторы, связанные с гипоксией ( EGLN1 / PHD2), ядерные рецепторы ( PPARG, NR4A1 ) и факторы, связанные со стероидами (9 HSD17E ).Экспрессия всех генов-кандидатов была обнаружена во всех тканях, и, как правило, была обнаружена хорошая корреляция между результатами RNA-Seq и RT-qPCR. Кроме того, не было обнаружено значительных изменений в экспрессии EGLN1 и PDGF B в ответ на лечение или по прошествии времени.

    Таблица 3 . Относительная экспрессия генов-кандидатов, затронутая временем, у контрольных животных.

    Таблица 4 . Относительная экспрессия генов-кандидатов, на которую влияет лечение, в каждый анализируемый момент времени.

    Эффекты, зависящие от времени

    Изменения экспрессии гена-кандидата, связанные со временем, оценивали в контрольных образцах. Все значимые эффекты, наблюдаемые с течением времени (включая статистический анализ), представлены в таблице 3. Связанные со временем эффекты наблюдались для: TBXAS1 ( P = 0,0006), PTGDS ( P = 0,0153), TGF β R1 (0,0017), ICAM1 ( P = 0,0003), FAS ( P = 0.0015), FASLG ( P <0,0001), NF κ BIA ( P = 0,0006), FGF1 (0,0031), FGF2 ( THBS1 = 0,0032) ( P <0,0001), PPAR γ ( P = 0,0183) и HSD17B7 ( P <0,0001) (таблица 3, дополнительная таблица 5). Несмотря на то, что P <0,05 было получено для NF κ B ( P = 0,0408) с помощью теста ANOVA, в тесте множественных сравнений не было получено значимого эффекта ( P > 0.05, таблица 3, дополнительная таблица 5).

    Экспрессия большинства генов-мишеней снижалась с течением времени. Экспрессия TBXAS1, ICAM1, FAS, FASLG и THBS1 была значительно выше на ранних стадиях развития ХЛ (дни 5 и / или 10) и снижалась по мере созревания ХЛ (дни 20 и / или 30). Экспрессия PTGDS, NF κ BIA и PPAR γ была значительно выше на 10 день, чем на 20 день. Экспрессия TGF β R1 и FGF2 была самой низкой на 30 день по сравнению с днями. 5 и 20 или только с 20-м днем ​​соответственно.В другом направлении, экспрессия FGF1 значительно увеличивалась с 5 дня по 30 день. Наконец, HSD17B7 имел самую низкую экспрессию на 5 день, увеличиваясь на более поздних стадиях развития CL.

    Эффекты, вызванные лечением

    Эффекты лечения Превикоксом оценивали во всех доступных образцах путем сравнения экспрессии генов-кандидатов в обработанной и контрольной группах в каждый момент времени (5, 10, 20 и 30 дни). Существенных изменений нет ( P > 0.05) в экспрессии FGF1 и HSD17B7 были получены в ответ на лечение в любом из изученных сравнений (дополнительная таблица 5), даже если прогнозировалось, что их экспрессия будет модулироваться NGS на 30 и 20 дни. никаких значительных изменений в экспрессии любого из генов-кандидатов на 10 день не наблюдалось (дополнительная таблица 5). При попарном сравнении на 5 день экспрессия TGF β 1 и THBS1 увеличивалась в ответ на лечение, тогда как FASLG, FGF2 и SULT1E1 подавлялись (подробности, включая статистический анализ, см. В Таблице 4A). ).На 20 день в контрольных образцах наблюдалась более высокая экспрессия TGF β R1 и FGF2 (Таблица 4B). В другом направлении несколько факторов были активированы лечением на 20-й день: TBXAS1, PTGDS, ICAM1, NODAL, FAS, FASLG, NF κ B1, NF κ BIA, THBS1, PPARG, NR4A1 и SULT1E1 (Таблица 4B). Наконец, на 30 день лечение снизило экспрессию IDO1 и увеличило экспрессию FGF2 (Таблица 4C).

    Обсуждение

    Общие соображения

    Среди многих видоспецифичных регуляторных особенностей наличие переходной независимости от гонадотропинов в развивающейся собачьей CL, безусловно, является одним из самых интригующих (17, 20). Он позиционирует собаку как ценную модель для исследования развития ХЛ без доминирующих эффектов гипофизарных гормонов, которые наблюдаются, например, у домашнего скота (42, 43). Как описано ранее, PG, в основном PGE2, считаются одними из наиболее важных регуляторов функции CL во время ее независимости от гонадотропинов (3, 23, 24).Также стало очевидно, что PGE2 может играть более широкую роль в ХЛ собак, регулируя чувствительность лютеина к другим гормонам (например, ПРЛ) и оказывая вазоактивное и иммуномодулирующее действие (3, 25, 26). Следовательно, широкий спектр прямых и косвенных эффектов PG в собачьей CL побудил нас провести настоящее исследование на основе NGS. Конечная цель состояла в том, чтобы лучше понять различные роли, которые PGs могут играть в транскриптоме CL, и, таким образом, выяснить другие возможные регуляторные механизмы, индуцируемые PGs в CL.Воспользовавшись доступом к контрольным образцам, охватывающим промежуток времени между 5 и 30 днями после овуляции, то есть во время развития и созревания CL, в этих образцах также оценивали транскрипционные изменения с учетом влияния времени. В соответствии с нашими предыдущими сообщениями (3, 24, 26), большие вариации в экспрессии генов наблюдались в CL собак, получавших Previcox. Это может быть, по крайней мере, частично объяснено небольшим количеством животных в группе и индивидуальными вариациями экспрессии генов.Однако, как можно видеть из анализа представленных здесь данных секвенирования, лечение препаратом Превикокс само по себе является дополнительной причиной этих колебаний. Фактически, образцы из контрольных групп показали более высокую корреляцию друг с другом, чем образцы из обработанных групп. Это также можно было наблюдать при анализе тепловой карты 2000 генов с более высокой дисперсией, показывающих более однородную кластеризацию, когда использовались только контрольные образцы. Как обсуждалось в другом месте, индивидуальные вариации и фармакокинетика могли сыграть важную роль в более низкой однородности, наблюдаемой в группах лечения (26).Оценка графиков PCA и тепловых карт также показала более однородную кластеризацию образцов, разделенных на раннюю и зрелую CL, чем при применении лечения. Таким образом, казалось, что это время оказало большое влияние на изменения транскрипции, наблюдаемые среди исследованных образцов.

    Эффекты, зависящие от времени

    Показывая гомогенное распределение экспрессии генов, с четким различием между ранней и зрелой CL, временные эффекты были исследованы в контрольных образцах и дополнительно служили для контроля качества.По сравнению с развивающейся CL (дни 5 и 10), более широко представлены гены в зрелой CL (дни 20 и 30), связанные с биосинтезом / метаболизмом липидов. Канонические пути, которые, по прогнозам, активируются на этой стадии, были связаны с биосинтезом холестерина. Холестерин — это субстрат, необходимый для синтеза стероидных гормонов. Увеличение его продукции, вероятно, необходимо для наблюдаемого повышенного стероидогенного выхода из CL в это время. Как также подтверждается анализом кПЦР, было обнаружено, что экспрессия HSD17B7 (известного как PRLR-ассоциированный белок) увеличивается с созреванием CL.Вместе с другими изоформами 17βHSD этот фермент отвечает за превращение эстрона в эстрадиол, более мощный эстроген (44, 45). Принимая во внимание высокую вариабельность циркулирующего 17β-эстрадиола (E2) во время диэструса у собак (1), вместе с сопутствующим повышением экспрессии ароматазы (CYP19) (46), вполне вероятно, что наблюдаемое увеличение экспрессии HSD17B7 могло иметь место. в местной обеспеченности эстрогенами CL собак. Отражая возрастающую стероидогенную способность CL после их начального постовуляторного снижения, уровни E2 увеличиваются во время диэструса у собак, примерно в соответствии с профилями секреции P4 (13, 47).Экспрессия рецепторов эстрогена, ESR1 / ERα и ESR2 / ERβ, была подтверждена в CL собак (46). Тем не менее, участие эстрогенов в регуляции функции ХЛ собак остается малоизученным, даже несмотря на то, что были предприняты некоторые попытки пролить свет на лежащие в основе механизмы (6, 46). Функциональные термины, более широко представленные на 5-й и 10-й дни после овуляции, в основном связаны с иммунной функцией и пролиферативными механизмами, такими как локомоция, межклеточная адгезия, организация внеклеточного матрикса и регуляция каскада ERK1 / 2.Соответственно, было предсказано, что пути, связанные с клеточным циклом, пролиферацией и иммунной функцией, будут инактивированы после созревания CL, то есть на 20/30 дни продолжительности жизни CL. Очевидно повышенная иммунная активность развивающейся ХЛ собак соответствует ранее сообщавшимся об увеличении инфильтрации макрофагами, моноцитами и лимфоцитами на этой стадии (48, 49). Более того, что касается иммунной регуляции, TNF был одним из наиболее предсказуемых вышестоящих регуляторов, участвующих в транскриптомных изменениях CL, наблюдаемых в ответ на время.Аналогичным образом, ранее сообщалось о повышенной экспрессии TNF α и его рецептора TNFR2 на 5 день по сравнению со зрелыми стадиями ХЛ (26). Здесь также было обнаружено, что экспрессия FAS и FASLG , факторов, принадлежащих к суперсемейству TNF, более высока при раннем, чем в зрелом CL, в середине диэструса (дни 5/10 по 20/30). Их повышенная экспрессия в то время была подтверждена результатами qPCR. Роль системы FAS / FASLG в лютеолизе как внешних индукторов апоптоза широко описана у разных видов (50–54).Что касается ранней ХЛ, FAS также увеличивался в бычьей ХЛ уже на 5-й день после овуляции, вызывая вопрос о возможной неапоптотической передаче сигналов FAS в регуляции функции ХЛ (55). Действительно, было показано, что FAS влияет на некоторые нижестоящие неапоптотические сигнальные пути, такие как NFκB (56). Таким образом, хотя роль FAS / FASLG в развивающейся CL все еще неизвестна, она также может быть связана с иммуноопосредованной реорганизацией и пролиферацией тканей. Подобно FAS / FASLG, тромбоспондины (THBS) были связаны с лютеолитическими событиями, отвечая на PGF2α и действуя как антиангиогенные факторы, ингибируя проангиогенный FGF2 (57, 58).Подобно крысе (59) и, как также было обнаружено нашим анализом qPCR, повышенная экспрессия THBS1 была обнаружена на ранних стадиях CL и снижалась к середине диэструса в зрелой CL (дни 20 и 30). На ранней стадии ХЛ наблюдается интенсивная ангиогенная активность. Таким образом, повышенная экспрессия THBS1 кажется парадоксальной и до конца не изучена. Кажется правдоподобным, что THBS1 может действовать как ограничитель сосудистого разрастания, как предполагают другие (59).Однако следует отметить, что доступность белка этого фактора, а также доступность его рецепторов не изучались в настоящем исследовании, но, безусловно, заслуживают дальнейшего внимания.

    Что касается эйкозаноидов, модуляция функции CL классически рассматривается как баланс между лютеотропной функцией PGE2 и лютеолитической активностью PGF2α. В собачьей ХЛ экспрессия PGE2-синтазы (PTGES) и рецептора 2 PGE2 (PTGER2 / EP2) снижается с течением времени (21).Этот паттерн экспрессии может объяснить ингибирование пути передачи сигналов эйкозаноидов, предсказанное программным обеспечением IPA. Соответственно, аналогичные зависящие от времени эффекты наблюдались здесь в экспрессии TBXAS1 и PGD2-синтазы ( PTGDS) , которая снижалась от ранней до средней лютеиновой фазы в транскрипционном анализе (дополнительно подтверждено с помощью qPCR). Оба эйкозаноида преимущественно охарактеризованы в других системах. Таким образом, в то время как тромбоксан 2 (TBXA2) связан с агрегацией тромбоцитов, ишемией миокарда и бронхостенозом, PGD2 широко описывается как регулятор температуры тела и цикла сна, вазодилатации, расслабления гладких мышц и сужения бронхов (60–62).Что касается репродуктивной системы, то ингибирование TBXAS приводит к усилению цАМФ-зависимого стероидогенеза в клетках Лейдига (63). Что касается PGD2, у мужчин он действует как активатор гена Sox9 и, следовательно, играет ключевую роль в органогенезе яичек (64, 65). Однако, насколько нам известно, ничего не известно о модулирующем влиянии этих двух эйкозаноидов на функцию ХЛ. Поразительно, что PGD2 может подвергаться спонтанной дегидратации в различные простаноиды J, такие как 15d-PGJ2 (66, 67).Этот простагландин может опосредовать провоспалительные механизмы различными путями, но также влияет на противовоспалительные реакции, в основном через ядерный рецептор PPARγ (68). Экспрессия PPARγ снижается между 10 и 20 днями в анализе кПЦР и является альтернативным рецептором для нескольких различных факторов, включая эйкозаноиды и жирные кислоты, с регуляторной ролью в метаболизме жирных кислот, дифференцировке клеток и воспалении (69). Среди других регуляторных эффектов PPARγ играет косвенную роль в усилении экспрессии STAR за счет активации cJUN (70).У беременных собак ХЛ стабильно выражалась на протяжении всего диэструса (39). Однако здесь мы наблюдали повышенную экспрессию этого рецептора на ранних стадиях ХЛ, подобно двум изученным эйкозаноид-синтазам. Таким образом, кажется правдоподобным, что PPARγ у собак также обеспечивает альтернативный путь для возможных модулирующих эффектов простаноидов, производных PGD2, в CL.

    В совокупности наш анализ показывает, что во время перехода от ранней развивающейся к зрелой CL происходит снижение иммунной активности и пролиферация тканей, что, как и ожидалось, сопровождается ее повышенной стероидогенной способностью.Кроме того, среди предсказанных высших вышестоящих регуляторов присутствовали различные гормоны и рецептор 2 PGE2 (PTGER2 / EP2), которые, как известно, демонстрируют зависящие от времени изменения в их экспрессии в CL во время диэструса собак (14, 21). Принимая во внимание, что эти функциональные изменения и экспрессия различных генов были ранее исследованы и / или ожидались, как упоминалось в другом месте, анализ зависящих от времени эффектов служил также в качестве первичной валидации методологии секвенирования следующего поколения.Помимо этого, впервые были описаны и обсуждены паттерны экспрессии TBXAS, PTGDS, FAS / FASLG, NF κ B / NF κ BIA, THBS1, PPAR γ и HSD17B7 в собачьей CL. здесь. Все эти факторы могут играть функциональную роль в развитии CL у собак и, таким образом, представляют собой темы, заслуживающие большего внимания в будущем.

    Эффекты, вызванные лечением

    Функциональное подавление COX2 и последующая отмена PG оказали различное влияние на разные исследованные группы.Количество ДЭГ, обнаруженных для каждой исследуемой временной точки, также было различным: оно было ниже на гонадотропин-независимых стадиях ХЛ (5-й и 10-й дни), чем во время переходного периода и при зависимости от гонадотропина (20-е и 30-е дни соответственно). Интересно, что наибольшее количество ДЭГ (1741) было обнаружено у собак, получавших Превикокс в течение 20 дней. Это, вместе с отсутствием генов, на которые обычно влияет лечение во всех группах, усиливает зависящие от времени и стадии развития эффекты супрессии COX2 на транскрипционную активность CL.Кроме того, наличие возможных компенсаторных механизмов вывода PG предполагалось ранее (3, 26) и, по-видимому, является частью естественной регуляции функции CL у собак. В то же время возможное присутствие таких механизмов требует осторожности при оценке и интерпретации полученных результатов, поскольку они могут быть вызваны этими механизмами, а не напрямую связаны с функцией PG.

    Гонадотропин-независимая стадия CL

    Эта стадия относится к раннему, развивающемуся КЛ, леченному Превикоксом в течение 5 и 10 дней.В это время наблюдались большие индивидуальные и функциональные вариации ответа на лечение на уровне транскриптома, при этом меньшее количество генов соответствовало применяемым строгим критериям значения P и критериям FDR. Тем не менее функциональные параметры, связанные с движением и делением клеток, преобладали на 5-й день после овуляции в ответ на Previcox. Кроме того, предполагаемая активация клеточного движения и путей, связанных с цитоскелетом, была в основном связана с повышенной экспрессией таких факторов, как актины, ламинин и миозин, наблюдаемой при анализе транскриптома.В предыдущих исследованиях значительный эффект лечения в этот момент времени показал снижение экспрессии STAR, PRLR и PTGES, причем последний был связан с более низкими уровнями PGE2 внутри CL (3). Однако никаких значительных эффектов в отношении транскрипционной способности, васкуляризации или иммунной функции не наблюдалось (24, 26). Здесь, как обнаружено с помощью кПЦР, экспрессия фактора роста FGF2 была снижена обработкой Previcox, в то время как THBS1 была усилена. Принимая во внимание вышеупомянутое взаимодействие между этими факторами, характер экспрессии FGF2 и THBS1 предполагает разрушительный эффект этого лечения на ангиогенные механизмы.Эффекты ингибирования васкуляризации кажутся еще более вероятными, если принять во внимание повышенную экспрессию TGF β 1 после лечения. Фактически, рост и капиллярный морфогенез эндотелиальных клеток, выделенных из бычьей КЛ, были уменьшены этим цитокином (71). Кроме того, в настоящем исследовании qPCR также выявила снижение экспрессии FASLG в CL, обработанном Previcox. Если, как описано выше, этот фактор обычно связан с антиангиогенной активностью, его повышенная экспрессия на ранних стадиях CL может означать положительную роль FASLG в ангиогенезе CL, который, по-видимому, нарушается после лечения.Хотя эта идея является гипотетической, она заслуживает дальнейшего внимания в будущем.

    Что касается других функциональных механизмов, то, как показывает количественная ПЦР, экспрессия гена SULT1E1 снизилась после обработки Превикоксом. Как указано в другом месте, ауто / паракринные эффекты эстрогенов в CL собак были предложены ранее (6, 46). SULT1E1 сульфоконъюгирует эстрогены, нарушая их способность связываться с рецепторами и, таким образом, предотвращая их действие на ткани-мишени (72).Таким образом, наблюдаемое снижение экспрессии SULT1E1 в ответ на лечение может нарушить баланс локально активных эстрогенов в CL, предположительно как часть компенсаторных механизмов после отмены PG.

    Эффекты лечения Превикоксом на 10-й день оказались менее выраженными на уровне транскриптома. Однако в предыдущих исследованиях мы наблюдали, что ингибирование COX2 на 10-й день снижает экспрессию PTGES, следовательно, значительно снижая уровни PGE2 внутри CL, и это было связано со значительным снижением уровней циркулирующего P4 (3, 24).Эти предыдущие результаты явно контрастируют с небольшим количеством ДЭГ, наблюдаемым в настоящем анализе. Однако представляется вероятным, что вариация между обработанными образцами могла быть причиной отрицательного результата этого анализа, в частности, в отношении примененного скорректированного значения P (FDR), с учетом множественных испытаний, но не для биологическое разнообразие в ответ на нанесенное воздействие анти-COX2.

    Переход к гонадотропной зависимости

    Эта стадия КЛ относится к переходному периоду развития ее гонадотропиновой зависимости, представленной в нашем исследовании к 20-му дню после овуляции (17, 18).Фактически, 20-й день был моментом времени, наиболее затронутым лечением. В настоящее время CL более восприимчив к оскорблениям, касающимся его функциональности. Основные функциональные термины, представленные в образцах, обработанных Previcox в настоящее время, были связаны с клеточной пролиферацией и иммунным ответом. Это хорошо согласуется с ранее сообщенным уменьшенным размером ядер стероидогенных клеток и повышенной экспрессией некоторых провоспалительных интерлейкинов (например, IL1β или IL6) в ответ на Previcox в настоящее время (24, 26).В настоящем NGS-анализе также было обнаружено, что IL1β и IL6 по-разному экспрессируются после лечения. Активация нескольких канонических путей, связанных с иммунной системой, была предсказана программным обеспечением IPA, а повышенная экспрессия других провоспалительных факторов, например, ICAM1, NODAL, FAS, FASLG и NF κ B1 , была дополнительно подтверждена. по кПЦР. Эта явно повышенная реактивность иммунной системы сопровождалась отрицательными эффектами, вызванными лечением в этот момент времени на стероидогенный аппарат, что отражалось в снижении экспрессии 3βHSD и STAR (3, 24).Эти данные свидетельствуют о преимущественно отрицательном влиянии лечения на функцию ХЛ на этой стадии.

    Что касается функции сосудов, то в дополнение к ранее обнаруженной повышенной экспрессии эндотелина-1 (END1) и подавлению ангиопоэтина 1 (ANGPT1) на 20-й день лечения (26), здесь повышена экспрессия антиангиогенного THBS1 Были идентифицированы и пониженные уровни FGF2 . Таким образом, постулируемое негативное влияние отмены PG на сосудистую активность CL было дополнительно подтверждено.

    В отличие от снижения экспрессии SULT1E1 на 5-й день лечения, его экспрессия была повышена во время переходной фазы на 20-й день у собак, получавших Previcox. SULT1E1 также был повышен в CL у собак в середине беременности, подвергшихся лютеолизу после лечения антигестагеном (27), что позволяет предположить, что местная отмена эстрогенов может быть связана со снижением активности CL. Очевидно подавленная экспрессия HSD17B7 ( P = 0.0608) на 20-й день лечения еще больше укрепляет идею о возможном участии эстрогенов в функции ХЛ. С другой стороны, мы также наблюдали сильно увеличенную экспрессию ядерного фактора NR4A1 (также называемого Nur77) в ответ на Previcox. Этот паттерн экспрессии был дополнительно подтвержден с помощью qPCR. Ранее были описаны несколько функций этого рецептора. Экспрессия NR4A1 увеличивалась в CL у сук, коров и крыс в ответ на лечение лютеолизином PGF2α (73–75).Этот рецептор также известен как важный регулятор воспаления [см. Обзор (76)]. Таким образом, вероятно, что повышенная экспрессия этого ядерного рецептора может быть связана с усилением воспалительной реакции, наблюдаемой на этой стадии CL, на инсульт Previcox. Тем не менее, его точные функции в КЛ собак еще предстоит определить. Из-за разностороннего воздействия NR4A1 на разные органы и системы, его возможное действие на CL, по-видимому, заслуживает большего внимания в будущем.

    Повышенная экспрессия TBXAS, PTGDS и PPAR γ, наблюдаемая при транскриптомном анализе и анализе qPCR на 20 день после лечения Previcox, может представлять возможные компенсаторные механизмы, как предполагалось в предыдущих сообщениях (3, 26). Как упоминалось в другом месте, PPARγ действует как альтернативный рецептор простагландинов (68, 69). Помимо его способности повышать регуляцию простероидогенного cJUN (70), было показано, что он подавляет активность NFκB (77, 78). Действительно, ранее было предложено увеличить экспрессию cJUN для противодействия негативным эффектам Previcox (26).

    В совокупности, в соответствии с нашими предыдущими выводами (26), функциональное ингибирование COX2, помимо подавления содержания PGE2 внутри CL (3), привело к активации факторов и путей, связанных с иммунной системой CL. Это также отрицательно сказалось на васкуляризации КЛ при ее функциональном переходе в гонадотропинзависимую стадию. Регуляторные эффекты на PPARγ и NFκB, реципрокные взаимодействия между FGF и THBS или даже возможные модулирующие эффекты на локально продуцируемые эстрогены, возможно, могут быть вовлечены в поддержание гомеостаза ткани CL в это время PG-зависимым образом.

    Гонадотропин-зависимая стадия ХЛ

    В этом сравнении стадия развития CL относится к середине диэструса, представленному 30-м днем. В это время поддержание функции CL в первую очередь зависит от PRL (19, 20). День 30 показал второе по величине количество ДЭГ в ответ на лечение Превикоксом. Кроме того, при анализе диаграммы Венна на 20-й и 30-й дни было зарегистрировано наибольшее количество одновременно затронутых генов, даже если сигнальные пути, представленные этими генами, указывали на их различный функциональный статус.

    На 30-й день полностью зрелый CL проявляет высокую стероидогенную способность. Это было отражено в функциональных показателях, представленных на 30-й день в контрольных образцах по сравнению с их аналогами, обработанными Previcox. К ним относятся, например, стероидогенные и липидные метаболические процессы, которые были меньше представлены в CL обработанных собак. Анализ функциональных путей подтвердил эти наблюдения, выявив синтез холестерина и стероидогенез среди преобладающих путей, на которые влияет лечение.Интересно, что в этом контрасте эффекты лечения оказались разнообразными и затронули гены с более высокими функциональными вариациями. С другой стороны, как указано выше, в отличие от 20-го дня лечения, связанные с иммунной системой функциональные пути (например, передача сигналов NFκB и TGFβ) оказались менее представленными на 30-й день в обработанной CL. Однако их важность была подчеркнута путем включения соответствующих связанных факторов в число ведущих регулирующих органов. Таким образом, помимо TNF и PPARγ, с помощью программного обеспечения IPA также были идентифицированы TGFβ1 и NFκBIA (фактор, связанный с NFκB).Благодаря добавлению новой информации, эти результаты также хорошо согласуются с ранее сообщенным повышенным присутствием CD4-экспрессирующих макрофагов, инфильтрирующих CL, в ответ на лечение Previcox на 30-й день лечения (26). В представленном здесь наборе данных на активацию иммунной системы указывает сильное подавление экспрессии IDO1 на 30-й день лечения. Будучи ферментом, ограничивающим скорость катаболизма триптофана, функция IDO1 считается контрольной точкой в ​​активации лейкоцитов, оказывая иммуносупрессивное действие (79).Интересно, что, как указано выше, несмотря на близость во времени развития, стадии созревания и стероидогенной способности CL между 20 и 30 днями после овуляции, эффекты, вызванные Previcox на иммунную систему в эти два момента времени, по-видимому, расходятся. дальнейшее подчеркивание зависящих от времени эффектов отмены PG в собачьей CL.

    Заключительные замечания

    Как показано в этом и предыдущих исследованиях, лечение собак препаратом Превикокс влияет на несколько компонентов и функций ХЛ (3, 24, 26).В соответствии с этими наблюдениями широкие эффекты ингибирования COX2 наблюдались в глубоком анализе РНК-Seq, проведенном здесь. Эти эффекты явно зависели от стадии. День 20, знаменующий переходный период к зависимости от гонадотропина, был наиболее подвержен ингибированию COX2, определяя этот период как наиболее чувствительную стадию развития CL к функциональной отмене PG. Похоже, что на этой стадии внутренние регуляторные механизмы становятся нестабильными, тогда как лечение может повлиять на лютеотропные эффекты ПРЛ (3).Это также может влиять на сильные компенсаторные механизмы, присутствующие на более ранних стадиях, делая зрелую CL менее способной стабилизировать свой транскриптом в ответ на инсульт, вызванный лечением Previcox. В самом деле, похоже, что ранняя CL более устойчива к изъятию PGs, это указывает на то, что этот орган внутренне регулируется и несет сильные компенсаторные механизмы. По мере созревания CL ее транскриптом становится более чувствительным к ингибированию COX2.

    Механизмы, связанные с клеточной пролиферацией, иммунной системой и васкуляризацией, несомненно, участвуют в правильном развитии CL.Соответственно, здесь было предоставлено более глубокое понимание регуляторных механизмов, лежащих в основе развития CL, выявлено несколько факторов и путей, которые могут играть роль в этом процессе. Некоторые из них, такие как THBS1 и FAS / FASLG, известны своим участием в прекращении функции CL, но их роль в образовании CL все еще недостаточно изучена. Кроме того, модулирующие эффекты эстрогенов и PPARγ в CL собак все еще остаются неясными и могут играть важную лютеотропную роль.Наконец, повышенная экспрессия TBXAS и PTGDS на ранних стадиях CL подтверждает идею о том, что другие PG, помимо PGE2, могут играть важную роль в регуляции и поддержке собачьей CL.

    По-видимому, благодаря изучению транскриптомных эффектов и основанной на паттернах экспрессии генов информация, представленная в данном документе, не является окончательной, и необходимы дальнейшие функциональные исследования и исследования, связанные с экспрессией белков, для подтверждения этих выводов и гипотез. Тем не менее, наши анализы с собаками, получавшими Previcox, четко выявили более широкие регуляторные роли, связанные с PG в функции CL, помимо лютеотропной поддержки стероидогенеза с помощью PGE2 или лютеолитической передачи сигналов PGF2α.Таким образом, трансляционный аспект настоящего исследования по отношению к другим видам домашних животных очевиден.

    Наше исследование относится к категории клинических испытаний, и Превикокс применялся перорально в соответствии с рекомендациями производителя. Это могло ослабить воздействие на ткань-мишень из-за ее метаболизма, даже несмотря на то, что использовалась 10 мг / кг фирококсиба, что вдвое больше клинически рекомендованной дозировки (после консультации с производителем относительно безопасности). Несмотря на нарушение функции CL, ни у одной из собак лютеиновая фаза не прервалась.С клинической точки зрения это важная информация, потому что введение Превикокса, по-видимому, безопасно для функции и поддержания КЛ у небеременных и, предположительно, также у беременных собак.

    Заявление о доступности данных

    Наборы данных, созданные для этого исследования, можно найти в Омнибусе экспрессии генов NCBI, серийный номер доступа GSE130369.

    Заявление об этике

    Эксперименты на животных были одобрены ответственным комитетом по этике (разрешение 54/2008) Варминско-Мазурского университета в Ольштыне, Польша.

    Авторские взносы

    MTP участвовал в разработке концепции настоящего исследования, экспериментального дизайна, сбора данных, анализа и интерпретации данных, а также в составлении рукописи. FG принимала участие в передаче знаний и в лабораторной части проекта, а также в критическом обсуждении данных. HR способствовал передаче знаний, критическому обсуждению и интерпретации данных, а также редактированию рукописи. TJ участвовал в разработке исследования in vivo и сборе тканей, передаче знаний, критическом обсуждении данных и редактировании рукописи.BH участвовал в разработке исследования in vivo . BH и AB участвовали в передаче знаний, критическом обсуждении данных и редактировании рукописи. МПК разработал и руководил проектом, а также принимал участие в интерпретации данных, а также в составлении и редактировании рукописи. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

    Финансирование

    Эта работа была частично поддержана Швейцарским национальным научным фондом (SNSF) на исследовательский грант № 31003A_160251 и 31003A_182481 для MPK.

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Благодарности

    Авторы благодарны доктору Барри Бавистеру за тщательное редактирование рукописи. Мы высоко ценим технический опыт и вклад Рикардо Фернандеса Рубиа. Часть лабораторных работ была выполнена с использованием логистики в Центре клинических исследований, факультет Ветсуиссе, Цюрихский университет.

    Дополнительные материалы

    Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fendo.2019.00715/full#supplementary-material

    Дополнительная таблица 1. Список дифференциально экспрессируемых генов (ДЭГ), обнаруженных в контрасте «контрольные дни 20 + 30 по сравнению с контрольными днями 5 + 10». Все перечисленные гены соответствовали критериям P <0,01 и FDR <0,1 (коэффициент ложного обнаружения, скорректированное значение P ).

    Дополнительная таблица 2. Список дифференциально экспрессируемых генов (DEG), обнаруженных в контрастах «день 5, обработанный по сравнению с контролем дня 5», «день 10, обработанный по сравнению с контролем дня 10», «день 20, обработанный по сравнению с контролем, день 20» и «Обработка 30-го дня по сравнению с контролем 30-го дня». Все перечисленные гены соответствовали критериям P <0,01 и FDR <0,1 (коэффициент ложного обнаружения, скорректированное значение P ).

    Дополнительная таблица 3. Списки репрезентативных генов (до 10) и детали статистического анализа конкретных терминов GO, конкретных функциональных сетей, репрезентативных канонических путей и основных вышестоящих регуляторов.

    Дополнительная таблица 4. Полный список генов, представленных на диаграмме Венна из контрастов «день 5, обработанный по сравнению с контролем дня 5», «день 20, обработанный по сравнению с контролем, день 20» и «день 30, обработанный по сравнению с контролем дня 30», и каждый пересечение.

    Дополнительная таблица 5. Относительная экспрессия генов и статистический анализ всех генов-кандидатов-мишеней, исследованных в отношении эффектов, зависящих от времени и вызванных лечением. Относительная экспрессия генов (RGE) представлена ​​для каждой группы в виде среднего геометрического и геометрического стандартного отклонения.Для эффектов, зависящих от времени, использовался непараметрический анализ ANOVA (Краскела-Уоллиса) с последующим тестом Данна. Для оценки эффектов лечения в каждый анализируемый момент времени применяли тест Стьюдента t . P <0,05 считалось значимым.

    Дополнительное изображение 1. Первоначальный исследовательский анализ набора данных секвенирования. Матрица корреляции образцов и тепловые карты были получены с помощью приложения CountQC, входящего в структуру SUSHI. В (A, B) , «K» и «Ctrl» относятся к контрольным образцам, а «P» и «Treat» относятся к образцам, обработанным Previcox. (A) Матрица корреляции образцов, содержащая все образцы, представленные для RNA-Seq, с учетом всех присутствующих генов. Образцы 10/1 (10_K_1) и 30/1 (30_K_1) контрольные и 10/2 (10_P_2) и 30/1 (30_P_1), обработанные, показали низкие коэффициенты корреляции по сравнению с другими образцами из той же группы и были исключены из дальнейшего анализа. . (B) Матрица корреляции образцов, содержащая окончательный список образцов, использованных в настоящем анализе и учитывающая все присутствующие гены. Контрольные группы, по-видимому, имеют более высокую однородность, чем соответствующие обработанные группы. (C) Тепловая карта 2000 генов с более высокой дисперсией среди всех контрольных образцов. Показанные генные онтологии (GO) были получены с помощью Enrichr. Образцы демонстрируют очевидную лучшую кластеризацию, чем в (D) , тепловой карте 2000 генов с более высокой дисперсией среди всех проанализированных образцов (контрольных и обработанных).

    Дополнительное изображение 2. Графики вулкана дифференциально экспрессируемых генов (DEG; FDR <0,1, Log2Ratio> 0,5), на которые влияет течение времени ( A : контраст «20 + 30 дней контроль над 5 + 10 контрольными днями») или индуцированный лечением ( B : контраст «день 5, обработанный по сравнению с контролем дня 5»; C : контраст «день 5, обработанный над контролем дня 5»; D : контраст «день 5, обработанный над контролем дня 5») .

    Дополнительное изображение 3. Функциональные сети, обнаруженные в активированных дифференциально экспрессируемых генах (ДЭГ) из контраста «20 + 30-й день контроль над 5 + 10-й контроль» и в подавленных ДЭГ из контраста «30-й день, обработанный в течение 30-го дня. контроль.» Функциональные сети были получены с помощью приложения ClueGO для Cytoscape. Показаны функциональные термины, чрезмерно представленные в каждой группе. Избыточные или неинформативные термины были удалены, а полученные сети были перегруппированы вручную.Количество картированных генов указывается размером узла, в то время как значение функциональных терминов обозначается цветом узла (представленным в легенде в правом нижнем углу). (A) Сети, более широко представленные на 20 и 30 дни контроля (зрелая CL), были связаны с внутриклеточным транспортом и метаболизмом липидов. (B) Сети, более широко представленные в образцах CL от контрольных животных на 30 день после овуляции, были связаны с синтезом оксида азота и ангиогенезом.

    Список литературы

    1.Хоффманн Б., Хёвелер Р., Нор Б., Хасан Ш. Исследования гормональных изменений у собак во время родов и выявления специфических для беременности неконъюгированных эстрогенов. Exp Clin Endocrinol. (1994) 102: 185–9. DOI: 10.1055 / с-0029-1211280

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    2. Nishiyama TTS, Ito M, Kimura J, Watanabe G, Taya K, Takeishi M. Иммуногистохимическое исследование стероидогенных ферментов в яичниках и плаценте во время беременности у собак. Anat Hist Embryol. (1999) 28: 125–9. DOI: 10.1046 / j.1439-0264.1999.00170.x

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    3. Ковалевски М.П., ​​Иле С., Семенюх М.Дж., Грам А, Боос А., Здунчик С. и др. Формирование ранней собачьей CL и роль простагландина E2 (PGE2) в регуляции его функции: подход in vivo . Териогенология. (2015) 83: 1038–47. DOI: 10.1016 / j.theriogenology.2014.12.006

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    5.Камат Б.Р., Браун Л.Ф., Мансо Э.Дж., Сенгер Д.Р., Дворак В.Ф. Экспрессия фактора проницаемости сосудов / фактора роста эндотелия сосудов гранулезой человека и клетками лютеина тека. Роль в развитии желтого тела. Am J Pathol. (1995) 146: 157–65.

    PubMed Аннотация | Google Scholar

    6. Хоффманн Б., Бюджес Ф., Энгель Э., Ковалевски М.П., ​​Папа П.С. Регуляция функции желтого тела у суки. Reprod Domest Anim. (2004) 39: 232–40. DOI: 10.1111 / j.1439-0531.2004.00508.x

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    7. Ковалевски М.П. Лютеиновая регрессия против предродового лютеолиза: регуляторные механизмы, регулирующие функцию желтого тела собак. Reprod Biol. (2014) 14: 89–102. DOI: 10.1016 / j.repbio.2013.11.004

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    8. Ковалевски М.П., ​​Грамм А, Каутц Э., Граубнер ФР. Собака: нонконформист, не только в отношении сигналов материнского распознавания. Adv Anat Embryol Cell Biol. (2015) 216: 215–37. DOI: 10.1007 / 978-3-319-15856-3_11

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    9. Грамм А, Бюхлер У., Боос А, Хоффманн Б., Ковалевски М.П. Биосинтез и деградация простагландинов плаценты собак: предродовые изменения в экспрессии и функции простагландин F2альфа-синтазы (PGFS, AKR1C3) и 15-гидроксипростагландиндегидрогеназы (HPGD). Biol Reprod. (2013) 89: 2. DOI: 10.1095 / биолрепрод.113.109918

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    10.Грамм А, Фокс Б., Бюхлер Ю., Боос А., Хоффманн Б., Ковалевски М.П. Плацентарная простагландин E2-синтаза собак: экспрессия, локализация и биологические функции в обеспечении субстратов для синтеза PGF2alpha до родов. Biol Reprod. (2014) 91: 154. DOI: 10.1095 / биолрепрод.114.122929

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    11. Ковалевски М.П., ​​Бесериклисой Х.Б., Пфаррер С., Аслан С., Киндал Х., Кучукаслан И. и др. Плацента собак: источник предстартовых простагландинов во время нормальных родов и родов, вызванных антипрогестинами. Репродукция. (2010) 139: 655–64. DOI: 10.1530 / REP-09-0140

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    12. Luz MR, Bertan CM, Binelli M, Lopes MD. Концентрации в плазме 13,14-дигидро-15-кето-простагландина F2-альфа (PGFM), прогестерона и эстрадиола у беременных и небеременных гибридных сук с диэструсом. Териогенология. (2006) 66: 1436–41. DOI: 10.1016 / j.theriogenology.2006.01.036

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    15.Steinetz BG, Goldsmith LT, Harvey HJ, Lust G. Концентрации релаксина и прогестерона в сыворотке крови у беременных, псевдобеременных и подвергшихся овариэктомии беременных сук, получавших прогестин: обнаружение релаксина как маркера беременности. Am J Ver Res. (1989) 50: 68–71.

    PubMed Аннотация | Google Scholar

    16. Concannon PW. Влияние гипофизэктомии и введения ЛГ на уровни прогестерона в плазме лютеиновой фазы у суки бигль. J Reprod Fert. (1980) 58: 407–10.DOI: 10.1530 / jrf.0.0580407

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    17. Okkens AC, Dieleman SJ, Bevers MM, Lubberink AAME, Willemse AH. Влияние гипофизэктомии на продолжительность жизни желтого тела у циклической собаки. J Reprod Fertil. (1986) 77: 187–92. DOI: 10.1530 / jrf.0.0770187

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    18. Онклин К., Верстеген Дж., Конканнон П.В. Связанные со временем изменения в регуляции лютеина у собак: in vivo эффекты ЛГ на прогестерон и пролактин во время беременности. J Reprod Fertil. (2000) 118: 417–24. DOI: 10.1530 / jrf.0.1180417

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    19. Concannon PW, Weinstein S, Whaley S, Frank D. Подавление лютеиновой функции у собак с помощью антисыворотки к лютеинизирующему гормону и бромокриптина. J Reprod Ferti. (1987) 81: 175–80. DOI: 10.1530 / jrf.0.0810175

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    20. Оккенс А.С., Беверс М.М., Дилеман С.Дж., Виллемсе А.Х.Доказательства пролактина как основного лютеотрофного фактора у циклических собак. Vet Q. (1990) 12: 193–201. DOI: 10.1080 / 01652176.1990.9694266

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    21. Ковалевский М.П., ​​Мутембей Х.М., Хоффманн Б. Простагландин E2-синтаза собак (PGES) и ее рецепторы (EP2 и EP4): экспрессия в желтом теле во время диэструса. Anim Reprod Sci. (2008) 109: 319–29. DOI: 10.1016 / j.anireprosci.2007.11.023

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    22.Ковалевский М.П., ​​Шулер Г., Тауберт А., Энгель Э., Хоффманн Б. Экспрессия циклооксигеназы 1 и 2 в желтом теле собаки во время диэструса. Териогенология. (2006) 66: 1423–30. DOI: 10.1016 / j.theriogenology.2006.01.039

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    24. Яновский Т., Фингерхат Дж., Ковалевски М.П., ​​Здунчик С., Домославская А., Юрчак А. и др. In vivo исследования лютеотропной активности простагландинов во время раннего диэструса у небеременных сук. Териогенология. (2014) 82: 915–20. DOI: 10.1016 / j.theriogenology.2014.07.005

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    25. Грамм А, Последний С., Боос А., Хоффманн Б., Ковалевски М.П. Экспрессия и функциональные последствия лютеиновых эндотелинов у беременных и небеременных собак. Репродукция. (2015) 150: 405–15. DOI: 10.1530 / REP-15-0256

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    26. Таварес Перейра М., Грам А., Новачик Р.М., Боос А., Хоффманн Б., Яновски Т. и др.Простагландин-опосредованные эффекты в раннем желтом теле собак: in vivo эффекты на сосудистые и иммунные факторы. Reprod Biol. (2019) 10: 100–11. DOI: 10.1016 / j.repbio.2019.02.001

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    27. Затта С., Рехрауэр Х., Грамм А, Боос А., Ковалевски М.П. Анализ транскриптома выявляет различия в механизмах, регулирующих прекращение лютеиновой функции у беременных и небеременных собак. BMC Genomics. (2017) 18: 757.DOI: 10.1186 / s12864-017-4084-9

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    28. Хатакеяма М., Опиц Л., Руссо Г., Ци В., Шлапбах Р., Рерауэр Х. СУШИ: изысканный рецепт полностью документированного, воспроизводимого и многократно используемого анализа данных NGS. BMC Bioinformatics. (2016) 17: 228. DOI: 10.1186 / s12859-016-1104-8

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    29. Qi W, Schlapbach R, Rehrauer H. Анализ данных РНК-seq: от контроля качества исходных данных до анализа дифференциальной экспрессии. Методы Мол Биол . (2017) 1669: 295–307. DOI: 10.1007 / 978-1-4939-7286-9_23

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    30. Добин А., Дэвис К.А., Шлезингер Ф., Дренков Дж., Залески С., Джа С. и др. STAR: сверхбыстрый универсальный выравниватель RNA-seq. Биоинформатика. (2013) 29: 15–21. DOI: 10.1093 / биоинформатика / bts635

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    33. Ми Х, Хуанг Х, Муругануджан А, Тан Х, Миллс С., Канг Д. и др.PANTHER версии 11: расширенные данные аннотаций из путей Gene Ontology и Reactome, а также усовершенствования инструмента анализа данных. Nucleic Acids Res. (2017) 45: D183–9. DOI: 10.1093 / nar / gkw1138

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    34. Chen EY, Tan CM, Kou Y, Duan Q, Wang Z, Meirelles GV и др. Enrichr: интерактивный и совместный инструмент анализа пополнения списка генов HTML5. BMC Bioinformatics. (2013) 14: 128. DOI: 10.1186 / 1471-2105-14-128

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    35.Биндеа Г., Млечник Б., Хакл Х., Чароентонг П., Тосолини М., Кириловский А. и др. ClueGO: плагин Cytoscape для расшифровки функционально сгруппированных онтологий генов и сетей аннотаций путей. Биоинформатика. (2009) 25: 1091–3. DOI: 10.1093 / биоинформатика / btp101

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    36. Шеннон П., Маркиел А., Озьер О., Балига Н.С., Ван Дж. Т., Рэймидж Д. и др. Cytoscape: программная среда для интегрированных моделей сетей биомолекулярного взаимодействия. Genome Res. (2003) 13: 2498–504. DOI: 10.1101 / gr.1239303

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    37. Каутц Э., Грам А., Аслан С., Ай С.С., Сельчук М., Канка Х. и др. Экспрессия генов, участвующих во взаимодействии эмбриона и матери в матке собак на ранних сроках беременности. Репродукция. (2014) 147: 703–17. DOI: 10.1530 / REP-13-0648

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    38. Ковалевски М.П., ​​Мишель Э., Грам А, Боос А., Гускетти Ф., Хоффманн Б. и др.Лютеиновая и плацентарная функция у суки: пространственно-временные изменения экспрессии рецептора пролактина (PRLr) при диэструсе, беременности, нормальных и искусственных родах. Reprod Biol Endocrinol. (2011) 9: 109. DOI: 10.1186 / 1477-7827-9-109

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    39. Ковалевски М.П., ​​Мейер А., Хоффманн Б., Аслан С., Боос А. Экспрессия и функциональные последствия гамма-рецептора, активируемого пролифератором пероксисом (PPARgamma), в репродуктивных тканях собак во время нормальной беременности и родов, а также при аборте, вызванном антипрогестинами. Териогенология. (2011) 75: 877–86. DOI: 10.1016 / j.theriogenology.2010.10.030

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    40. Андерсен К.Л., Ледет-Йенсен Дж., Эрнтофт Т. Нормализация количественных данных обратной транскрипции-ПЦР в реальном времени: основанный на модели подход к оценке дисперсии для идентификации генов, подходящих для нормализации, примененный к наборам данных рака мочевого пузыря и толстой кишки. Cancer Res. (2004) 64: 5245–50. DOI: 10.1158 / 0008-5472.CAN-04-0496

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    41.Вандесомпеле Дж., Де Претер К., Паттин Ф., Поппе Б., Ван Рой Н., Де Паэпе А. и др. Точная нормализация количественных данных ОТ-ПЦР в реальном времени путем геометрического усреднения нескольких генов внутреннего контроля. Genome Biol. (2002) 3: ИССЛЕДОВАНИЕ 0034. DOI: 10.1186 / GB-2002-3-7-research0034

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    42. Хоффманн Б., Шамс Д., Бопп Р., Эндер М.Л., Гименес Т., Карг Х. Лютеотрофные факторы у коровы: данные о наличии левого гриппа, а не пролактина. Репродукция. (1974) 40: 77–85. DOI: 10.1530 / jrf.0.0400077

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    43. Szafranska B, Ziecik AJ. Активная и пассивная иммунизация свиней против лютеинизирующего гормона. Acta Physiol Hung. (1989) 74: 253–8.

    PubMed Аннотация

    44. Nokelainen P, Peltoketo H, Vihko R, Vihko P. Клонирование экспрессии новой эстрогенной мышиной 17-бета-гидроксистероиддегидрогеназы / 17-кетостероидредуктазы (m17HSD7), ранее описанной как белок, связанный с рецептором пролактина (PRAP) у крыс . Mol Endocrinol. (1998) 12: 1048–59. DOI: 10.1210 / me.12.7.1048

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    47. Онклин К., Верстеген Дж. Паттерны секреции пролактина и прогестерона в плазме у беременных по сравнению с небеременными двояковыми суками гончей породы. J Reprod Fertil Suppl. (1997) 51: 203–8.

    PubMed Аннотация | Google Scholar

    48. Hoffmann B, Büsges F, Baumgärtne W. Иммуногистохимическое определение иммунных клеток, экспрессирующих CD4, CD8 и MHC II, и эндоглина в желтом теле собаки на разных стадиях диэструса. Reprod Domestic Anim. (2004) 39: 391–5. DOI: 10.1111 / j.1439-0531.2004.00520.x

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    49. Новачик Р.М., Юрша-Пиотровска Э., Грам А, Семенюх М.Ю., Боос А., Ковалевский М.П. Клетки, экспрессирующие CD4, CD8, MHCII и эндоглин в желтом теле собаки во время беременности, и активация лютеиновой системы TNF-альфа перед родами. Териогенология. (2017) 98: 123–32. DOI: 10.1016 / j.theriogenology.2017.05.003

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    50.Пру Дж. К., Хендри И. Р., Дэвис Дж. С., Руэда Б. Р.. Растворимый лиганд Fas активирует путь сфингомиелина и индуцирует апоптоз в лютеиновых стероидогенных клетках независимо от стресс-активированного p38 (MAPK). Эндокринология. (2002) 143: 4350–7. DOI: 10.1210 / en.2002-220229

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    52. Куирк С.М., Харман Р.М., Хубер С.К., Коуэн Р.Г. Реакция лютеиновых клеток мышей на апоптоз, опосредованный fas-антигеном (CD95). Biol Reprod. (2000) 63: 49–56. DOI: 10.1095 / biolreprod63.1.49

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    53. Roughton SA, Lareu RR, Bittles AH, Dharmarajan AM. Fas и fas лиганд-мессенджер рибонуклеиновая кислота и экспрессия белка в желтом теле крысы во время апоптоз-опосредованного лютеолиза. Биол Репрод . (1999) 60: 797–804. DOI: 10.1095 / biolreprod60.4.797

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    55. Дункан А., Форсина Дж., Блирт А., Таунсон Д.Зависимые от эстрального цикла изменения экспрессии Fas в желтом теле крупного рогатого скота: влияние промежуточных филаментов и цитокинов кератина 8/18. Reprod Biol Endocrinol. (2012) 10:90. DOI: 10.1186 / 1477-7827-10-90

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    56. Barnhart BC, Legembre P, Pietras E, Bubici C, Franzoso G, Perer ME. Лиганд CD95 индуцирует подвижность и инвазивность устойчивых к апоптозу опухолевых клеток. EMBO J. (2004) 23: 3175–85.DOI: 10.1038 / sj.emboj.7600325

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    57. Фарберов С., Мейдан Р. Функции и регуляция транскрипции тромбоспондинов и их взаимосвязь с фактором роста фибробластов-2 в лютеиновых клетках крупного рогатого скота. Biol Reprod. (2014) 91:58. DOI: 10.1095 / биолрепрод.114.121020

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    58. Gospodarowicz D, Neufeld G, Schweigerer L. Молекулярная и биологическая характеристика фактора роста фибробластов, ангиогенного фактора, который также контролирует пролиферацию и дифференцировку клеток, происходящих из мезодермы и нейроэктодермы. Cell Differ. (1986) 19: 1–17. DOI: 10.1016 / 0045-6039 (86)

    -7

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    59. Петрик Дж. Дж., Джентри П. А., Фейдж Дж. Дж., Ламар Дж. Экспрессия и локализация тромбоспондинов-1 и -2 и их рецептора на клеточной поверхности, CD36, во время развития фолликулов крыс и формирования желтого тела1. Biol Reprod. (2002) 67: 1522–31. DOI: 10.1095 / биолрепрод.102.007153

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    60.Брейер Р.М., Багдассарян СК, Майерс С.А., Брейер М.Д. Простаноидные рецепторы: подтипы и сигнализация. Annu Rev Pharmacol Toxicol. (2001) 41: 661–90. DOI: 10.1146 / annurev.pharmtox.41.1.661

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    61. Хата А.Н., Брейер Р.М. Фармакология и передача сигналов рецепторов простагландина: множественные роли в воспалении и иммунной модуляции. Pharmacol Ther. (2004) 103: 147–66. DOI: 10.1016 / j.pharmthera.2004.06.003

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    63.Wang X, Yin X, Schiffer RB, King SR, Stocco DM, Grammas P. Ингибирование активности тромбоксан-синтазы усиливает стероидогенез и экспрессию стероидогенных острых регуляторных генов в клетках Лейдига мыши MA-10. Эндокринология. (2008) 149: 851–7. DOI: 10.1210 / en.2007-0470

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    64. Малки С., Неф С., Нотарникола С., Тевенет Л., Гаска С., Меджан С. и др. Простагландин D2 индуцирует ядерный импорт фактора определения пола SOX9 через его фосфорилирование цАМФ-PKA. EMBO J. (2005) 24: 1798–809. DOI: 10.1038 / sj.emboj.7600660

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    65. Монио Б., Деклосменил Ф, Баррионуево Ф., Шерер Г., Аритаке К., Малки С. и др. Путь PGD2, независимо от FGF9, усиливает активность SOX9 в клетках Сертоли во время мужской половой дифференцировки. Разработка. (2009) 136: 1813–21. DOI: 10.1242 / dev.032631

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    66.Фитцпатрик Ф.А., Виналда Массачусетс. Катализируемый альбумином метаболизм простагландина D2. J Biol Chem. (1983) 258: 11713–8.

    PubMed Аннотация | Google Scholar

    67. Kikawa Y, Narumiya S, Fukushima M, Wakatsuka H, ​​Hayaishi O. 9-дезокси-дельта 9, дельта 12-13,14-дигидропростагландин D2, метаболит простагландина D2, образующийся в плазме человека. Proc Natl Acad Sci USA. (1984) 81: 1317–21. DOI: 10.1073 / pnas.81.5.1317

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    69.Komar CM. Рецепторы, активируемые пролифератором пероксисом (PPAR) и функция яичников — значение для регуляции стероидогенеза, дифференцировки и ремоделирования тканей. Reprod Biol Endocrinol. (2005) 3:41. DOI: 10.1186 / 1477-7827-3-41

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    70. Ковалевски М.П., ​​Дайсон М.Т., Манна ПР, Стокко Д.М. Участие рецептора γ, активируемого пролифератором пероксисом, в гонадном стероидогенезе и экспрессии стероидогенного острого регуляторного белка. Reprod Fertil Dev. (2009) 21: 909–22. DOI: 10.1071 / RD09027

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    73. Атли М.О., Бендер Р.В., Мехта В., Бастос М.Р., Луо В., Везина С.М. и др. Паттерны экспрессии генов в желтом теле крупного рогатого скота после многократных внутриматочных инфузий низких доз простагландина F2альфа. Biol Reprod. (2012) 86: 130. DOI: 10.1095 / биолрепрод.111.094870

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    74.Qi L, Guo N, Wei Q, Jin P, Wang W, Mao D. Участие NR4A1 и NR4A2 в регуляции лютеиновой функции у крыс. Acta Histochem. (2018) 120: 713–9. DOI: 10.1016 / j.acthis.2018.07.007

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    75. Ucar EH, Cetin H, Atli MO. Влияние нескольких инъекций низких доз PGF2alpha на зрелое желтое тело у небеременных сук. Териогенология. (2018) 113: 34–43. DOI: 10.1016 / j.theriogenology.2018.01.018

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    76. Мерфи Е.П., Крин Д. Молекулярные взаимодействия между орфанными ядерными рецепторами NR4A и NF-kappaB необходимы для соответствующих воспалительных реакций и гомеостаза иммунных клеток. Биомолекулы. (2015) 5: 1302–18. DOI: 10.3390 / biom5031302

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    77. Делрив П., де Бошер К., Беснар С., Берге В.В., Петерс Дж. М., Гонсалес Ф. Дж. И др.Рецептор, активируемый пролифератором пероксисом, отрицательно регулирует ответ сосудистого воспалительного гена за счет отрицательного перекрестного взаимодействия с факторами транскрипции NF-kB и AP-1. J Biol Chem. (1999) 45: 32048–54. DOI: 10.1074 / jbc.274.45.32048

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    78. Ким Е.К., Квон К.Б., Ку Б.С., Хан М.Дж., Сон М.Ю., Сонг Е.К. и др. Активация гамма-рецептора, активируемого пролифератором пероксисом, защищает бета-клетки поджелудочной железы от цитотоксичности, индуцированной цитокинами, через путь NF kappaB. Int J Biochem Cell Biol. (2007) 39: 1260–75. DOI: 10.1016 / j.biocel.2007.04.005

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Corpus luteum — wikidoc

    Шаблон: Infobox Anatomy

    Главный редактор: C. Майкл Гибсон, M.S., M.D. [1]

    Обзор

    желтое тело (латинское «желтое тело») (множественное число желтое тело ) — это временная эндокринная структура у млекопитающих, участвующая в выработке прогестагенов, необходимых для поддержания беременности.

    Развитие и структура

    Желтое тело развивается из фолликула яичника во время лютеиновой фазы менструального цикла или эстрального цикла после выхода зрелой яйцеклетки (яйца) из фолликула во время овуляции. Фолликул сначала образует геморрагическое тело, а затем становится желтым телом, но этот термин просто относится к видимому скоплению крови, оставшемуся после разрыва фолликула, и не имеет функционального значения. В то время как ооцит (позже зигота) проходит через маточную трубу в матку, желтое тело остается в яичнике.

    Желтое тело обычно очень велико по сравнению с размером яичника; у людей размер структуры колеблется от 2 до 6 см в диаметре. [1]

    Его клетки развиваются из фолликулярных клеток, окружающих фолликул яичника:

    Функция

    Необходим для установления и сохранения беременности у женщин.

    В яичнике желтое тело выделяет эстрогены и прогестерон, которые являются стероидными гормонами, отвечающими за утолщение эндометрия, его развитие и поддержание, соответственно.

    Когда яйцо не оплодотворяется

    Если яйцеклетка не оплодотворена, желтое тело перестает выделять прогестерон и разлагается (примерно через 14 дней у человека). Затем он перерождается в белое тело, которое представляет собой массу фиброзной рубцовой ткани.

    Выстилка матки отслаивается без прогестерона и выводится через влагалище (у людей и некоторых человекообразных обезьян, у которых менструальный цикл проходит). В период течки слизистая оболочка возвращается к нормальному размеру.

    При оплодотворении яйца

    Однако при оплодотворении эмбрион выделяет гормон хорионический гонадотропин человека (ХГЧ) или аналогичный гормон у других видов.

    Этот гормон сигнализирует желтому телу о продолжении секреции прогестерона, тем самым поддерживая толстую оболочку (эндометрий) матки и обеспечивая область, богатую кровеносными сосудами, в которых может развиваться зигота (и). С этого момента желтое тело называется желтое тело .

    Введение гормона простагландина в этот момент вызывает дегенерацию желтого тела и прерывание беременности. Однако у плацентарных животных, таких как люди, плацента в конечном итоге берет на себя выработку прогестерона, и желтое тело распадается на белое тело без потери эмбриона / плода.

    Дополнительные изображения

    • Порядок изменений яичника

    Внешние ссылки

    Номер ссылки

    Шаблон: Женская репродуктивная система. Шаблон: Эндокринная система


    он: גופיף צהוב de: Gelbkörper lt: Geltonkūnis мк: Жолто тело sv: Gulkropp


    Шаблон: WikiDoc Sources

    ИЗВЛЕЧЕНИЕ ЖЕСТКОГО ТЕЛА ПРИ РАННЕЙ БЕРЕМЕННОСТИ: ОБЗОР Т…: Акушерско-гинекологический осмотр

    Что вы по профессии? Academic MedicineAcute Уход NursingAddiction MedicineAdministrationAdvanced Практика NursingAllergy и ImmunologyAllied здоровьеАльтернативная и комплементарной MedicineAnesthesiologyAnesthesiology NursingAudiology & Ear и HearingBasic ScienceCardiologyCardiothoracic SurgeryCardiovascular NursingCardiovascular SurgeryChild NeurologyChild PsychiatryChiropracticsClinical SciencesColorectal SurgeryCommunity HealthCritical CareCritical Уход NursingDentistryDermatologyEmergency MedicineEmergency NursingEndocrinologyEndoncrinologyForensic MedicineGastroenterologyGeneral SurgeryGeneticsGeriatricsGynecologic OncologyHand SurgeryHead & Neck SurgeryHematology / OncologyHospice & Паллиативная CareHospital MedicineInfectious DiseaseInfusion Сестринское делоВнутреннее / Лечебное делоВнутреннее / Лечебное отделениеБиблиотечные науки Уход за матерью и детьмиМедицинская онкологияМедицинские исследованияНеонатальный / Перинатальный Неонатальный / Перинатальный уход ecialtiesNursing-educationNutrition & DieteticsObstetrics & GynecologyObstetrics & Gynecology NursingOccupational & Environmental MedicineOncology NursingOncology SurgeryOphthalmology / OptometryOral и челюстно SurgeryOrthopedic NursingOrthopedics / Позвоночник / Спорт Медицина SurgeryOtolaryngologyPain MedicinePathologyPediatric SurgeryPediatricsPharmacologyPharmacyPhysical Медицина и RehabilitationPhysical Терапия и женщин Здоровье Физическое TherapyPlastic SurgeryPodiatary-generalPodiatry-generalPrimary Уход / Семейная медицина / Общие PracticePsychiatric Сестринское делоПсихиатрияПсихологияОбщественное здравоохранениеПульмонологияРадиационная онкология / ТерапияРадиологияРевматологияНавыки и процедурыСонотерапияСпорт и упражнения / Тренировки / ФитнесСпортивная медицинаХирургический уходПереходный уходТрансплантационная хирургияТерапия травмТравматическая хирургияУрологияЖенское здоровье Уход за ранамиДругое

    Что ваша специальность? Addiction MedicineAllergy & Clinical ImmunologyAnesthesiologyAudiology & Speech-Language PathologyCardiologyCardiothoracic SurgeryCritical Уход MedicineDentistry, Oral Surgery & MedicineDermatologyDermatologic SurgeryEmergency MedicineEndocrinology & MetabolismFamily или General PracticeGastroenterology & HepatologyGenetic MedicineGeriatrics & GerontologyHematologyHospitalistImmunologyInfectious DiseasesInternal MedicineLegal / Forensic MedicineNephrologyNeurologyNeurosurgeryNursingNutrition & DieteticsObstetrics & GynecologyOncologyOphthalmologyOrthopedicsOtorhinolaryngologyPain ManagementPathologyPediatricsPlastic / Восстановительная SugeryPharmacology & PharmacyPhysiologyPsychiatryPsychologyPublic, Окружающая среда и гигиена трудаРадиология, ядерная медицина и медицинская визуализацияФизическая медицина и реабилитация Респираторная / легочная медицинаРевматологияСпортивная медицина / наукаХирургия (общая) Травматологическая хирургияТоксикологияТрансплантационная хирургияУрологияСосудистая хирургияВироло у меня нет медицинской специальности

    Каковы ваши условия работы? Больница на 250 коекБольница на более 250 коекУправление престарелыми или хосписы Психиатрическое или реабилитационное учреждениеЧастная практикаГрупповая практикаКорпорация (фармацевтика, биотехнология, инженерия и т. Д.) Докторантура Университета или медицинского факультета Магистратура или 4-летнего академического университета Общественный колледж Правительство Другое

    Микрососудистые эндотелиальные клетки желтого тела | Репродуктивная биология и эндокринология

  • 1.

    Брюс Н.В., Мур Р.М.: Капиллярный кровоток к фолликулам яичников, строме и желтым телам анестезированных овец.J Reprod Fertil. 1976, 46: 299-304.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 2.

    О’Ши Дж. Д., Роджерс Р. Дж., Д’Оккио М. Дж.: Клеточный состав циклического желтого тела коровы. J Reprod Fertil. 1989, 85: 483-487.

    PubMed Статья Google ученый

  • 3.

    Рейнольдс Л.П., Грацул-Бильска А.Т., Редмер Д.А.: Ангиогенез в женских репродуктивных органах: патологические последствия.Int J Exp Pathol. 2002, 83: 151-163. 10.1046 / j.1365-2613.2002.00277.x.

    PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • 4.

    Тамура Х, Гринвальд GS: Ангиогенез и его гормональный контроль в желтом теле беременной крысы. Биол Репрод. 1987, 36: 1149-1154.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 5.

    Мейер Г.Т., Брюс Н.В.: Количественные изменения клеток и васкуляризация в раннем желтом теле беременной крысы.Анат Рек. 1980, 197: 369-374.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 6.

    Никосия С.В., Диаз Дж., Никосия РФ, Сондерс Б.О., Муро-Качо С. Клеточная пролиферация и апоптоз во время развития и старения желтого тела кролика. Ann Clin Lab Sci. 1995, 25: 143-157.

    CAS PubMed Google ученый

  • 7.

    Рике В.А., Редмер Д.А., Рейнольдс Л.П.: Рост и клеточная пролиферация желтых тел свиней на протяжении всего эстрального цикла.J Reprod Fertil. 1999, 117: 369-377.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 8.

    Яблонька-Шариф А., Грацул-Бильска А.Т., Редмер Д.А., Рейнольдс Л.П.: Рост и клеточная пролиферация желтых тел овец на протяжении эстрального цикла. Эндокринология. 1993, 133: 1871-1879. 10.1210 / en.133.4.1871.

    CAS PubMed Google ученый

  • 9.

    Redmer DA, Doraiswamy V, Bortnem BJ, Fisher K, Jablonka-Shariff A, Grazul-Bilska AT, Reynolds LP: Доказательства роли капиллярных перицитов в росте сосудов развивающегося желтого тела овцы.Биол Репрод. 2001, 65: 879-889.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 10.

    Чжэн Дж., Фрике П.М., Рейнольдс Л.П., Редмер Д.А.: Оценка роста, пролиферации и гибели клеток в желтых телах крупного рогатого скота на протяжении всего эстрального цикла. Биол Репрод. 1994, 51: 623-632.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 11.

    Огюстен Х.Г., Браун К., Телеменакис И., Модлич Ю., Кун В.: Ангиогенез яичников.Фенотипическая характеристика эндотелиальных клеток в физиологической модели роста и регрессии кровеносных сосудов. Am J Pathol. 1995, 147: 339-351.

    PubMed Central CAS PubMed Google ученый

  • 12.

    Plendl J: Ангиогенез и сосудистая регрессия в яичнике. Анат Гистол Эмбриол. 2000, 29: 257-266. 10.1046 / j.1439-0264.2000.00265.x.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 13.

    Amselgruber WM, Schafer M, Sinowatz F: Ангиогенез в желтом теле крупного рогатого скота: иммуноцитохимическое и ультраструктурное исследование. Анат Гистол Эмбриол. 1999, 28: 157-166. 10.1046 / j.1439-0264.1999.00195.x.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 14.

    Аль-Зиаби М.О., Фрейзер Х.М., Уотсон Э.Д .: Гибель клеток во время естественной и индуцированной регрессии лютеиновой кислоты у кобыл. Репродукция. 2002, 23: 67-77. 10.1530 / reprod / 123.1.67.

    Артикул Google ученый

  • 15.

    Янг Ф.М., Роджер Ф.И., Иллингворт П.Дж., Фрейзер Х.М.: пролиферация клеток и морфология сосудов в желтом теле мартышки. Hum Reprod. 2000, 15: 557-566. 10.1093 / humrep / 15.3.557.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 16.

    Кристенсон Л.К., Стоуфер Р.Л.: пролиферация эндотелиальных клеток микрососудов в желтом теле приматов во время менструального цикла и имитация беременности на ранних сроках. Эндокринология. 1996, 137: 367-374.10.1210 / en.137.1.367.

    CAS PubMed Google ученый

  • 17.

    Роджер Ф.М., Янг Ф.М., Фрейзер Х.М., Иллингворт П.Дж .: Пролиферация эндотелиальных клеток следует за выбросом лютеинизирующего гормона в середине цикла, но не за спасением хорионического гонадотропина человека, в желтом теле человека. Hum Reprod. 1997, 12: 1723-1729. 10.1093 / humrep / 12.8.1723.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 18.

    Stouffer RL, Martinez-Checker JC, Molskness TA, Xu F, Hazzard TM: Регулирование и действие ангиогенных факторов в яичнике приматов. Arch Med Res. 2001, 32: 567-575. 10.1016 / S0188-4409 (01) 00323-Х.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 19.

    Fraser HM, Lunn SF: Регулирование и манипулирование ангиогенезом в желтом теле приматов. Репродукция. 2001, 121: 355-362. 10.1530 / reprod / 121.3.355.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 20.

    Augustin HG: Морфогенез сосудов в яичнике. Baillieres Best Practices Clin Obstet Gynaecol. 2000, 14: 867-882. 10.1053 / beog.2000.0132.

    CAS Статья Google ученый

  • 21.

    Роу А.Дж., Моррис К.Д., Бикнелл Р., Фрейзер Х.М.: Ангиогенез в желтом теле на ранних сроках беременности у мартышек и влияние иммунонейтрализации фактора роста эндотелия сосудов на наступление беременности. Биол Репрод. 2002, 67: 1180-1188.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 22.

    Wulff C, Dickson SE, Duncan WC, Fraser HM: Ангиогенез в желтом теле человека: имитация ранней беременности с помощью лечения ХГЧ связана как с ангиогенезом, так и со стабилизацией сосудов. Hum Reprod. 2001, 16: 2515-2524. 10.1093 / humrep / 16.12.2515.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 23.

    Nett TM, McClellan MC, Niswender GD: Влияние простагландинов на желтое тело овцы: кровоток, секреция прогестерона и морфология. Биол Репрод. 1976, 15: 66-78.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 24.

    Азми Т.И., О’Ши Д.Д., Брюс Н.В., Роджерс Р.Дж.: Морфометрия функционального и регрессирующего желтого тела морской свинки. Анат Рек. 1984, 210: 33-40.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 25.

    Азми Т.И., О’Ши Дж. Д.: Механизм делеции эндотелиальных клеток во время регрессии желтого тела. Lab Invest. 1984, 51: 206-217.

    CAS PubMed Google ученый

  • 26.

    Гайтан Ф., Моралес С., Беллидо С., Санчес-Криадо Дж. Э .: Избирательный апоптоз лютеиновых эндотелиальных клеток у крыс, получавших дексаметазон, приводит к ишемическому некрозу лютеиновой ткани. Биол Репрод. 2002, 66: 232-240.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 27.

    McCormack JT, Friederichs MG, Limback SD, Greenwald GS: Апоптоз во время спонтанного лютеолиза у циклического золотого хомячка: биохимические и морфологические доказательства. Биол Репрод. 1998, 58: 255-260.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 28.

    О’Ши Д.Д., Райт П.Дж.: Регрессия желтого тела при беременности после родов у овцы. Acta Anat (Базель). 1985, 122: 69-76.

    Артикул Google ученый

  • 29.

    Modlich U, Kaup FJ, Augustin HG: Циклический ангиогенез и регресс кровеносных сосудов в яичнике: регресс кровеносных сосудов во время лютеолиза включает отслоение эндотелиальных клеток и окклюзию сосудов. Lab Invest. 1996, 74: 771-780.

    CAS PubMed Google ученый

  • 30.

    Бауэр М., Шиллинг Н., Спанель-Боровски К.: Развитие и регресс некапиллярных сосудов в желтом теле крупного рогатого скота. Cell Tissue Res. 2003, 311: 199-205.

    CAS PubMed Google ученый

  • 31.

    Багавандосс П., Уилкс Дж. У.: Выделение и характеристика эндотелиальных клеток микрососудов из развивающегося желтого тела. Биол Репрод. 1991, 44: 1132-1139.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 32.

    Plendl J, Neumuller C, Vollmar A, Auerbach R, Sinowatz F: Выделение и характеристика эндотелиальных клеток из различных органов плодных свиней.Анат Эмбриол. 1996, 194: 445-456.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 33.

    Роджерс Р.Дж., О’Ши Дж.Д .: Очистка, морфология, выработка прогестерона и содержание трех типов клеток, выделенных из желтого тела овцы. Aust J Biol Sci. 1982, 35: 441-455.

    CAS PubMed Google ученый

  • 34.

    Спанель-Боровски К., Фенивес А: Гетероморфология культивируемых эндотелиальных клеток микрососудов.Arzneimittelforschung. 1994, 44: 385-391.

    CAS PubMed Google ученый

  • 35.

    Окуда К., Сакумото Р., Уэнояма Ю., Бериша Б., Миямото А., Шамс Д. Альфа-рецепторы фактора некроза опухоли в эндотелиальных клетках микрососудов желтого тела крупного рогатого скота. Биол Репрод. 1999, 61: 1017-1022.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 36.

    Plendl J, Neumuller C, Sinowatz F: Различия эндотелия микрососудов в желтом теле крупного рогатого скота при беременности и желтом теле эстрального цикла.Biol Cell. 1996, 87: 179-188. 10.1016 / S0248-4900 (97) 89274-Х.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 37.

    Гирш Э., Гребер Ю., Мейдан Р. Лютеотрофные и лютеолитические взаимодействия между маленькими и большими лютеиноподобными клетками крупного рогатого скота и эндотелиальными клетками. Биол Репрод. 1995, 52: 954-962.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 38.

    Пру Дж. К., Линч М. П., Дэвис Дж. С., Руэда Б. Р.: Сигнальные механизмы в индуцированной фактором некроза опухоли альфа гибели эндотелиальных клеток микрососудов желтого тела.Репрод Биол Эндокринол. 2003, 1: 17-10.1186 / 1477-7827-1-17.

    PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • 39.

    Кристенсон Л.К., Стоуфер Р.Л.: Выделение и культивирование эндотелиальных клеток микрососудов из желтого тела приматов. Биол Репрод. 1996, 55: 1397-1404.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 40.

    Ratcliffe KE, Anthony FW, Richardson MC, Stones RW: Морфология и функциональные характеристики эндотелия микрососудов яичников человека.Hum Reprod. 1999, 14: 1549-1554. 10.1093 / humrep / 14.6.1549.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 41.

    Спанель-Боровски К., Ван дер Бош Дж .: Различные фенотипы культивируемых эндотелиальных клеток микрососудов, полученных из желтого тела крупного рогатого скота. Исследование методами световой микроскопии и сканирующей электронной микроскопии (СЭМ). Cell Tissue Res. 1990, 261: 35-47.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 42.

    Спанель-Боровски К.: Разнообразие ультраструктуры в различных фенотипах культивируемых эндотелиальных клеток микрососудов, выделенных из желтого тела крупного рогатого скота. Cell Tissue Res. 1991, 266: 37-49.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 43.

    Spanel-Borowski K, Bein G: Различные фенотипы эндотелиальных клеток микрососудов проявляют разные антигены класса I и II под действием гамма-интерферона. In vitro Cell Dev Biol Anim. 1993, 29: 601-602.

    Артикул Google ученый

  • 44.

    Фенивес AM, Саксер М., Спанель-Боровски К. Эндотелиальные клетки микрососудов крупного рогатого скота разной морфологии различаются по росту и реакции на действие гамма-интерферона. Experientia. 1994, 50: 99-104.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 45.

    Фенивс А.М., Беренс Дж., Спанель-Боровски К. Культивируемые эндотелиальные клетки микрососудов (MVEC) различаются по цитоскелету, экспрессии кадгеринов и фибронектинового матрикса.Исследование под влиянием гамма-интерферона. J Cell Sci. 1993, 106: 879-890.

    CAS PubMed Google ученый

  • 46.

    Herrman G, Missfelder H, Spanel-Borowski K: паттерны связывания лектина в двух культивируемых типах эндотелиальных клеток, полученных из желтого тела крупного рогатого скота. Histochem Cell Biol. 1996, 105: 129-137.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 47.

    Вольф К.В., Спанель-Боровски К.: Межфазный цитоскелет микротрубочек пяти различных фенотипов культур эндотелиальных клеток микрососудов, полученных из желтого тела крупного рогатого скота. Тканевая клетка. 1992, 24: 347-354. 10.1016 / 0040-8166 (92)

    -8.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 48.

    Mayerhofer A, Spanel-Borowski K, Watkins S, Gratzl M: Культивированные эндотелиальные клетки микрососудов, полученные из желтого тела крупного рогатого скота, обладают NCAM-140.Exp Cell Res. 1992, 201: 545-548.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 49.

    Рикен А.М., Спанель-Боровски К., Саксер М., Хубер П.Р .: Экспрессия цитокератина в желтых телах крупного рогатого скота. Histochem Cell Biol. 1995, 103: 345-354.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 50.

    Спанель-Боровски К., Рикен А.М., Кресс А., Хубер П.Р .: Выделение гранулезоподобных клеток из желтого секреторного тела крупного рогатого скота и их характеристика в долгосрочной культуре.Анат Рек. 1994, 239: 269-279.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 51.

    Antczak M, Van Blerkom J: Сосудистый характер фолликулярных гранулезных клеток яичников: фенотипические и функциональные доказательства наличия эндотелиально-подобной популяции клеток. Hum Reprod. 2000, 15: 2306-2318. 10.1093 / humrep / 15.11.2306.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 52.

    Antczak M: Возможные ответвления идентификации фолликулярных гранулезных клеток яичников как специализированных эндотелиально-подобных клеток: теоретический трактат. Репродукция Биомед онлайн. 2001, 2: 188-197.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 53.

    Спанель-Бороврски К., Рикен А.М., Паттон В.Ф .: Цитокератин-положительные и цитокератин-отрицательные культивированные эндотелиальные клетки из бычьей аорты и полой вены. Дифференциация. 1994, 57: 225-234.10.1046 / j.1432-0436.1994.5730225.x.

    Артикул Google ученый

  • 54.

    Lehmann I, Brylla E, Sittig D, Spanel-Borowski K, Aust G: Эндотелиальные клетки микрососудов различаются по своей базальной экспрессии молекул адгезии и цитокинов, регулируемой альфа-фактором некроза опухоли. J Vasc Res. 2000, 37: 408-416. 10.1159 / 000025757.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 55.

    Gilbert S, Loranger A, Daigle N, Marceau N: Простые кератины эпителия 8 и 18 обеспечивают устойчивость к Fas-опосредованному апоптозу. Защита осуществляется посредством модуляции нацеливания на рецептор. J Cell Biol. 2001, 154: 763-773. 10.1083 / jcb.200102130.

    PubMed Central CAS PubMed Статья Google ученый

  • 56.

    Ley K, Gaehtgens P, Spanel-Borowski K: Дифференциальная адгезия гранулоцитов к пяти различным фенотипам культивируемых эндотелиальных клеток микрососудов.Microvasc Res. 1992, 43: 119-133.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 57.

    Рикен А., Ранер С., Ландманн Л., Спанель-Боровски С. Клетки, подобные эндотелию крупного рогатого скота, увеличивают межклеточные соединения при обработке гамма-интерфероном. Исследование in vitro. Анат Анз. 1996, 178: 321-330.

    CAS Статья Google ученый

  • 58.

    Brännstrom M, Pascoe V, Norman RJ, McCline N: Локализация субпопуляций лейкоцитов в стенке фолликула и в желтом теле на протяжении менструального цикла человека.Fertil Steril. 1994, 61: 488-495.

    PubMed Google ученый

  • 59.

    Спанель-Боровски К., Ранер П., Рикен А.М.: Иммунолокализация CD18-положительных клеток в яичнике крупного рогатого скота. J Reprod Fertil. 1997, 111: 197-205.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 60.

    Townson DH, O’Connor CL, Pru JK: Экспрессия моноцитарного хемоаттрактантного белка-1 и распределение популяций иммунных клеток в желтом теле крупного рогатого скота на протяжении всего эстрального цикла.Биол Репрод. 2002, 66: 361-366.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 61.

    Пэйт Дж. Л., Лэндис Киз П: Иммунные клетки в желтом теле: друзья или враги ?. производство. 2001, 122: R665-676. 10.1530 / reprod / 122.5.665.

    Google ученый

  • 62.

    Aust G, Brylla E, Lehmann I, Kiessling S, Spanel-Borowski K: Клонирование бычьей мРНК RANTES, ее экспрессия и регуляция в яичниках в периовуляторный период.FEBS Lett. 1999, 463: 160-164. 10.1016 / S0014-5793 (99) 01599-9.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 63.

    Machelon V, Nome F, Emilie D: Регулируется при активации нормальный экспрессируемый и секретируемый T хемокин индуцируется фактором некроза опухоли альфа в клетках гранулезы из преовуляторного фолликула человека. J Clin Endocrinol Metab. 2000, 85: 417-424. 10.1210 / jc.85.1.417.

    CAS PubMed Google ученый

  • 64.

    Aust G, Simchen C, Heider U, Hmeidan FA, Blumenauer V, Spanel-Borowski K: Эозинофилы в желтом теле человека: роль RANTES и эотаксина в привлечении эозинофилов в периовуляторные структуры. Мол Хум Репрод. 2000, 6: 1085-1091. 10.1093 / мольхр / 6.12.1085.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 65.

    Gospodarowicz D, Massoglia S, Cheng J, Fujii DK: Эффект фактора роста фибробластов и липопротеинов на пролиферацию эндотелиальных клеток, полученных из коры надпочечников, коры головного мозга и капилляров желтого тела коров быка.J. Cell Physiol. 1986, 127: 121-136.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 66.

    Редмер Д.А., Роне Дж. Д., Гудман А.Л .: Доказательства наличия нестероидного ангиотропного фактора из желтого тела приматов: стимуляция миграции эндотелиальных клеток in vitro. Proc Soc Exp Biol Med. 1985, 179: 136-140.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 67.

    Schweigerer L, Neufeld G, Friedman J, Abraham JA, Fiddes JC, Gospodarowicz D: Эндотелиальные клетки капилляров экспрессируют основной фактор роста фибробластов, митоген, который способствует их собственному росту.Природа. 1987, 325: 257-259. 10.1038 / 325257a0.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 68.

    Goede V, Schmidt T, Kimmina S, Kozian D, Augustin HG: Анализ процессов созревания кровеносных сосудов во время циклического ангиогенеза яичников. Lab Invest. 1998, 78: 1385-1394.

    CAS PubMed Google ученый

  • 69.

    Отани Н., Минами С., Ямото М., Шиконе Т., Отани Х., Нишияма Р., Отани Т., Накано Р.: фактор роста сосудистого эндотелия / fms-подобная система тирозинкиназы в яичниках человека во время менструального цикла и ранняя беременность.J Clin Endocrinol Metab. 1999, 84: 3845-3851. 10.1210 / jc.84.10.3845.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 70.

    Сугино Н., Кашида С., Такигучи С., Карубе А., Като Н. Экспрессия фактора роста эндотелия сосудов и его рецепторов в желтом теле человека во время менструального цикла и на ранних сроках беременности. J Clin Endocrinol Metab. 2000, 85: 3919-3924. 10.1210 / jc.85.10.3919.

    CAS PubMed Google ученый

  • 71.

    Endo T, Kitajima Y, Nishikawa A, Manase K, Shibuya M, Kudo R: Циклические изменения экспрессии мРНК фактора роста эндотелия сосудов, его рецепторов Flt-1 и KDR / F1k-1 и Ets-1 в человеческих телах лютея. Fertil Steril. 2001, 76: 762-768. 10.1016 / S0015-0282 (01) 02012-X.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 72.

    Бериша Б., Шамс Д., Косманн М., Амсельгрубер В., Эйнспанье Р.: Экспрессия и концентрация в тканях фактора роста эндотелия сосудов, его рецепторов и локализация в желтом теле крупного рогатого скота во время эстрального цикла и беременности.Биол Репрод. 2000, 63: 1106-1114.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 73.

    Tscheudschilsuren G, Aust G, Nieber K, Schilling N, Spanel-Borowski K: Эндотелиальные клетки микрососудов различаются по базальной и регулируемой гипоксией экспрессии ангиогенных факторов и их рецепторов. Microvasc Res. 2002, 63: 243-251. 10.1006 / mvre.2001.2346.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 74.

    Цигкос С., Кутсильерис М., Папапетропулос А. Ангиопоэтины в ангиогенезе и за его пределами. Мнение эксперта по исследованию наркотиков. 2003, 12: 933-941. 10.1517 / eoid.12.6.933.21790.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 75.

    Maisonpierre PC, Suri C, Jones PF, Bartunkova S, Wiegand SJ, Radziejewski C, Compton D, McClain J, Aldrich TH, Papadopoulos N, Daly TJ, Davis S, Sato TN, Yancopoulos GD: Ангиопоулос: 2, естественный антагонист Tie2, который нарушает ангиогенез in vivo.Наука. 1997, 277: 55-60. 10.1126 / science.277.5322.55.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 76.

    Рейнольдс Л.П., Грацул-Бильска А.Т., Редмер Д.А.: Ангиогенез в желтом теле. Эндокринная. 2000, 12: 1-9. 10.1385 / ЭНДО: 12: 1: 1.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 77.

    Спанель-Боровски К., Кухри П., Кунель В. Спираль эндотелиальных клеток в малых артериолах мочеточников человека.Исследование методом сканирующей электронной микроскопии (СЭМ). Анат Анз. 1992, 174: 213-216.

    CAS Статья Google ученый

  • 78.

    Gupta MK, Qin RY: Механизм и его регуляция ангиогенеза, индуцированного опухолью. Мир Дж. Гастроэнтерол. 2003, 9: 1144-1155.

    PubMed Central CAS PubMed Статья Google ученый

  • 79.

    Kim HS, Skurk C, Thomas SR, Bialik A, Suhara T., Kureishi Y, Birnbaum M, Keaney JF, Walsh K: Регулирование ангиогенеза с помощью киназы-3beta гликогенсинтазы.J Biol Chem. 2002, 277: 1888-1896.

    Google ученый

  • 80.

    Йошимура Y: Ренин-ангиотензиновая система яичников в репродуктивной физиологии. Фронт нейроэндокринол. 1997, 18: 247-291. 10.1006 / frne.1997.0152.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 81.

    Шаузер К.Х., Нильсен А.Х., Винтер Х., Данцер В., Поульсен К.: Локализация ренин-ангиотензиновой системы в яичнике крупного рогатого скота: циклическое изменение экспрессии рецептора ангиотензина II.Биол Репрод. 2001, 65: 1672-1680.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 82.

    Хаяси К., Миямото А., Бериша Б., Косманн М.Р., Окуда К., Шамс Д. Регулирование производства ангиотензина II и рецепторов ангиотензина в эндотелиальных клетках микрососудов желтого тела крупного рогатого скота. Биол Репрод. 2000, 62: 162-167.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 83.

    Кобаяши С., Акоста Т.Дж., Одзава Т., Хаяши К., Бериша Б., Охтани М., Шамс Д., Миямото А.Внутреннее высвобождение ангиотензина II и прогестерона in vivo во время развития желтого тела у коровы: эффект вазоактивных пептидов. Биол Репрод. 2002, 66: 174-179.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 84.

    Стирлинг Д., Магнесс Р.Р., Стоун Р., Уотерман М.Р., Симпсон Е.Р .: Ангиотензин II ингибирует стимулированное лютеинизирующим гормоном расщепление боковой цепи холестерина и стимулирует экспрессию основного фактора роста фибробластов в лютеиновых клетках крупного рогатого скота в первичной культуре.J Biol Chem. 1990, 265: 5-8.

    CAS PubMed Google ученый

  • 85.

    Monton M, Castilla MA, Alvarez Arroyo MV, Tan D, Gonzalez-Pacheco FR, Lopez Farre A, Casado S, Caramelo C: Влияние ангиотензина II на рост эндотелиальных клеток: роль AT-1 и AT -2 рецептора. J Am Soc Nephrol. 1998, 9: 969-974.

    CAS PubMed Google ученый

  • 86.

    Кобаяши С., Бериша Б., Амсельгрубер В.М., Шамс Д., Миямото А. Производство и локализация ангиотензина II в раннем желтом теле крупного рогатого скота: возможное взаимодействие с лютеиновыми ангиогенными факторами и простагландином 2 альфа.J Endocrinol. 2001, 170: 369-380.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 87.

    Шамс Д., Бериша Б., Невианс Т., Амзельгрубер В., Кретцл В. Д.: Изменения в реальном времени местных вазоактивных пептидных систем (ангиотензин, эндотелин) в желтом теле крупного рогатого скота после индуцированной регрессии лютеиновой кислоты. Mol Reprod Dev. 2003, 65: 57-66. 10.1002 / мрд.10257.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 88.

    Хаяси К., Миямото А. Ангиотензин II взаимодействует с простагландином F2 альфа и эндотелином-1 как местный лютеолитический фактор в желтом теле крупного рогатого скота in vitro. Биол Репрод. 1999, 60: 1104-1109.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 89.

    Хаяси К., Танака Дж., Хаяси К.Г., Хаяши М., Отани М., Миямото А. Совместное действие ангиотензина II с сублютеолитическим введением PGF2alpha в индуцировании лютеолиза и эструса у коровы.Репродукция. 2002, 124: 311-315. 10.1530 / reprod / 124.2.311.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 90.

    Филиппатос Г.С., Гангопадхьяй Н., Лалуде О., Парамесваран Н., Саид С.И., Спилман В., Ухал Б.Д.: Регулирование апоптоза с помощью вазоактивных пептидов. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2001, 281: 749-761.

    Google ученый

  • 91.

    Грант К., Лоизиду М., Тейлор I. Эндотелин-1: многофункциональная молекула при раке.Брит Дж. Рак. 2003, 88: 163-166. 10.1038 / sj.bjc.6700750.

    PubMed Central CAS PubMed Статья Google ученый

  • 92.

    Стайлз Д.Д., Оструу П.Т., Балос Л.Л. и др.: Корреляция эндотелина-1 и трансформирующего фактора роста бета-1 со злокачественными новообразованиями и кровоснабжением в глиомах человека. J Neuropathol Exp Neurol. 1997, 56: 435-439.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 93.

    Bagnato A, Salani D, DI Castro V: Экспрессия эндотелина 1 и рецептора эндотелина A при карциноме яичников: доказательства аутокринной роли в росте опухоли. Cancer Res. 59: 720-727.

  • 94.

    Леви Н., Гордин М., Смит М.Ф., Болден-Тиллер О.Ю., Мейдан Р.: Гормональная регуляция и клеточно-специфическая экспрессия изоформ эндотелин-превращающего фермента 1 в эндотелиальных и стероидогенных клетках яичников крупного рогатого скота. Биол Репрод. 2003, 68: 1361-1368.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 95.

    Wright MF, Sayre B, Keith Inskeep EK, Flores JA: Простагландин F Регулирование эндотелиновой системы желтого тела крупного рогатого скота на ранней и средней ягодичных фазах. Биол Репрод. 2001, 65: 1710-1717.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 96.

    Schams D: Экспрессия элементов ангиотензиновой и эндотелиновой систем в желтом теле крупного рогатого скота во время эстрального цикла и беременности. Эндокринная. 2002, 19: 305-312.10.1385 / ENDO: 19: 3: 305.

    PubMed Статья Google ученый

  • 97.

    Yoshioka S, Fujiwara H, Yamada S, Tatsumi K, Nakayama T, Higuchi T, Inoue T, Maeda M, Fujii S: фермент, превращающий эндотелин-1, экспрессируется на фолликулах яичников человека и желтых телах менструального цикла. цикл и ранняя беременность. J Clin Endocrin Met. 1998, 83: 3943-3950. 10.1210 / jc.83.11.3943.

    CAS Google ученый

  • 98.

    Girsh E, Dekel N: Участие эндотелина-1 и его рецепторов в PGF2alpha-индуцированном лютеолизе у крыс. Mol Reprod Dev. 2002, 63: 71-78. 10.1002 / мрд.10159.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 99.

    Milvae RA: Взаимосвязь между эндотелином и простагландином F в функции желтого тела. J Reprod Fert. 2000, 5: 1-5. 10.1530 / revreprod / 5.1.1.

    CAS Google ученый

  • 100.

    Мейдан Р., Леви Н.: рецепторы эндотелина-1 и биосинтез в желтом теле: молекулярные и физиологические последствия. Domest Anim Endocrinol. 2002, 23: 287-298. 10.1016 / S0739-7240 (02) 00164-9.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 101.

    Камада С., Блэкмор П. Ф., Кубота Т., Энингер С., Асада Ю., Гордон К., Ходген Г. Д., Асо Т. Роль эндотелина-1 в регулировании пролиферации клеток гранулезы человека и стероидогенеза in vitro.J Clin Endocrin Metab. 1995, 80: 3708-3714. 10.1210 / jc.80.12.3708.

    CAS Google ученый

  • 102.

    Hinckley ST, Milvae RA: Эндотелин-1 опосредует простагландин F , индуцированный регрессией лютеиновой кислоты у овец. Биол Репрод. 2001, 64: 1619-1623.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 103.

    Карам Х., Вальденайр О., Белаир М.Ф., Приджент-Сасси С., Ракотосалама А, Клозель М., Ицковиц Дж., Бруневаль П. Эндотелиновая система в яичниках человека и обезьяны: экспрессия различных компонентов генов in situ.Cell Tissue Res. 1999, 295: 101-109. 10.1007 / s004410051216.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 104.

    Mancina R, Barni T, Calogero AE, Filippi S, Amerini S, Peri A, Susini T, Vannelli G, Burrello N, Forti G, Maggi M: Идентификация, характеристика и биологическая активность рецепторов эндотелина в яичник человека. J Clin Endocrin Met. 1997, 4122-4129. 10.1210 / jc.82.12.4122.

    Google ученый

  • 105.

    Мамлюк Р., Леви Н., Руэда Б., Дэвис Дж. С., Мейдан Р.: Характеристика и регуляция экспрессии гена рецептора эндотелина типа А в типах лютеиновых клеток крупного рогатого скота. Эндокринология. 1999, 140: 2110-2116. 10.1210 / en.140.5.2110.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 106.

    Терранова П.Ф .: Возможные роли фактора некроза опухоли альфа в развитии фолликулов, овуляции и продолжительности жизни желтого тела. Domest Anim Endocrinol.1997, 14: 1-15. 10.1016 / S0739-7240 (96) 00094-Х.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 107.

    Дэвис Дж. С., Руэда Б. Р.: Желтое тело: структура яичников с материнскими инстинктами и суицидальными наклонностями. Передние биоски. 2002, 7: 1949-1978.

    Артикул Google ученый

  • 108.

    Hehnke-Vagnoni KE, Clark, Taylor MJ, Ford SP: Наличие и локализация фактора некроза опухоли альфа в желтом теле небеременных и беременных свиней.Биол Репрод. 1995, 53: 1339-1344.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 109.

    Ричардс RG, Миндаль GW: Идентификация и распределение альфа-рецепторов фактора некроза опухоли в желтых телах свиней. Биол Репрод. 1994, 51: 1285-1291.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 110.

    Окуда К., Сакумото Р., Уэнояма Ю., Бериша Б., Миямото А., Шамс Д. Альфа-рецепторы фактора некроза опухоли в эндотелиальных клетках микрососудов желтого тела крупного рогатого скота.Биол Репрод. 1999, 61: 1017-1022.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 111.

    Фридман А., Вайс С., Леви Н., Мейдан Р.: Роль фактора некроза опухоли альфа и его рецептора типа I в регрессии лютеиновой кислоты: индукция запрограммированной гибели клеток в эндотелиальных клетках, полученных из желтого тела крупного рогатого скота. Биол Репрод. 2000, 63: 1905-1912.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 112.

    Groenewegen G, Buurman WA, Jeunhomme GM, van der Linden CJ: Влияние циклоспорина на экспрессию антигена MHC класса II на артериальном и венозном эндотелии in vitro. Трансплантация. 1985, 40: 21-25.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 113.

    Пенни Л.А.: Моноцитарный хемоаттрактантный белок 1 при лютеолизе. Rev Reprod. 2000, 5: 63-66. 10.1530 / revreprod / 5.2.63.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 114.

    Кавиччио В.А., Пру Дж.К., Дэвис Дж.С., Руэда Б.Р., Таунсон Д.Х.: Секреция моноцитарного хемоаттрактантного белка-1 эндотелиальными клетками желтого тела крупного рогатого скота: регуляция цитокинами, но не простагландином F . Эндокринология. 2002, 143: 3582-3589. 10.1210 / en.2002-220388.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 115.

    Гирш Э., Ван В., Мамлюк Р., Ардити Ф., Фридман А., Милвае Р. А., Мейдан Р.: Регулирование экспрессии эндотелина-1 в желтом теле крупного рогатого скота: повышение за счет простагландина F .Эндокринология. 1996, 137: 5191-5196. 10.1210 / en.137.12.5191.

    CAS PubMed Google ученый

  • 116.

    Андерсон Л.Е., Ву Ю.Л., Цай С.Дж., Уилтбанк MC: Рецептор простагландина F в желтом теле: последняя информация о гене, рибонуклеиновой кислоте-мессенджере и белке. Биол Репрод. 2001, 64: 1041-1047.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 117.

    Gupta MK, Qin RY: Механизм и его регуляция ангиогенеза, индуцированного опухолью. Мир Дж. Гастроэнтерол. 2003, 9: 1144-1155.

    PubMed Central CAS PubMed Статья Google ученый

  • 118.

    Эберхард А., Калерт С., Гёде В., Хеммерлейн Б, пластина К. Х., Огюстин Г. Г.: Гетерогенность ангиогенеза и созревания кровеносных сосудов в опухолях человека: последствия для антиангиогенной терапии опухолей. Cancer Res. 2000, 60: 1388-1393.

    CAS PubMed Google ученый

  • желтое тело — Французский перевод — Linguee

    На терапевтических уровнях дидрогестерон не оказывает противозачаточного действия, так как не подавляет и не препятствует действию

    […] овуляция или t h e желтое тело .

    quality-generic.com

    La dydrogestrone utilize des thrapeutiques n’a pas d’effet contraceptif, car elle n’interfre pas avec

    […] l’ovu la ion ou le corps jaune .

    quality-generic.com

    Гормон, производимый t h e желтым телом d u ri ng второй половиной […]

    менструального цикла.

    conceptive.ca

    Один гормон p ro duite pa r l e corpus luteum p en dant la de uxime […]

    цикл менструального цикла.

    conceptive.ca

    Функциональная стерильность не может быть

    […] из-за овуляторной недостаточности bu t t o желтое тело d e ve lopment and function which […]

    недостаточно для правильного

    […]

    имплантация и раннее развитие оплодотворенной яйцеклетки.

    ppc лекарственных препаратов.com

    La strilit fonctionnelle peut n’tre pas due une insuffisance

    […]

    ovulatoire mais une

    […] insuffisa NC e du d v eloppement et de la fonction du corp s jaune d e sor te que la […]

    nidation et la croissance

    […]

    de l’ovule fcond sont невозможное.

    ppcdrugs.com

    Гранулезо-лютеиновые кисты,

    […] происходят в пределах t h e желтого тела , a re функционального, […]

    неопухолевые увеличения яичников

    […]

    вызвано чрезмерным скоплением крови во время геморрагической фазы менструального цикла.

    go2tv.tv

    les kystes de Granulosa-lutine, qui se produisent

    […] dans le l ut eum d e corpus, sont le s agrandissements […]

    Функциональные ткани и неопухолевые

    […]

    яйцеклеток, вызывающих чрезмерное накопление, находятся в фазе сердечного цикла менструального цикла.

    go2tv.tv

    Аномальная овуляция и дефицит т.е. n t желтое тело f u nc ция.

    janssen.ca

    Овуляция аномальная и аномальная функция и корпус и год.

    janssen.ca

    Синдром гиперстимуляции яичников (СГЯ) Чрезмерная реакция яичников на фолликулярные стимулирующие агенты у женщин, подвергающихся индукции овуляции, может привести к синдрому

    […]

    развитие синдрома гиперстимуляции яичников при введении u-ХГЧ для индукции овуляции или

    […] для поддержки т ч e желтое тело .

    ppcdrugs.com

    Синдром гиперстимуляции яичников (SHO) Chez les femmes se prtant un traitement visant dclencher l’ovulation, без чрезмерного количества яиц, вспомогательных агентов, фолликуло-стимуляторов, синдром лишнего аппетита

    […]

    Гиперстимуляция яичников при введении ХГЧ-у для удаления овуляции или

    […] com ap po int a u c orp s jaune .

    ppcdrugs.com

    После овуляции доминирующий яичник

    […] фолликул становится t h e желтым телом w h ic h продуцирует прогестерон […]

    и небольшое количество эстрогена.

    prime2.org

    Aprs l’ovulation, le follicule ovarien

    […] доминант vi ent le co rps jaune qui pr oduit l a прогестрон […]

    et un peu d’strogne.

    prime2.org

    Фолликул трансформируется в

    […] прогестерон-секрет ti n g желтое тело , w ho se основная функция […]

    предназначен для облегчения процесса имплантации.

    puregon.nu

    Le follicule se

    […] transforme al или s en cor ps jaune fa bri cant la прогестрон, […]

    не является основным принципом имплантации.

    puregon.nu

    Прогестерон и эстроген в крови снижаются к концу этой фазы из-за

    […] degenera ti n g желтое тело ( D ay s 23-28).

    prime2.org

    La progestrone et les strognes dans le sang diminuent vers la fin de cette phase cause du corps

    […] jaune en dgnr es cence (2 3eau 28e jour ) .

    prime2.org

    Затем ЛГ вызывает t h e желтое тело t o s ecrete возрастающее количество прогестерона […]

    и небольшое количество эстрогена.

    prime2.org

    Ensuite,

    […] LH infl ue nce l e corps jaune p наш qu ‘il scrte des Quantits pl us importantes […]

    от progestrone et un peu d’strogne.

    prime2.org

    T h e corpus luteum s t ea dily производит и […]

    секретирует прогестерон.

    prime2.org

    L e corps j aune pr oduit et scrte rgulirement […]

    де ла прогестрон.

    prime2.org

    г. Высокий уровень ЛГ вызывает пустой доминантный фолликул до

    […] измените на a желтое тело .

    prime2.org

    г.Le niveau lev de LH fait que le follicule Dominant

    […] см. ch ange en corps jaune .

    prime2.org

    на ранних сроках беременности,

    […] ХГЧ предотвращает t h e желтое тело f r om дегенерирующее, […]

    , чтобы он продолжал функционировать и выделял прогестерон

    . […]

    и эстроген для поддержки развивающегося эмбриона.

    prime2.org

    Tout au dbut de la

    […] grossesse, hCG v ite au corp s jaune d e d gn re r pour […]

    Qu’il continue fonctionner et librer de la

    […]

    progestrone et des strognes pour soutenir l’embryon qui se dveloppe.

    prime2.org

    Если яйцеклетка не оплодотворена,

    […]

    Активность гипофиза подавлена ​​из-за высокого уровня прогестерона в крови

    […] произведено т ч е желтое тело .

    prime2.org

    Si l’ovule n’est pas fcond, l’activit de l’hypophyse est Inhibe par le niveau lev de progestrone dans le sang

    […] produ it par le corps jaune .

    prime2.org

    После овуляции ЛГ стимулирует пустой фолликул до

    […] превратиться в t h e желтое тело .

    prime2.org

    Aprs l’ovulation, LH stimule le follicule vide pour qu’il se dveloppe

    […] et devienn e le corps ja un e.

    prime2.org

    T h e желтое тело a l , поэтому производит […]

    небольших доз эстрогена во время этой фазы.

    prime2.org

    L e corps j aune pr oduit galement […]

    de petites Quantits d’strognes подвеска cette phase.

    prime2.org

    Может быть достаточно ЛГ, чтобы вызвать

    […]

    лютеинизация и овуляция, но не

    […] достаточно для adeq ua t e corpus luteum f o rm в результате чего […]

    при дефиците лютеиновой фазы.

    woomb.org

    Неисправность и суффикс ЛГ для обеспечения лютинизации фолликулов и т. Д.

    […]

    l’ovulation, mais passes pour provoquer la

    […] формат n d’un cor ps jaune ad qu at av ec pour […]

    consquence des dficiences dans la phase lutale.

    матка.org

    После того, как доминантный фолликул яичника высвобождает зрелую яйцеклетку, она

    […] изменения на a желтое тело a n d начинает секретировать […]

    прогестерон.

    prime2.org

    Une fois que le follicule ovarien dominant libre un ovule mr, il se

    […] transf или me e n cor ps jaune et co mmenc e scrter […]

    де ла прогестрон.

    prime2.org

    Декапептил — это коммерческое название синтетического декапептида, трипторелина, структура которого близка к структуре гипоталамического гормона, а именно LHRH (лютеинизирующий гормон, высвобождающий гормон), названного так потому, что он стимулирует переднюю долю гипофиза

    […]

    выработка железом ЛГ (лютеинизирующего гормона), который играет главную роль

    […] роль, у женщин, в овуляции a n d желтое тело f o rm ation.

    ccne-ethique.fr

    Le Dcapeptyl — это коммерческий продукт для синтеза синтаза, трипторлин, структура которого не является структурой целевого гормона гипоталамуса, LHRH (лютеинизирующий гормон, высвобождающий гормон), ainsi appele parce qu’elle entrane la libration, par l’hypophyse antrieure,

    […]

    de LH (lutinisante гормон) qui, chez la femme, joue un rle

    […] majeur da ns l’ov ula tio n et l a f orm ation des corps jau ne s.

    ccne-ethique.fr

    Механизмы действия как комбинированной, так и прогестиновой ЭК включают подавление или задержку пика лютеинизирующего гормона (9-11), задержку или

    […]

    подавление овуляции (12), нарушение развития фолликулов (10) или вмешательство в процесс

    […] созревание т ч e желтое тело ( 1 3) .

    cps.ca

    Les mcanismes d’action des counterceptifs d’urgence объединяет в себе содержание нашего прогестина, входящего в супрессию, или отчет о l’hormone lutinisante (9-11), qui

    […]

    замедляет или подавляет овуляцию (12), препятствует развитию фолликулов (10) или

    […] la mat ur ation du cor ps jaune (1 3) .

    cps.ca

    Когда доминирующий фолликул выпускает свою яйцеклетку в яйцевод, происходит разрыв

    […] фолликул для мс a желтое тело o n t он яичник.

    omafra.gov.on.ca

    Aprs s’tre bris pour relcher son ovule dans l’oviducte, le follicule

    […] dominant f или me un corp s jaune s ur l ‘o vaire.

    omafra.gov.on.ca

    Достигнутые уровни предоставляют информацию о

    […] адекватность результата ti n g corpus luteum .

    woomb.org

    Les niveaux atteints fournissent des information sur

    […] l’adq ua тион ду корпус желтый р сул тант .

    woomb.org

    Профессор Браун объясняет поведение лютеинизирующего гормона ЛГ и его роль в овулате.

    woomb.org

    Профессор Браун объясняет состав гормона Lutnisante (лютеинизирующего гормона ЛГ) и его влияния на кровоток, на формирование желтого тела и оплодотворения.

    woomb.org

    Настоящая неотложная хирургическая помощь, перекрут придатка — редкая патология, которую трудно диагностировать до операции, поскольку признаки

    […]

    неспецифических и также встречаются у геморрагических

    […] осложнения из a желтое тело , s al пингит или […]

    внематочная беременность.

    cice.fr

    Хирургическая хирургическая операция, вызванная скручиванием, вызванная патологией, действующая и диагностическая, не имеющая особого значения

    […]

    galement rencontrs dans les осложнения

    […] hmorragiq ue s d’u n corp s jaune, les salp in gites […]

    ou les grosses extra utrines.

    cice.fr

    Лекция 12 — лютеиновая фаза

    Лекция 12 — лютеиновая фаза

    Лекция 12а — Лютеиновая фаза эстрального цикла и менструального цикла

    Чтение

    Лекция 12а:

    Лютеиновая фаза (текстовый рисунок 9-1)

    • CL
      • геморрагическое тело (овуляция до 1-3 дней)
      • CL становится более узнаваемым к 3-5 дню
    • производство прогестерона
      • размер CL соответствует выработке прогестерона
    • лютеолиз
      • регресс КЛ
      • Изменение структуры, а также способность секретировать прогестерон
      • CL становится corpus albicans

    Corpus Luteum Formation (текстовый рисунок 9-2, в лекции используются более старые версии этих изображений)

    • в ответ на выброс ЛГ, гранулезные и тека клетки преовуляторной лютеинизировать фолликул
    • базальная мембрана разрушается
    • при овуляции разрушаются стенки фолликула
    • смесь клеток тека и гранулезы
    • базальная мембрана становится соединительнотканной сетью КЛ
    • разрыв мелких кровеносных сосудов приводит к образованию тромба в геморрагическое тело

    Структура и функции CL

    • большие лютеиновые клетки из гранулезы
      • содержат секреторные гранулы
        • во время полового цикла содержат окситоцин
        • при беременности содержат релаксин
    • маленькие лютеиновые клетки из внутренней теки
      • не содержат секреторных гранул
    • как маленькие, так и большие лютеиновые клетки производят прогестерон
    • увеличение размера CL за счет
      • увеличение размера крупных лютеиновых клеток (гипертрофия)
      • увеличение количества мелких клеток (гиперплазия)
    • васкуляризация CL
    • недостаточная лютеиновая функция важный фактор репродуктивной недостаточности

    Целевые показатели действия прогестерона (текстовые рисунки 9-7)

    • лопатка таламуса
      • отрицательная обратная связь по амплитуде и частоте ГнРГ
      • предотвращает поведенческую течку
      • останавливает преовуляторный выброс ЛГ
    • матка
      • эндометрия
        • стимулирует секрецию желез эндометрия, что способствует развитию Conceptus до имплантации
      • миометрий
        • уменьшает сокращение мышц (подвижность)
    • молочная железа
      • стимулирует развитие альвеол

    Синтез прогестерона (текстовые рисунки 9-8)

    • Эфир холестерина импортируется в клетку, связанную с ЛПНП
    • ЛГ за счет связывания со своим рецептором увеличивает цАМФ и ПКА
    • Причины PKA
      • увеличить интернализацию молекулы холестерина-ЛПНП
      • активирует холестерин эстеразу
      • Повышенное поглощение холестерина митохондриями
      • , вероятно, играет роль в регуляции превращения прегненолона в прогестерон. в гладком ER

    Лютеолиз

    • требуется матка (рисунок 9-9)
      • гистерэктомия предотвращает лютеолиз
      • частичная гистерэктомия
        • ипсилатеральная
        • контралатеральный
          • не влияет на лютеолиз, происходит в нормальное время
      • пересадка яичника на шейку
      • матка необходима для лютеолиза и должна находиться рядом с яичником, чтобы действовать
    • PGF — лютеолизин
      • Противоточный обмен между маточной веной и яичниковой артерией (Рисунок 1)
        • присутствует у коровы, овцы, свиноматки
          • важно, так как PGF разрушается в периферическом кровообращении по мере прохождения через легкие
        • отсутствует у кобылы (Рисунок 2)
          • PGF попадает в яичник после прохождения общего кровообращения
          • Яичник кобылы более чувствителен к PGF, чем другие виды
      • Чувствительность CL к PGF (Рисунок 3)
        • Корова, овца только после 5-6 дня цикла
        • сеять не ранее 12-14 дня цикла
    • окситоцин (текстовые рисунки 9-11, 9-12, рисунок 4))
      • производства CL (большие лютеиновые клетки)
      • рецепторов в матке снижается после овуляции по мере увеличения прогестерона
      • через 10-12 дней прогестерона, рецепторы окситоцина матки снова начинают увеличиваться
      • в ответ на связывание окситоцина с его рецептором в эндометрии матки, PGF выпущен
      • PGF запускает высвобождение окситоцина из CL, чтобы вызвать положительную обратную связь петля
      • окситоцин также может поступать из задней доли гипофиза
    • внутриклеточные механизмы лютеолиза
      • ишемия (снижение кровотока к CL)
      • апоптоз
        • увеличение внутриклеточного кальция
        • протеинкиназа С подавляет синтез прогестерона
    • иммунная система
      • макрофаги и лимфоциты присутствуют в лютеиновой ткани и увеличиваются во время лютеолиза
        • может выполнять фагоцитоз лютеиновых клеток
        • цитокинов высвобождаются и вызывают
          • гибель клеток
          • остановить выработку прогестерона
          • апоптоз

    Менструальный цикл у женщин (Рисунок 5)

    • Средняя продолжительность цикла — 28 дней от начала менструации до начала следующей менструации
    • События яичников
      • Фолликулярная волна начинается 1-2 дня с рекрутмента с последующим отбором и доминирование
      • Овуляция наступает на 14 день
      • лютеиновая фаза 14 дней
    • Лютеолиз у приматов
      • Не требует матки
      • Продолжительность жизни
      • CL у человека составляет 12-14 дней, если не беременность. происходит
        • При отсутствии беременности КЛ самоуничтожается
        • Возможные рецепторы окситоцина внутри яичников и PGF2α продукция
    • Менструация
      • Падение в P4 и E2
      • PGF2α эндометрия, сужение сосудов, некроз
      • Воспаление и дегенерация тканей эндометрия

    Манипуляции со временем овуляции

    • Гормональная индукция овуляции
      • PGF2α — регрессирует CL между 5-17 днями полового цикла крупного рогатого скота
      • Ovsync
        • день 0 — ГнРГ — устранение текущей фолликулярной волны
        • день 7 — PGF2α — регресс ХЛ, индуцированный ГнРГ или естественным ХЛ
        • день 9 — GnRH (36-48 часов после PGF2) — индуцирует овуляцию доминантного фолликула из волны
          , инициированной GnRH в день 0
      • Прогестины — предотвращает течку и положительную обратную связь эстрогена, пока присутствует.Дайте до тех пор, пока естественный CL
        не исчезнет сам по себе. Прекратите давать прогестин, эстроген теперь имеет положительную обратную связь, течка стимулируется,
        получают выброс ГнРГ и ЛГ.
    • Суперовуляция — лекарства стимулируют набор и отбор, поэтому растет больше фолликулов
      • ФСГ — необходимо сделать несколько инъекций
      • eCG — требуется только 1 инъекция, ограниченное использование в США

    Обзор викторин

    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *